王 瑞,蘇顯明?, 張秋萍

1.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院老年心內(nèi)科(西安 710061) ,2.西安市第五醫(yī)院內(nèi)五科(西安710082)

△通訊作者

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2、同型半胱氨酸和D-二聚體與原發(fā)性高血壓相關(guān)性分析

王 瑞1,蘇顯明1?, 張秋萍2

1.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院老年心內(nèi)科(西安 710061) ,2.西安市第五醫(yī)院內(nèi)五科(西安710082)

目的：探討脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(LP-PLA2)、同型半胱氨酸(Hcy)和D-二聚體(D-Dime)與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性。方法: 選擇無其他任何危險(xiǎn)因素的原發(fā)性高血壓疾病患者75例(無危險(xiǎn)因素疾病組)和伴有hs-CRP 、體重指數(shù)、總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、血糖等至少一項(xiàng)以上危險(xiǎn)因素的原發(fā)性高血壓疾病患者66例(危險(xiǎn)因素疾病組)及原發(fā)性高血壓合并癥患者(包括合并腦梗死、腦出血、冠心病、頸動脈斑塊等動脈粥樣硬化性心腦血管疾病)43例(原發(fā)性高血壓合并癥組)；另選擇同期健康體檢者114名作為正常對照組。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法測定四組血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2、速率法測定四組同型半胱氨酸，采用透射比濁法測定四組D-二聚體水平，分析脂蛋白相關(guān)磷脂酶、同型半胱氨酸和D-二聚體與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性。結(jié)果：無危險(xiǎn)因素疾病組、危險(xiǎn)因素疾病組和原發(fā)性高血壓合并癥三組中LP-PLA2、Hcy、D-Dime的血液濃度顯著高于正常對照組(P<0.01)，且逐漸升高(P<0.01或P<0.05)；無危險(xiǎn)因素疾病組、危險(xiǎn)因素疾病組和原發(fā)性高血壓合并癥三組患者中 Hcy、D-Dime和 LP-PLA2三者呈明顯正相關(guān)性(r=0.854 ，P<0.05)。結(jié)論: 在心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中既存在有多因素的相互協(xié)同作用，也有疾病促進(jìn)炎癥因子的釋放而存在因果關(guān)系相互促進(jìn)的疊加效應(yīng)。

原發(fā)性高血壓病(Essential hypertension,EH)、動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)是心血管疾病(Cardiovascular disease,CDC)中發(fā)生率和致殘率最高，嚴(yán)重影響人們的身心健康和生活質(zhì)量的疾病。近來有研究發(fā)現(xiàn)炎癥和氧化應(yīng)激在其發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用[1]。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lipo-protein—associated phospholipase A2,LpPLA2)是一個(gè)新近發(fā)現(xiàn)的炎癥因子，且與原發(fā)性高血壓、動脈粥樣硬化密切相關(guān)[2]；同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)對原發(fā)性高血壓的發(fā)病和進(jìn)展顯示出較明顯的活性特征；D-二聚體(D-Dime)是交聯(lián)纖維蛋白的特異降解產(chǎn)物，它的升高可以體現(xiàn)出機(jī)體正處在血栓的形成和降解的過程中，其與心腦血管疾病密切有關(guān)[3]。為此，我們旨在通過檢測原發(fā)性高血壓不同情況血液Lp-LPA2、Hcy和D-Dime濃度的變化，探討原發(fā)性高血壓不同情況與這些指標(biāo)的相關(guān)性。

資料與方法

1 一般資料 選取2012年1月至2015年1月間西安市第五醫(yī)院內(nèi)5科門診及住院的原發(fā)性高血壓合并癥患者43例(包括合并腦梗、腦出血、冠心病等動脈粥樣硬化性心腦血管疾病，簡稱原發(fā)性高血壓合并癥組)，其中男 24例，女19 例，平均年齡( 62.5 ±9.8)歲;伴有hs-CRP 、體重指數(shù)、總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、血糖等至少一項(xiàng)以上危險(xiǎn)因素的原發(fā)性高血壓疾病患者66例(簡稱危險(xiǎn)因素疾病組)，其中男 35例， 女31 例，平均年齡(63.7 ±10);無其它危險(xiǎn)因素的原發(fā)性高血壓疾病患者75例(簡稱無危險(xiǎn)因素疾病組)，其中男 40例， 女35例，平均年齡(60.83 ±8.96)歲。另外選擇同期健康體檢者114例作為正常對照組，男60例，女54例，平均年齡(62.31±7.86)歲。

入選標(biāo)準(zhǔn):所有病例均符合1995年全國第4屆腦血管病學(xué)術(shù)會議修訂的腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)及1979年世界衛(wèi)生組織 (WHO)CHD 診斷標(biāo)準(zhǔn)，并以1999年WHO/國際高血壓協(xié)會(ISH)高血壓指南、2010年美國糖尿病協(xié)會(ADA)糖尿病診療指南及2007年中國成人血脂異常防治指南作為高血壓、糖尿病、血脂異常的診斷指標(biāo)。

排除標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)病史詢問既往無心腦血管病病史，近期未服任何藥物，且經(jīng)體檢、超聲心動圖、X線片、頭顱核磁共振等檢查排除高血壓、糖尿病、血脂異常、腦卒中、心臟疾病和急慢性炎癥性疾病，亦無吸煙史，無體重指數(shù)BMI異常。由于脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與年齡和性別相關(guān)[4]，各組間在性別、年齡方面經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差別無顯著性。

2 研究方法

2.1 血壓測定：血壓測定取門診以及入院當(dāng)天未治療前的測定，用汞柱式血壓計(jì)測定血壓3次，每次間隔lmin；以Korotkoff第1音為收縮壓(SBP)，第5音為舒張壓(DBP，缺乏此音時(shí)按第4音記錄)，取3次血壓的平均值。

2.2 標(biāo)本收集：所有入選者均于晨起空腹采集靜脈血5 ml，一管采用無任何添加劑的干燥管注入3 ml ，室溫靜置lh，以3000r/min離心10 min,分離血清，用于測定Lp-PLA2和HCY、hs-CRP、總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、血糖等生化項(xiàng)目；另一管采用凝血專用檸檬酸鈉抗凝管(藍(lán)帽)，注入血液1.8～2 ml刻度線，顛倒混勻7～8次，以防凝固，以3000r/min離心10 min，分離血漿測定D-Dime，標(biāo)本在2h內(nèi)檢測完畢。

2.3 Hcy測定:用全自動生化分析儀(型號AU2700)檢測HCY、hs-CRP 、總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、血糖等生化項(xiàng)目；采用免疫比濁法檢測同型半胱氨酸，由浙江東甌診斷產(chǎn)品有限公司提供， 相關(guān)操作步驟嚴(yán)格按照項(xiàng)目作業(yè)指導(dǎo)書進(jìn)行。

2.4 血清Lp-PLA2水平的測定:血清Lp-PLA2水平測定采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法，試劑盒由天津康爾克生物科技有限公司提供，操作嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

2.5 D-Dime 測定:D-Dime 測定采用全自動凝血分析儀ACL TOP700(美國IL公司生產(chǎn))及配套原裝試劑、質(zhì)控品。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)；Lp-PLA2、Hcy與D-Dime的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析；P< 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 各組間血清脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2、同型半胱氨酸、 血漿D-二聚體的水平比較 原發(fā)性高血壓無危險(xiǎn)因素、危險(xiǎn)因素和合并癥三組中脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2、同型半胱氨酸、D-二聚體的血液濃度水平顯著高于正常對照(P<0.01)且逐漸升高(P<0.01或(P<0.05)，見表1。

表1 各組血清Lp-LPA2、Hcy、血漿D-Dime水平的比較

注：與對照組比較，﹡P<0.01；與無危險(xiǎn)因素疾病組比較，▲P< 0.01；與危險(xiǎn)因素組比較，#P<0.05

2 血清 Hcy、D-Dime和 LP‐PLA2 相關(guān)性分析 結(jié)果顯示三者呈明顯正相關(guān)(r=0.854，P<0.05)，說明Hcy、D-Dime和 LP‐PLA2有顯著的協(xié)同作用。

討 論

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)是近年來炎性反應(yīng)介質(zhì)的熱點(diǎn)，其具有促進(jìn)動脈粥樣硬化作用，與心腦血管疾病密切相關(guān)[5-6]，是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與冠狀動脈的狹窄程度有一定關(guān)系。其致病的機(jī)理主要是Lp-PLA2與LDL中的載脂蛋白B結(jié)合，在動脈粥樣硬化中的Lp-PLA2水解ox-LDL成為溶血卵磷脂(LysoPC)和氧化型游離脂肪酸(oxNEFAs)，這兩種介質(zhì)能促進(jìn)黏附分子和炎癥因子的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)單核細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞?；罨木奘杉?xì)胞吞噬氧化LDL而形成泡沫細(xì)胞，大量的泡沫細(xì)胞在損傷的內(nèi)皮細(xì)胞局部聚集，最終造成動脈粥樣硬化斑塊的形成。Lp-PLA2促進(jìn)動脈粥樣硬化斑塊局部的炎性細(xì)胞釋放細(xì)胞因子和蛋白酶，降解纖維帽的平滑肌細(xì)胞和膠原基質(zhì)誘導(dǎo)局部產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPS)，使斑塊纖維帽變薄，完整性破壞。同時(shí)聚集的單核巨噬細(xì)胞等進(jìn)一步產(chǎn)生Lp-PLA2，形成惡性循環(huán)，加重斑塊進(jìn)展，斑塊破裂，血栓形成，促發(fā)心血管事件[7]。

高同型半胱氨酸是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，大量的研究證實(shí)高同型半胱氨酸不僅可以促進(jìn)原發(fā)性高血壓的發(fā)生和發(fā)展，同時(shí)還可以誘發(fā)冠心病、腦卒中、動脈粥樣硬化、冠狀動脈病變等嚴(yán)重心腦疾病。同型半胱氨酸誘發(fā)高血壓、心腦血管疾病的機(jī)制：①損害血管內(nèi)皮細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞受損是動脈粥樣硬化最初的特征[8]。②損害血管平滑肌細(xì)胞、血小板 高同型半胱氨酸血癥對于血小板的粘附率和聚集率產(chǎn)生間接影響[9]。③ 影響血脂代謝 高 LDL 血癥也是動脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素，它與高同型半胱氨酸血癥形同，可以產(chǎn)生過氧化物和自由基，從而損害血管。高同型半胱氨酸血癥可促進(jìn)低密度脂蛋白(LDL)的氧化過程，其原因可能與同型半胱氨酸自由巰基相關(guān)。④同型半胱氨酸能使血小板發(fā)生高度聚集和粘附,抑制抗凝、纖溶系統(tǒng)發(fā)揮正常作用，促進(jìn)血栓形成。同型半胱氨酸還能增加尿微量白蛋白的排泄、誘導(dǎo)腎血管重構(gòu)、降低腎小球?yàn)V過率和腎血流灌注、降低激肽，導(dǎo)致腎臟組織損害、水鈉潴留、前列腺素減少,促使血壓升高。

血漿 D-二聚體是凝血酶及因子 XII 作用的交聯(lián)纖維蛋白經(jīng)纖溶酶降解作用后的終末產(chǎn)物，血漿 D-二聚體含量增高表明體內(nèi)有血栓形成及溶解發(fā)生，是血栓形成和溶解發(fā)生的一個(gè)高度敏感的分子標(biāo)志物。 Ridker的一項(xiàng)研究表明血漿中 D-二聚體濃度升高預(yù)示可能發(fā)生冠狀動脈病, 以及通過檢測血漿中D-二聚體的含量的變化了解腦梗死患者的病情是否在發(fā)展有著極為重要的價(jià)值。

以往許多前瞻性研究表明脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2、同型半胱氨酸和D-二聚體在原發(fā)性高血壓病、動脈粥樣硬化等心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。本次研究顯示有危險(xiǎn)因素存在的高血壓組和有合并癥的高血壓組中Hcy、D-Dime和 LP‐PLA2均顯著高于單純的高血壓組，并且有合并癥的也顯著高于有危險(xiǎn)因素存在的高血壓組以及三種因素的正相關(guān)性，充分證明在心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中既存在有多因素的相互協(xié)同作用，也有疾病促進(jìn)炎癥因子的釋放而存在的因果關(guān)系相互作用的惡性循環(huán)現(xiàn)象，這種疊加效應(yīng)使得患嚴(yán)重心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)度增加，所以，在重視病因預(yù)防的同時(shí)積極治療相關(guān)疾病至關(guān)重要；并建立疾病的多因素臨床綜合評價(jià)體系十分必要。

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(收稿：2016-05-09)

Correlation analysis of lipoprotein associated phospholipase A2, homocysteine and D-Dime with essential hypertension

Wang Rui, Su Xianming, Zhang Qiuping.

The Cadre Department ,the First Affiliated Hospital of Xi’an Jiaotong University(Xi’an 710061)

Objective：To probe relationship between lipoprotein-associated phospholipase A2(Lp-PLA2)、Homocysteine & D-Dime of the patients with essential hypertension(EH). Methods：There were no risk factors hypertension group(n=75)、risk factors hypertension group(n=66)、hypertension complication group(n=43) and normal control group(n=114) ．All of the study subjects were determined by enzyme-linked immunosorbent assay of plasma lipoprotein associated LP‐PLA2，Rate determination of homocysteine，turbidmetry of D-Dime .Results：By comparative analysis, LP-PLA2、HCY and D-Dmie concentration of no risk factors hypertension group、risk factors hypertension group and hypertension complication group were significantly higher than that in the control group(P<0.01),and LP-PLA2 、HCY and D-Dmie level were gradually and significantly higher from no risk factors hypertension group、risk factors hypertension group to hypertension complication group (P<0.01 orP<0.05 ). LP-PLA2、HCY and D-Dmie showed asignificant positive correlation with different disease group，no risk factors hypertension group、risk factors hypertension group and hypertension complication group (r=0.857,P<0．05).Conclusion：Serum level of LP-PLA2、HCY and D-Dmie are correlated with different cases of hypertension,the more influence factors and the more severe the disease, the higher the concentration. So there are many factors that exist in the mutual cooperation, and the stacking effect of Interaction of causation in the occurrence and development of cardiovascular diseases.

Hypertension/physiopatholoqy Phospholipases A2/analysis Homocysteine/analysis @Different cases

高血壓/病理生理生學(xué) 磷脂酶A2/分析 同型半胱氨酸/分析 D-二聚體

R544

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.03.020