薛慧婷

(新疆伊犁水文勘測局，新疆 伊犁 835000)

氣相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測水中安眠酮殘留量

薛慧婷

(新疆伊犁水文勘測局，新疆 伊犁 835000)

本實驗建立水中安眠酮殘留量的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS/MS)分析方法。方法 樣品采用乙酸乙酯提取，濃縮后甲醇定容待測。采用GC-MS/MS分析時，安眠酮在15 mins內(nèi)流出。對采集的水樣進行兩種濃度的加標(biāo)質(zhì)控，回收率均在70%以上，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在3.0%以內(nèi)。在0.05～1.00 mg/L的濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)大于0.999。檢出限為0.50μg/L。該方法可準(zhǔn)確用于環(huán)境水樣中安眠酮殘留的定量分析，靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度均滿足殘留檢測的分析要求。

安眠酮；氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；殘留量；水

安眠酮(methaqualone)，又名甲苯喹啉酮(C16H14N2O)，臨床上常用作催眠藥、鎮(zhèn)定藥，主要用于動物過度興奮或驚厥，可使機體平靜；但該藥副作用較大，進入人體后，會表現(xiàn)出惡心、 嘔吐、頭暈、無力、四肢及口舌麻木，個別較重患者會有短時間的精神失常，過量服用可出現(xiàn)昏迷、心跳過速、呼吸抑制等癥狀；近年來，隨著養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，一些不法分子在經(jīng)濟利益的驅(qū)動下，置法律法規(guī)于不顧，為達到?；?、保重以及增加捕獲量的目的，在魚類產(chǎn)品運輸和捕撈過程中擅自在飼料中非法添加安眠酮，導(dǎo)致該藥物在產(chǎn)品中的殘留，給食品安全帶來嚴(yán)重隱患。目前，農(nóng)業(yè)部嚴(yán)禁使用的促生長作用的催眠鎮(zhèn)靜藥安眠酮[1]，但是目前工作對濫用抗生素導(dǎo)致細菌耐藥性的研究和監(jiān)測工作還不到位[2]。針對該類藥物殘留不同儀器的檢測已有相關(guān)研究報道[3-11]，這些方法主要用于人體血漿、頭發(fā)及豬肉、豬腎和飼料中安眠酮的測定，而在采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)聯(lián)用法定性定量測定安眠酮殘留量少有報道，由于該類藥物存在于魚塘養(yǎng)殖水體環(huán)境中，因此很有必要對于水樣進行檢測。本研究開發(fā)環(huán)境水樣中痕量安眠酮的殘留檢測方法，并對方法的有效性進行評價，為環(huán)境中安眠酮殘留量檢測標(biāo)準(zhǔn)的制定提供可靠依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖基地：淡水養(yǎng)殖用水。

1.2 主要試劑與材料

乙酸乙酯、甲醇(色譜純，美國Fisher Scientific公司)；安眠酮標(biāo)準(zhǔn)品(美國Supelco公司)。

1.3 主要儀器

氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(7890B-7000B，美國安捷倫公司)；離心機(CT18RT，上海天美公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(SB-1100，日本EYELA公司)。

1.4 實驗方法

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

安眠酮標(biāo)準(zhǔn)溶液：配制100.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，保存于1℃～4℃冰箱中冷藏，使用時用甲醇稀釋至相應(yīng)濃度做標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

1.4.2 分離提取

準(zhǔn)確量取50.0 ml水樣品于具塞離心管中，加入20.0 ml乙酸乙酯，振蕩后放入高速離心機10 000 r/min離心3 min，將上層有機相倒入濃縮瓶中，40℃減壓濃縮近干，用甲醇溶液2.00 ml定容。

1.4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線及質(zhì)控樣

分別配置0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mg/l濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，同時在試驗過程中添加不同濃度的安眠酮做回收率試驗。

1.4.4 儀器條件

色譜柱：HP-5MS(30 m×0.25 mm, 0.5 μm)；載氣：氦氣(99.999%)；恒流模式流速：1.0 ml/min；進樣：1.00 μL，不分流；進樣口溫度：250 ℃；程序升溫：80 ℃保持1 min，以20 ℃/min升溫至280 ℃，保持10 min；離子化方式：電子轟擊(EI)；離子化能量：70 eV；離子源溫度：230 ℃；傳輸線溫度270 ℃；溶劑延遲：3 min；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)。掃描范圍：50～450 amu；定量方式：外標(biāo)法。

1.4.5 樣品測定

按試驗過程將定容后的樣品及質(zhì)控樣移入進樣瓶中，按優(yōu)化后的儀器條件進行分析測定，通過儀器的色譜工作站記錄保留時間、峰面積及二級質(zhì)譜離子的豐度比進行分析。

圖1 安眠酮一級質(zhì)譜圖

2 結(jié)果與討論

2.1 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法優(yōu)化和選擇

對安眠酮標(biāo)準(zhǔn)品進行分析，采用全離子掃描確定目標(biāo)化合物的保留時間和一級質(zhì)譜圖，由圖1安眠酮的碎片離子可選擇m/z為250為母離子，在設(shè)定的色譜及質(zhì)譜條件下進行子離子及碰撞電壓優(yōu)化試驗，通過圖2可選擇最佳碰撞電壓和子離子的參數(shù)。

圖2 優(yōu)化母離子及碰撞電壓色譜圖

2.2 方法的線性范圍

通過氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀分析安眠酮標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖見圖3，以峰面積對應(yīng)其濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖4，安眠酮的方法學(xué)參數(shù)及優(yōu)化條件見表1。

2.3 方法回收率、精密度及穩(wěn)定性

對采集的淡水養(yǎng)殖用水樣品添加0.05和0.20 mg/l兩種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)，按試驗步驟操作，每個濃度各添加5個平行樣品，進行回收率重復(fù)測定。兩個添加水平的樣品在24 h內(nèi)分4個時間段測定，對該方法的穩(wěn)定性進行研究，結(jié)果見表2，標(biāo)準(zhǔn)偏差SD值均小于3.0%，由此可見測試方法具有很好的穩(wěn)定性。對空白樣品基質(zhì)進行20次測定，按照3倍信噪比(S/N)作為定量檢出限，通過計算所得安眠酮檢出限為0.50 μg/L。樣品加標(biāo)回收率、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)見表3。

圖3 不同濃度安眠酮的GC-MS/MS色譜圖

圖4 安眠酮標(biāo)準(zhǔn)曲線(0.01～0.50 mg/L)

2.4 樣品的測定

為驗證該方法的可靠性和準(zhǔn)確性，本次試驗選擇新疆地區(qū)五個大型無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖基地的20個淡水養(yǎng)殖用水樣品進行檢測，在檢測的樣品中均未檢出安眠酮藥物殘留。

表1 安眠酮的串聯(lián)質(zhì)譜檢測條件及方法學(xué)參數(shù)(n=5)

表2 安眠酮測定方法穩(wěn)定性研究(n=5)

表3 安眠酮的平均回收率、RSD值及檢出限(n=5)

3 結(jié)語

本實驗建立水中安眠酮殘留量的方法，采用乙酸乙酯提取水中殘留的安眠酮，通過氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀器進行定性、定量檢測分析。該方法的線性系數(shù)在0.999以上，檢出限可達到0.50μg/L。由于待測水樣基本沒有基質(zhì)干擾，因此該方法的前處理步驟簡便、快速，測定的準(zhǔn)確度和精密度較高，適用于水中安眠酮類藥物殘留的檢測工作。

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2016-10-27

薛慧婷(1973-)，女，新疆伊寧人，工程師，主要從事水質(zhì)分析評價、監(jiān)測等工作。

P332.7

B

1004-1184(2017)01-0066-02