張立華 張鐵征 王曉 張明

早期前列腺癌抗原-2和人類腺體激肽釋放酶2在前列腺癌診斷中的臨床意義

張立華 張鐵征 王曉 張明

目的 探討血清早期前列腺癌抗原-2(EPCA-2)和人類腺體激肽釋放酶2(hK2)濃度在前列腺癌早期診斷提供理論依據(jù)。方法 選擇健康對(duì)照組58例、前列腺增生癥組43例、前列腺癌組34例，用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清前列腺特異性抗原(PSA)濃度，用酶聯(lián)免疫技術(shù)分別檢測(cè)血清EPCA-2和hK2濃度，觀察3組患者EPSA、PCA-2和hK2水平的差異和相關(guān)性，并探討對(duì)前列腺癌的敏感度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值。結(jié)果 前列腺癌組PSA、EPCA-2、hK2水平明顯高于健康對(duì)照組和前列腺增生組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q值分別為10.24、8.18、7.87、9.15、7.23、6.41，P<0.01)；前列腺增生癥組PSA、EPCA-2水平明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q值分別為3.61、3.04，P<0.05)，但hK2水平2組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=2.75，P>0.05)。PSA水平與EPCA-2、hK2水平呈正相關(guān)(r值分別為0.869，0.792，P<0.01)，EPCA-2、hK2水平呈正相關(guān)(r=0.780，P<0.01)。以PSA>5ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性偏低達(dá)60.4%，敏感性高達(dá)91.18%，陽性預(yù)測(cè)值43.66%，陰性預(yù)測(cè)值95.31%。以EPCA-2>30ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性達(dá)96.04%，敏感性達(dá)94.12%，陽性預(yù)測(cè)值88.89%，陰性預(yù)測(cè)值97.98%。以hK2>0.17ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性達(dá)87.13 %，敏感性達(dá)88.24%，陽性預(yù)測(cè)值69.77%，陰性預(yù)測(cè)值95.65%。PSA、EPCA-2、hK2曲線下面積分別為0.758、0.951、0.877，3項(xiàng)觀察指標(biāo)依次預(yù)測(cè)前列腺的診斷價(jià)值依次為EPCA-2>hK2>PSA。結(jié)論 前列腺癌患者血清EPCA-2、hK2檢測(cè)，可以進(jìn)一步提高診斷的準(zhǔn)確性，避免誤診及漏診，為臨床診療方案提供有力的參考依據(jù)。

前列腺癌；早期前列腺癌抗原-2；人類腺體激肽釋放酶2

研究發(fā)現(xiàn)，我國(guó)前列腺癌發(fā)病率為10.2/10萬～10.74/10萬，病死率為4.66/10萬～6.56/10萬，且發(fā)病率和病死率呈逐年上升趨勢(shì)[1,2]。一項(xiàng)薈萃分析表明，亞洲人群前列腺增生和前列腺癌的發(fā)病率呈正相關(guān)，前者會(huì)增加2.93倍的前列腺癌風(fēng)險(xiǎn)[3]。前列腺增生和前列腺癌起病隱匿，臨床癥狀輕微，容易被患者忽視，尤其是前列腺癌會(huì)明顯增加患者的疾病負(fù)擔(dān)[4]，應(yīng)盡早明確診斷并及時(shí)治療。血清前列腺特異性抗原(PSA)進(jìn)行篩查雖然能夠早期發(fā)現(xiàn)前列腺癌及時(shí)采取治療措施，顯著降低患者的病死率，但其假陽性率高，存在過度診斷和治療的風(fēng)險(xiǎn)，且在鑒別診斷PCa 與前列腺其他疾病的準(zhǔn)確性上仍缺乏足夠的敏感性和特異性[5]。早期前列腺癌抗原-2(EPCA-2)是一種與前列腺癌相關(guān)的核基質(zhì)蛋白，有研究表明它能較病理切片提早5年或更早時(shí)間診斷出前列腺癌[6]。人類腺體激肽釋放酶2(hK2)對(duì)前列腺癌的診斷更為準(zhǔn)確，成為一種有前景的標(biāo)志物[7]。本研究旨在探討血清EPCA-2和hK2檢測(cè)在鑒別診斷前列腺癌中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年3月至2015年9月在我院治療的前列腺癌患者34例(前列腺癌組)，年齡47～81歲，平均年齡(65.8±4.6)歲；前列腺增生癥組43例，年齡52～78歲，平均年齡(66.2±4.1)歲。所有患者均經(jīng)過穿刺活檢或病理切片診斷。選取同期健康體檢男性58例作為健康對(duì)照組，年齡45～80歲，平均年齡(64.5±4.9)歲。3組一般資料具有均衡性。

1.2 入選與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 入選標(biāo)準(zhǔn)：①前列腺增生和前列腺癌均符合《中國(guó)泌尿外科疾病診斷治療指南》[8]和“中國(guó)前列腺癌早期診斷專家共識(shí)”[9]的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者住院治療前未進(jìn)行藥物或其他治療；③患者神志清楚，能夠配合診療，依從性好；④患者和(或)家屬知情同意，并簽署知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者有其他部位腫瘤；②前列腺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移；③患者有前列腺炎或其他泌尿系統(tǒng)感染；④患者有精神疾患或意識(shí)模糊，不能配合診療；⑤患者和(或)家屬對(duì)試驗(yàn)有排斥心理，依從性差者。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集:取空腹靜脈血3 ml，采血前1周內(nèi)未行導(dǎo)尿、前列腺按摩、膀胱鏡檢查，分離血清，如果無法立即檢測(cè)可以保存于-20℃冰箱中。

1.3.2 試劑與儀器:血清PSA檢測(cè)采用羅氏公司Cobas e601電化學(xué)發(fā)光分析儀及配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，PSA>4 μg/L為陽性臨界值；血清EPCA-2檢測(cè)采用ELISA法，試劑為美國(guó)RB公司生產(chǎn)，結(jié)果>30 ng/ml為陽性臨界值；血清hk2檢測(cè)采用ELISA法，試劑購自英國(guó)Abcam公司；ELISA法采用美國(guó)伯樂公司550型酶標(biāo)儀。

2 結(jié)果

2.1 3組血清PSA、EPCA-2、hK2水平比較 前列腺癌組PSA、EPCA-2、hK2水平明顯高于健康對(duì)照組和前列腺增生組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q值分別為10.24、8.18、7.87、9.15、7.23、6.41，P<0.01)；前列腺增生癥組PSA、EPCA-2水平明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q值分別為3.61、3.04，P<0.05)，但hK2水平2組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=2.75，P>0.05)。見表1。

組別PSA(μg/L)EPCA-2(ng/ml)hK2(ng/ml)前列腺癌組(n=34) 72.33±69.8460.91±28.150.28±0.18前列腺增生癥組(n=43)4.36±1.7214.56±8.230.08±0.06健康對(duì)照組(n=58) 2.17±1.4110.62±2.110.05±0.06F值24.3220.2716.33P值<0.01<0.01<0.01

2.2 3組PSA、EPCA-2、hK2水平相關(guān)性分析PSA水平與EPCA-2、hK2水平呈正相關(guān)(r值分別為0.869、0.792，P<0.01)，EPCA-2、hK2水平呈正相關(guān)(r=0.780，P<0.01)。見圖1～3。

2.3 前列腺癌患者檢測(cè)血清PSA、EPCA-2、hK2水平的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值 以PSA>5ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性偏低達(dá)60.4%，敏感性高達(dá)91.18%，陽性預(yù)測(cè)值43.66%，陰性預(yù)測(cè)值95.31%。以EPCA-2>30ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性達(dá)96.04%，敏感性達(dá)94.12%，陽性預(yù)測(cè)值88.89%，陰性預(yù)測(cè)值97.98%。以hK2>0.17ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性達(dá)87.13%，敏感性達(dá)88.24%，陽性預(yù)測(cè)值69.77%，陰性預(yù)測(cè)值95.65%。PSA、EPCA-2、hK2曲線下面積分別為0.758、0.951、0.877，3項(xiàng)觀察指標(biāo)依次預(yù)測(cè)前列腺的診斷價(jià)值依次為EPCA-2>hK2>PSA。見圖4，表2、3。

圖1 3組PSA與EPCA-2相關(guān)性分析

圖2 3組PSA與hK2相關(guān)性分析

圖3 3組EPCA-2與hK2相關(guān)性分析

表2 前列腺癌患者血清PSA、EPCA-2、hK2的指標(biāo)分析 %(例)

表3 檢測(cè)指標(biāo)曲線下面積

3 討論

前列腺癌目前進(jìn)行篩查或診斷的方法主要有PSA檢查、前列腺癌早期診斷標(biāo)志物、直腸指檢、影像學(xué)檢查(超聲、MRI、CT等)和前列腺穿刺活檢[9]。目前對(duì)PSA檢查對(duì)患者獲益與傷害(過度診斷、治療)、篩查人群、年齡、頻率等存在爭(zhēng)議，認(rèn)為PSA具有前列腺組織特異性，但不是前列腺癌特異性[10]。影像學(xué)檢查雖然有一定診斷價(jià)值，但受影響因素較多，且費(fèi)用較高，而穿刺活檢是有創(chuàng)檢查，需要麻醉操作費(fèi)時(shí)，因此對(duì)具有診斷特異性的指標(biāo)進(jìn)行探討，具有臨床意義。

PSA在前列腺癌診斷、分期、檢測(cè)前列腺癌患者的所有生物標(biāo)志物之中是最成熟的，是一般人群中診斷前列腺癌最廣泛的生物標(biāo)志物，同時(shí)也是臨床用于篩選前列腺癌最重要的參考指標(biāo)，目前已在臨床得到廣泛應(yīng)用[11,12]。PSA很少進(jìn)入血液，當(dāng)癌組織結(jié)構(gòu)破壞時(shí)，PSA被激活進(jìn)入血液循環(huán)，其血液中水平升高也可能與癌組織增加和新生血管形成有關(guān)。盡管PSA已是前列腺癌診斷的主要標(biāo)準(zhǔn)，但是其腫瘤特異性差[13]。因?yàn)镻SA僅具有前列腺組織特異性，前列腺炎、增生、按摩、穿刺、泌尿系感染均可引起PSA增高，當(dāng)血清PSA值處于診斷灰區(qū)4～10μg/L時(shí)，用PSA區(qū)分值區(qū)分前列腺增生和前列腺癌是不可靠的。本研究資料顯示，前列腺癌組血清PSA濃度為(72.33±69.84)μg/L，明顯高于前列腺增生癥組(4.36±1.72)μg/L和健康對(duì)照組(2.17±1.41)μg/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；若以PSA>5ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性偏低達(dá)60.4%，敏感性高達(dá)91.18%，陽性預(yù)測(cè)值43.66%，陰性預(yù)測(cè)值95.31%。

EPCA-2是近幾年發(fā)現(xiàn)的一種在前列腺癌中表達(dá)而在正常前列腺不表達(dá)的核基質(zhì)蛋白，研究人員通過免疫抗體測(cè)定患者血液中的EPCA-2水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)97%的未患前列腺癌的患者EPCA-2結(jié)果為陰性，前列腺良性疾病患者EPCA-2小于臨界值，94%的前列腺癌可以通過EPCA-2篩查出來，以上結(jié)果提示EPCA-2可以為前列腺癌篩查的腫瘤標(biāo)志物[14]。Wang等[15]對(duì)116例前列腺癌，342例前列腺增生癥，174例健康患者檢測(cè)PSA和EPCA-2水平，發(fā)現(xiàn)EPCA-2對(duì)前列腺癌檢測(cè)具有81.9%的敏感性和87.6%的特異性，較PSA檢測(cè)更具有臨床意義。韓旭等[16]對(duì)前列腺癌和前列腺增生癥患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，EPCA-2對(duì)前列腺癌的診斷能力明顯高于游離PSA(FPSA)、總PSA(TPSA)和PSA，且提出聯(lián)合檢測(cè)有利于提高患者的診斷率。本研究結(jié)果顯示，前列腺癌患者血清EPCA-2水平為(60.91±28.15)ng/ml，明顯高于前列腺增生癥組組的(14.56±8.23)ng/ml和正常對(duì)照組的(10.62±2.11)ng/ml，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。這提示EPCA-2與前列腺癌發(fā)生密切相關(guān)，EPCA-2測(cè)定有利于前列腺癌的診斷與鑒別診斷。若以EPCA-2>30ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性達(dá)96.04%，敏感性達(dá)94.12%，陽性預(yù)測(cè)值88.89%，陰性預(yù)測(cè)值97.98%。PSA、EPCA-2、hK2曲線下面積分別為0.758、0.951、0.877，3項(xiàng)觀察指標(biāo)依次預(yù)測(cè)前列腺的診斷價(jià)值依次為EPCA-2>hK2>PSA。說明EPCA-2具有較好的診斷價(jià)值。此外，Leman等[17]研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)前列腺癌患者EPCA-2水平在鑒別正常男性前列腺、前列腺增生和前列腺癌的敏感性為91%，特異性為94%，曲線下面積為0.982，這與本研究結(jié)果相近。潘穎[18]研究發(fā)現(xiàn)，EPCA臨界水平為9.94ng/ml，對(duì)前列腺癌的敏感度為90%，特異度為97.5%，且EPCA水平與臨床分期無相關(guān)性。因此EPCA-2可以有效提高前列腺癌的檢出率，有助于疾病的鑒別，減少患者不必要的穿刺活檢。

人類激肽釋放酶是絲氨酸蛋白酶家族中的一組亞群，hK2只是其中之一，是一種由前列腺產(chǎn)生的、具有前列腺特異性的腺體激肽釋放酶[19]。hK2的氨基酸序列與PSA大約有80%的同源性，其分子由287個(gè)氨基酸組成。hK2在分化不良的前列腺癌組織高表達(dá)，因此hK2可用于鑒別前列腺癌與前列腺增生[20]。Bachour等[21]對(duì)前列腺增生癥和前列腺癌患者進(jìn)行血清hK2、PSA、游離PSA(FPSA)及相互比率進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)hK2/FPSA比值最大曲線下面積明顯高于其他檢測(cè)指標(biāo)，說明hK2可以提高前列腺癌的早期檢出率。AlapontAlacreu等[22]認(rèn)為PSA是篩查前列腺癌的標(biāo)志物，但其單獨(dú)應(yīng)用時(shí)，并不具有足夠的敏感性和特異性，而Hk2是一種新的前列腺癌的標(biāo)志物，有利于前列腺癌的早期檢測(cè)。本研究結(jié)果顯示，前列腺癌患者血清hK2水平為(0.28±0.18)ng/ml，明顯高于BPH組的(0.08±0.06)ng/ml和正常對(duì)照組的(0.05±0.06)ng/ml，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。這提示hK2檢測(cè)能夠明顯提高前列腺癌陽性率。若以hK2>0.17ng/ml為前列腺癌的判定標(biāo)準(zhǔn)，其預(yù)測(cè)前列腺癌的特異性達(dá)87.13 %，敏感性達(dá)88.24%，陽性預(yù)測(cè)值69.77%，陰性預(yù)測(cè)值95.65%。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，PSA水平與EPCA-2、hK2水平呈正相關(guān)(r值分別為0.869、0.792，P<0.01)，EPCA-2、hK2水平呈正相關(guān)(r=0.780，P<0.01)。潘穎[18]研究表明，PSA水平與前列腺癌患者臨床分期、Gleason評(píng)分呈正相關(guān)(r值分別為0.475、0.589，P<0.05)，而EPCA水平與臨床分期無相關(guān)性。畢學(xué)成[23]研究發(fā)現(xiàn)，前列腺癌患者前列腺組織中hK2水平進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，hK2基因表達(dá)水平與Gleason評(píng)分成正相關(guān)(r=0.977，P<0.05)。EPCA-2、hK2應(yīng)用可以提高前列腺癌患者的檢出率，有可能對(duì)患者臨床分期有一定的指導(dǎo)作用。本研究未對(duì)不同臨床分期患者PSA、EPCA-2、hK2水平進(jìn)行分析，同時(shí)未對(duì)三者聯(lián)合檢測(cè)的敏感度和特異度進(jìn)行探討，是本研究的不足之處，后續(xù)試驗(yàn)會(huì)進(jìn)行探討。

綜上所述，對(duì)于前列腺癌患者選用血清EPCA-2、hK2檢測(cè)，可以進(jìn)一步提高診斷的準(zhǔn)確性，避免誤診及漏診，為臨床診療方案提供有力的參考依據(jù)。

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The clinical significance of early prostate cancer antigen 2 and human glandular kallikrein 2 in diagnosis of prostate cancer

ZHANGLihua*,ZHANGTiezheng*,WANGXiao,etal.

DepartmentofClinicalLaboratory,TCMHospitalofHengshuiCity,Hebei,Hengshui053000,China

Objective To investigate the clinical significance of early prostate cancer antigen 2 (EPCA-2) and human glandular kallikrein-2 (hK2) in diagnosis of prostate cancer.Methods Fifty-eight healthy subjects (control group),43 patients with prostate hyperplasia (prostate hyperplasia group) and 34 patients with prostate cancer (prostate cancer group) were enrolled in the study.The serum levels of prostate specific antigen (PSA) were detected by electrochemiluminescence method,and the serum levels of EPSA and hK2 were detected by ELISA.Moreover the differences and correlation among EPSA,PCA-2,hK2 were observed,besides,the predictive sensitivity, specificity,positive predictive value and negative predictive value were investigated.Results The serum levels of PSA,EPCA-2,hK2 in prostate cancer group were significantly higher than those in control group and those in prostate hyperplasia group (P<0.01).TheserumlevelsofPSA,EPCA-2inprostatehyperplasiagroupweresignificantlyhigherthanthoseincontrolgroup(P<0.05),however,therewerenosignificantdifferencesintheserumlevelsofhK2betweentwogroups(P>0.05).ThelevelsofPSAwerepositivelycorrelatedtothoseofEPCA-2,hK2 (r=0.869,0.792,respectively,P<0.01).MoreoverthelevelsofEPCA-2werepositivelycorrelatedtothoseofhK2 (r=0.780,P<0.01).TakingPSA>5ng/mlasdiagnosticcriteriaofprostatecancer,itsspecificitytopredictprostatecancerwas60.4%,andpredictivesensitivitywas91.18%,positivepredictivevaluewas43.66%andnegativepredictivevaluewas95.31%.TakingEPCA-2>30ng/mlasdiagnosticcriteria,itsspecificitytopredictprostatecancerwas96.04%,andpredictivesensitivitywas94.12%,positivepredictivevaluewas88.98%andnegativepredictivevaluewas97.90%.TakinghK2>0.17ng/mlasdiagnosticcriteria,itsspecificitytopredictprostatecancerwas87.13%,andpredictivesensitivitywas88.24%,positivepredictivevaluewas69.77%andnegativepredictivevaluewas95.65%.TheareaundercurveofPSA,EPCA-2,hK2was0.758, 0.951, 0.877,respectively,andthediagnosticvaluetopredictprostatecancerwasEPCA-2>hK2>PSA.Conclusion The detection of serum levels of EPCA-2,hK2 in patients with prostate cancer can further improve the accuracy of diagnosis,avoid misdiagnosis and missed diagnosis,which provides a powerful reference basis for clinical diagnosis and treatment.

prostatic cancer;early prostate cancer antigen-2;human glandular kallikrein 2

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.05.012 ·論著·

053000 河北省衡水市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科

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1002-7386(2017)05-0686-05

2016-09-24)