李晉萌

哈藥集團(tuán)制藥六廠 150000

羅紅霉素含量測(cè)定技術(shù)分析

李晉萌

哈藥集團(tuán)制藥六廠 150000

羅紅霉素作為抗生素的一種，對(duì)于危害性較強(qiáng)的革蘭陽性菌和厭氧菌等具有非常好的處理效果。在目前的情況下，采用傳統(tǒng)的伏安法和SP法等對(duì)羅紅霉素的含量進(jìn)行測(cè)定的時(shí)候，測(cè)定結(jié)果往往缺乏準(zhǔn)確性，致使羅紅霉素的含量測(cè)定很難滿足實(shí)際的測(cè)定需要。在這樣的背景下，荷移光譜法日益被應(yīng)用，通過對(duì)富電子和缺電子等相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行有效利用的基礎(chǔ)上，來實(shí)現(xiàn)電荷轉(zhuǎn)移，促進(jìn)絡(luò)合物的不斷形成，這樣能夠在一定條件下對(duì)羅紅霉素的含量進(jìn)行準(zhǔn)確的反映。

羅紅霉素；含量測(cè)定；測(cè)定技術(shù)

一、研究簡介

（1）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩ふ伊_紅霉素含量測(cè)定的方法。（2）實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)研究法。選取羅紅霉素樣本進(jìn)行配比研究，以高效液相色譜法和流動(dòng)相對(duì)波長和吸光度進(jìn)行測(cè)定，在實(shí)驗(yàn)研究中進(jìn)行對(duì)比分析之后，得知羅紅霉素的具體含量。（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，羅紅霉素含量的精確度和穩(wěn)定性都處于一個(gè)非常良好的狀態(tài)，在不同的溫度條件、反應(yīng)時(shí)間和試劑、溶劑等情況下，羅紅霉素的含量也存在一定的差異。（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)論：在對(duì)羅紅霉素的含量進(jìn)行測(cè)定的過程中，合理應(yīng)用荷移光譜法和高效化的測(cè)定技術(shù)可以得出具有高度精準(zhǔn)性的羅紅霉素含量。

二、實(shí)驗(yàn)的資料與方法

1.主要試劑和設(shè)備

TCNQ（Sigma公司產(chǎn)品）丙酮溶液：5.0×10-3mol/L；標(biāo)準(zhǔn)羅紅霉素（羅紅霉素對(duì)照品，在中國藥物生物制品檢定所購買）：1.0× 10-4mol/L丙酮溶液；甲醇、無水乙醇、丙酮、氯仿等有機(jī)試劑都是分析純。羅紅霉素片（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批號(hào)為05011251；江蘇亞邦愛普森藥業(yè)有限公司，批號(hào) 0411129）。實(shí)驗(yàn)用水都為二次蒸餾水。UV2401PC型紫外可見分光光度計(jì)（日本島津）；HHS·21Ni型恒溫水?。ū本┚感l(wèi)科學(xué)儀器廠）。

2.實(shí)驗(yàn)方法

選定樣品試劑，并應(yīng)用可以承裝10ml溶液的比色管開展丙酮溶液的承裝，所承裝的丙酮溶液量要求控制在5.0×10-3mol/L。并且在比色管中，加入適量的羅紅霉素，利用丙酮溶液來對(duì)羅紅霉素進(jìn)行稀釋，直到比色管中的混合液達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)刻度，就能夠充分的對(duì)兩種物質(zhì)實(shí)現(xiàn)搖勻處理，在進(jìn)行混合液配制的時(shí)候，需要把溫度控制在30℃，同時(shí)兩種物質(zhì)的反應(yīng)時(shí)間也應(yīng)該控制在20min，將搖勻的溶液放置在低溫的環(huán)境之下，進(jìn)行冷凍，直到混合物的溫度下降至室溫溫度值就可以停止冷凍。最后配制一個(gè)相應(yīng)的空白試劑，利用該試劑和混合試劑開展對(duì)比分析，對(duì)兩個(gè)試劑的吸光度進(jìn)行詳細(xì)的檢測(cè)。

3.樣品的測(cè)定

（1）準(zhǔn)備樣品：選取不同廠家生產(chǎn)的羅紅霉素各10片（標(biāo)示量都是每片150mg），精確稱量之后研磨混勻，隨后準(zhǔn)確稱取總量的十分之一，用丙酮進(jìn)行溶解、過濾，將不溶物扔掉。濾液在100ml容量瓶中定容備用。

（2）測(cè)定樣品：在10ml比色管中取適量上述制備好的樣品試液，根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法在λ max處實(shí)施測(cè)定，同時(shí)按照藥典方法測(cè)定相同藥物制劑含量，同時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)加入法作回收率實(shí)驗(yàn)。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1.羅紅霉素吸收光譜。按照標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)方法來對(duì)溶液進(jìn)行配制，并以相應(yīng)的試劑空白為參照，來對(duì)羅紅霉素吸收光譜進(jìn)行繪制。試驗(yàn)結(jié)果表明，羅紅霉素和TCNQ相互作用后形成的絡(luò)合物存在兩個(gè)吸收峰，分別在波長743nm和844nm部位，在這個(gè)范圍里試劑吸收比較小。

2.反應(yīng)溫度。在10℃-60℃之間保持恒溫狀態(tài)后，在一定時(shí)間里對(duì)荷移絡(luò)合物的吸光度進(jìn)行測(cè)量，進(jìn)一步探討溫度對(duì)荷移反應(yīng)所產(chǎn)生的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，羅紅霉素含量測(cè)定的最佳反應(yīng)溫度是 30℃。

3.試劑用量。在本次試驗(yàn)研究里面，為了明確試劑用量對(duì)反應(yīng)所產(chǎn)生的影響，應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整試劑的用量。實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，在試劑用量不斷增加的前提下，荷移絡(luò)合物的吸光度明顯增大，在通常情況下兩者之間呈正相關(guān)關(guān)系；黨試劑用量達(dá)到一定程度以后，溶液的吸光度將保持不變。

4.反應(yīng)時(shí)間。在這次試驗(yàn)研究過程中，實(shí)驗(yàn)人員把反應(yīng)溫度控制在30℃，在10-50min的反應(yīng)時(shí)間里對(duì)溶液的吸光度開展了準(zhǔn)確的測(cè)定，深入探討反應(yīng)時(shí)間對(duì)絡(luò)合物的具體生成情況所造成的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，羅紅霉素含量測(cè)定的最佳時(shí)間是20min，如果混合物處在室溫條件的情況下，反應(yīng)120min內(nèi)溶液的吸光度趨于穩(wěn)定。

5.溶劑。在對(duì)羅紅霉素含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)，要采用甲醇、無水乙醇、丙酮等作為實(shí)驗(yàn)溶劑，討論不同溶劑對(duì)反應(yīng)所產(chǎn)生的影響有何不同。

6.方法的重現(xiàn)性。移取六份羅紅霉素開展測(cè)定工作，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差是1.0%，表明這種方法的重現(xiàn)性可以。

7.絡(luò)合物組成的測(cè)定。應(yīng)用等摩爾連續(xù)變化法和平衡移動(dòng)法測(cè)得羅紅霉素和TCNQ反應(yīng)生成的荷移絡(luò)合物的組成比都為1∶2。

8.標(biāo)準(zhǔn)曲線：根據(jù)實(shí)驗(yàn)確定的最佳條件配制溶液同時(shí)進(jìn)行反應(yīng)，在各自的最大吸收波長下測(cè)定荷移絡(luò)合物的吸光度，對(duì)測(cè)得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，并繪制工作曲線，得到回歸方程和線性范圍。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論和討論

1.現(xiàn)階段國家在藥物含量測(cè)定方面，通常采用紫外分光光度法的方式，對(duì)成分波長在200-400nm范圍里的藥物進(jìn)行測(cè)定和掃描，在對(duì)羅紅霉素含量進(jìn)行測(cè)定的過程中，主要是對(duì)羅紅霉素波長為212nm部位進(jìn)行波長吸收。相關(guān)研究資料表明，羅紅霉素含量測(cè)定技術(shù)也包括末端吸收波長或測(cè)定中改變檢測(cè)波長的方式，然而實(shí)踐研究表明，這兩種方式的應(yīng)用效果并不樂觀，很難對(duì)羅紅霉素的含量進(jìn)行精準(zhǔn)的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)研究表明，對(duì)羅紅霉素波長在210nm部位進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，試劑吸收的可能性比較大；波長在215-230nm區(qū)間段的時(shí)候，制劑輔料的吸收峰比較明顯，在這種情況下非常容易對(duì)羅紅霉素主峰的測(cè)定形成干擾。

2.荷移反應(yīng)就是指以某些特定物質(zhì)為前提，在發(fā)生荷移反應(yīng)的時(shí)候，促使絡(luò)合物發(fā)生顏色變化，對(duì)波長進(jìn)行有效的吸收，進(jìn)而對(duì)被測(cè)定物質(zhì)的含量進(jìn)行準(zhǔn)確的測(cè)定。荷移光譜法在實(shí)際物質(zhì)含量測(cè)定過程中具有非常好的應(yīng)用價(jià)值，操作相對(duì)簡便且被測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性可以得到可靠的保證。以荷移光譜法對(duì)羅紅霉素含量進(jìn)行測(cè)定，有助于保障羅紅霉素試劑的穩(wěn)定性，具有良好的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和實(shí)用價(jià)值，所以荷移光譜法有推廣的價(jià)值。

綜上所述，荷移光譜法的合理應(yīng)用，同時(shí)和相關(guān)的測(cè)定技術(shù)相配合對(duì)羅紅霉素含量實(shí)現(xiàn)測(cè)定，可以精準(zhǔn)且高效的測(cè)定出羅紅霉素含量，適合在藥物含量測(cè)定方面加以推廣。

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1672-5018（2017）02-285-1