招鈺娟　鄧曉華　甘沛明　梁雪琪　黎小鵬

摘 要：建立了韭菜中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的分析方法，本實驗對2種前處理方法進(jìn)行考察，線性范圍在 0.5～20 ng/mL，線性相關(guān)系數(shù) 0.991～0.999 之間。使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 試劑盒以及 NY/T761-2008的前處理方法分別對韭菜進(jìn)行前處理，QuEChERS 方法回收率在 71.23%～100.37% 之間，國標(biāo)前處理方法回收率在 70.49%～108.32%。結(jié)果表明，QuEChERS 方法具有操作簡便快速、準(zhǔn)確率高、重復(fù)性好等優(yōu)點。

關(guān)鍵詞：有機(jī)磷；液質(zhì)聯(lián)用；韭菜；QuEChERS

中圖分類號：O657.7 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20161017001

1 前言

食品的質(zhì)量安全近年來在我國引起了高度重視，隨著有機(jī)磷殺蟲劑的品種日益爭奪，造成了該農(nóng)藥在環(huán)境、農(nóng)作物中的殘留。蔬菜中基質(zhì)復(fù)雜，農(nóng)藥殘留量低，干擾因素多，主要殘留成分不易分離、富集和純化，因而相關(guān)農(nóng)藥檢測不準(zhǔn)確。[1、2]樣品前處理中目標(biāo)物的提取、基質(zhì)凈化方法的選擇與優(yōu)化成為農(nóng)藥多殘留檢測的關(guān)鍵。NY/T761-2008[3]的前處理方法是一個成熟的方法，但是前處理耗時長。而QuEChERS[4.5]（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）方法是近年來國際上最新發(fā)展起來的一種用于農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測的快速樣品前處理技術(shù)，此方法快捷簡便。因此本次實驗采用基質(zhì)復(fù)雜的韭菜為樣品以NY/T761-2008和QuEChERS的前處理方法進(jìn)行比對，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜快速檢測韭菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

Agilent 1200 液相色譜6410 QQQ（美國安捷倫公司）；搖床、T26 勻漿機(jī)（IKA 公司）；高速冷凍離心機(jī) 3K30（SIGMA 公司）；MUL-TIV APTM 氮吹儀（Organomation 公司）；Agilent Bond Elut QuEChERS 試劑盒（含PSA和GCB）；Agilent Florisil 500mg 6cc。

甲酸、乙腈均為色譜純，由德國 Merck 公司生產(chǎn)；乙腈、丙酮、正己烷、氯化鈉等均為分析純，由廣州分析化學(xué)試劑廠生產(chǎn)；實驗用水為屈臣氏。甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、久效磷、敵百蟲、樂果、敵敵畏、殺撲磷、亞胺硫磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、三唑磷、喹硫磷、倍硫磷、治螟磷、毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)品（農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)監(jiān)測所，濃度為 100 mg/L）。

2.2 液相條件

Agilent Poroshell 120 SB-C18 （2.1x100 mm， 2.7μm）；流動相組成及梯度如表 1 所示；柱溫 45℃；流速為 0.3 mL/min；進(jìn)樣量 10 μL。按表1梯度洗脫。

2.3 質(zhì)譜條件

電離方式：ESI+，檢測模式：多反應(yīng)檢測 （MRM），毛細(xì)管電壓：4000V，干燥氣流量 10 L/min，干燥氣溫度：350℃，霧化器壓力 50 psi，定性離子對、定量離子對及碰撞能量見表 2。

2.4 樣品處理

2.4.1 NY/T761-2008前處理法

稱取 25g 的韭菜樣品，加入 25 mL 乙腈，勻質(zhì)機(jī)勻漿，10000 rpm 4℃ 冷凍離心 5 min，吸取 10 mL 樣品50℃氮吹至盡干，2mL正己烷定容，旋渦震蕩，待凈化。

凈化：5 mL丙酮+正己烷（1：9）活化Florisil柱，下接10mL試管把待測樣品全部轉(zhuǎn)移至Florisil柱中，用5mL丙酮+正己烷（1：9）分2次洗滌試管并把溶劑倒入spe中，負(fù)壓抽干，50℃氮吹至近干。

2.5 mL 初始流動相定容，漩渦震蕩 1 min，10000 rmp/min 4 ℃離心 5 min，倒入樣品瓶中，上機(jī)檢測。

2.4.2 QuEChERS 前處理法

稱取 10 g 的韭菜樣品，加入 10 mL冰凍乙腈，勻質(zhì)機(jī)勻漿，加入陶瓷均質(zhì)子，加入 Agilent Bond Elut QuEChERS 提取鹽包，劇烈震蕩 3min，10000 rpm 4℃冷凍離心 5 min，全部上清液倒入有陶瓷均質(zhì)子的分散固相萃取管中，劇烈震蕩 3min，漩渦 1min，10000 rpm 4℃冷凍離心 5min，吸取 0.2mL 樣品，初始流動相定容到 1mL，上機(jī)檢測。

3 結(jié)果與討論

3.1 液相色譜柱選擇

色譜條件優(yōu)化分別使用 Poroshell 120 SB-C18 （2.1×

100 mm，2.7μm）色譜柱（圖1）、ZORBAX SB-C18（2.1×

150mm，3.5μm）（圖2）和 Atlantis T3（2.1x150mm，3.5μm）（圖3），由圖 1可知，采用 Poroshell 120 SB-C18 色譜柱對 16 種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行分離時，色譜峰的分離效果最好，而且分離時間短。

3.2 樣品前處理方法

本次實驗使用2種前處理方法來對韭菜樣品進(jìn)行檢測，韭菜樣品中雜質(zhì)成分較為復(fù)雜，NY/T761-2008前處凈化效果（見圖4黑色基線），紅色基線則是QuEChERS（含PSA和GCB），由此證明，含有PSA和GCB的QuEChERS

比NY/T761-2008前處凈化效果要優(yōu)。

3.3 線性范圍和相關(guān)系數(shù)

在該試驗條件下標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度在0.5ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL各取10uL進(jìn)樣，記錄色譜圖，線性方程和相關(guān)系數(shù)見表3。

3.4 回收率和精密度

以各物質(zhì)的特征離子色譜峰信噪比S/N>10算出定量限，空白樣品，分別加入濃度為10、20、40 ug/kg的混合標(biāo)準(zhǔn)品，做2平行實驗，詳見表4。

4 結(jié)論

本實驗建立了韭菜中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，采用2種前處理方法對加標(biāo)樣品進(jìn)行分析。結(jié)果表明QuEChERS 方法比國標(biāo)方法的提取效率高，凈化效果好，靈敏度高、重現(xiàn)性好，適用于韭菜有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測的實際工作需要。

參考文獻(xiàn)

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[2]達(dá)晶，王鋼力，曹進(jìn)，張慶生.QuEChERS液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定植物性食品中30種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J].色譜（Chinese Journal of Chromatography），2015，8（33）：830-837.

[3]NY/T 761-2008，蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定[S].

[4]Dimitra A L，Triantafyllos A A[J]. Anal Bioanal Chem，2007（389）：1663.

[5]Angelika B，Marek B. Food Chem[J].2008，108（2）：6694.