李明月，程華，謝鳳姣，羅蒲花

（湖南省邵陽市第一人民醫(yī)院，湖南 邵陽422000）

SOCS1在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥母胎界面的表達(dá)及意義

李明月，程華，謝鳳姣，羅蒲花

（湖南省邵陽市第一人民醫(yī)院，湖南 邵陽422000）

目的 探討細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)負(fù)調(diào)控因子1（SOCS1）在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥 （ICP）母胎界面的表達(dá)以及意義。方法 采用ELISA的方法檢測18例ICP孕婦 （ICP組）與20例晚孕孕婦 （對照組）的胎盤組織勻漿IL-4和TNF-α濃度，采用免疫組化法測定兩組胎盤組織中SOCS1的定位與表達(dá)水平。結(jié)果 ①SOCS1主要表達(dá)于滋養(yǎng)細(xì)胞。②ICP組SOCS1陽性細(xì)胞率顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01）。③ICP組的IL-4表達(dá)水平為 （1.08±0.15）ng／L，顯著低于對照組的 （1.56± 0.32）ng／L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01）；ICP組的TNF-α表達(dá)水平為 （18.37±1.68）ng／L，顯著高于對照組的 （10.59± 1.63）ng／L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01）。④ICP組的TNF-α／IL-4比值為17.01±2.06，顯著高于對照組的6.78±0.54，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01）。結(jié)論 SOCS1表達(dá)水平明顯降低，可能參與了ICP的發(fā)病，這可能與Th1／Th2比例失衡有關(guān)。

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥；胎盤；SOCS1；TNF-α；IL-4

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥 （ICP）是一種妊娠期特有的并發(fā)癥，以妊娠期出現(xiàn)皮膚瘙癢為特點(diǎn)，可導(dǎo)致早產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)等，但病因尚不明確，免疫因素是倍受關(guān)注的病因之一。ICP患者母胎界面的Th1／Th2細(xì)胞因子平衡由正常妊娠的Th2優(yōu)勢向Th1方向偏移，細(xì)胞免疫功能顯著增強(qiáng)，導(dǎo)致胚胎組織被母體排斥。這種 “Th1漂移”成為妊娠免疫耐受的研究熱點(diǎn)。細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)負(fù)調(diào)控因子1（SOCS1）是一種對細(xì)胞因子信號通路具有負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用的蛋白分子，可調(diào)控Th1／Th2細(xì)胞平衡向Th2偏移［1］，SOCS1缺乏可使母體對胎兒發(fā)生免疫排斥，導(dǎo)致妊娠失敗和妊娠并發(fā)癥發(fā)生。SOCS1在ICP發(fā)病機(jī)制中的作用目前未見相關(guān)報(bào)道。本研究通過檢測SOCS1在胎盤組織的表達(dá)及測定胎盤組織勻漿IL－4、TNF－α表達(dá)水平，從母胎界面探討SOCS1在ICP免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制中的可能作用，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月至2016年6月在我院分娩的單胎產(chǎn)婦38例作為研究對象，其中ICP患者18例 （ICP組），正常晚孕20例 （對照組）。兩組孕婦均為擇期剖宮產(chǎn)，對照組剖宮產(chǎn)指征為疤痕子宮、胎位異常。兩組孕婦的孕周、孕齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05），具有可比性。

1.2 ICP診斷 ①臨床表現(xiàn)：孕晚期出現(xiàn)皮膚瘙癢等不適癥狀；②肝功能異常：血清總膽汁酸>10 μmol／L，大多數(shù)ICP的轉(zhuǎn)氨酶輕度至中度升高；部分患者膽紅素增高，很少超過85.5 μmol／L；③病理檢查：ICP患者肝組織活檢見毛細(xì)膽管膽汁淤積、膽栓形成；④分娩后瘙癢癥狀消失，肝功能恢復(fù)正常。

1.3 方法 標(biāo)本采集與處理：胎盤娩出后立即剪取組織兩塊，其中一塊放入10%甲醛中固定，另一塊用生理鹽水按重量 ∶體積＝1∶2.5稀釋，勻漿機(jī)中勻漿，提取上清夜。標(biāo)本的檢測方法均按照試劑盒提供的步驟進(jìn)行。

1.4 結(jié)果判斷 結(jié)果用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定位、定量，SOCS1染色的陽性細(xì)胞為胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕褐色或棕黃色顆粒。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，多個(gè)獨(dú)立樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析F檢驗(yàn)，計(jì)量資料以x ±s表示，比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SOCS1在胎盤上的定位 SOCS1主要表達(dá)于滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿內(nèi)，見圖1、圖2。

圖1 ICP胎盤組織SOCS1蛋白免疫組化染色，呈陰性反應(yīng)

圖2 正常胎盤組織SOCS1蛋白免疫組化染色，呈陽性反應(yīng)

2.2 兩組SOCS1陽性細(xì)胞率比較 ICP組的SOCS1陽性細(xì)胞率顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表1。

表1 兩組SOCS1陽性細(xì)胞率比較 （±s）

表1 兩組SOCS1陽性細(xì)胞率比較 （±s）

組別 例數(shù) 陽性細(xì)胞率（%） t值 P值ICP組 18 0.24±0.61 3.606 0.001對照組 20 0.76±0.05

2.3 兩組IL-4、TNF-α表達(dá)水平比較 ICP組的IL－4水平顯著低于對照組，TNF－α及TNF－α／IL－4均高于ICP組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01）。見表2。

表2 兩組TNF-α及IL-4水平比較 （±s）

表2 兩組TNF-α及IL-4水平比較 （±s）

注：與對照組比較，*P＜0.01。

TNF－α IL－4 TNF－α／IL－4組別 例數(shù) （ng／L） （ng／L）ICP組對照組18 20 18.37±1.68* 1.08±0.15* 17.01±2.06*10.59±1.63 1.56±0.32 6.78±0.54

3 討論

3.1 SOCS1的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制 SOCS1是由細(xì)胞因子誘導(dǎo)產(chǎn)生的負(fù)調(diào)控蛋白，通過抑制細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)機(jī)體對細(xì)胞因子的過度刺激，SOCS1與Th1／Th2平衡調(diào)節(jié)有關(guān)。過敏性紫癜患者的Th1／Th2失衡，表明SOCS1可能參與了Th1／Th2失衡的調(diào)節(jié)［2］。另有研究［3］表明，臍血內(nèi)皮細(xì)胞凋亡與SOCS1在內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)抑制有關(guān)。因此，高SOCS1表達(dá)使Th往Th2方向分化。

3.2 SOCS1在ICP免疫調(diào)節(jié)中的作用 妊娠是個(gè)半同種移植過程，母胎界面的局部免疫會直接地影響妊娠結(jié)局。Th1型細(xì)胞因子對胎盤組織有害，而Th2型細(xì)胞因子對胚胎具有保護(hù)作用，從而使多數(shù)妊娠獲得成功［4］，正常妊娠是一種 “Th2”現(xiàn)象［5］。ICP被認(rèn)為是這種免疫調(diào)節(jié)的失敗［6］，IL－4是重要的Th2型細(xì)胞因子，TNF－α是最主要的Th1型細(xì)胞因子，IL－4和TNF－α在母胎界面的Th平衡中發(fā)揮重要作用。本研究結(jié)果顯示，ICP胎盤勻漿的IL－4表達(dá)水平低于對照組，TNF－α高于對照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01），存在Th1／Th2比例失衡，與相關(guān)報(bào)道［7］一致?？梢?，ICP母胎界面局部，存在“Th1漂移”。

先兆流產(chǎn)患者胎盤表達(dá)SOCS1低于正常早孕者，人早孕母胎界面高表達(dá)SOCS1［8］，同時(shí)，足月分娩前絨毛、絨毛膜見SOCS1等蛋白表達(dá)，分娩后SOCS1等蛋白消失，提示SOCS1蛋白可能與妊娠的維持有關(guān)。本研究測定SOCS1在ICP及正常晚孕胎盤組織的表達(dá)，ICP組SOCS1的表達(dá)低于對照組 （P＜0.01），因此推測，由于SOCS1減少，SOCS1對Th1的抑制減弱，導(dǎo)致Th向Th1偏移，從而使胚胎遭受免疫攻擊、被母體排斥。因此認(rèn)為SOCS1表達(dá)水平可能與ICP密切相關(guān)。

本研究探討了SOCS1在ICP免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制中的作用，認(rèn)為SOCS1表達(dá)的降低可能是ICP的發(fā)病原因之一，其機(jī)制可能與Th1／Th2細(xì)胞因子失衡有關(guān)。是否可以通過補(bǔ)充SOCS1達(dá)到治療ICP的目的值得進(jìn)一步研究。

[1] Kubo M,Hanada T,Yoshimura A.Suppressors of cytokine signaling and immunity[J].Nat Immunol,2003,4(12):1169-1176.

[2] 杜春陽,史永紅,崔立文,等.細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白1對腫瘤壞死因子-α誘導(dǎo)的腎小管細(xì)胞凋亡的影響 [J].中國藥理學(xué)通報(bào), 2011,27(10):1378-1382.

[3] 丁浩,萬磊,李菊香,等.細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子-1表達(dá)下調(diào)對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響 [J].嶺南心血管病雜志,2011,(S1): 227-228.

[4] Laird SM,Tuckerman EM,Cork BA,et al.A review of immunecells and molecules in women with recurrent miscarriage outline[J].Hum Reprod Update,2003,9(2):163-174.

[5] Xing CY,Gui SQ.Effect of IFN-γ/IL-10 on IL-10 receptor expression of decidual stromal cells in early pregnancy[J].Reprod Contracep,2006,17(2):65.

[6] 梁輝標(biāo),呂杰強(qiáng).妊娠期肝內(nèi)膽汁瘀積癥肝功能、炎癥細(xì)胞因子變化臨床分析 [J].中國婦幼保健,2016,31(1):55-57.

[7] 李明月,張麗娟.SOCS3在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥母胎界面的表達(dá)及意義 [J].中華婦產(chǎn)科雜志,2010,45(6):406-410.

[8] 邢長英,歸綏琪,王海燕.人早孕母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表達(dá) [J].中國免疫學(xué)雜志,2006,22(6):538-544.

（責(zé)任編輯：何華）

Expression and Significance of SOCS1 in Placenta of Intrahepatic Cholestasis during Pregnancy

LI Mingyue,CHENG Hua,XIE Fengjiao,LUO Puhua(Shaoyang First People's Hospital,Shaoyang 422000,China)

ObjectiveTo explore the expression and significance of suppressor of cytokine singnaling-1(SOCS1)in the placenta of intrahepatic cholestasis during pregnancy(ICP).MethodsThe samples were obtained from 18 cases of ICP pregnant women(ICP group) and 20 cases of normal later pregnant women(control group),and the levels of IL-4 and TNF-α of placenta homogenate were detected by ELISA.The expression level and localization of SOCS1 in the placenta were examined by immunohistochemical method.Results①The SOCS1 was mainly expressed in the chorion cells.②The SOCS1 positive cell rate of ICP group was significantly lower than that of control group,with statistical difference(P＜0.01).③The expression level of IL-4 of ICP group was(1.08±0.15)ng/L,significantly lower than (1.56±0.32)ng/L of control group,with statistical difference(P＜0.01).The TNF-α level of ICP group was(18.37±1.68)ng/L, significantly higher than(10.59±1.63)ng/L of control group,with statistical difference(P＜0.01).④The ratio of TNF-α/IL-4 of ICP group was 17.01±2.06,significantly higher than 6.78±0.54 of control group,with statistical difference(P＜0.01).ConclusionsThe expression level of SOCS1 significantly decreases,which means that SOCS1 probably plays a role in the pathogenesis of ICP and is relative with the disequilibrium of Th1/Th2.

Intrahepatic cholestasis during pregnancy;Placenta;SOCS1;TNF-α;IL-4

R714.2

A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.01.0035

2016－09－08

2016-11-30

李明月 （1977－），湖南邵陽人，碩士研究生學(xué)歷，副主任醫(yī)師，研究方向：圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)。