陸藝，姜保成，費(fèi)建平

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院蘇州九龍醫(yī)院普外科，江蘇 蘇州 215021)

HER2/c-erbB-2蛋白在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義

陸藝，姜保成，費(fèi)建平

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院蘇州九龍醫(yī)院普外科，江蘇 蘇州 215021)

目的探討表皮生長因子受體2(HER2/c-erbB-2)蛋白在胃癌患者癌組織、遠(yuǎn)癌正常胃組織中的表達(dá)及其與患者臨床特征參數(shù)和生存期的關(guān)系。方法選取2012年1月至2015年10月上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院蘇州九龍醫(yī)院普外科手術(shù)治療的88例胃癌患者為研究對(duì)象，采用IHM兩步方法檢測(cè)88例胃癌患者癌組織及26例部分配對(duì)遠(yuǎn)癌正常胃組織中HER2/c-erbB-2的表達(dá)情況。分析胃癌患者癌組織中HER2/c-erbB-2陽性表達(dá)與患者的年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征的關(guān)系；比較HER2/c-erbB-2陽性胃癌患者與陰性患者生存期有無差別。結(jié)果HER2/c-erbB-2蛋白主要在胞膜中表達(dá)，少部分表達(dá)于細(xì)胞漿；HER2/c-erbB-2在癌及遠(yuǎn)癌組織中陽性率分別為27.3%和3.8%，癌組織顯著高于遠(yuǎn)癌組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；HER2/c-erbB-2陽性表達(dá)與腫瘤的浸潤深度和區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.05)；HER2/c-erbB-2陽性和陰性患者中位生存時(shí)間分別為13.8個(gè)月與33.9個(gè)月，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(HR=2.25，95%CI：1.06～4.80，P＜0.05)。結(jié)論HER2/c-erbB-2蛋白可能與胃癌的發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，并可作為預(yù)后不良的分子標(biāo)志物。

胃癌；表皮生長因子受體2；預(yù)后

胃癌臨床上較為常見，來自北美的流行病學(xué)資料顯示，2012年美國胃癌新發(fā)病21 320例，當(dāng)年胃癌死亡10 540例[1]。在我國胃癌的發(fā)病率一直居高不下，農(nóng)村發(fā)病率顯著高于城市，欠發(fā)達(dá)地區(qū)高于發(fā)達(dá)地區(qū)，且近年來發(fā)病率有升高趨勢(shì)。與日本相比，我國胃癌患者確診時(shí)晚期患者比例較高，大多數(shù)患者確診時(shí)已發(fā)生區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差。近年來的研究顯示腫瘤癌基因的過表達(dá)與抑癌基因的低表達(dá)在胃癌的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。近年來的文獻(xiàn)報(bào)道，HER2/c-erbB-2在人多種惡性腫瘤中高表達(dá)，并與患者預(yù)后不良有關(guān)[2-3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月至2015年10月上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院蘇州九龍醫(yī)院普外科手術(shù)治療的88例胃癌患者為研究對(duì)象。采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)88例胃癌患者手術(shù)切除的癌組織及配對(duì)的26例遠(yuǎn)癌正常胃組織中HER2/c-erbB-2蛋白的表達(dá)情況。88例胃癌患者年齡33～78歲，平均（58.3±16.6）歲；男性51例，女性37例；臨床分期Ⅰ/Ⅱ期41例，Ⅲ/Ⅳ47例；腫瘤位于賁門者36例，幽門者38例，位于中部胃體者14例；術(shù)后證實(shí)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者60例，無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者28例。

1.2 儀器設(shè)備 石蠟切片機(jī)（購自德國徠卡公司），顯微鏡（購自日本奧林巴斯公司）、電熱恒溫箱（上海榮珂檢測(cè)儀器有限公司生產(chǎn)），電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療儀器廠)，臺(tái)式離心機(jī)（購自美國貝克曼公司）。

1.3 主要試劑 兔抗人HER2/c-erbB-2多克隆抗體，購自美國Sigma公司；EliVisionlM廣譜染色及DAB顯色試劑盒，均購于中山科技(北京)有限公司。

1.4 免疫組化檢測(cè) EnVision二步法，具體操作是實(shí)驗(yàn)室操作流程說明進(jìn)行，首先常規(guī)進(jìn)行脫蠟并水化，3%過氧化氫處理8 min，用于清除內(nèi)源酶活性，枸櫞酸高壓抗原修復(fù)，試劑A室溫封閉15 min，一抗4℃過夜，二抗37℃溫育20 min，試劑C 37℃溫育10 min，DAB顯色，蘇木素復(fù)染。

1.5 結(jié)果判定[4]兩位資深的病理科醫(yī)師獨(dú)立進(jìn)行閱片，在高倍鏡下選取5個(gè)視野，計(jì)算每個(gè)視野下的HER2/c-erbB-2陽性細(xì)胞比例。陽性細(xì)胞均以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為主。陽性細(xì)胞＜5%為-；陽性細(xì)胞5%～25%為+；陽性細(xì)胞25%～50%為++；陽性細(xì)胞＞50%為+++。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用stata12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用例表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；生存數(shù)據(jù)采用中位數(shù)表示，組間比較采用生存曲線Log-rank檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HER2/c-erbB-2蛋白表達(dá) HER2/c-erbB-2蛋白主要在細(xì)胞膜中表達(dá)，少部分表達(dá)于細(xì)胞漿(圖1)。HER2/c-erbB-2在癌及遠(yuǎn)癌組織中陽性率分別為27.3%和3.8%，癌組織中HER2/c-erbB-2表達(dá)陽性率明顯高于遠(yuǎn)癌組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.43，P＜0.05)。

圖1 HER2/c-erbB-2蛋白在癌組織中的表達(dá)(A:陰性；B：陽性)

2.2 HER2/c-erbB-2蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 HER2/c-erbB-2表達(dá)與腫瘤的浸潤深度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.05)；而與患者的年齡、性別、臨床分期、病理分級(jí)和病變部位無關(guān)(P＞0.05)，見表1。

表1 HER2/c-erbB-2蛋白表達(dá)與與患者臨床特征(例)

2.3 HER2/c-erbB-2表達(dá)與患者預(yù)后 HER2/ c-erbB-2表達(dá)陽性患者的中位生存時(shí)間為13.8個(gè)月，陰性患者為33.9個(gè)月，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義HR=2.25，95%CI：1.06～4.80(P＜0.05)。

圖2 HER2/c-erbB-2陽性與陰性患者生曲線

3 討 論

從GenBank數(shù)據(jù)庫中我們查找HER2/c-erbB-2基因發(fā)現(xiàn)，該基因在人類定位17號(hào)染色體長臂12帶21區(qū)。HER2/c-erbB-2轉(zhuǎn)錄后的mRNA編碼一個(gè)185 kda跨膜的且具有TK活性的蛋白[5]。近年來的研究顯示，HER2/c-erbB-2在人類多種惡性實(shí)體腫瘤組織中呈現(xiàn)表達(dá)水平升高，并與患者腫瘤的惡性程度有關(guān)，陽性表達(dá)患者往往預(yù)后較差，中位生存時(shí)間較短[6-7]。

胃癌是臨床上較為常見的實(shí)體惡性腫瘤之一，也是消化系統(tǒng)最為常見的惡性腫瘤。但胃癌發(fā)生發(fā)展的確切分子機(jī)制仍然不是十分清楚，同時(shí)其預(yù)后并不理想，晚期患者5年生存率較低。既往有研究報(bào)道[8]，HER2/c-erbB-2在胃癌組織中大多呈現(xiàn)高表達(dá)且與患者的預(yù)后不良有關(guān)。豆穎等[8]應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)在78例原發(fā)胃癌及39例正常胃組織中HER2/c-erbB-2基因的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)HER2/c-erbB-2在癌和正常胃細(xì)胞中陽性率分別為23.08%和0，正常細(xì)胞中幾乎不表達(dá)。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)HER2/c-erbB-2與腫瘤部位和大體分型有關(guān)，但與細(xì)胞分化情況無關(guān)(P＞0.05)。因而，作者認(rèn)為HER2/c-erbB-2是否表達(dá)與患者的預(yù)后存在相關(guān)性，可作為預(yù)后的分子標(biāo)志物，并通過分析HER2/ c-erbB-2表達(dá)水平，從而判斷患者是否能從輔助化療中受益。裴波及其同事[4]觀察77例胃癌患者HER2/ c-erbB-2的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)HER2/c-erbB-2在癌組織中的表達(dá)率為10.4%，而在正常胃組織中不表達(dá)，與豆穎等[8]的研究一致。而本研究顯示HER2/c-erbB-2在胃癌組織中陽性率為27.3%，略高于豆穎等[8]和裴波等[4]的結(jié)果，分析原因可能與納入研究患者的臨床病理特征等不完全相同有關(guān)。但我們的研究顯示HER2/ c-erbB-2陽性表達(dá)與患者的腫瘤浸潤深度(P＜0.05)、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)有關(guān)，這與裴波等[4]的研究結(jié)論一致。因此，可以認(rèn)為HER2/c-erbB-2可能與胃癌的發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，但由于樣本量相對(duì)較小，統(tǒng)計(jì)學(xué)效能不高，其相關(guān)性有待大樣本研究進(jìn)一步證實(shí)。同時(shí)我們對(duì)HER2/c-erbB-2表達(dá)與患者的生存期進(jìn)行了對(duì)比研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)HER2/c-erbB-2陽性和陰性患者中位生存時(shí)間分別為13.8個(gè)月和33.9個(gè)月，陽性表達(dá)患者的中位生存時(shí)間顯著短于陰性患者，研究結(jié)果與Uprak等[9]的報(bào)道一致。因此，我們認(rèn)為，HER2/c-erbB-2的陽性表達(dá)可作為判斷胃癌患者預(yù)后不良的腫瘤標(biāo)志物。

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Expression of HER2/c-erbB-2 protein in gastric carcinoma and its clinical significance.

LU Yi,JIANG Bao-cheng, FEI Jian-ping.Department of General Surgery,Suzhou Kowloon Hospital Shanghai Jiao Tong University,School of Medicine,Suzhou 215021,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of epidermal growth factor receptor 2(HER2/c-erbB-2) protein in gastric carcinoma tissue and normal gastric tissue,and to analyze its relationship with clinical parameters and survival time of patients.MethodsEighty-eight patients with gastric carcinoma who received operation therapy from Jan.2012 to Oct.2015 were selected as the research subjects.The expression of HER2/c-erbB-2 protein in the gastric cancer tissue(88 cases)and corresponding normal gastric tissue(26 cases)were evaluated by two step immunohistochemical(IHM)method.The relationships between the HER2/c-erbB-2 protein positive expression in gastric carcinoma and its clinicopathological characteristics such as age,gender,lymph node metastasis were analyzed.ResultsThe HER2/c-erbB-2 protein was mainly expressed in the cell membrane,and a small part was expressed in the cytoplasm. The positive rate in carcinoma tissue was significantly higher than that in normal gastric tissue,27.3%vs 3.8%,and the difference was statistically significant(P＜0.05).The positive expression of HER2/c-erbB-2 was related to the depth oftumor invasion and regional lymph node metastasis(P＜0.05).The median survival time of HER2/c-erbB-2 positive and negative patients were respectively 13.8 months and 33.9 months,and the difference was statistically significant between the two groups(HR=2.25,95%CI:1.06～4.80,P＜0.05).ConclusionHER2/c-erbB-2 protein may be related to occurrence,development,and invasion and metastasis of gastric carcinoma,and can be used as a marker of poor prognosis.

Gastric carcinoma;Epidermal growth factor receptor 2(HER2/c-erbB-2);Prognosis

R732

A

1003—6350（2017）01—0091—03

2016-06-08)

陸藝。E-mail：luyi_jiulong@163.com

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.01.028