丁小麗 綜述，胡 蓉 審校

(1.贛南醫(yī)學院研究生學院,江西贛州 341000；2.贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院檢驗科,江西贛州 341000)

·綜 述· doi:10.3969/j.issn.1671-8348.2017.04.042

microRNA-25在腫瘤中的研究進展

丁小麗1綜述，胡 蓉2△審校

(1.贛南醫(yī)學院研究生學院,江西贛州 341000；2.贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院檢驗科,江西贛州 341000)

微RNAs 25；腫瘤；研究進展

microRNA (微小RNA,miRNA)是約有22個核苷酸長度的小分子非編碼RNA，在轉(zhuǎn)錄水平上通過抑制翻譯或者降解mRNA調(diào)控著大約1/3的人類基因表達。miR-25是miRNA的一員，屬于miR-106b-25簇，定位于7號染色體長臂( 7q22.1)上的微染色體維持蛋白7(MCM7)基因的內(nèi)含子上。miR-25既可作為癌基因也可作為抑癌基因參與不同腫瘤的發(fā)生過程，miR-25在肝癌、胃癌、膠質(zhì)母細胞瘤、乳腺癌、食管癌、卵巢癌和胰腺癌等中高表達，被認為是一種原癌miRNA，但在結(jié)腸癌和甲狀腺癌等腫瘤中則是抑癌性miRNA，因此，miR-25的表達程度可能與腫瘤類型或與其調(diào)控不同功能的靶基因有關(guān)。

1 miR-25參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展

miR-25能參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程，其潛在機制主要有促進腫瘤增生、轉(zhuǎn)移與侵襲，抑制腫瘤凋亡、調(diào)控細胞周期及自噬等。

1.1 miR-25參與腫瘤的增生、遷移、侵襲。

1.1.1 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的惡性腫瘤，占每年腦部腫瘤的70%。Zhang等[1]用RT-PCR分析了35例膠質(zhì)瘤組織中miR-25的表達，發(fā)現(xiàn)其中32例miR-25的表達量明顯多于正常腦組織，并對6種膠質(zhì)瘤細胞系檢測發(fā)現(xiàn)其中4種細胞系的miR-25表達都增高；再對細胞系轉(zhuǎn)染miR-25后進行噻唑藍(MTT)檢測，結(jié)果顯示小膠質(zhì)細胞明顯增生。該研究闡明了異常高表達miR-25的通過堿基互補配對與CDKN1C 的3′-UTR結(jié)合，導致CDKN1C蛋白質(zhì)水平而減少。Peng等[2]研究進一步發(fā)現(xiàn)miR-25在膠質(zhì)瘤細胞的另一個靶位點NEFL，證實miR-25靶向NEFL促進膠質(zhì)瘤細胞增殖和侵襲并闡明其機制主要是通過激活mTOR信號通路而實現(xiàn)。

1.1.2 非小細胞肺癌 Xiang等[3]通過qRT-PCR發(fā)現(xiàn)miR-25在NSCLC的組織和細胞系中都顯著上調(diào)，抑制miR-25的表達明顯抑制NSCLC細胞的增殖、侵襲、遷移，而增加miR-25表達則出現(xiàn)相反結(jié)果，研究結(jié)果揭示miR-25通過靶向抑制FBXW7促進NSCLC 細胞的增殖和遷移。

1.1.3 肝癌 Wang等[4]采用體外實驗闡明miR-25的高表達促進了肝癌細胞的遷移、侵襲，并激活上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)，通過Targetscan、miRNA-PicTar預測軟件發(fā)現(xiàn)其6個可能的靶基因中 RhoGDP解離抑制因子1(RhoGDI1)降低最為明顯，對其進行雙熒光素酶及功能實驗證實miR-25通過與RhoGDI1的3′-UTR區(qū)結(jié)合抑制其mRNA的表達從而促進肝癌細胞生長、遷移和侵襲。

1.1.4 胃癌 據(jù)報道，miR-25可靶向調(diào)控TOB1[5]、RECK[6]、LATS2[7]、FBXW7[8]促進胃癌細胞增生、遷移、侵襲。Li等[5]研究報道在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或TNM分期Ⅲ或Ⅳ期胃癌患者的血漿和原發(fā)性腫瘤組織中miR-25的表達普遍增加，TOB1在胃癌組織的表達水平明顯降低，miR-25 在胃癌組織中高表達并負調(diào)控TOB1的表達，研究還發(fā)現(xiàn)用miR-25誘導TOB1缺失增強了胃癌細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的能力，過表達TOB1則出現(xiàn)相反結(jié)果。此外，Li等[5]不僅通過體外實驗證明miR-25促進胃癌細胞增生、侵襲、轉(zhuǎn)移，同時構(gòu)建BALB/c裸鼠模型，通過尾靜脈注入miR-25拮抗劑和對照劑，并進行遠處肺轉(zhuǎn)移及腹膜轉(zhuǎn)移的體內(nèi)試驗進一步驗證miR-25的功能，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-25拮抗劑組的裸鼠肺組織轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)的數(shù)量和體積大大減少，再次表明miR-25促進胃癌細胞的轉(zhuǎn)移。而最近Zhang等[9]發(fā)現(xiàn)miR-25在胃癌還具有抗凋亡的作用，揭示miR-25在AGS細胞可能是通過抑制FBXW7并促進癌基因CCNE1和MYC的表達而產(chǎn)生抗凋亡的效應。

1.1.5 前列腺小細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌 正常情況下IL-8-CXCR2-p53 通路可抑制前列腺SCNC細胞的增殖，但p53基因突變后引起該通路失活，導致miR-25表達增加、FBXW7表達下調(diào)，引起AURKA(Aurora激酶A)的水平升高，這項研究表明，p53基因突變后的細胞內(nèi)途徑使AYRKA表達增加，這對前列腺SCNC細胞的快速擴散和侵襲極其重要[10]。

1.1.6 前列腺癌和結(jié)直腸癌 在以上腫瘤中miR-25大都為高表達，然而有文獻報道在前列腺癌和結(jié)直腸癌中miR-25為低表達。Zoni 等[11]發(fā)現(xiàn)miR-25在前列腺癌細胞系中表達下調(diào)，在PC-3M-Pro4Luc2和C4-2B細胞株中過表達miR-25并在72 h后檢測癌細胞的遷移能力，結(jié)果顯示88%的PC-3M-Pro4Luc2細胞株遷移能力降低，49%的C4-2B細胞遷移能力被顯著減弱。miR-25可以負性靶向具有促侵襲功能的整合素αv、α6從而調(diào)節(jié)癌細胞遷移、侵襲。在直腸癌中，血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)是一種分泌型細胞外基質(zhì)糖蛋白，慢性缺氧能誘導ANGPTL2參與血管生成和血管內(nèi)皮細胞的遷移。Zhou等[12]通過免疫組織化學分析發(fā)現(xiàn)，ANGPTL2在直腸癌組織呈高表達，隨著直腸癌轉(zhuǎn)移的加劇ANGPTL2表達逐漸增加，而RT-qPCR的結(jié)果表明，在4個直腸癌細胞系中miR-25的表達水平與對照組相比顯著降低，過表達miR-25導致克隆形成、遷移、侵襲減少，值得一提的是Li等[13]認為miR-25在直腸癌中是高表達，可能與miR-25即可作為癌基因也可作為抑癌基因有關(guān)；同樣的，在結(jié)腸癌中，miR-25也為低表達，功能研究揭示恢復miR-25的表達明顯抑制細胞的增殖和遷移，此外體內(nèi)實驗表明穩(wěn)定過表達miR-25后可抑制結(jié)腸癌細胞異種移植瘤的生長，miR-25在結(jié)腸癌作為抑癌基因，其機制主要為靶向抑制Smad7[14]。

1.2 miR-25調(diào)控細胞凋亡 凋亡存在3條主要通路：線粒體通路、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通路和死亡受體通路。已報道m(xù)iR-25靶向不同凋亡通路的關(guān)鍵因子，如PTEN、TRAIL等。近年報道m(xù)iR-25在NSCLC不僅能促進癌細胞增殖，還可負調(diào)節(jié)MOAP1[15]、RGS3[16]的表達從而抑制癌細胞凋亡。Zhang等[17]的Western blot實驗結(jié)果顯示缺失miR-25引起凋亡蛋白Bax、Bim和caspase-3的表達增加，抗凋亡蛋白Bcl-2的表達下降，表明下調(diào)miR-25可誘導卵巢癌細胞凋亡，而miR-25的過表達則加快卵巢癌細胞增殖，熒光素酶報告基因系統(tǒng)測定顯示，Bim是miR-25的直接靶基因。

1.3 miR-25調(diào)控細胞周期 細胞分裂周期42(CDC42)蛋白，是RhoGTP酶家族的一員，近年來研究發(fā)現(xiàn)，RhoGTP酶在多種惡性腫瘤中高表達，并與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。研究結(jié)果顯示下調(diào)miR-25能抑制NSCLC增殖，誘導細胞周期G1期的阻滯，提高對順鉑的敏感性，研究揭示其機制可能是NSCLC中的miR-25可靶向CDC42[18]；同樣地，在小細胞肺癌(SCLC)中miR-25也是過表達，作為致癌基因調(diào)控細胞周期相關(guān)蛋白cyclin E2的生成，下調(diào)miR-25產(chǎn)生抑制癌細胞增殖、侵襲的效應，誘導G1期阻滯，可使G0/G1向S期轉(zhuǎn)變的 cyclin E2和CDK2減少[19]。與NSCLC不同的是，下調(diào)miR-25后其對順鉑的敏感性降低。

1.4 miR-25調(diào)控細胞自噬 自噬通過溶酶體降解消除過度或不必要的蛋白質(zhì)和受損細胞器保持細胞穩(wěn)態(tài)。Wang等[20]利用免疫組織化學、Western blot檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)抑制miR-25后LC3-Ⅱ或LC3-Ⅱ/Ⅰ比值增加，研究結(jié)果表明異甘草素(ISL)誘導化學致敏、細胞周期停滯和自噬，但不引起凋亡，而miR-25的過度表達則阻斷了ISL誘導的自噬和化療敏感性，抑制miR-25使靶基因ULK1的表達增加引起自噬，該研究闡明miR-25靶向ULK1調(diào)控自噬，并在自噬誘導階段的早期就可參與調(diào)控。

2 相關(guān)信號通路

綜上所述，miR-25參與腫瘤發(fā)生發(fā)展的過程是一個復雜的調(diào)控網(wǎng)絡，miR-25在不同腫瘤介導不同的靶基因，靶基因之間的關(guān)系目前尚不完全清楚。另外，miR-25也有其不同的上游調(diào)控因素，如β-catenin，細胞因子IL-23、腫瘤壞死因子α(TNF-α)，氧化應激等。研究表明Wnt/β-catenin信號通路可激活miR-25，進而抑制miR-25靶基因RhoGDI1的表達，促進肝癌細胞EMT、遷移和侵襲的功能[4]；Mei等[21]研究發(fā)現(xiàn)IL-23通過增加miR-25的表達來抑制其靶基因SOX4的表達，從而促進未分化甲狀腺癌細胞遷移、侵襲。

3 診斷、預后指標

研究顯示miRNA在病理狀態(tài)下會快速從組織中釋放入血，在血清、血漿、唾液和尿液中這些胞外miRNA與不同的腫瘤或同一腫瘤的不同病理狀態(tài)有關(guān)，miR-25也不例外，隨著miR-25在許多癌癥中被廣泛報道，越來越多的研究表明miR-25是腫瘤發(fā)展的一個獨立預后指標。例如研究證實miR-25在肝癌遠處轉(zhuǎn)移患者的表達水平比無轉(zhuǎn)移的患者更高，miR-25高表達的肝癌患者預后不良；研究還報道循環(huán)的miR-25-3p和miR-451a可能是甲狀腺乳頭狀癌診斷的潛在標志物[22]；在食管癌患者定量RT-PCR結(jié)果表明血漿的miR-25水平顯著高于對照組且血漿miR-25術(shù)后水平與術(shù)前相比明顯更低，當腫瘤復發(fā)時又增高[23]；Xu等[24]發(fā)現(xiàn)miR-25在不吸煙女性肺腺癌組織中的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期有關(guān)，高miR-25表達患者總生存期較差。而且miR-25可用于一些肺癌患者培美曲塞維持治療療效的預測，特別是EGFR突變和ALK易位的肺癌患者[25]；胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與miR-25的高表達有關(guān)，Li等[5]研究證實miR-25的水平與胃癌患者生存率呈負相關(guān)，血漿中的miR-25也被認為是早期發(fā)現(xiàn)胃癌的潛在生物學標志物；在非黑色素瘤皮膚癌中的早期就出現(xiàn)miR-25-3p的表達水平顯著下調(diào)，認為該檢測指標可作為一種無創(chuàng)的生物學標志物[26]。此外，miR-25在其他腫瘤如直腸癌、肺癌、卵巢癌[27]等多種腫瘤的預后研究中均有報道。

4 治 療

miR-25可調(diào)控放化療敏感性，而放化療敏感性會明顯影響腫瘤的治療效果。研究表明NSCLC患者中有相當一部分對放療反應遲鈍，He等[28]研究發(fā)現(xiàn)將NSCLC與健康對照組相比、NSCLC放射抵抗患者與放射敏感的患者相比，其中前者的miR-25表達上調(diào)，且在NSCLC組織和細胞株中BTG2的表達與miR-25的表達呈負相關(guān)，研究認為通過miR-25-BTG2軸直接調(diào)控BTG2表達，影響NSCLC對放療的敏感性；近年來，研究發(fā)現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性也為腫瘤治療提供了可能，據(jù)前人研究報道m(xù)iR-25在胃癌中是一個癌基因，通過靶向TOB1促進胃癌細胞的生長和轉(zhuǎn)移[5]，然而Zhou等[29]研究發(fā)現(xiàn)若miR-25的成熟區(qū)rs41274221發(fā)生單核苷酸多態(tài)性(SNP)則改變了miR-25對胃癌的效應，可作為一個與腫瘤生長、轉(zhuǎn)移有關(guān)的保護因素參與到胃癌的發(fā)生過程中，該研究闡明單核苷酸多態(tài)性可干擾靶基因TOB1的調(diào)控影響miR-25的功能，使原本在胃癌具有促癌功能的miR-25變成抑癌功能，阻止胃癌細胞進一步增生、轉(zhuǎn)移，這或許是疾病的一種新生物學標志物，但SNP在miRNA的作用還有待進一步研究；另外，腫瘤細胞中抑癌性miR-25的缺失會增加其靶向致癌基因的表達，而致癌性miR-25的升高能夠降低其靶向腫瘤抑制基因的表達，這一認識使得應用靶向致癌性miR-25與恢復抑癌性miR-25的功能來治療腫瘤成為可能，但miR-25在治療方面未見報道，可能是今后研究的一個方向。

5 展 望

綜上所述，本文探討了miR-25參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展及其診斷和預后的研究進展，現(xiàn)在對miR-25的研究多集中在其調(diào)控某一個基因?qū)δ[瘤發(fā)生發(fā)展的影響上，而對相關(guān)信號通路的研究卻仍然較少，miR-25在腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機制有待更進一步的研究，明確miR-25的調(diào)控機制可能為腫瘤的防治提供新靶點。另外，以miR-25為首的調(diào)控網(wǎng)絡中，即使在同一腫瘤中也可發(fā)現(xiàn)多種靶基因共同參與其發(fā)生發(fā)展，目前究竟是哪個靶基因發(fā)揮主要調(diào)控作用或者靶基因之間的聯(lián)系還未見相關(guān)報道，相信隨著以后對相關(guān)問題的深入研究，可為進一步闡明 miR-25 在腫瘤的作用、分子靶向治療及基因治療等問題上提供新的方向。

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丁小麗(1989-)，在讀碩士，主要從事分子診斷研究?！?/p>

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1671-8348(2017)04-0545-04

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2016-10-29)