王 昱，陳 俊，陳 楓，王新武，竇樹龍

（1.重慶出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心，國家質(zhì)檢總局牛病檢測重點實驗室，重慶進(jìn)境陸生動物疫病防控研究工程技術(shù)中心，重慶 400020；2.寧波出入境檢驗檢疫局，浙江寧波 315000；3. 樂山市農(nóng)業(yè)質(zhì)量檢驗檢測中心，四川樂山 614000；4.湖南出入境檢驗檢疫局，湖南長沙 410000；5.國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局，北京 100020）

新西蘭牛結(jié)核病區(qū)域化防控與啟示

王 昱1，陳 俊2，陳 楓3，王新武4，竇樹龍5

（1.重慶出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心，國家質(zhì)檢總局牛病檢測重點實驗室，重慶進(jìn)境陸生動物疫病防控研究工程技術(shù)中心，重慶 400020；2.寧波出入境檢驗檢疫局，浙江寧波 315000；3. 樂山市農(nóng)業(yè)質(zhì)量檢驗檢測中心，四川樂山 614000；4.湖南出入境檢驗檢疫局，湖南長沙 410000；5.國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局，北京 100020）

近年來，新西蘭牛結(jié)核病防控取得了關(guān)鍵性進(jìn)展，全國牛群期間感染率連續(xù)三年維持在0.2%左右，提前18個月實現(xiàn)了防控目標(biāo)。通過資料分析以及走訪調(diào)查，新西蘭牛結(jié)核防控的成效，得益于政府的持續(xù)投入、第三方機(jī)構(gòu)的科學(xué)落實以及養(yǎng)殖行業(yè)的全民參與，其監(jiān)測計劃、區(qū)域化管控措施和野生宿主清除措施對我國的牛結(jié)核防控具有較高的借鑒價值。

牛結(jié)核；防控；區(qū)域化管理；產(chǎn)地檢疫

新西蘭的牛結(jié)核?。═B）歷史可以追溯到19世紀(jì)中葉，到上世紀(jì)80年代 ，北島、塔拉納基和中坎特伯雷的牛群基本實現(xiàn)了牛結(jié)核的根除。但由于澳大利亞短尾負(fù)鼠種群的不斷擴(kuò)大和跨地域遷徙，使得牛結(jié)核病的流行出現(xiàn)新的特點。1994年，新西蘭1 700余頭牛和鹿感染結(jié)核病[1]，達(dá)歷史新高。為此，新西蘭政府根據(jù)流行狀況實施了極具特色的牛結(jié)核病根除計劃，到2011年12月，新西蘭感染牛群的期間感染率低于0.2%，提前18個月實現(xiàn)了控制目標(biāo)。但由于出現(xiàn)了新的受感染牛群，2012—2013年感染率上升至 0.21%。據(jù)最新數(shù)統(tǒng)計，2015—2016年新西蘭牛群感染率為0.09%，若在2017年保持感染率低于0.2%，就能達(dá)到世界動物衛(wèi)生組織（OIE）的牛結(jié)核病官方無疫要求[2]。為此，筆者收集并整理了近年來新西蘭牛結(jié)核病監(jiān)測和防控方面的信息，并結(jié)合進(jìn)口種牛規(guī)定疫病的檢出情況，分析該病的發(fā)展規(guī)律，辨別產(chǎn)地預(yù)檢的側(cè)重點及關(guān)注點，進(jìn)一步指導(dǎo)工作開展。

1 新西蘭牛結(jié)核病的區(qū)域化防控

1.1 實施機(jī)構(gòu)

牛結(jié)核病是由牛結(jié)核分枝桿菌引起的重要人獸共患傳染病，在某些種群中病死率高達(dá)40%～60%。19世紀(jì)中期，殖民者船艙中的負(fù)鼠可能是最早的牛結(jié)核病攜帶者。從上世紀(jì)70年代開始，新西蘭就啟動了全國性的牛結(jié)核病防控計劃。1998年，新西蘭發(fā)布了牛結(jié)核病害蟲管理戰(zhàn)略生物安全命令，規(guī)定牛結(jié)核病是新西蘭須通報的動物疫病。目前，該病被列入國家有害生物防控計劃（NPMS）[3]。起初，該計劃由農(nóng)業(yè)部（即現(xiàn)在的初級產(chǎn)業(yè)部）牽頭落實。2013年7月，新西蘭政府初級產(chǎn)業(yè)部（AHB）重組，建立了第三方性質(zhì)的牛結(jié)核病防控組織——TBfree，其成為牛結(jié)核病防控和根除的實施機(jī)構(gòu)。該機(jī)構(gòu)從屬于非盈利性組織OSPRI New Zealand Ltd，除政府提供的部分資金外，還得到了DairyNZ、Beef+Lamb New Zealand和Deer Industry New Zealand等產(chǎn)業(yè)組織和企業(yè)的支持。TBfree主要致力于實施NPMS，并以根除牛結(jié)核病為最終目的。TBfree的目標(biāo)有以下幾點：一是到2026年，實現(xiàn)家養(yǎng)牛和鹿的牛結(jié)核病根除；二是到2040年，實現(xiàn)牛結(jié)核病在負(fù)鼠中的根除；三是到2055年，實現(xiàn)牛結(jié)核病的生物學(xué)根除[4]。

TBfree的主要職能包括：一是控制易感動物，包括牛場注冊、結(jié)核病染疫狀態(tài)分級、牛和鹿的結(jié)核病檢測、屠宰染疫動物以及監(jiān)督農(nóng)場主執(zhí)行等；二是控制傳播途徑，防止該病由染疫動物向無疫區(qū)傳播，控制該病從染疫農(nóng)場或高風(fēng)險地區(qū)向外移動，監(jiān)測和強(qiáng)制執(zhí)行添加標(biāo)識、檢測及動物狀態(tài)聲明；三是控制野生動物，調(diào)查野生動物（負(fù)鼠，野豬和雪貂）種群，確定結(jié)核病的野生分布情況[4]。新西蘭計劃在未來15年內(nèi)，實現(xiàn)至少25 000 000公頃范圍內(nèi)野生動物媒介風(fēng)險區(qū)的減少，同時維持現(xiàn)有的無媒介風(fēng)險區(qū)的無疫狀況，把牛結(jié)核病疫情控制在較低水平。隨著在牛結(jié)核病防控經(jīng)費的持續(xù)增加，該病在牛群和鹿群的感染率穩(wěn)步降低，到目前已經(jīng)成功控制群體感染率在0.2%以內(nèi)（圖1）。

圖1 1977—2014年感染牛結(jié)核病的家養(yǎng)牛群和鹿群數(shù)量及控制野生動物傳播媒介的經(jīng)費支出

1.2 區(qū)域化分類管理

根據(jù)新西蘭NPMS全國操作指導(dǎo)書的要求[3]，基于不同牛結(jié)核病感染風(fēng)險狀況，可將動物個體劃分為：密切接觸動物、反應(yīng)動物、陽性動物、陰性動物和感染動物。其中，反應(yīng)動物是指檢測結(jié)果陽性需要立即屠宰的動物；陽性動物是指篩查檢測為陽性且需要進(jìn)一步確診或屠宰的動物；符合下述情況之一的為牛結(jié)核病感染動物：一是屠宰后發(fā)現(xiàn)有特征性病理變化的，二是樣本培養(yǎng)或PCR陽性，三是至少兩種認(rèn)可檢測方法陽性，四是檢測陽性后沒有在認(rèn)可的獸醫(yī)檢查的情況下屠宰或死亡的。

根據(jù)牛結(jié)核病風(fēng)險水平的不同，可將畜群劃分為：感染群、無疫群和處于暫停狀態(tài)的感染狀況不明群（S）。在出口檢疫過程中常見到C1、C2、C10和CM的農(nóng)場：C1代表1年內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)監(jiān)測無疫；C2代表18個月內(nèi)（或C1后1年內(nèi)）連續(xù)監(jiān)測無疫；C10是指10年連續(xù)監(jiān)測無疫，C后面的數(shù)字代表無疫的年份長短；CM表示非種用牛群（成年種牛少于25%）的無疫狀態(tài)，圈養(yǎng)控制下的無牛結(jié)核病鹿群也可以用CM表示。對于新建的牛群在疫情狀況不明前，默認(rèn)暫停（S）狀態(tài)。如果新建牛群有來自感染區(qū)的牛，狀態(tài)將調(diào)整為感染。

根據(jù)新西蘭最新發(fā)布的消息，所有的肉用牛群將由C2狀態(tài)更改為CM狀態(tài)。所有進(jìn)入屠宰場的CM牛將接受牛結(jié)核病屠宰檢測，新注冊的肉用和種用牛都將賦予感染狀況不明（S）狀態(tài)。新注冊牛群需要在12個月內(nèi)完成牛結(jié)核病檢測，一旦檢測證明無疫，將更改為C2狀態(tài)。對于無疫牛群，一旦發(fā)現(xiàn)牛結(jié)核病可疑牛，或者有來自感染群、來源不明或來自農(nóng)場監(jiān)測工作有問題的牛，其狀態(tài)將改為感染狀況不明群（S）。

基于監(jiān)測結(jié)果，TBfree將不同牛結(jié)核病風(fēng)險程度的地理區(qū)域劃分為：移運控制區(qū)、特別檢測區(qū)和常規(guī)監(jiān)測區(qū)。移運控制區(qū)主要指牛群感染率不低于1%的區(qū)域，通常以64 km2為一個單元。如果移運控制區(qū)在之后12個月內(nèi)感染率下降到1%以下，將考慮取消移運控制。特殊檢測區(qū)是指同感染區(qū)或者是有感染牛結(jié)核病的野生動物媒介的區(qū)域毗鄰，其牛群感染率沒達(dá)到移運控制區(qū)的水平，年均發(fā)病率在0.2%～1%之間。常規(guī)監(jiān)測區(qū)一般位于無野生動物媒介區(qū)，年均牛結(jié)核病流行率不超過0.2%。除移運控制區(qū)在移運前60天需要進(jìn)行牛結(jié)核病檢測外，其他區(qū)域不需要移運前檢測。新西蘭牛結(jié)核病風(fēng)險區(qū)域劃分見圖2[5]。

圖2 新西蘭牛結(jié)核病風(fēng)險區(qū)域劃分

1.3 野生動物媒介的區(qū)域化控制

在新西蘭，負(fù)鼠、雪貂和野豬是牛結(jié)核桿菌的野生宿主和傳播媒介。一旦從這些野生動物檢出牛結(jié)核病，這些動物的活動區(qū)域就將被認(rèn)定為牛結(jié)核病媒介風(fēng)險區(qū)（VRA），VRA內(nèi)70%的牛結(jié)核病新疫情均與負(fù)鼠和雪貂的病原傳播有關(guān)。對于野生動物的監(jiān)測，主要包括按計劃主動采樣監(jiān)測和發(fā)現(xiàn)可疑動物后進(jìn)行剖檢和實驗室檢測。新西蘭40%的領(lǐng)土為VRA，其余的60%為無媒介風(fēng)險區(qū)（VFAs）（圖3）[6]。通過減少VRAs來實現(xiàn)牛結(jié)核病的根除是TBfree的另一項重要工作。預(yù)計到2026年，25%的VRAs將被消除。

圖3 新西蘭牛結(jié)核病野生動物傳播載體的風(fēng)險區(qū)域劃分

2 牛結(jié)核的監(jiān)測與檢測

2.1 不同群體的分級監(jiān)測

新西蘭的牛結(jié)核病監(jiān)測非常全面，對象覆蓋家養(yǎng)牛、家養(yǎng)鹿、圍獵鹿群等，內(nèi)容包括常規(guī)屠宰后尸檢、陽性動物屠宰后尸檢、特定野生動物監(jiān)測以及全民（包括注冊獸醫(yī)、診斷實驗室、農(nóng)場、獵人和其他公民）疫情報告等[2]。2010—2016年監(jiān)測情況見表1。感染狀態(tài)農(nóng)場的全部牛群每年至少進(jìn)行2次檢測，發(fā)現(xiàn)陽性個體后進(jìn)行屠宰后尸檢或采血做確診試驗。移運控制區(qū)、特別檢測區(qū)或常規(guī)監(jiān)測區(qū)的C1狀況牛群2次檢測間隔不超過12個月；移運控制區(qū)C2或CM狀況的牛群每年進(jìn)行1次檢測；特別檢測區(qū)的C2或CM狀況的牛群每年（12月齡以上牛）或每2年（24月齡以上牛）檢測1次；常規(guī)檢測區(qū)的C2（及更高）或CM狀況的牛群每3年檢測1次；S狀況的牛群的監(jiān)測頻率根據(jù)實際情況制定，在牛結(jié)核病感染狀況不明前，動物嚴(yán)禁移運（表2）。

表1 2010—2016年新西蘭牛結(jié)核病監(jiān)測情況

表2 不同牛結(jié)核病風(fēng)險水平的動物亞群及農(nóng)場監(jiān)測要求

當(dāng)發(fā)現(xiàn)陽性動物后，工作人員會立即加上指示牛結(jié)核病陽性的黃色標(biāo)簽，并通知牛群所有人，等待主管部門的處理意見和血液測試的結(jié)果。陽性動物在獲得移運許可前，不能離開當(dāng)前飼養(yǎng)農(nóng)場，也不能送去屠宰場，在血液檢測結(jié)果證明無病或屠宰前，均不能擅自將黃色標(biāo)簽去掉，否則將追究法律責(zé)任。對于需要直接屠宰的陽性牛，政府將按照當(dāng)前的補貼政策進(jìn)行經(jīng)濟(jì)補償。移運30日齡以上的牛和鹿必須填寫并簽署動物狀態(tài)申明（30日齡內(nèi)的乳畜除外）[3]。根據(jù)官方提供的數(shù)據(jù)，2010—2016年，牛群的群體感染率已經(jīng)控制在0.2%以內(nèi)（表3）[2]。

表3 2010—2016年新西蘭牛結(jié)核病群體感染率（牛群和鹿群）

2.2 監(jiān)測方法

官方認(rèn)可的牛群結(jié)核病初篩檢測為皮膚PPD測試包括尾根褶皺測試（CFT）和比較性頸部測試（CCT）。用于對PPD陽性進(jìn)行進(jìn)一步確認(rèn)的系列輔助測試包括標(biāo)準(zhǔn)Bovigam γ-IFN檢測和特定抗原Bovigam（ESAT-6/CFP10）γ-IFN檢測；用于對PPD試驗進(jìn)行平行補充測試的輔助測試主要指平行Bovigam γ-IFN測試（禽型結(jié)核菌素和牛型結(jié)核菌素）。而對于鹿群，初篩方法為結(jié)核菌素頸部注射測試和頸部多點注射測試，系列輔助測試包括：IgG1 ELISA（ETB）和改進(jìn)型ETB測試。CFT注射的標(biāo)準(zhǔn)做法是：用專用PPD注射器將0.1 mL的PPD注射到牛尾根褶皺皮內(nèi)，注射后30秒內(nèi)含PPD的小泡可見不消失，注射后（72±6）小時后觀察結(jié)果，任何可觸診或可見的皮膚反應(yīng)視為陽性。皮膚PPD測試的缺陷是在上一次注射60天內(nèi)不能進(jìn)行第2次皮膚PPD試驗，PPD陽性動物、進(jìn)行系列輔助檢測或直接標(biāo)識為反應(yīng)動物需要在地區(qū)疫病主管的監(jiān)督下屠宰[3]。對新西蘭紅鹿的研究表明，CFT的特異性只有45.9%，而血液γ-IFN抗體測試的特異性達(dá)到98%[7]，CFT也被證明可能不足以發(fā)現(xiàn)所有的牛結(jié)核病陽性動物。為此，新西蘭采用系列輔助測試用以排除假陽性，采用平行試驗用以排除假陰性。值得注意的是，Bovigam測試結(jié)果為陽性的牛不一定存在病理變化。此外，分離株的分析和基于基因組測序（WGS）的病原溯源也在牛結(jié)核病的防控中開始被采用[2]。

3 產(chǎn)地檢疫情況

新西蘭是我國進(jìn)口種牛的主要來源地之一。根據(jù)雙邊議要求，出口到中國的活動物必須在出口前完成不少于30天的農(nóng)場檢疫和不少于30天的隔離檢疫。產(chǎn)地檢疫工作主要包括召開檢疫前會談、制定檢疫計劃、進(jìn)行牛結(jié)核菌素PPD試驗、采集農(nóng)場和隔離場的動物血液、收集農(nóng)場資質(zhì)證明、對牛地方流行性白血病進(jìn)行臨床檢查、疫苗免疫、規(guī)定項目的實驗室檢測、體內(nèi)外寄生蟲藥物治療或預(yù)防、制作檢疫證書以及動物裝運前臨床檢查。出口動物在農(nóng)場檢疫和隔離檢疫階段，需要分別采血并進(jìn)行實驗室檢測，檢測項目根據(jù)不同動物種類而有所不同。牛結(jié)核病是產(chǎn)地預(yù)檢的重點疫病之一，除現(xiàn)場進(jìn)行PPD皮下接種試驗外，還需對皮試陽性動物單獨采血，并進(jìn)行實驗室IFN-γ 測試（BOVIGAM test），目前該實驗主要由AgResearch集團(tuán)下屬Hopkirk Research Institue實驗室完成。據(jù)不完全統(tǒng)計，2013—2015年共檢出牛結(jié)核病15批次，全部在農(nóng)場檢疫環(huán)節(jié)檢出，共計113頭（參考進(jìn)境動物檢疫管理信息系統(tǒng)），且均為結(jié)核菌素CFT陽性，后經(jīng)Bovigam干擾素測試驗證全部均為陰性（表4）。

表4 近3年內(nèi)新西蘭出口種牛結(jié)核病檢出情況

4 對策和建議

我國針對該病主要采取“檢疫、監(jiān)測、撲殺”的防控手段[8]，經(jīng)過多年努力，我國牛結(jié)核病陽性率呈逐年下降趨勢。杜艷芬等[9]研究發(fā)現(xiàn)，目前我國牛結(jié)核病感染率大約為1.3%，但由于該研究采用的方法是分離培養(yǎng)法，若采用PPD變態(tài)，反應(yīng)測試感染率應(yīng)在2%以上。以新疆的調(diào)查結(jié)果為例，1956—1989 年累計檢疫牛1 550 054頭，檢出陽性33 007頭，陽性率為2.13%[10]。相對于新西蘭牛結(jié)核病的成功防控經(jīng)驗而言，我國有諸多問題尚未解決：一是沒有全國性的牛結(jié)核病監(jiān)測計劃和根除計劃；二是市面上無國產(chǎn)化的牛結(jié)核γ-干擾素檢測試劑盒；三是不確定是否存在類似負(fù)鼠的中間宿主或傳播媒介，野生動物感染和傳播該病的情況不明。為此，建議從以下幾個方面采取措施：一是適時提出我國的牛結(jié)核病根除計劃和措施，實現(xiàn)有“綱”可循；二是研發(fā)有自主知識產(chǎn)權(quán)的適合于牛結(jié)核病初篩、確診的血清學(xué)和（或）分子生物學(xué)檢測試劑盒，考慮改進(jìn)現(xiàn)有技術(shù)或多方法聯(lián)用，克服皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的假陰性和假陽性的技術(shù)難題；三是加強(qiáng)野生動物牛結(jié)核病的監(jiān)測和研究，探明牛結(jié)核病在我國的分布和傳播規(guī)律，嚴(yán)格控制野生動物的屠宰和交易，防范野生動物結(jié)核感染家養(yǎng)動物；四是加強(qiáng)屠宰檢疫和主動監(jiān)測，結(jié)合家養(yǎng)動物的監(jiān)測結(jié)果建立風(fēng)險等級不同的動物亞群和分區(qū)，加強(qiáng)動物的移運控制；五是加強(qiáng)進(jìn)口動物的檢疫，嚴(yán)格防范外來牛結(jié)核病的引入；六是建立1～2個全國性的牛結(jié)核病參考實驗室，統(tǒng)領(lǐng)全國的監(jiān)測工作以及標(biāo)準(zhǔn)化試劑研究工作；七是加強(qiáng)經(jīng)費投入，落實責(zé)任主體。

[1] TBfree New Zealand Ltd. A brief history of bovine TB[EB/ OL]. （2014-3-1）[2016-12-20]. http://www.tbfree.org.nz/whatis-bovine-tuberculosis-2-3.aspx.

[2] Ministry for Primary Industries. Surveillance. Volume 43-37（2016—2010）[EB/OL]. （2016-11-1）[2016-12-20]. http:// www.sciquest.org.nz/surveillance.

[3] TBfree New Zealand Ltd. National Bovine Tuberculosis Pest Management Plan：National Operational Plan. Part B：Operational Policies. November 2013[EB/OL]. （2016-12-1）[2016-12-20]. http://www.tbfree.org.nz/.

[4] TBfree New Zealand Ltd. Strategy overview[EB/OL].（2014-3-1）[2016-12-20].http://www.tbfree.org.nz/.

[5] TBfree New Zealand Ltd. Disease control areas[EB/OL].（2014-3-1）[2016-12-20]. http://www.tbfree.org.nz/dcamap.

[6] TBfree New Zealand Ltd. Pest management detail[EB/OL].（2014-3-1）[2016-12-20]. http://www.tbfree.org.nz/where-pestcontrol-is-needed.aspx.

[7] GRIFFIN J F，CROSS J P，CHINN D N，et al. Diagnosis of tuberculosis due to Mycobacterium bovis in New Zealand red deer（Cervus elaphus）using a composite blood test and antibody assays[J]. N Z Vet J，1994，42（5）：173-179.

[8] 甘海霞. 廣西奶牛結(jié)核病的監(jiān)測與防制[D]. 南寧：廣西大學(xué)，2008.

[9] 杜艷芬. 牛結(jié)核病病原學(xué)調(diào)查及分子流行病學(xué)研究[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2009.

[10] 李舵. 新疆部分地區(qū)牛結(jié)核病監(jiān)測與防治策略研究[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2005.

（責(zé)任編輯：杜憲）

Regional Prevention and Control of Bovine Tuberculosis in New Zealand

Wang Yu1，Chen Jun2，Chen Feng3，Wang Xinwu4，Dou Shulong5
（1. Technical Center of Chong-qing entry-exit inspection and Quarantine Bureau， R.P.C，State Key Laboratories for Cattle Disease Testing （Chongqing），Research and Engineering Center for the Control of Imported Terrestrial Animal Diease of Chong qing，Chongqing 400020；2. Ningbo Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Ningbo，Zhejiang 315000；3. Leshan Agricultural Products Quality Inspection and Testing Center，Leshan，Sichuan 614000；4. Hunan Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Changsha，Hunan 410000；5. General Administration of Quality Supervision，Inspection and Quarantine of China，Beijing 100020）

In recent years，signi fi cant progress has been made in the prevention and control of Bovine Tuberculosis（TB）in New Zealand，where the herd prevalence rate was maintained at a low level of about 0.2% for three successive years. Targets of TB control were achieved 18 months ahead of schedule. On the basis of data analysis，interviews and investigations，the achievement was bene fi ted from sustained government investment，scienti fi c implementation of the independent third-party organization，as well as participation of the whole people in breeding industry. For TB prevention and control in China，some measures adopted by New Zealand may provide certain reference，such as its scienti fi c surveillance plan，regional management and effective eradication of wild-type hosts.

TB；prevention and control；regional management；inspection and quarantine at the place of origin

S855.2

A

1005-944X（2017）03-0070-05

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.03.019

質(zhì)檢總局2015年度科技攻關(guān)項目（2015IK331）