戴 一，朱向群，吳靈剛

（新華學院藥學院，安徽合肥 230088）

烏靈參化學成分及藥理作用研究進展*

戴 一，朱向群，吳靈剛

（新華學院藥學院，安徽合肥 230088）

烏靈參；化學成分；藥理作用；臨床應用

烏靈參（XN）又叫雷震子，因皮色烏黑、用之靈驗有效而得名，為炭角菌科黑柄炭角菌Xylaria nigripes (KI.) Sacc的菌核，主產四川、云南等地，在臺灣地區(qū)也有報道[1]。XN性溫、味微苦，具有益氣補血的作用，被《四川中藥志》所收載，民間用其除濕、鎮(zhèn)驚、止心悸、催乳、補腎、安眠等[2]。早期研究主要集中于XN的臨床研究，趙聰格等[3]、王嘉麟等[4]在治療抑郁癥、焦慮性失眠、神經調節(jié)、免疫調節(jié)等方面亦進行了綜述。近年來，XN研究較為活躍，在多個方面取得了一定進展，本文從XN化學成分、藥理活性及臨床應用等方面進行綜述，以期為XN的進一步開發(fā)利用提供參考。

1 化學成分

XN所含成分主要為多糖、腺苷、氨基酸、微量元素及蛋白等[5-6]。關于蛋白成分，1993年，Sreerama和Veerabhadrappa從XN中分離獲得了羧酸酯水解酶FE-Ⅰ、FE-Ⅱ、FE-Ⅲ和FE-Ⅳ，酯酶活性較高，等電點分別為5.1、5.25、5.4和5.6。FE-Ⅰ和FE-Ⅱ相對分子量約為78.5kDa，F(xiàn)E-Ⅲ和FE-Ⅳ約為78.5kDa，這四種酶為同源二聚體，其亞基通過非共價鍵相連[7]。

對于XN中所含的小分子單體成分，2008年，Gong等[8]從XN中首次分離出5-羥基-7-甲氧基-2-甲基-4-二氫色原酮(1)、5,7-二羥基-2-甲基-4-二氫色原酮(2)、5-羥基-2-甲基-4-二氫色原酮(3)、1-(2,6-二羥基苯)-3-羥基-丁酮(4)、5α,8α-過氧化麥角甾-6,22-二烯-3β-醇(5)、麥角甾-7,22-二烯-3β-5α,6β-三醇(6)、大戟醇(7)、β-谷甾醇(8)、2-(4-羥基苯)-乙醇(9)等9個單體成分，其中化合物1、2為首次分離到的天然產物。2015年，Li等[9]對XN的化學成分的研究取得新進展，分離出兩個新的化學單體xylapyrrosides A（10）和B（11）及兩個已知化合物pollenopyrrosides A（12）和B（13），這些單體擁有獨特的2-甲?；量┏砗蠁徇h(huán)的三環(huán)骨架，均為螺環(huán)吡咯生物堿，在天然產物中非常稀少，且xylapyrrosides A、B分別與pollenopyrrosides A和B兩兩成鏡像關系；同時，Li等的課題組首次完成了帶有吡喃糖環(huán)的螺酮縮醇生物堿的合成，全合成出化合物10、11、13和3個新的類似物xylapyrrosides A1（14）、A2 (15)和B1(16)。此外，XN還含有香豆素成分8-二羥基-3-甲基-3，4-二氫異香豆素[10]。

2 藥理活性

2.1 抗氧化作用 對XN藥理活性的研究，近年來多集中在抗氧化活性方面。XN水提物具有抗氧化活性，尤其是菌絲體胞內多糖具有很強的還原能力，其螯合鐵離子能力、ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力的IC50值分別為141.2、174.25和351.56ng/ml[11]。另外，栽培XN及市售XN產品（XNP）抗氧化活性不同，對栽培XN及XNP分別采用水和乙醇提取，提取物分別記為XN水提物（XN-H）、XNP水提物（XNP-H）、XN乙醇提取物（XN-E）和XNP乙醇提取物（XNP-E）。對于抗氧化活性，無論水提還是乙醇提取，XN提取物的抗氧化活性和自由基清除能力均強于XNP提取物，但所有提取物的金屬離子螯合能力和還原能力均較弱[12]。XN-H（IC50 6.20μg/ml）和XN-E(IC50 5.41μg/ml)的抗氧化活性強于Trolox（IC50 19.64μg/ml）和維生素C（IC50 26.39μg/ml），而XNP提取物的抗氧化活性均弱于Trolox和維生素C。在超氧自由基清除方面，XN-E(IC50 5.12μg/ml)、XNP-E（IC50 8.89μg/ml）與Trolox(IC50 6.94μg/ml)和維生素C（IC50 4.25μg/ml）的活性類似；XN提取物的DPPH自由基清除能力弱于Trolox和維生素C，但約是XNP提取物的8倍；對于ABTS自由基清除能力，XN和XNP提取物均較弱。

在上述提取物中，XN-E提取物的總黃酮含量（32.69mg/g）和酚類含量（59.75mg/g）最高，XNP-H的多糖含量最高，XN-E具有最強的抗氧化活性和自由基清除能力與其較高含量的多酚有關，而不是多糖[12]。對于XN的DPPH自由基清除活性的具體物質基礎，Wu[10]從XN中獲得了5,8-二羥基-3-甲基-3,4-二氫異香豆素，該物質在20μmol/L濃度時的DPPH自由基清除能力是維生素C的1.67倍，是維生素E的2.10倍。另外，XN的化學單體xylapyrrosides A和B及pollenopyrrosides A和B也顯示出溫和的抗氧化活性[9]。

2.2 造血及降血糖活性 XN顯示出的血液系統(tǒng)活性主要為造血功能。給失血50%的大鼠灌服XN及FeSO4(加維生素C)10d，每隔一天檢查血象l次，共12次，發(fā)現(xiàn)給藥期間XN組紅細胞（RBC）和血紅蛋白（Hb）的增長率明顯高于對照組，但與FeSO4組比較差異無統(tǒng)計學意義；同時，XN還能明顯縮短RBC和Hb恢復至放血前90%水平所需要時間[13]。XN還具有降血糖作用，Chen等[14]研究發(fā)現(xiàn)，XN水提物對正常Wistar大鼠和類固醇激素性胰島素抵抗(SIIR)大鼠均具有降血糖作用，給藥60min后，正常Wistar大鼠血糖降低21%，SIIR大鼠血糖降低26%。另外，對于SIIR大鼠，胰島素受體底物-1和葡萄糖轉運蛋白-4的信號蛋白分別增加0.51倍和1.12倍，血漿中游離脂肪酸含量不變，而5-HT受體拮抗劑（對氯苯丙氨酸）可阻斷XN水提物的降血糖作用。因此提示，XN水提物對正常Wistar大鼠和SIIR大鼠均有降血糖作用，對SIIR大鼠的降血糖作用可能與5-HT相關，可提高SIIR大鼠對胰島素的敏感性。

2.3 抗炎保肝作用 XN提取物具有免疫調節(jié)活性。用1μg/ml脂多糖(LPS)誘導Balb/c小鼠腹膜巨噬細胞，以5-30μg/ml的XN-H或XN-E處理時，對巨噬細胞沒有細胞毒作用，但在上述濃度條件下，XN-H和XN-E對巨噬細胞產生一氧化氮（NO）、PGE2、IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ均有劑量依賴性的抑制作用，而且XN-H處理組活性強于XN-E處理組。另外，XN-H提取物對iNOS與COX-2 RNA表達、LPS-誘導IκB-α磷酸化及NF-κB激活的抑制作用均強于XN-E[15]。由于二者所含物質的區(qū)別，XN-H比XN-E具有更強的抗炎活性，其機制可能是通過NF-κB信號途徑抑制iNOS和COX-2的表達實現(xiàn)的，物質基礎可能是β-葡聚糖[15]。Song等[16]分別以500mg/kg和1000mg/kg的劑量連續(xù)9天灌胃小鼠XN-H，然后皮下注射2ml/kg的40% CCl4橄欖油溶液，結果兩個劑量給藥組均能阻止血清谷草轉氨酶（sGOT）、血清谷丙轉氨酶（sGPT）和肝硫代巴比妥酸反應物質（TBARS）水平的升高，并能提高肝超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）的濃度及增強CCl4誘導肝損傷小鼠血清的總抗氧化活性，保肝作用類似水飛薊素。這個結果顯示XN提取物能有效保護CCl4誘導的肝損傷，其機制可能與抗氧化作用有關。

2.4 其它作用 有研究發(fā)現(xiàn)，XN提取物可緩解大鼠快動眼睡眠剝奪誘導的空間記憶障礙，海馬區(qū)的CREB磷酸化可能是其機制之一[17]。此外，XN提取物還具有較強的殺滅蚊子幼蟲的能力，體現(xiàn)了XN藥理作用的多樣性[18]。

3 臨床應用

3.1 治療失眠 治療失眠是XN的主要臨床應用之一。彭利芬[19]對100例手術后失眠癥患者采用烏靈膠囊進行治療，總有效率達到94%，證實了烏靈膠囊治療失眠的有效性。對于烏靈膠囊治療失眠的有效性和安全性，一個多中心、隨機、雙盲、安慰劑對照實驗（92個志愿者服用安慰劑，84個志愿者服用烏靈膠囊，連續(xù)服用4周，接著進行2周隨訪）發(fā)現(xiàn)，治療前后烏靈膠囊組、安慰劑組匹茲堡睡眠質量指數(shù)（PSQI）和世界衛(wèi)生組織生存質量測定量表簡表指標（WHOQOL-BREF）明顯提高，但組間比較差異無統(tǒng)計學意義，烏靈膠囊組和安慰劑組不良反應率分別為10.10%和6.73%。該結果僅能說明烏靈膠囊組通過4周用藥可以改善失眠癥狀，且耐受性良好，由于與安慰劑組相比無明顯差別，需進一步臨床試驗驗證[20]。

3.2 治療抑郁癥 郭慧榮等[21]對34例青少年適應障礙患者給予口服烏靈菌粉治療，治療6周后，抑郁自評量表、焦慮自評量表評分較治療前明顯下降；病情嚴重程度、療效總評和療效指數(shù)較治療前明顯下降，且全部患者無明顯副反應，可見烏靈菌粉治療青少年適應障礙安全、有效。

腦卒中后抑郁是腦卒中患者常見并發(fā)癥之一。萬愛蘭等[22]將70例腦卒中后抑郁患者隨機分為賽洛特+烏靈膠囊組、賽洛特對照組，結果烏靈膠囊聯(lián)合賽洛特治療起效快，可明顯改善腦卒中后抑郁障礙的程度，并能促進神經功能康復，不良反應較少且輕微。

對于XN治療伴隨癲癇的抑郁癥患者的有效性和安全性，采用多中心、隨機、雙盲、安慰劑對照的方式進行12周治療，104例伴有癲癇的抑郁癥患者隨機分為XN組和安慰劑組，志愿者在治療的第0、2、4、8和12周隨訪，81人完成隨訪，該研究主要療效終點是抑郁癥總有效率，治療12周后XN組（51.3%，n=39）比安慰劑組（35.7%，n=42）顯著有效；對于癲癇的發(fā)作頻率和嚴重性，XN組和安慰劑組比較無明顯差別；此外，伴隨癲癇的抑郁癥患者生活質量和發(fā)作擔憂得分，XN組高于安慰劑組，且大部分患者不良反應較輕。提示XN能減輕抑郁癥癥狀，且患者耐受性良好[23]。

另外，有專利保護了XN與箭葉秋葵、滇藏方枝柏等組成復方治療陰虛的抑郁癥患者[24]，與白芍、全蝎組方亦可治療抑郁癥，且療效顯著[25]。由此可見,XN對治療抑郁癥具有良好的應用前景，且日益受到關注。

3.3 治療前列腺增生 XN還可以治療前列腺增生。例如：XN膠囊治療32例前列腺增生癥的臨床癥狀總有效率為96.9%，B超檢查前列腺體積明顯縮?。◤那傲邢俅笮∵M行評價，總有效率為71.9%），綜合評價總有效率為90.6%。XN膠囊長期服用除無副作用外，尚有提高血紅蛋白及免疫功能的作用，絕大多數(shù)患者服用后自覺精力充沛、精神飽滿、食欲增加、睡眠時間延長，因此，對治療前列腺增生亦有輔助作用[26]。還有專利報道XN可與莪術、浙貝母等組方治療前列腺炎和前列腺增生[27]，與靈芝、龜殼、珍珠粉等10種中藥組合治療腎病等[28]。

4 小結

烏靈參作為一種名貴藥材，對其化學成分的研究較少，且沒有系統(tǒng)性，但有研究發(fā)現(xiàn)，烏靈參中除含有常見成分外，尚含有天然產物中非常稀少且獨特的2-甲?；量┏砗蠁徇h(huán)的三環(huán)骨架。因此，深入開展烏靈參化學成分的系統(tǒng)研究對于發(fā)現(xiàn)烏靈參的新活性、開發(fā)其藥用價值具有重要意義。對于烏靈參藥理作用的研究，近年來主要局限于中樞神經系統(tǒng)疾病，盡管在抗氧化活性及造血、護肝等方面進行了探索，但沒有特色成果，還有待進一步深入研究烏靈參的藥理作用。

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(綜述講座欄目編輯：張玉亭)

R932

A

1004-6879（2017）03-0249-04

2016-10-24）

* 國家級大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目（201512216001）