劉媛 （綜述），孫良起 （校審）

（中國(guó)人民解放軍第150中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 洛陽(yáng) 471000）

G實(shí)驗(yàn)在早期診斷深部真菌感染中的臨床意義

劉媛 （綜述），孫良起 （校審）

（中國(guó)人民解放軍第150中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 洛陽(yáng) 471000）

血漿1,3－β－D－葡聚糖含量的測(cè)定 （G實(shí)驗(yàn)）利用了真菌細(xì)胞壁特異性成分1,3－β－D葡聚糖，在早期診斷侵襲性真菌感染方面有較高的特異性和準(zhǔn)確性，為臨床提供了較好的臨床依據(jù)。本文從G實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)原理、影響因素、臨床價(jià)值、預(yù)期發(fā)展等方面對(duì)其在早期診斷深部真菌感染中的臨床意義進(jìn)行綜述，為臨床快速、準(zhǔn)確診斷深部真菌感染提供依據(jù)。

G實(shí)驗(yàn)；1,3-β-D葡聚糖；深部真菌感染

1 前言

深部真菌感染又稱為侵襲性真菌感染 （invasive fungal infection，IFI），是致病性真菌侵犯皮下組織、黏膜、肌肉、內(nèi)臟器官等而引起的感染性疾病。近年來(lái)，隨著廣譜抗菌藥物的濫用，免疫抑制劑、類固醇激素和抗癌藥物的廣泛應(yīng)用以及氣管插管、導(dǎo)管介入、器官移植手術(shù)的廣泛開(kāi)展，深部真菌感染的發(fā)病率和致死率逐年增高，成為臨床治療的棘手難題。因此，快速準(zhǔn)確地早期診斷深部真菌感染意義重大。本研究證實(shí)G實(shí)驗(yàn)在早期診斷IFI中有較好的特異性和敏感性。

2 G實(shí)驗(yàn)與深部真菌感染早期診斷的關(guān)系

2.1 G實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)原理 血漿1,3－β－D－葡聚糖 （BG）是真菌細(xì)胞壁含量很高的一種多聚糖成分，約占真菌細(xì)胞壁干重的50%以上，只存在于除隱球菌和結(jié)合菌 （包括毛霉菌、根霉菌等）以外所有深部真菌內(nèi)，人類細(xì)胞和原核性病毒內(nèi)不含有，理論上保證了抗原的特異性。BG特異性激活鱟變形細(xì)胞裂解物種的G因子，引起細(xì)胞裂解凝固，故又稱G實(shí)驗(yàn)。當(dāng)真菌侵入人體組織和血液造成深部感染后，大量吞噬細(xì)胞將其吞噬，持續(xù)釋放BG，造成其在血液及體液中的含量明顯升高，而淺部感染真菌和定植真菌時(shí)，BG很少能釋放入血，因此，G實(shí)驗(yàn)可用于鑒別侵襲性真菌感染和定植菌［1－2］。由于真菌侵入呼吸道時(shí)，氣道分泌物的包裹作用使BG釋放受阻，而產(chǎn)生假陰性。隱球菌有厚壁薄膜，結(jié)合菌細(xì)胞壁缺乏BG，很難釋放入血產(chǎn)生假陰性，故G實(shí)驗(yàn)不適用于二者的感染監(jiān)測(cè)。

2.2 G實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的影響因素 G實(shí)驗(yàn)為臨床抗真菌治療提供了幫助，但實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程中卻易受到干擾因素影響，大部分會(huì)導(dǎo)致其假陽(yáng)性。造成假陽(yáng)性的主要原因有：①BG污染：使用非廠家提供的采血管、反應(yīng)試管、無(wú)熱源槍頭、手術(shù)中使用的紗布等容易受BG污染。②藥品或治療中的BG污染：血液制品和磺胺類及厄他培南等；蘑菇多糖和黃芪多糖、雙黃連等；近期內(nèi)注射脂肪乳；高免疫球蛋白血癥；使用纖維素膜人工腎的血液透析患者和腹膜透析；腹破損導(dǎo)致食物中的BG或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液；菌血癥 （銅綠假單胞菌、鏈球菌）；高溶血、高脂血、高膽紅素血。

2.3 G實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)閾值和準(zhǔn)確性 近年來(lái)，很多研究均通過(guò)對(duì)G實(shí)驗(yàn)診斷深部真菌感染的準(zhǔn)確性及最佳實(shí)驗(yàn)閾值進(jìn)行回顧性分析及Meta分析，研究了實(shí)驗(yàn)閾值的確定與結(jié)果準(zhǔn)確性之間的相關(guān)性［3］。2015年，Hou等［4］對(duì)4個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)11項(xiàng)研究結(jié)果進(jìn)行Meta分析，該研究共包含1 068例患者，以上研究中分別選用了Fungitell診斷試劑盒 （陽(yáng)性閾值 80～120 pg／mL）、Fungitell G實(shí)驗(yàn)試劑盒 （陽(yáng)性閾值20 pg／mL）、Wako BG檢測(cè)試劑盒 （陽(yáng)性閾值7或11 pg／mL）、GKT－25M Set檢測(cè)試劑盒（陽(yáng)性閾值10 pg／mL）規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，Meta分析結(jié)果顯示無(wú)論是IFI患者或者非IFI患者，G實(shí)驗(yàn)的敏感性和特異性都平均高達(dá)75%和87%，準(zhǔn)確性較高，可作為IFI侵襲性真菌感染的早期篩選指標(biāo)。然而，Alexander等［5］根據(jù) Funglitell試劑盒標(biāo)準(zhǔn)以60 mg／mL作為實(shí)驗(yàn)閾值，對(duì)肺移植患者的血清標(biāo)本進(jìn)行G實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，卻得到了較低的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值；劉耀婷等［6］的研究卻表明，對(duì)肝腎移植等患者的血清標(biāo)本應(yīng)用GKT－5M Set真菌檢測(cè)試劑盒，以10 pg／mL作為陽(yáng)性閾值，準(zhǔn)確性較高。因此，G實(shí)驗(yàn)作為早期篩查深部真菌感染的指標(biāo)是否準(zhǔn)確以及最佳的實(shí)驗(yàn)閾值尚需要更多的臨床研究提供科學(xué)依據(jù)。

2.4 G實(shí)驗(yàn)在臨床診斷中的價(jià)值 深部真菌感染早期病情隱匿，不宜發(fā)現(xiàn)，造成臨床病死率居高不下。其診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是真菌培養(yǎng)陽(yáng)性，但此方法培養(yǎng)周期長(zhǎng) （約7～14天），陽(yáng)性率低，即使培養(yǎng)陰性也不能排除真菌感染的可能。目前，檢測(cè)真菌的抗原、抗體和代謝產(chǎn)物已逐漸成為臨床診斷深部真菌感染的早期有效手段。與傳統(tǒng)真菌培養(yǎng)比較，BG抗原檢測(cè)具有特異性高、靈敏度高、快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，歐洲癌癥治療研究組織真菌病研究組已將G試驗(yàn)連續(xù)兩次陽(yáng)性作為侵襲性深部真菌疾病感染的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)［7］。2007年中華醫(yī)學(xué)會(huì)出版的《肺真菌病學(xué)診斷治療專家共識(shí)》中將血清BG抗原檢測(cè)歸為診斷真菌感染的微生物檢查依據(jù)［8］。多項(xiàng)研究已證實(shí)IFI發(fā)病率在血液?。?］、器官移植［10］、惡性腫瘤［11］、老年性COPD、ICU病房及獲得性免疫缺陷病 （HIV）患者中較高，且研究［12］表明，IFI確診組及診斷組的BG含量較普通細(xì)菌感染組及正常對(duì)照組均有明顯增加 （P＜0.05），證實(shí)G實(shí)驗(yàn)可作為早期 IFI診斷指標(biāo)。以上重癥疾病導(dǎo)致的肺部念珠菌和曲霉菌感染較常見(jiàn)，HIV患者感染卡氏肺孢子菌和馬爾尼菲青霉菌的病例也有相同的報(bào)道。同時(shí)，對(duì)并發(fā)深部真菌感染的危重新生兒及早產(chǎn)兒血漿BG進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)，表明以125 pg／mL作為陽(yáng)性閾值得到了特異性和敏感性之和最大［13］， 對(duì)提高療效意義重大。

2.5 G實(shí)驗(yàn)的預(yù)期發(fā)展 Lahmer等［14］于2016年證實(shí)了G實(shí)驗(yàn)、GM實(shí)驗(yàn)和真菌培養(yǎng)聯(lián)合診斷可明顯提高臨床深部真菌感染的價(jià)值，同樣，Chen等［15］的研究也表明BG抗原檢測(cè)可以與其他感染指標(biāo)，如降鈣素原 （PCT）、內(nèi)毒素等聯(lián)合檢測(cè)，使老年COPD患者肺部侵襲性真菌感染的診斷陽(yáng)性率增加。對(duì)于針對(duì)性疾病，如血液病可聯(lián)合曲霉菌PCR聯(lián)合檢測(cè)，提高檢出率和準(zhǔn)確性［16］。制備真菌BG多克隆抗體及建立ELISA競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)體系也可提高G實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和特異性［17］。G實(shí)驗(yàn)未來(lái)的發(fā)展方向除了進(jìn)一步提升檢驗(yàn)技術(shù)，還應(yīng)與相關(guān)檢測(cè)手段合理聯(lián)合應(yīng)用，提高檢出率。

3 小結(jié)

G試驗(yàn)早期診斷深部真菌感染的準(zhǔn)確性和敏感性較高，對(duì)指導(dǎo)臨床合理用藥和經(jīng)驗(yàn)用藥意義重大。但G實(shí)驗(yàn)易受干擾因素的影響，而且只能定性判斷，不能確定感染的真菌類型。因此，臨床需要進(jìn)行綜合分析，合理判斷。

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（責(zé)任編輯：肖婷婷）

Clinical Significance of G-Test in Early Diagnosis of Deep Fungal Infection

LIU Yuan(Review),SUN Liangqi(Revision)
(Clinical Laboratory,150 Central Hospital of PLA,Luoyang 471000,China)

G-test has a higher specificity and accuracy in the early diagnosis of deep fungal infection by using 1,3-β-D-glucan,the specific ingredient of fungal cell wall.This paper reviewed the clinical significance of G test in the early diagnosis of deep fungal infection respectively from its testing principle,influence factors,clinical value and future development,in order to provide basis for rapid and accurate clinical diagnosis of deep fungal infection.

G-test;1,3-β-D-glucan;Deep fungal infection

R519

：B

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.09.1331

2016－09－27

2017-02-12

劉媛，女，碩士研究生學(xué)歷，臨床檢驗(yàn)技師，研究方向：微生物感染，E-mail：Liuyuan306@126.com。