張智，林秀芳，馬建章，*，鄭喜群

（1.東北林業(yè)大學(xué)，黑龍江哈爾濱150040；2.齊齊哈爾大學(xué)，黑龍江齊齊哈爾161006）

玉米肽對(duì)雙歧桿菌免疫力作用的影響

張智1，林秀芳1，馬建章1，*，鄭喜群2，*

（1.東北林業(yè)大學(xué)，黑龍江哈爾濱150040；2.齊齊哈爾大學(xué)，黑龍江齊齊哈爾161006）

檢測(cè)復(fù)合益生菌（長(zhǎng)雙歧桿菌＋青春雙歧桿菌＋動(dòng)物雙歧桿菌）與復(fù)合益生菌-玉米肽對(duì)小鼠免疫功能及抗氧化的影響。將小鼠隨機(jī)分為空白組、復(fù)合菌高、中、低3個(gè)劑量組和復(fù)合菌-玉米肽高、中、低3個(gè)劑量組。SPF級(jí)昆明系小鼠分別經(jīng)口每日連續(xù)灌胃30天后，對(duì)免疫器官、碳粒廓清指數(shù)、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、脾淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和體液酶聯(lián)免疫進(jìn)行測(cè)定。碳粒廓清指數(shù)測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，復(fù)合菌和復(fù)合菌-玉米肽的高劑量組高于對(duì)照組。脾淋巴增殖實(shí)驗(yàn)中，復(fù)合菌和復(fù)合菌-玉米肽制劑高劑量組刺激指數(shù)高于對(duì)照組，差異有顯著性意義，說明該樣品具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能作用。遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，復(fù)合菌-玉米肽高劑量組明顯優(yōu)于其他組。體液酶聯(lián)免疫測(cè)定實(shí)驗(yàn)方法中，復(fù)合菌和復(fù)合菌-玉米肽制劑高劑量組優(yōu)于對(duì)照組，說明該樣品具有促進(jìn)免疫球蛋白A的功能。由此可見，攝入一定量的復(fù)合益生菌和復(fù)合益生菌-玉米肽，可增強(qiáng)小鼠的免疫能力，說明該樣品具有增強(qiáng)免疫力的功能作用。抗氧化能力的測(cè)定主要通過測(cè)定小鼠血清的SOD酶活性和MDA含量。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，復(fù)合菌和復(fù)合菌-玉米肽能夠提高SOD酶活性、降低血清中MDA含量，具有一定的抗氧化能力。

玉米肽；復(fù)合益生菌；免疫；抗氧化；影響

根據(jù)研究人體90%的疾病與免疫有關(guān)，故免疫系統(tǒng)在抵御外界環(huán)境有害物質(zhì)入侵方面起著至關(guān)重要的作用。免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)在預(yù)防疾病方向起著至關(guān)重要的作用。越來越多的人們對(duì)這方面愈加重視。最近有研究表明，免疫調(diào)節(jié)劑可增強(qiáng)機(jī)體防御反應(yīng)，此方式是一項(xiàng)有效增加對(duì)疾病抗性的方式[1]。已有研究表明乳酸桿菌（LAB）對(duì)腸道菌群有一定的調(diào)節(jié)作用，具有一定的免疫功能。證明益生菌對(duì)免疫條件作用有一定的影響[2]。通過食用河蟹，能提高免疫力與抗病能力[3]。說明提高免疫的同時(shí)，也能提高抗病能力。

益生菌（Probiotic）又稱活菌制劑，是有益的的細(xì)菌或真菌。益生菌能夠促進(jìn)宿主腸道內(nèi)微生物菌群的生態(tài)平衡，對(duì)宿主生理功能和健康產(chǎn)生都有一定的促進(jìn)作用[4]。益生菌具有減緩乳糖消化不良[5]、治療腹瀉[6]、激活免疫系統(tǒng)、抗氧化[7]、抗腫瘤[8]等多種保健功能。雙歧桿菌一直被公認(rèn)為是安全的益生菌，對(duì)機(jī)體健康沒有致病性，具有食品安全性。長(zhǎng)雙歧桿菌（Bifidobacrium Longum）是一種專性厭氧菌，已有研究表明長(zhǎng)雙歧桿菌可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫力[9]。青春雙歧桿菌（Bifidobacrium adolescent）是一種嚴(yán)格厭氧菌，已有研究證明其免疫功能。張炳華[10]等研究表明環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫功能有一定的恢復(fù)和增強(qiáng)作用。動(dòng)物雙歧桿菌（Bifidobacrium animalis）被認(rèn)為是一種嚴(yán)格專性厭氧菌。已有研究表明含動(dòng)物雙歧桿菌的益生菌酸乳便秘癥狀有所改善[11]。

免疫佐劑（immunoadjuvant）是指能夠先于抗原或與抗原同時(shí)作用，能非特異性地改變或增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該抗原的特異性免疫應(yīng)答，能增強(qiáng)相應(yīng)抗原的免疫原性或改變免疫反應(yīng)類型[12]。已證明玉米肽也是一種較好的提高免疫力的物質(zhì)。羅軍[13]等研究玉米肽對(duì)輻射大鼠的作用，結(jié)果表明玉米肽能夠促進(jìn)大鼠外周血象的影響，提高機(jī)體免疫力。單一益生菌由于其嚴(yán)格厭氧特性的制約，很難發(fā)揮其很好的免疫作用，因此希望通過加入其他物質(zhì)以提高其免疫活性，更好地應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)際。目前此三種雙歧桿菌復(fù)合菌及復(fù)合菌-玉米肽的免疫活性與抗氧化能力少見報(bào)道。本試驗(yàn)主要探究復(fù)合菌[長(zhǎng)雙歧桿菌∶青春雙歧桿菌∶動(dòng)物雙歧桿菌（質(zhì)量比）=1∶1∶1]及在此基礎(chǔ)上添加玉米肽的復(fù)合菌制劑（質(zhì)量比＝1∶1∶1∶1）的免疫功能及抗氧化能力，旨在更好地提高復(fù)合益生菌的免疫及抗氧化能力，為研制新型免疫佐劑提供基礎(chǔ)研究。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及材料

昆明系清潔級(jí)雄性小鼠，體重18 g～22 g，6周齡～ 8周齡。玉米肽：由齊齊哈爾大學(xué)食品與生物工程學(xué)院提供。

1.2 儀器與設(shè)備

YQX-Ⅱ厭氧培養(yǎng)箱：上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司；SW-CJ-1G超凈工作臺(tái)：江蘇凈通凈化設(shè)備有限公司；JA2003型電子天平：上海精科儀器有限公司；SHZ-C水浴恒溫振蕩器：上海博訊實(shí)業(yè)有限公司；DHP-9272型恒溫培養(yǎng)箱：上海一恒科技有限公司；DL-6M型立式離心機(jī)：湖南星科科學(xué)儀器有限公司；RT-6000全自動(dòng)酶標(biāo)儀：Rayto；TGL-16G臺(tái)式離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠；YXQG02手提式壓力蒸汽滅菌器：山東新華醫(yī)療器械股份有限公司；免疫球蛋白IgA試劑盒、免疫球蛋白IgG試劑盒、SOD試劑盒、MDA試劑盒：購自南京建成生物制劑公司。

1.3 方法

1.3.1 原料制備

取斜面保存的菌種，經(jīng)活化、MRS培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)，培養(yǎng)得到長(zhǎng)雙歧桿菌（Bifidobacrium Longum）BL-01、青春雙歧桿菌（Bifidobacrium adolescent）BA-10及動(dòng)物雙歧桿菌（Bifidobacrium animalis）BA-30。然后將這三種菌種分別于改良培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24h，3500 r/min離心10min，除去上清，收集菌體沉淀。烘干，冷凍干燥得到菌粉。收集冷藏備用。將三者等比例混合得到復(fù)合益生菌。再按照一定比例混合玉米肽，得到復(fù)合益生菌增強(qiáng)劑。

1.3.2 小鼠喂養(yǎng)及分組

灌胃前適應(yīng)環(huán)境一周。將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、復(fù)合菌低劑量組、復(fù)合菌中劑量組、復(fù)合菌高劑量組、復(fù)合菌-玉米肽制劑低劑量組、復(fù)合菌-玉米肽制劑中劑量組和復(fù)合菌-玉米肽制劑高劑量組。正常對(duì)照組灌胃生理鹽水，每天灌胃0.2mL/10 g。飲用水為無菌水。飼料為普通飼料。自由采食。每天換水。隔天換墊料。連續(xù)灌胃30 d。記錄體重變化。

1.3.3 免疫器官

各組小鼠末次灌胃給藥，第2天稱重記錄。所有小鼠眼眥取血于無抗凝劑的離心管中，3 000 r/min離心10min，分離得到血清。小鼠脫臼處死，取其脾臟和胸腺，用生理鹽水進(jìn)行清洗，去除表面的血跡，并用濾紙擦干表面。稱重記錄脾臟與胸腺的重量[14]。

脾臟（胸腺/肝臟）指數(shù)=脾臟（胸腺/肝臟）質(zhì)量/小鼠體重

1.3.4 碳粒廓清指數(shù)

參照其他試驗(yàn)方法，略作改動(dòng)[15]。小鼠稱重，用印度墨汁（10mL/kg，用前稀釋3倍～4倍）由尾靜脈注入體內(nèi)，觀察墨汁注入小鼠體內(nèi)成功后，立即計(jì)時(shí)。間隔時(shí)間分別為2min及10min時(shí)，分別以毛細(xì)管取眼眥靜脈叢取血20μL，注入盛有2mL 0.1%的Na2CO3溶液的比色皿中，測(cè)定OD600并記錄，以Na2CO3溶液作為空白對(duì)照。將小鼠脫臼處死，取肝臟和脾臟，用濾紙吸干臟器表面血污，分別稱重，計(jì)算吞噬指數(shù)α。

式中：OD1為2min時(shí)的吸光值；OD2為10min時(shí)的吸光值；t1為2min；t2為10min；k為廓清指數(shù)。

1.3.5 遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)

參照方筍的試驗(yàn)方法[16]，略作改動(dòng)。預(yù)先將小鼠腹部脫毛，首次將1%二硝基氟苯（DNFB溶液）（以體積比=1∶1的丙酮麻油溶液配制）定量取50μL致敏小鼠。第五天再用DNFB涂右耳致敏，24 h后處死動(dòng)物剪下小鼠的左右耳殼，用打孔器取直徑8mm的相同部分的耳片，分別稱重，用左右耳的重量之差來代表遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）的程度。

1.3.6 脾淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)

參照郭淼[17]的實(shí)驗(yàn)方法，略作改動(dòng)。將小鼠脫臼處死，75%乙醇中浸泡10min，無菌條件下取脾，制備成細(xì)胞懸液，經(jīng)篩網(wǎng)過濾，清洗兩次，1000 r/min離心10min，棄去上清液。加入RPMI-1640培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞密度為5×106個(gè)/mL，用臺(tái)酚藍(lán)染色計(jì)數(shù)（活力應(yīng)大于95%）。將每一份脾細(xì)胞懸液分兩孔加入96孔培養(yǎng)板中，一孔加5μL伴刀豆球蛋白A促細(xì)胞分裂劑，另一孔作為對(duì)照，置于37℃CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h。用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法（MTT法）進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)，加入MTT（5mg/mL）10μL/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4 h。待培養(yǎng)結(jié)束后，離心，吸出上清液，每孔加入100μL二甲基亞砜（DMSO），混勻，使紫色結(jié)晶完全溶解，于波長(zhǎng)570 nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算刺激指數(shù)SI。

式中：SI為刺激指數(shù)；a為ConA組在570 nm處的吸光值；b為對(duì)照組在570 nm處的吸光值。

1.3.7 體液免疫試驗(yàn)

小鼠脫臼致死，取血清。采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定樣品中免疫球蛋白A和免疫球蛋白G的含量。

準(zhǔn)備試劑、樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，加入樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，生物素標(biāo)記二抗和酶標(biāo)試劑，37℃保溫反應(yīng)60min，洗板5次，加入顯色液A、B，37℃顯色10min，加入終止液，10min之內(nèi)讀完OD值（450 nm）。計(jì)算免疫球蛋白含量。

1.3.8 抗氧化活性測(cè)定

小鼠采用摘除眼球的方法取血，3 000 r/min離心10min。獲得血清。之后按照試劑盒的要求測(cè)定小鼠血清中SOD和MDA。丙二醛采用TBA法進(jìn)行測(cè)定?？偝趸锲缁覆捎昧u胺法測(cè)定。

1.3.9 數(shù)據(jù)處理

采用excel2010、origin8.5處理數(shù)據(jù)和SPSS21.0中One-way ANOVA分析，各組數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P＜0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 臟器指數(shù)

臟器指數(shù)的變化見表1。

表1 臟器指數(shù)的變化Table1 The varities of weights of spleen and thymus

實(shí)驗(yàn)過程中，小鼠無死亡現(xiàn)象，活動(dòng)正常，無異?，F(xiàn)象，脫臼處死后，脾臟、胸腺等器官無異常現(xiàn)象。脾臟指數(shù)中，與空白對(duì)照組相比，復(fù)合菌高、中劑量組顯著增加（P＜0.01）；復(fù)合菌-玉米肽高、中劑量組顯著增加（P＜0.01）。胸腺指數(shù)中，復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽均無顯著性差異（P＞0.05）。說明復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽對(duì)脾臟影響顯著，對(duì)胸腺影響差異不顯著。肝臟指數(shù)中，復(fù)合菌中劑量組與對(duì)照組存在顯著差異（P＜0.05）。復(fù)合菌高劑量組與低劑量組與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。復(fù)合菌-玉米肽高劑量組與對(duì)照組比較差異顯著（P＜0.01）。復(fù)合菌低劑量組無明顯差異變化。

2.2 碳粒廓清指數(shù)

碳粒廓清指數(shù)的變化見表2。

表2 碳粒廓清指數(shù)Table2 Carbon granule clearance assay

如表2所示，復(fù)合菌3個(gè)劑量都能夠顯著地提高，復(fù)合菌-玉米肽只有高劑量組能提高小鼠地碳粒廓清指數(shù)，低劑量組與中劑量無法提高該指數(shù)。與空白組相比，復(fù)合菌3個(gè)劑量組存在極顯著差異（P＜0.01），復(fù)合菌-玉米肽只有高劑量組存在顯著差異（P＜0.05），中劑量組和高劑量組無明顯差異（P＞0.05）。證明復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽都能提高碳粒廓清指數(shù)，具有對(duì)細(xì)胞免疫有一定的調(diào)節(jié)，且存在一定的劑量依賴。

2.3 遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)

遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的變化見表3。

表3 遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)Table3 The varities of DHT

遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DHT）屬于Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)，是由T細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥免疫反應(yīng)。當(dāng)皮膚接觸到一些小分子半抗原物質(zhì)，半抗原可與皮膚蛋白結(jié)合形成完全抗原，激活對(duì)抗原敏感的T細(xì)胞，當(dāng)機(jī)體再次接觸致敏原。如表3所示，復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)有一定的影響。復(fù)合菌中劑量組與空白對(duì)照組存在顯著差異（P＜0.01）。復(fù)合菌高劑量組與低劑量組與對(duì)照組差異不顯著。復(fù)合菌-玉米肽高、中、低三個(gè)劑量組與空白組都存在顯著差異（P＜0.01）。在一定的劑量范圍內(nèi)，復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽能夠促進(jìn)小鼠的細(xì)胞免疫，且玉米肽佐劑的加入能夠顯著提高DHT指標(biāo)。

2.4 脾淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)

脾淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)的變化見表4。

表4 脾淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)Table4 Plaque forming assay

如表4所示，復(fù)合菌高劑量組與中劑量組能夠提高脾淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)，與空白對(duì)照組相比，高劑量組存在極顯著差異（P＜0.01）。復(fù)合菌-玉米肽能夠顯著提高脾淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)，與空白對(duì)照組相比，低劑量組存在不顯著差異（P＞0.05），中劑量組和高劑量組存在極顯著差異（P＜0.01）。證明復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽都能提高脾淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)，且隨著劑量的增加，刺激指數(shù)增大，免疫活性增強(qiáng)。

2.5 體液酶聯(lián)免疫

體液酶聯(lián)免疫的變化見表5。

表5 分泌型免疫球蛋白Table5 The varities of IgA and IgG

分泌型球蛋白對(duì)腸道黏膜防御起著重要作用，是防御病原菌在腸道黏膜黏附的第一道防線，對(duì)機(jī)體的健康狀況起著重要的作用。如表5所示，與空白對(duì)照組相比，復(fù)合菌-玉米肽高、中、低劑量組存在顯著性差異（P＜0.01）；復(fù)合菌制劑高、中劑量組與空白對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.01）。說明復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽能夠在一定程度上促進(jìn)免疫球蛋白A。如表5所示，免疫球蛋白G整體呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。與空白對(duì)照組相比，復(fù)合菌高、中劑量組存在極顯著性差異（P＜0.01），復(fù)合菌低劑量組無顯著性差異。復(fù)合菌-玉米肽中劑量組與對(duì)照組相比存在顯著性差異（P＜0.01）。低劑量組無顯著性差異（P＞0.05）。說明玉米肽的加入有助于提高免疫球蛋白G的含量，有助于提高機(jī)體抵御外界致病菌的侵入。

2.6 抗氧化指標(biāo)

小鼠脫臼致死，取血清，按照試劑盒說明書方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?？寡趸笜?biāo)的變化見表6。

表6 抗氧化指標(biāo)Table6 The varities of antioxidation

機(jī)體內(nèi)酶與非酶系統(tǒng)不斷產(chǎn)生能攻擊生物細(xì)胞膜中的多不飽和脂肪酸的氧自由基，從而引起脂質(zhì)的過氧化。脂質(zhì)的過氧化最終形成醛基、羥基、酮基等新的氧自由基。氧化產(chǎn)物過多會(huì)引起核酸、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的聚合，從而具有一定的毒性，對(duì)人體造成傷害。丙二醛（MDA）含量的多少反應(yīng)了機(jī)體的氧化損傷程度，是評(píng)價(jià)機(jī)體代謝的重要指標(biāo)。SOD酶活性是作為評(píng)價(jià)藥物抗衰老的重要指標(biāo)，是生物體體內(nèi)重要的生物酶之一。

如表6所示，復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽的MDA含量總體呈下降趨勢(shì)。與空白對(duì)照組相比，復(fù)合菌高、中低劑量組能夠降低血清中的MDA含量。復(fù)合菌-玉米肽高劑量和中劑量組能夠降低血清中MDA含量。與空白對(duì)照組相比，復(fù)合菌低劑量組存在差異顯著（P＜0.05）。復(fù)合菌-玉米肽制劑高劑量組能夠顯著降低小鼠血清中MDA含量，結(jié)果存在差異性顯著（P＜0.01）。復(fù)合菌中劑量組與對(duì)照組相比存在顯著差異（P＜0.05）。復(fù)合菌-玉米肽中劑量組與對(duì)照組存在極顯著差異（P＜0.01）。說明玉米肽佐劑的加入能夠顯著提高SOD活性。

3 結(jié)論

益生菌具有多種生理功能，不僅能夠有效地調(diào)節(jié)機(jī)體的微生態(tài)平衡，而且能夠提高機(jī)體免疫力，提高抗病性，是一種有效的提高機(jī)體健康的物質(zhì)。雙歧桿菌更是被公認(rèn)為安全無毒的益生菌。但是單一的雙歧桿菌的活性受限，為了更好的提高雙歧桿菌的活性，本試驗(yàn)采用復(fù)合雙歧桿菌，以期能夠更好的提高生物效價(jià)，玉米肽的加入作為免疫增強(qiáng)劑，也能高效地促進(jìn)雙歧桿菌的免疫活性的發(fā)揮。機(jī)體正常菌群在機(jī)體內(nèi)保持著動(dòng)態(tài)平衡，這種動(dòng)態(tài)平衡對(duì)機(jī)體的免疫作用的正常發(fā)揮以及生命活動(dòng)都是起著至關(guān)重要的作用。機(jī)體免疫活性的正常發(fā)揮對(duì)機(jī)體的穩(wěn)定起著重要的作用。玉米肽氨基酸的組成中谷氨酰胺的含量很高，谷氨酰胺是構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸，同時(shí)也是合成核酸的氮源，與組織生長(zhǎng)、修復(fù)密切相關(guān)。雖非必需氨基酸，但在提高機(jī)體免疫力、維持腸道黏膜正常結(jié)果和功能等方面起著重要的作用。淋巴細(xì)胞是重要的免疫器官，脾臟是機(jī)體重要的免疫器官。含有大量的T淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞。所以測(cè)定脾淋巴細(xì)胞的增殖情況對(duì)于研究免疫而言起著重要的作用。碳粒廓清試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽制劑能夠提高碳粒廓清指數(shù)。遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)中，玉米肽的加入提高了復(fù)合雙歧桿菌的刺激T細(xì)胞的能力。脾細(xì)胞細(xì)胞增殖試驗(yàn)中，復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽制劑高劑量結(jié)果呈差異性顯著。能夠有效的促進(jìn)脾淋巴增殖。免疫球蛋白A是機(jī)體內(nèi)較為常見的蛋白。免疫球蛋白A的含量一定程度上反映機(jī)體的免疫情況。復(fù)合菌-玉米肽制劑高劑量組度都能促進(jìn)機(jī)體內(nèi)免疫球蛋白A?？寡趸芰χ饕獪y(cè)定SOD活性與MDA含量，試驗(yàn)結(jié)果表明復(fù)合菌和復(fù)合菌-玉米肽能夠提高SOD活性，降低MDA含量。結(jié)果表明復(fù)合菌與復(fù)合菌-玉米肽制劑有一定的抗氧化能力。雙歧桿菌為常見的益生菌，對(duì)人體起著重要的作用。玉米肽的加入能夠有效地提高雙歧桿菌的免疫活性與抗氧化能力，為接下來的研究提供一定的參考。

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The Effect of Corn Peptide on Immunity Function of Bifidobacriums

ZHANG Zhi1，LIN Xiu-fang1，MA Jian-zhang1，*，ZHENG Xi-qun2，*
（1.Northeast Forestry University，Harbin 150040，Heilongjiang，China；2.Qiqihar University，Qiqihar 161006，Heilongjiang，China）

The research was mainly about the immunity function of complex probiotics（Bifidobacrium Longum＋Bifidobacrium adolescent＋Bifidobacrium animalis）and complex probiotics-corn peptide.Mice were randomly divided into seven groups including blank control group，three groups treated with compound probiotics liquid at different doses and three groups treated with complex probiotics-corn peptide at different doses.Mice（SPF grade from Kunming）were continuously eaten after 30 d.The methods for immunity function were relative to weights of spleen and thymus，carbon granule clearance assay，plaque forming assay，DHT，and Elisa.Through the carbon granule clearance experiment，complex probiotics and complex probiotics-corn peptide have obvious changes compared with the control team.Through the splenic lymphocyte proliferation experiment，complex probiotics and complex probiotics-corn peptide have markedly obvious changes compared with the control team. The experiment showed that complex probiotics and complex probiotics-corn peptide enhanced certain parameter of splenic lymphocyte function.Through DHT experiment，the results implied that complex probiotics-corn peptide have changes compared with the control team.Through the Elisa experiment，the experiment implied that complex probiotics and complex probiotics-corn peptide could enhance IgA.In conclusion，complex probiotics and complex probiotics-corn peptide could be able to enhance mice immunity function.The measures of antioxidation function were the content of MDA and the activity of SOD.The results showed that complex probi－otics and complex probiotics-corn peptide could reduce the content of MDA and improve the activity of SOD. The experiment showed that complex probiotics and complex probiotics-corn peptide had antioxidation function.

corn peptide；probiotics；immunity；antioxidation；effect

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.03.003

2016-11-12

大熊貓國(guó)際資金項(xiàng)目（SG1409）；黑龍江省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（GA13B201）

張智（1964—），女（漢），教授，博士，研究方向：微生物與發(fā)酵工程。

*通信作者：馬建章（1937—），男（漢），教授，博士，研究方向：主要從事野生動(dòng)物生態(tài)管理與自然保護(hù)區(qū)方面的研究；鄭喜群（1963—），男（漢），教授，博士，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品加工及應(yīng)用酶學(xué)。