徐文龍 孫位軍 王 張 劉光麗 梁 源

1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川 成都 611137；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥學(xué)院，四川 成都 611137

基于文獻數(shù)據(jù)挖掘的七十味珍珠丸與二十五味珍珠丸的現(xiàn)代研究進展對比和分析

徐文龍1孫位軍1王 張2*劉光麗1梁 源1

1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川 成都 611137；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥學(xué)院，四川 成都 611137

應(yīng)用文獻數(shù)據(jù)挖掘法，對比二十五味珍珠丸與保密方七十味珍珠丸的組方、化學(xué)成分、藥理學(xué)和臨床等現(xiàn)代研究信息，為七十味珍珠丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制研究提供思路。挖掘出七十味珍珠丸的植物類藥材12種，動物類藥材5種，礦物類和寶石類藥材8種，金屬類藥材4種，混合物1種，與二十五味珍珠丸共有的藥物僅9種。二十五味珍珠丸中動植物類藥物和礦物藥類成分已建立含量測定方法，七十味珍珠丸中的礦物和金屬類藥材已建立含量測定方法，但植物藥類尚未開展。七十味珍珠丸的藥理作用研究較多，但作用機制研究不深入，而二十五味珍珠丸幾乎沒有開展作用機制研究。兩者主要用于心腦血管和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療，二十五味珍珠丸治療疾病范圍較七十味珍珠丸少，且兩藥多與其他藥物配伍，均未見不良反應(yīng)報道。

七十味珍珠丸；二十五味珍珠丸；組方；藥理；對比

二十五味珍珠丸和七十味珍珠丸均已被《中國藥典》(2015版)收載。二十五味珍珠丸系藏族驗方，最早收載于公元八世紀藏醫(yī)巨著《四部醫(yī)典》的第3部“秘訣部”中，主要用于中風、半身不遂、口眼歪斜、昏迷不醒、神智紊亂、譫語發(fā)狂等。七十味珍珠丸源于二十五味珍珠丸，經(jīng)歷代藏醫(yī)藥學(xué)家不斷改進和完善，最后由藏醫(yī)南方學(xué)派代表人物蘇喀巴·年尼多杰于十五世紀中葉研制而成[1]；具有安神、鎮(zhèn)靜、通經(jīng)活絡(luò)、調(diào)和氣血、醒腦開竅的功效，用于“黑白脈病 ”、“龍血”不調(diào)；中風、癱瘓、半身不遂、癲癇、腦溢血、腦震蕩、心臟病、高血壓及神經(jīng)性障礙。目前，七十味珍珠丸在全國范圍內(nèi)僅有兩家企業(yè)具有國藥準字號，即西藏甘露藏藥股份有限公司和青海金訶藏藥廠；二十五味珍珠丸則有西藏神猴藥業(yè)有限責任公司、西藏甘露藏藥股份有限公司、青海金訶藏藥廠、昌都藏藥等企業(yè)具有國藥準字號。

七十味珍珠丸與二十五味珍珠丸在藥物組成上有較多相似之處，故通過化學(xué)成分、藥理和臨床研究的對比，能夠為二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的現(xiàn)代研究提供思路。

1 組方數(shù)據(jù)挖掘

一般認為七十味珍珠丸來源于二十五味珍珠丸，因此進行兩組數(shù)據(jù)挖掘并進行比較，可以挖掘出七十味珍珠丸處方中更多的藥物信息，為多成分質(zhì)量控制標準的制定提供基礎(chǔ)。

1.1 二十五味珍珠丸組方 在《中國藥典》(2015版)中，僅收載二十五味珍珠丸中組成藥物，未記錄其具體的各組方比例。其中植物類藥材有19種，即肉豆蔻、草果、丁香、豆蔻、檀香、余甘子、肉桂、毛訶子、木香、冬葵果、蓽撥、香旱芹、黑種草子、沉香、降香、紅花、訶子、志達薩增、西紅花；動物類藥材有4種，即體外培育牛黃、人工麝香、螃蟹、水牛角濃縮粉；礦物類藥材有4種，即石灰華、金礞石、珍珠、珍珠母。從藥物數(shù)目來說，二十五味珍珠丸并非由25味藥組成，而是27味，究其原因，可能是由于古代藏醫(yī)缺乏植物分類學(xué)知識，將紅花與西紅花、珍珠與珍珠母分別視為同一種藥物。

1.2 七十味珍珠丸組方 七十味珍珠丸為保密處方，僅公開了部分藥物的名稱，其具體的組方比例無從得知，阻礙了藥效物質(zhì)研究和質(zhì)量控制水平的提高，如《中國藥典》(2015版)所載的藥物有珍珠、檀香、降香、九眼石、西紅花、牛黃、麝香等[2]。

根據(jù)公開出版的文獻，整理總結(jié)出七十味珍珠丸中植物類藥材應(yīng)有32種，已知12種即西紅花[3](藏紅花[4])、檀香、安息香、沉香、降香、短穗兔耳草(短穗兔草[5])、甘草、天竺黃、木訶子、訶子、藏荊芥、荊芥等；動物類藥材應(yīng)有8種，已知5種即麝香(人工麝香)、野牛血、牛黃(人工牛黃)、羚羊角、熊膽等；礦物和寶石類藥材應(yīng)有20余種，已知8種即天然珍珠(珍珠)、九眼石、瑪瑙、珊瑚、藍寶石、貓眼石、松石[6]、青金石等；金屬類藥材應(yīng)有10余種，已知4種即金、銀、銅(銅灰)、天然鐵等[7]；混合物1種，即佐臺(坐臺[8])。總結(jié)發(fā)現(xiàn)，在組方中礦物和寶石類藥材多達20余種，占比約29%。此外，各單位生產(chǎn)的七十味珍珠丸在部分藥物的使用上存在差異，如有單位使用麝香、牛黃，而有些單位使用人工麝香和人工牛黃，另外各單位煉制佐臺(佐塔)的工藝也不盡相同，這些都可能影響藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及藥效。

1.3 二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的共有藥物 共有植物藥6種，即檀香、沉香、降香、紅花、西紅花、訶子；共有動物藥2種，即牛黃(人工牛黃)、麝香(人工麝香)；共有礦物與寶石類藥1種，即珍珠(人工珍珠)。由此可知，兩者共有的藥物僅9種，可能是因為七十味珍珠丸屬于保密配方，尚未公布的藥物中可能存在共有藥物。

2 化學(xué)成分研究

2.1 二十五味珍珠丸的化學(xué)成分研究 對部分藥物的化學(xué)成分進行了研究，如應(yīng)用HPLC測定西紅花中的西紅花苷I[9]、肉桂中的桂皮醛、木香中的木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)脂[10]；應(yīng)用RP-HPLC法測定人工牛黃中的人工牛黃膽酸[11]；通過原子吸收分光光度法測定了重金屬元素含量，即平均含鉛7.5720mg·kg-1、砷2.2626mg·kg-1、汞<0.005mg·kg-1和鎘0.1242mg·kg-1[12]；采用激光誘導(dǎo)擊穿光譜(LIBS)技術(shù)對金屬成分如鈣、鈉、鉀、鎂進行了定性分析[13]。而其它已知藥物中的化學(xué)成分未見分析報道，究其原因可能是其在組方中含量較低，成分測試存在一定困難。

2.2 七十味珍珠丸的化學(xué)成分研究 只開展了礦物和金屬成分的研究，如吳金泉等[14]采用LIBS對七十味珍珠丸Mg、Ca、Na、Fe、Al、Si、K、Li、Hg、Pb、Au等10種元素進行了定性研究，同時還對不同價態(tài)的Pb元素進行了LIBS的時間演化研究；李玉等[15]用ICP-AES法測定七十味珍珠丸中的微量和常量元素，測定出銅、鐵、鈷等多種元素的含量。見表1。

表1 七十味珍珠丸中元素的含量/10-6

2.3 二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的化學(xué)成分研究對比 二十五味珍珠丸中礦物藥數(shù)量和含量較七十味珍珠丸為少，共有金屬鈣、鈉、鉀、鎂、鉛、汞等元素，且含量各不相同；二十五味珍珠丸中的3個植物藥與1個動物藥已有含量測定指標，但未見七十味珍珠丸中動物藥和植物藥中化學(xué)成分的研究報道，有可能與組方中含量相對較低有關(guān)，其化學(xué)成分在儀器的檢測限以下，也可因礦物藥含量較多，干擾了動物藥和植物藥檢測；另外處方保密對化學(xué)成分研究有較大的障礙。

3 藥理研究

3.1 二十五味珍珠丸的藥理研究 二十五味珍珠丸能增加記憶再缺失小鼠模型的逃避潛伏期，并可減少小鼠發(fā)聲和退縮的錯誤次數(shù)，表明珍珠丸能通過改善模型小鼠的記憶能力，提高其智力，從而改善癡呆癥狀[16]；制造頸總動脈結(jié)扎致大鼠不完全性腦缺血模型，二十五味珍珠丸預(yù)防給藥可明顯降低模型大鼠腦毛細血管通透性、腦含水量和腦指數(shù)，從而減輕腦水腫[17]；二十五味珍珠膠囊按5.04 g生藥/kg·d(相當于臨床給藥量的70倍)灌胃60d以及停藥2周后，動物的血液學(xué)指標、血液生化學(xué)指標及臟器指數(shù)沒有明顯異常，提示在臨床規(guī)定劑量范圍內(nèi)是安全的[18]。

3.2 七十味珍珠丸的藥理研究 七十味珍珠丸 0.5～1g/ kg 可明顯減輕缺血性腦梗塞引起的行為障礙，減少梗塞面積，使缺血性腦組織病理變化減輕，對腦缺血有保護作用[19]。七十味珍珠丸治療腦血管及神經(jīng)系統(tǒng)疾病可能與其抑制腦內(nèi)β-EP[20]、5-HT、NA、DA[21]的異常升高和海馬神經(jīng)元凋亡[22]有關(guān)；具有防治急性腎型高血壓、中樞鎮(zhèn)靜、抗驚厥[23]、改善血液流變學(xué)[24]和血流動力學(xué)[25]、改善腦膜微循環(huán)[26]、減輕血小板聚集[27]、抗血栓形成[28]等藥理作用，并可能通過抑制β-分泌酶[29]的表達來改善學(xué)習記憶[30]。

索有瑞等[31]通過模擬人工胃液發(fā)現(xiàn)，七十味珍珠丸中重金屬元素汞、砷、鉛、鎘等吸收較少，大部分排出體外，機體內(nèi)無明顯長期蓄積性毒性。說明七十味珍珠丸中重金屬元素并非機體正常生理所需要，但重金屬元素在七十味珍珠丸中是怎樣發(fā)揮作用尚未清楚，去除重金屬元素是否會影響藥效也有待進一步研究。

3.3 二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的藥理研究對比 二十五味珍珠丸的藥理學(xué)研究相對滯后，幾乎沒有開展作用機制研究。七十味珍珠丸現(xiàn)代藥理學(xué)研究較多，主要集中在抗腦缺血及其初步機理研究方面，但作用機制研究需結(jié)合分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)技術(shù)進一步深入。

4 臨床研究

4.1 二十五味珍珠丸的臨床研究 主要用于血管性癡呆[32]、冠心病[33]、坐骨神經(jīng)痛[34]、缺血性腦卒中[35]、椎動脈型頸椎病[36]、腦出血后遺癥[37]、急性高血壓腦出血[38]等疾病，臨床不良反應(yīng)未見報道。詳見表2。

表2 二十五味珍珠丸的主要臨床研究

4.2 七十味珍珠丸的臨床研究 常用于缺血性腦卒中(腦缺血、中風、癱瘓、薩病、腦中風后遺癥[39]、腔隙性腦梗塞[40]、腦溢血[41])、腦震蕩[42]、原發(fā)性高血壓[43]、小兒抽搐[44]、面癱、阿爾茨海默病[45]、神經(jīng)血管性頭痛[46]、植物神經(jīng)功能紊亂[47]及心絞痛[48]等心腦血管和神經(jīng)系統(tǒng)疾病，相當于藏醫(yī)的“黑白脈病”的范疇。目前由治療心腦血管疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病擴展到其它疾病，如小兒抽搐、風濕性關(guān)節(jié)炎等；七十味珍珠丸與其他中西藥聯(lián)合使用均取得滿意效果，如治療腔隙性腦梗塞與銀杏葉注射液合用總有效率90.6%、治療腦梗塞與二十五味珍珠丸合用總有效率為 96.7%。亦未見不良反應(yīng)報道。

4.3 二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸的臨床研究對比 二十五味珍珠丸與七十味珍珠丸均用于心腦血管和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療，臨床效果顯著，但均未見不良反應(yīng)報道。故應(yīng)在現(xiàn)有基礎(chǔ)上，采用多中心、大樣本、隨機、對照、雙盲的現(xiàn)代臨床實驗研究七十味珍珠丸治療心腦血管疾病的有效性和作用機制[31]。

5 小結(jié)

5.1 七十味珍珠丸與二十五味珍珠丸對比分析 通過上述數(shù)據(jù)對比分析可知，在組方上七十味珍珠丸和二十五味珍珠丸共有植物藥6種(檀香、沉香、降香、紅花、西紅花、訶子)，動物藥2種(牛黃、麝香)，礦物與寶石類藥1種(珍珠)。在化學(xué)成分上，兩者均共同含有鈣、鈉、鉀、鎂、鉛、汞等元素，均進行了對于礦物藥的研究。二十五味珍珠丸由于其組方公開(組方比例未知)，已進行如肉桂、西紅花等植物藥的化學(xué)成分分析；而七十味珍珠丸由于為保密處方，對于其植物藥的研究尚未見公開文獻報道。在藥理研究上，兩者均進行了安全性和腦缺血方面的藥理研究，但二十五味珍珠丸整體而言藥理研究相對滯后，七十味珍珠丸現(xiàn)代藥理學(xué)研究較多。在臨床上，兩者均多用于心腦血管疾病，此外七十味珍珠丸目前還用于治療小兒抽搐、風濕性關(guān)節(jié)炎等。

5.2 七十味珍珠丸的量-時-效關(guān)系不清楚 七十味珍珠丸“每3～7日給藥一次”，似“緩釋作用”，但缺乏藥理學(xué)和藥劑學(xué)數(shù)據(jù)支撐。在治療心腦血管疾病中存在有效劑量與時間段跨度均很大等問題，如在治療缺血性腦卒中的劑量為2～1000mg/(kg·d)，平均值為192mg/(kg·d)，臨床治療的有效時間段為10～90d，實驗研究的有效時間段為3h至7d。在劑量設(shè)置和起效時間、維持時間判斷方面均可能存在誤判或隨意的可能，進而影響臨床治療的有效性[49]。故開展七十味珍珠丸的量時效關(guān)系研究，可為后續(xù)的有效性評價、作用機制和臨床研究提供基礎(chǔ)。

5.3 七十味珍珠丸中植物藥化學(xué)成分的分析測試思路及實踐 通過上述數(shù)據(jù)對比分析可知，在七十味珍珠丸中，與二十五味珍珠丸共有植物藥6種(檀香、沉香、降香、紅花、西紅花、訶子)，并且在其它公開發(fā)表的文獻中還整理出安息香、沉香、短穗兔耳草、甘草、天竺黃、木訶子、藏荊芥、荊芥等藥物組成。通過查閱藥典等資料分析這些植物藥中含有的化學(xué)成分，筆者重點開展了七十味珍珠丸中沒食子酸、柯里拉京、沉香四醇等化學(xué)成分的HPLC研究和分析?，F(xiàn)已定量測試6個成分(詳見圖1)，其中沒食子酸含量最高，為1.484 mg/g；其次為西紅花苷Ⅰ和柯里拉京，含量分別為0.654 mg/g和0.567 mg/g，鞣花酸、西紅花苷Ⅱ及沉香四醇含量相對較低，分別為0.399 mg/g、0.343 mg/g及0.279 mg/g。還定性測試出鷹嘴豆芽素A、胡椒堿、甘草苷，進而為開展血清藥物化學(xué)和藥代動力學(xué)研究奠定了基礎(chǔ)。

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Comparison with the Modern Research Progress of The Rannasangpei and Twenty Five Pearl Pill Based on Prescription Data Mining

XU Wenlong1SUN Weijun1WANG Zhang2*LIU Guangli1LIANG Yuan1

1.College of Pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137,China； 2.College of Ethnomedicine，Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 611137,China

With the application of literature mining，and through a comparison with twenty five pearl pill and the secret prescription of Rannasangpei formula，modern research information were mined and collected, to provide modern research of twenty five pearl pill and Rannasangpei. It is Revealed that Rannasangpei has twelve kinds of herbs，five kinds of animal medicinal materials，eight kinds of minerals and gems class，four kinds of metals，one kind of mixture， and there exists only 9 drugs shared by twenty five pearl pill and Rannasangpei. Methods for determination of certain contents in twenty five pearl pill has been set up，including plant and animal.Meanwhile，methods for determination of contents including minerals and metal medicinal materials in the Rannasangpei have been established and plant don’t study. The Rannasangpei has always enjoyed various pharmacological effects without clear working mechanisms, but twenty five pearl pill almost clear working mechanisms. They are mainly used in the treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases as well as nervous system diseases, the scope of twenty five pearl pill treatment less and compatibility significantly, with few reports about adverse effects.

Rannasangpei Pill; Twenty Five Pearl Pill; Component; Pharmacology; Comparison

①中國博士后基金：藏醫(yī)白脈病的潛在生物標志物及七十味珍珠丸的干預(yù)研究(2012M511916)；②四川省中醫(yī)藥管理局課題：藏醫(yī)白脈病的潛在生物標志物及七十味珍珠丸的干預(yù)研究(2012-E-040)；③ 成都中醫(yī)藥大學(xué)實驗技術(shù)項目重點項目：大鼠MCAO模型自制實驗裝置的標準化和共享機制研究(Z1411)；④ 成都中醫(yī)藥大學(xué)科技發(fā)展基金：藏藥七十味珍珠丸干預(yù)缺血性腦卒中的量-時-效關(guān)系研究(ZRQN1544)。

徐文龍(1991-)，碩士研究生，研究方向為中藥理論與實踐應(yīng)用研究。E-mail:454514539@qq.com

王張(1980-)，副研究員，博士后，碩士研究生導(dǎo)師，研究方向為民族藥的藥理學(xué)。 E-mail:wzcqcd@163.com

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1007-8517(2017)04-0059-05

2016-12-12 編輯：陶希睿)