薛慧婷
(新疆伊犁水文勘測局,新疆 伊犁 835000)
氣相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測水中安眠酮殘留量
薛慧婷
(新疆伊犁水文勘測局,新疆 伊犁 835000)
本實驗建立水中安眠酮殘留量的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS/MS)分析方法。方法 樣品采用乙酸乙酯提取,濃縮后甲醇定容待測。采用GC-MS/MS分析時,安眠酮在15 mins內(nèi)流出。對采集的水樣進行兩種濃度的加標(biāo)質(zhì)控,回收率均在70%以上,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在3.0%以內(nèi)。在0.05~1.00 mg/L的濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)大于0.999。檢出限為0.50μg/L。該方法可準(zhǔn)確用于環(huán)境水樣中安眠酮殘留的定量分析,靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度均滿足殘留檢測的分析要求。
安眠酮;氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜;殘留量;水
安眠酮(methaqualone),又名甲苯喹啉酮(C16H14N2O),臨床上常用作催眠藥、鎮(zhèn)定藥,主要用于動物過度興奮或驚厥,可使機體平靜;但該藥副作用較大,進入人體后,會表現(xiàn)出惡心、 嘔吐、頭暈、無力、四肢及口舌麻木,個別較重患者會有短時間的精神失常,過量服用可出現(xiàn)昏迷、心跳過速、呼吸抑制等癥狀;近年來,隨著養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展,一些不法分子在經(jīng)濟利益的驅(qū)動下,置法律法規(guī)于不顧,為達到?;?、保重以及增加捕獲量的目的,在魚類產(chǎn)品運輸和捕撈過程中擅自在飼料中非法添加安眠酮,導(dǎo)致該藥物在產(chǎn)品中的殘留,給食品安全帶來嚴(yán)重隱患。目前,農(nóng)業(yè)部嚴(yán)禁使用的促生長作用的催眠鎮(zhèn)靜藥安眠酮[1],但是目前工作對濫用抗生素導(dǎo)致細菌耐藥性的研究和監(jiān)測工作還不到位[2]。針對該類藥物殘留不同儀器的檢測已有相關(guān)研究報道[3-11],這些方法主要用于人體血漿、頭發(fā)及豬肉、豬腎和飼料中安眠酮的測定,而在采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)聯(lián)用法定性定量測定安眠酮殘留量少有報道,由于該類藥物存在于魚塘養(yǎng)殖水體環(huán)境中,因此很有必要對于水樣進行檢測。本研究開發(fā)環(huán)境水樣中痕量安眠酮的殘留檢測方法,并對方法的有效性進行評價,為環(huán)境中安眠酮殘留量檢測標(biāo)準(zhǔn)的制定提供可靠依據(jù)。
1.1 試驗材料
無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖基地:淡水養(yǎng)殖用水。
1.2 主要試劑與材料
乙酸乙酯、甲醇(色譜純,美國Fisher Scientific公司);安眠酮標(biāo)準(zhǔn)品(美國Supelco公司)。
1.3 主要儀器
氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(7890B-7000B,美國安捷倫公司);離心機(CT18RT,上海天美公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(SB-1100,日本EYELA公司)。
1.4 實驗方法
1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
安眠酮標(biāo)準(zhǔn)溶液:配制100.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液,保存于1℃~4℃冰箱中冷藏,使用時用甲醇稀釋至相應(yīng)濃度做標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。
1.4.2 分離提取
準(zhǔn)確量取50.0 ml水樣品于具塞離心管中,加入20.0 ml乙酸乙酯,振蕩后放入高速離心機10 000 r/min離心3 min,將上層有機相倒入濃縮瓶中,40℃減壓濃縮近干,用甲醇溶液2.00 ml定容。
1.4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線及質(zhì)控樣
分別配置0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mg/l濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液,同時在試驗過程中添加不同濃度的安眠酮做回收率試驗。
1.4.4 儀器條件
色譜柱:HP-5MS(30 m×0.25 mm, 0.5 μm);載氣:氦氣(99.999%);恒流模式流速:1.0 ml/min;進樣:1.00 μL,不分流;進樣口溫度:250 ℃;程序升溫:80 ℃保持1 min,以20 ℃/min升溫至280 ℃,保持10 min;離子化方式:電子轟擊(EI);離子化能量:70 eV;離子源溫度:230 ℃;傳輸線溫度270 ℃;溶劑延遲:3 min;掃描方式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)。掃描范圍:50~450 amu;定量方式:外標(biāo)法。
1.4.5 樣品測定
按試驗過程將定容后的樣品及質(zhì)控樣移入進樣瓶中,按優(yōu)化后的儀器條件進行分析測定,通過儀器的色譜工作站記錄保留時間、峰面積及二級質(zhì)譜離子的豐度比進行分析。
圖1 安眠酮一級質(zhì)譜圖
2.1 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法優(yōu)化和選擇
對安眠酮標(biāo)準(zhǔn)品進行分析,采用全離子掃描確定目標(biāo)化合物的保留時間和一級質(zhì)譜圖,由圖1安眠酮的碎片離子可選擇m/z為250為母離子,在設(shè)定的色譜及質(zhì)譜條件下進行子離子及碰撞電壓優(yōu)化試驗,通過圖2可選擇最佳碰撞電壓和子離子的參數(shù)。
圖2 優(yōu)化母離子及碰撞電壓色譜圖
2.2 方法的線性范圍
通過氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀分析安眠酮標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖見圖3,以峰面積對應(yīng)其濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖4,安眠酮的方法學(xué)參數(shù)及優(yōu)化條件見表1。
2.3 方法回收率、精密度及穩(wěn)定性
對采集的淡水養(yǎng)殖用水樣品添加0.05和0.20 mg/l兩種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn),按試驗步驟操作,每個濃度各添加5個平行樣品,進行回收率重復(fù)測定。兩個添加水平的樣品在24 h內(nèi)分4個時間段測定,對該方法的穩(wěn)定性進行研究,結(jié)果見表2,標(biāo)準(zhǔn)偏差SD值均小于3.0%,由此可見測試方法具有很好的穩(wěn)定性。對空白樣品基質(zhì)進行20次測定,按照3倍信噪比(S/N)作為定量檢出限,通過計算所得安眠酮檢出限為0.50 μg/L。樣品加標(biāo)回收率、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)見表3。
圖3 不同濃度安眠酮的GC-MS/MS色譜圖
圖4 安眠酮標(biāo)準(zhǔn)曲線(0.01~0.50 mg/L)
2.4 樣品的測定
為驗證該方法的可靠性和準(zhǔn)確性,本次試驗選擇新疆地區(qū)五個大型無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖基地的20個淡水養(yǎng)殖用水樣品進行檢測,在檢測的樣品中均未檢出安眠酮藥物殘留。
表1 安眠酮的串聯(lián)質(zhì)譜檢測條件及方法學(xué)參數(shù)(n=5)
表2 安眠酮測定方法穩(wěn)定性研究(n=5)
表3 安眠酮的平均回收率、RSD值及檢出限(n=5)
本實驗建立水中安眠酮殘留量的方法,采用乙酸乙酯提取水中殘留的安眠酮,通過氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀器進行定性、定量檢測分析。該方法的線性系數(shù)在0.999以上,檢出限可達到0.50μg/L。由于待測水樣基本沒有基質(zhì)干擾,因此該方法的前處理步驟簡便、快速,測定的準(zhǔn)確度和精密度較高,適用于水中安眠酮類藥物殘留的檢測工作。
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2016-10-27
薛慧婷(1973-),女,新疆伊寧人,工程師,主要從事水質(zhì)分析評價、監(jiān)測等工作。
P332.7
B
1004-1184(2017)01-0066-02