陸煒高，張宇，韋登球

(南寧市第八人民醫(yī)院檢驗科，廣西 南寧 530001)

·經(jīng)驗交流·

黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)的改良方法

陸煒高，張宇，韋登球

(南寧市第八人民醫(yī)院檢驗科，廣西 南寧 530001)

目的 探討?zhàn)さ鞍钻栃缘臐{膜腔積液白細胞計數(shù)改良措施，以提高其計數(shù)準確性。方法選取我院2015年5月至2016年4月280例漿膜腔積液中李凡它試驗（Rivalta）陽性的112例患者為研究對象，分別采用常規(guī)方法和改良法對其進行白細胞計數(shù)，重復(fù)計數(shù)5次并取其平均值作為最終結(jié)果進行比對。結(jié)果改良法下112例黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)均值為155×106/L、標準差為5.7、離散度集中、白細胞結(jié)構(gòu)分明且清晰、背景清晰、分辨率清楚，而常規(guī)方法下黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)為125×106/L、標準差為8.5、離散度離散、白細胞結(jié)構(gòu)模糊且不清晰、背景模糊、干擾較多，二者相比較，改良法所得結(jié)果更加準確，更易于標準化。結(jié)論對于黏蛋白陽性的漿膜腔積液，采用改良法進行白細胞計數(shù)有助于降低黏蛋白帶來的干擾，使得結(jié)果更加符合客觀實際，繼而為臨床診療工作開展提供準確的科學(xué)依據(jù)，值得在今后臨床工作中推廣使用。

黏蛋白陽性；李凡它試驗；漿膜腔積液；白細胞計數(shù)

漿膜腔積液是指患者機體處于病理狀態(tài)下胸腔、腹腔或者是心包腔之中積聚的過多液體，其本身就屬于疾病的一種臨床表現(xiàn)[1]。在目前臨床中漿膜腔積液可分為滲出液以及漏出液兩種，二者各自體現(xiàn)的疾病存在著顯著的差異性，同時對于后續(xù)的診療工作開展同樣具有重要影響。李凡它試驗則是用于黏蛋白定性試驗的一種方法，如果漿膜腔積液伴有白色云霧狀混濁，則其結(jié)果為陽性，絕大多數(shù)情況下性質(zhì)為滲出液。由于其操作簡便而被廣泛應(yīng)用在臨床檢驗工作中。然而，隨著臨床工作的深入開展，常規(guī)方法下漿膜腔積液白細胞計數(shù)僅考慮樣本是否為血性標本，并不區(qū)分李凡它試驗陰陽性對其結(jié)果帶來的影響，使得血性標本中黏蛋白對其帶來了較大的干擾，削弱結(jié)果的準確性與客觀性，導(dǎo)致其計數(shù)偏差。鑒于此，本研究圍繞黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)的改良予以深入分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2015年5月至2016年4月280例漿膜腔積液中李凡它試驗(Rivalta)陽性的112例(40%)患者為研究對象，其中男性66例，女性46例；年齡35～68歲，平均(51.25±1.33)歲；病程15 d～3個月，平均(1.24±0.21)個月；漿膜腔積液來源：胸腔54例、腹腔57例、心包腔1例。納入標準：(1)李凡它試驗陽性的漿膜腔積液標本；(2)所有標本均由臨床醫(yī)師行胸腔穿刺術(shù)、腹腔穿刺術(shù)、心包穿刺術(shù)采集所得。排除標準：凝塊、細胞變性、細胞破壞自溶等漿膜腔積液標本。

1.2 方法

1.2.1 蛋白定性試驗 實驗原理：通常情況下胸腔、腹腔或者是心包腔滲出液中包含有大量的漿膜黏蛋白，在漿膜腔積液標本處于酸性條件下可發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而生成白色霧狀沉淀[2]。具體試驗方法如下：取無菌干凈的100 mL量筒，向其中加入50 mL蒸餾水之后滴入0.1 mL乙酸，pH 3～5，在用力混勻之后于室溫條件下靜置15 min后將漿膜腔積液標本靠近量筒液面下逐滴滴入，并且在黑色背景下觀察量筒中是否有白色霧狀沉淀生成以及沉淀物的下降速度[3]。結(jié)果判定標準：如果漿膜腔積液滴入后肉眼可見濃厚的白色霧狀沉淀物并且其下沉速度較快，形成帶狀，則結(jié)果為李凡它試驗陽性，反之產(chǎn)生的白色霧狀沉淀物不明顯，緩慢下沉并在下沉過程中逐漸消失者為陰性[4]。

1.2.2 白細胞計數(shù) 為了驗證黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)改良方法的實用性，本次研究首先依照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》要求對漿膜腔積液標本進行常規(guī)白細胞計數(shù)，即：將充分混勻的漿膜腔積液標本采用白細胞稀釋液或者是冰醋酸進行稀釋后予以計數(shù)，具體稀釋的比例可參照實際細胞總量自行決定[5]。隨后將所得結(jié)果帶入到以下公式中進行校正：白細胞校正數(shù)=漿膜腔積液標本白細胞計數(shù)結(jié)果-漿膜腔積液標本紅細胞計數(shù)結(jié)果×外周血白細胞數(shù)÷外周血紅細胞數(shù)[6]。在常規(guī)方法計數(shù)完畢后采用改良法進行白細胞計數(shù)，具體方法如下：采用蒸餾水替代白細胞稀釋液對李凡他試驗陽性的漿膜腔積液標本進行稀釋，在計數(shù)前將濃度為2%的冰醋酸溶液吸入到毛細管中，隨即將其打出，促使毛細管內(nèi)壁完全沾有冰醋酸，之后將已經(jīng)稀釋好的漿膜腔積液標本吸入毛細管，充池，靜置10 min待紅細胞充分溶解后按照規(guī)程要求進行白細胞計數(shù)[7]。為了最大程度上避免誤差，取5次重復(fù)計數(shù)結(jié)果的均值作為最終白細胞計數(shù)結(jié)果，質(zhì)量得分在B級以上時保留結(jié)果并采用變異百分數(shù)評價法對其進行評價。

1.3 觀察指標 本研究選取的觀察指標為白細胞計數(shù)的均值、標準差、離散度、白細胞結(jié)構(gòu)和形態(tài)、背景五項內(nèi)容。

2 結(jié) 果

改良法下112例黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)所得結(jié)果相較于常規(guī)方法更加準確且更易于標準化，具體比對結(jié)果見表1。

表1 傳統(tǒng)方法與改良法方法結(jié)果比較

3 討 論

李凡它試驗即為漿液黏蛋白定性實驗，由于漿膜蛋白為多糖(polysaccharide)以及蛋白質(zhì)(protein)所組成的復(fù)合物，等電點PI 3～5，又被稱之為酸性糖蛋白(acidglycoprotein，AAG)[8]。當(dāng)漿膜腔積液標本處于稀釋的醋酸溶液中將會產(chǎn)生大量的白色沉淀，通過該實驗可以為臨床判定其具體為漏出液還是滲出液提供準確的科學(xué)依據(jù)。在臨床實踐過程中證實，漿膜腔積液為漏出液時，其所包含的黏蛋白含量相對較少，李凡它試驗結(jié)果多為陰性，而滲出液則與之相反，在大量黏蛋白參與下結(jié)果多為陽性。此點對于疾病的臨床診斷尤為重要。然而，依據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》所開展的臨床檢驗工作中漿膜腔積液白細胞計數(shù)并不考慮李凡它試驗陰性及陽性所帶來的影響，僅僅關(guān)注該標本是否為血性標本。由于漿膜腔積液標本中黏蛋白的客觀存在，使得白細胞計數(shù)受到較大干擾，所得結(jié)果與實際情況存在著較為明顯的偏差，給后續(xù)臨床診療方案取得的效果增添了不確定性。所以，改良黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)在當(dāng)前顯得尤為重要。

本次研究中改良法下112例黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)均值為155×106/L、標準差為5.7、離散度集中、白細胞結(jié)構(gòu)分明且清晰、背景清晰、分辨率清楚，而常規(guī)方法下黏蛋白陽性的漿膜腔積液白細胞計數(shù)為125×106/L、標準差為8.5、離散度離散、白細胞結(jié)構(gòu)模糊且不清晰、背景模糊、干擾較多。結(jié)果表明改良法所得結(jié)果的準確性及客觀性更高，更能夠滿足當(dāng)前臨床檢驗工作需求。其原因在于李凡它試驗陽性的漿膜腔積液標本中由于李凡它試劑中含有少量的冰醋酸，如果再次向標本中滴入含有冰醋酸的白細胞稀釋液直接進行白細胞計數(shù)，必然會因冰醋酸過多而使得白色霧狀沉淀更濃，最終導(dǎo)致其結(jié)果的準確性大打折扣。而本次研究采取的改良法，則是采用適量的蒸餾水來替代白細胞稀釋液對漿膜腔積液標本進行稀釋，以降低李凡它試驗陽性程度，即：從+++或者是++++程度降低至+[9]。換而言之，改良法的本質(zhì)在于確保白細胞計數(shù)結(jié)果準確性的基礎(chǔ)上采用蒸餾水來降低李凡它試驗陽性程度，從而最大限度上降低漿膜腔積液標本中黏蛋白對于整個白細胞計數(shù)工作帶來的不利影響，使得白細胞結(jié)構(gòu)及形態(tài)更加清晰，背景干凈[10]。而實踐證明此種方法無論是從理論上還是實踐應(yīng)用上均具備了較高的可行性。此外，相較于常規(guī)白細胞計數(shù)方法，本次采用的改良法在標準化方面具有著十分明顯的優(yōu)勢，整個操作過程中無需使用特殊的溶液或者是試劑，蒸餾水的質(zhì)量管控已經(jīng)全面貫徹落實在了臨床檢驗工作中，使得此種白細胞計數(shù)法推廣使用性大幅提升。

綜上所述，對于黏蛋白陽性的漿膜腔積液，采用改良法進行白細胞計數(shù)有助于降低黏蛋白帶來的干擾，使得結(jié)果更加符合客觀實際，繼而為臨床診療工作開展提供準確的科學(xué)依據(jù)，值得在今后臨床工作中推廣使用。

[1]唐玉鳳,魏永毅,陳紅,等.全自動尿液有形成分分析儀檢測漿膜腔積液時出現(xiàn)“管型”信息的意義[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2016,13(8): 1093-1095.

[2]滕士階,周彥,徐承來,等.體液細胞計數(shù)自動化檢測影響因素的研究[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2016,37(9):1290-1292.

[3]袁晃堆,肖燕青.腫瘤標志物及生化指標聯(lián)合檢測在良惡性胸腹腔積液診斷中的作用[J].中外醫(yī)療,2014,33(32):26-27.

[4]葉小英,范春麗,陸敏,等.SYSMEXXN-1000血球儀在腦脊液和胸腹水白細胞計數(shù)中的可行性探討[J].海南醫(yī)學(xué),2016,27(6): 955-956.

[5]張金花,胡娟,李君安.SysmexXE-5000全自動血細胞分析儀體液模式對胸、腹腔積液白細胞計數(shù)與分類計數(shù)的結(jié)果分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2015,36(1):45-46.

[6]郭翀,李軼勛,趙陽.XN-2000血細胞分析儀體液模式對腹腔積液和胸腔積液腫瘤細胞篩查作用的探討[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2015,36(15):2150-2151.

[7]Di Bonito P,Pacifico L,Chiesa C,et al.White blood cell count may identify abnormal cardiometabolic phenotype and preclinical organ damage in overweight/obese children[J].Nutr Metab Cardiovasc Dis,2016,26(6):502-509.

[8]李勤,嚴春潮.胸腹腔積液中有核細胞計數(shù)和分類兩種方法的比較——SysmexTX-4000i全自動血液分析儀及光學(xué)顯微鏡手工法的比較[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志,2014,27(1):14-16.

[9]管學(xué)平,陳鑫,耿波,等.全血白細胞計數(shù)危急值與臨床的關(guān)系[J].海南醫(yī)學(xué),2013,24(11):1639-1641.

[10]Hastings C,Gaynon PS,Nachman JB,et al.Increased post-induction intensification improves outcome in children and adolescents with a markedly elevated white blood cell count(≥200×109/L)with T cell acute lymphoblastic leukaemia but not B cell disease:a report from the C hildren's O ncology G roup[J].Br J Haematol,2015,168(4): 533-546.

R446.63

B

1003—6350（2017）03—0502—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.03.054

2016-08-09)

陸煒高。E-mail：luweig@126.com