任 可，李 桐

（1.包頭醫(yī)學院，內(nèi)蒙古 包頭 014040；2.包頭市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，內(nèi)蒙古 包頭 014040）

臨床檢測甲狀腺激素的方法多為免疫標記法，測定患者血液中的激素含量[2]。放射免疫分析法（RIA）的建立為激素等超微量物質(zhì)分析史的重大技術(shù)性的突破，使過去難以精確定量的極微量物質(zhì)得以確定，大大推進了我國生命科學的進步與發(fā)展[3]。隨著我國免疫學檢測技術(shù)的不斷進步與發(fā)展，技術(shù)的發(fā)展，電化學發(fā)光免疫分析技術(shù)相繼的誕生，其檢測更具敏感性、特異性、快速性及準確性，可在短時間內(nèi)準確的檢測出血液內(nèi)各種激素的準確水平[4]。

1 方法學進展

RIA技術(shù)的發(fā)展共經(jīng)歷了5代。第一代為 Yalow 與Berson共同創(chuàng)建的具有競爭性的抑制免疫反應(yīng)為原理的檢測方法，開辟了檢驗史上新思路；第二代的標記為游離標記抗原分離技術(shù)和抗原-抗體復(fù)合物；第三代的標志為半抗原制備抗體技術(shù)的運用及建立；第四代的標志是單克隆技術(shù)的建立。第五代的標志則為抗體固磁性微粒子，極大簡化檢測操作的程序，縮短檢測用時，為實現(xiàn)檢測技術(shù)的全自動分析奠定了良好的基礎(chǔ)。在RIA檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上，相繼發(fā)展了化學發(fā)光免疫分析技術(shù)（CLIA）、酶聯(lián)免疫分析（EIA）等，使檢測的特異性及靈敏性得到進一步提升。

2 免疫學檢測方法

2.1 RIA

RIA 是由美國科學家Yallow建立的，RIA的建立使定量分析取得了劃時代的進步，使微量生物的樣品最小檢出量由之前的微克提升至皮克級的水平，為臨床檢測實踐及生物醫(yī)學的基礎(chǔ)理論提供了新的方法及思路，為推動世界生物醫(yī)學的發(fā)展做出了巨大的貢獻。RIA的檢測原理是運用放射性的核素標記激素中的抗體及抗原，將待測抗體或者抗原與特異性做結(jié)合而形成復(fù)合物展開檢測的的先進分析方法。目前我國多數(shù)實驗室運用該方法測定血清中的游離甲狀腺素（FT4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）及促甲狀腺激素（TSH），上述檢測項目使用的試劑均為RIA的試劑盒。

2.2 CLIA

CLIA是1977年誕生的，在RIA原理的基本上，將高靈敏化學發(fā)光和特異性強的免疫反應(yīng)進行結(jié)合，是檢測微量抗體及抗原的一種非放射的免疫分析方法。早期的 CLIA顯示的特異性和RIA極為相似，但因其光信號的持續(xù)時間較短，因此在靈敏度方面低于RIA，難以滿足臨床檢測需求。上個世紀90年代初，英國Amersham公司率先在過氧化物酶催化Luminol 發(fā)光反應(yīng)中將微量碘酚加入其中，將其作為發(fā)光的穩(wěn)定劑，檢測發(fā)光信號結(jié)果顯示，發(fā)光信號持續(xù)了20至30分鐘，然后進行了試劑盒研究，研制了相應(yīng)的試劑盒，標志著CLIA正式運用以臨床檢測。

2.3 EIA

EIA 技術(shù)誕生以上個世紀60年代，有醫(yī)學研究者將酶的催化作用和抗原抗體的特異性免疫反應(yīng)進行了結(jié)合，運用特定的酶作為抗體及抗原的標記，使其成為示蹤活性性能的免疫酶，定性及定量測定的標準是根據(jù)免疫酶中催化底物的顯色，建立EIA免疫檢測方法。EIA長期存在的過程中不會生產(chǎn)放射性的污染，還具有操作簡單、設(shè)備安全的優(yōu)勢。但由于酶的穩(wěn)定性還存在一定限制，在比色法及偏振光技術(shù)中其測量范圍較窄、靈敏度較差加上定量較為困難，因此運用該方法進行檢測漏診及假陽性的發(fā)生率較高，限制了其在臨床的使用及推廣。

3 總 結(jié)

RIA技術(shù)的發(fā)展歷史悠久，該技術(shù)的不斷發(fā)展與突破為實現(xiàn)檢測技術(shù)的全自動分析奠定了良好的基礎(chǔ)，為推動世界生物醫(yī)學的發(fā)展做出了巨大的貢獻。在RIA檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上，相繼發(fā)展了化學發(fā)光免疫分析技術(shù)（CLIA）、酶聯(lián)免疫分析（EIA）等檢測技術(shù)，CLIA早期的 CLIA顯示的特異性和RIA極為相似，但因其光信號的持續(xù)時間較短，因此在靈敏度方面低于RIA，難以滿足臨床檢測需求，EIA檢測技術(shù)具有不會生產(chǎn)放射性的污染，還具有操作簡單、設(shè)備安全的優(yōu)勢，但其受到酶的穩(wěn)定性的影響，測量范圍較窄，靈敏度也較差。

王程強,李勝聯(lián),歐超燕,陳 筠,宋家樂.低水平母源性十溴聯(lián)苯醚暴露對子鼠學習記憶能力和甲狀腺激素影響[J/OL].中國職業(yè)醫(yī)學,2017,(05):547-551.

[2] 陳 瑤,韓 艷,黃 錕,嚴雙琴,任玲玲,徐葉清,盛 杰,陶芳標.馬鞍山育齡婦女孕早期和孕中期甲狀腺激素參考值隊列研究[J/OL]. 中國公共衛(wèi)生,2017,10(23):1-3.

[3] 左衛(wèi)星,張志飛,劉志民,王超群.參與下丘腦-垂體-甲狀腺軸負反饋調(diào)控的分子元件研究進展[J/OL].生物技術(shù)進展,2017,09(26):1-6

[4] 郭獻山,耿秀琴,趙建林,陳玉風.2型糖尿病合并不同水平高血壓患者甲狀腺激素水平變化及其相關(guān)性研究[J/OL].中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志,2017,09(14):1-5.