李雕，秦艷筠，黃唯子，楊靜慧，王茂思，龔無缺

樹莓為薔薇科（Rosaceae）懸鉤子屬（Rubus L.）多年生半灌木果樹，又名覆盆子、馬林、木莓、托盤等[1-2]。與藍(lán)莓、沙棘、醋栗、刺梨、桑葚、無花果和酸棗等被稱為第三代水果，其果實(shí)營養(yǎng)極其豐富，被稱為“維生素寶庫”、“天然綠色食品”[3-5]。樹莓成熟果實(shí)風(fēng)味獨(dú)特，色澤宜人，富含多種人體必需的營養(yǎng)元素，具有食品、美容、醫(yī)療保健等多領(lǐng)域的開發(fā)利用價(jià)值[5-8]。隨著人們對綠色食品的關(guān)注，樹莓果實(shí)也成為新時(shí)代綠色食品的新寵。樹莓品種較多，分為紅樹莓、黃樹莓、紫樹莓和黑樹莓，主要以紅樹莓和黑樹莓為主。紅樹莓主要品種有‘哈瑞太茲’、‘紅寶’、‘莎妮’、‘香妃’、‘澳洲紅’、‘諾娃’等，黑樹莓主要品種有‘凱歐’等[9-10]。目前國內(nèi)外關(guān)于樹莓果實(shí)解剖結(jié)構(gòu)方面的研究較少，僅見Sexlon等[11]對樹莓果實(shí)發(fā)育過程中細(xì)胞壁與纖維素含量關(guān)系的研究，楊國慧等[12]對樹莓果實(shí)超顯微結(jié)構(gòu)的觀察。本試驗(yàn)以兩個(gè)不同品種樹莓的成熟果實(shí)為材料，比較了它們果實(shí)的解剖形態(tài)差異以及果實(shí)細(xì)胞大小的差異，為樹莓品種的鑒定提供了重要依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

黑樹莓‘凱歐’和紅樹莓‘諾娃’的果實(shí)于2015年8—9月采集于天津市西青區(qū)楊柳青鎮(zhèn)后桑園樹莓實(shí)驗(yàn)基地（該地區(qū)土壤為黏壤土、肥料中等、土壤pH7.5、土壤含鹽量0.25%），樹齡為二年生。苗木采用扦插繁殖，籬壁式整枝，生長季摘心，冬季埋土防寒等管理措施。土肥水管理采用常規(guī)管理方法，栽培管理中未發(fā)現(xiàn)病蟲害。

1.2 方法

在同一塊實(shí)驗(yàn)地中選取長勢基本一致的植株，每個(gè)品種選取5株做好標(biāo)記，每次從每株上采取15枚成熟的果實(shí)（‘諾娃’為鮮紅色、‘凱歐’為黑色）放于不同的保鮮袋中，貼好標(biāo)簽。樣品采集后迅速帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行解剖觀察，未觀察的樣品放于4℃冰箱中保存。

選取成熟度、大小基本一致的果實(shí)進(jìn)行橫剖和縱剖觀察，5個(gè)重復(fù)。選取5組切片，運(yùn)用目鏡測微尺分別對每組切片中的外果皮、中果皮、內(nèi)果皮中的細(xì)胞大小進(jìn)行測量，每組切片選取10個(gè)細(xì)胞測量，測量方法采用微生物細(xì)胞大小測定的方法[13]。用NiBlackberry SMZ25體視顯微鏡和LEICA DM2000解剖顯微鏡進(jìn)行觀察。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩個(gè)品種樹莓外果皮解剖結(jié)構(gòu)比較

由圖1可知，不同品種樹莓外果皮細(xì)胞大小不同。黑樹莓外果皮細(xì)胞的橫切面平均面積為0.973 μm2，紅樹莓外果皮細(xì)胞的面積為 0.483 μm2，黑樹莓外果皮細(xì)胞的面積是紅樹莓的2.01倍。

圖1 ‘凱歐’與‘諾娃’外果皮表皮細(xì)胞的大小比較

從圖2中可以看出，兩個(gè)品種樹莓的外果皮結(jié)構(gòu)有較大差異?！畡P歐’外果皮由2～3層細(xì)胞組成，表面光滑，無毛，細(xì)胞長方形，排列緊密；‘諾娃’外果皮表面有2～3層細(xì)胞，外表皮有大量的表皮毛，細(xì)胞呈圓形、方形、棱形或不規(guī)則形，一些細(xì)胞以表皮毛根部為中心呈花環(huán)狀排列，排列疏松。

圖2‘凱歐’與‘諾娃’外果皮的解剖比較（10×20）

2.2 兩個(gè)品種樹莓中果皮解剖結(jié)構(gòu)比較

圖3 顯示，不同品種樹莓中果皮細(xì)胞大小不同?！畡P歐’中果皮細(xì)胞的橫切面積為40.35 μm2，‘諾娃’為11.37 μm2，‘凱歐’中果皮細(xì)胞的面積是‘諾娃’的3.55倍。與圖1比較，中果皮細(xì)胞較外果皮細(xì)胞大，其中‘凱歐’中果皮細(xì)胞面積是其外果皮的41.5倍，‘諾娃’中果皮細(xì)胞面積是其外果皮的23.5倍。

圖3 ‘凱歐’與‘諾娃’中果皮細(xì)胞的大小比較

從圖4中可以看出，‘凱歐’中果皮細(xì)胞高度液泡化，細(xì)胞排列疏松；‘諾娃’中果皮細(xì)胞排列較緊密，液泡中內(nèi)含物相對較多。兩個(gè)樹莓品種的中果皮細(xì)胞均較外果皮細(xì)胞大，與外果皮有較明顯的界限。

圖4 ‘凱歐’（左）與‘諾娃’（右）中果皮解剖結(jié)構(gòu)比較（10×20）

2.3 兩個(gè)品種樹莓內(nèi)果皮解剖結(jié)構(gòu)比較

圖5顯示，不同品種樹莓內(nèi)果皮厚度不同?！畡P歐’內(nèi)果皮厚度為18.09 μm，‘諾娃’內(nèi)果皮厚度為12.20 μm，‘凱歐’內(nèi)果皮厚度是‘諾娃’成熟果實(shí)內(nèi)果皮厚度的1.48倍。

圖5 成熟‘凱歐’與‘諾娃’內(nèi)果皮厚度比較

從圖6中可以看出，兩個(gè)品種內(nèi)果皮均較厚（圖b、c），內(nèi)果皮表面由不規(guī)則形狀的凹槽組成。但兩個(gè)品種的內(nèi)果皮表面的紋理有所不同。

從果實(shí)縱剖面上看，兩個(gè)品種樹莓的內(nèi)果皮可以分為3部分或3層（圖7）。外層最厚，為波浪狀結(jié)構(gòu)，細(xì)胞為圓形的厚壁細(xì)胞；中層厚度為外層厚度的1/3～1/4，由扁平的、排列緊密的厚壁細(xì)胞組成；內(nèi)層較薄，僅僅由2～3層細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞為圓形的厚壁細(xì)胞。

圖 6‘凱歐’與‘諾娃’內(nèi)果皮結(jié)構(gòu)比較

圖7 ‘凱歐’與‘諾娃’內(nèi)果皮的比較

3 結(jié)論與討論

黑樹莓與紅樹莓果實(shí)在發(fā)育過程中存在差異，紅樹莓外觀首先表現(xiàn)為小而綠，然后逐漸膨大，轉(zhuǎn)白，再逐漸變紅，成熟后的紅樹莓果實(shí)和花托分離，形成中空狀，果實(shí)柔軟多汁最后全部著紅，果肉和花托分離，果實(shí)變軟；黑樹莓外觀開始表現(xiàn)為小而綠，然后逐漸膨大轉(zhuǎn)紅，最后逐漸變黑，成熟的黑樹莓果實(shí)與花托不分離。黑樹莓與紅樹莓的果實(shí)特性與葛秋來[14]、謝娟[2]等的研究一致。

通過解剖觀察表明，黑樹莓外果皮表面較為光滑、無茸毛、細(xì)胞長方形，而紅樹莓外果皮表面布滿了茸毛、細(xì)胞多為不規(guī)則形；黑樹莓外果皮細(xì)胞較大，黑樹莓中果皮細(xì)胞排列較紅樹莓松散，細(xì)胞較紅樹莓大；黑樹莓果皮的厚度為18.09 μm，紅樹莓的厚度為12.20 μm。此外，兩個(gè)品種的內(nèi)果皮硬化、并分3部分（3層），其各部分的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有較大差異，外層部分形成了不同的紋理結(jié)構(gòu)。總之，黑樹莓與紅樹莓果皮在解剖結(jié)構(gòu)上有較大差異，特別是外果皮有無表皮毛，內(nèi)果皮表面的紋理等差異都可以作為品種鑒別的重要依據(jù)。

[1]張敏.不同樹莓品系果實(shí)特性評價(jià)及采后兩種處理方法對果實(shí)特性的影響[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2013.

[2]謝娟.紅樹莓果實(shí)生長發(fā)育規(guī)律及超顯微結(jié)構(gòu)研究[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

[3]李公存，蘇佳明，張洪勝.樹莓和黑莓優(yōu)良品種簡介[J].煙臺果樹，2014（125）：25-26.

[4]張群英，文光琴，李永霞，等.優(yōu)良樹莓品種及當(dāng)?shù)匾吧鷺漭囊N比較研究[J].種子學(xué)報(bào)，2015，34（1）：100-103.

[5]張愛正.樹莓——風(fēng)靡全球的第三代黃金水果[N].中國貿(mào)易報(bào)，2015-01-27（H01）.

[6]屈小媛，田維榮，胡萍，等.黑樹莓乳飲料的研制[J].食品科學(xué)，2012，33（16）：324-328.

[7]屈小媛，胡萍，周光橋.黑樹莓夸克最佳工藝參數(shù)組合的灰色分析[J].中國釀造，2011，235（10）：176-178.

[8]李華，趙鳳芹.不同HVEF處理對樹莓VC含量的影響[J].農(nóng)機(jī)化研究，2012（11）：146-149.

[9]程云清，耿婉婷.不同樹莓品種光合特征[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，43（5）：23-27.

[10]宋建新，孟憲軍.聚類法分析不同品種樹莓的加工特性[J].食品科學(xué)，2015，36（6）：130-135.

[11]Sexton R，Palmer J M，Whyte N A，et al．Cellulase，fruit softening and abscission in red raspberryRubus idaeusL.cv Glen Clova[J]．Annals of Botany，1997，80（3）：371-376．

[12]楊國慧，王冰，謝娟，等.樹莓果實(shí)顯微及超顯微結(jié)構(gòu)觀察[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，54（8）：1920-1922.

[13]程麗娟，薛泉宏.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].2版.北京：科學(xué)出版社，2012.

[14]葛秋來.樹莓果實(shí)成熟軟化機(jī)理的初步研究[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013.