王正江, 楊鴻梅

(江蘇省鹽城市第一人民醫(yī)院 消化內(nèi)科, 江蘇 鹽城, 224001)

結(jié)直腸癌中SOX9的表達及臨床意義

王正江, 楊鴻梅

(江蘇省鹽城市第一人民醫(yī)院 消化內(nèi)科, 江蘇 鹽城, 224001)

結(jié)直腸癌; SOX9; 病理; 免疫組化

SOX是一類SRY相關(guān)基因構(gòu)成的控制發(fā)育的基因家族，編碼一系列SOX家族的轉(zhuǎn)錄因子，其所有成員的共同特點是含有一個高度保守的HMG-box DNA結(jié)合域。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)SOX9的異常表達與許多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后相關(guān)。結(jié)直腸癌(CRC)的發(fā)病率和病死率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中僅次于胃癌、食管癌和原發(fā)性肝癌。本實驗采用免疫組織化學(xué)方法檢測結(jié)直腸癌組織中SOX9的表達情況，并分析與患者臨床和病理特性的相關(guān)性，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 組織標本

收集2013年5月—2013年10月189例鹽城市第一人民醫(yī)院結(jié)直腸腺癌術(shù)后經(jīng)HE染色確診的高、中、低分化標本，其中男109例，女80例，年齡22～89歲，平均63.3±10.42歲。剔除術(shù)前曾接受放療及化療患者。TNM分期依照UICC/AJCC結(jié)直腸癌分期(第7版)。

1.2 免疫組織化學(xué)

根據(jù)UltraSensitiveTMS-P超敏試劑盒(Maixin-bio)說明書操作。組織標本蠟塊行3 μm切片，常規(guī)二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水，對組織抗原進行相應(yīng)的修復(fù)。一抗SOX9(1∶1 000，ab185966)。陰性對照以PBS代替。DAB顯色，蘇木精復(fù)染。SOX9定位于細胞核，陽性染色為棕黃色; 根據(jù)核染色強度和核陽性細胞百分比進行判斷。強度為0(無染色), 1(弱染色), 2(中度染色), 3(強染色); 核陽性細胞百分比為0(無), 1(<10%), 2(10%～50%), 3(51%～80%), 4(>80%)。染色指數(shù)從0到12(核染色強度和核陽性細胞百分比相乘), 0～6低表達, 8～12高表達。由2位高年資病理科醫(yī)師進行獨立閱片，以雙盲法確定評分。

2 結(jié) 果

2.1 結(jié)直腸癌組織中SOX9蛋白免疫組化結(jié)果

SOX9表達陽性呈棕黃色顆粒，主要位于癌細胞核染色，在癌細胞質(zhì)無染色。結(jié)果顯示189例結(jié)直腸癌組織標本中, SOX9陽性表達率為37.57%(71/189)，癌旁細胞中偶見陽性細胞，正常組織細胞中未見陽性細胞。

2.2 SOX9表達與臨床病理參數(shù)相關(guān)性

分析189例結(jié)直腸癌組織標本中SOX9高表達組和低表達組臨床病理變量間關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)癌組織中SOX9表達與腫瘤大小、浸潤深度、TNM分期和淋巴節(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性(P<0.05)。見表1。

3 討 論

SOX基因家族是在動物中發(fā)現(xiàn)的一類新的編碼轉(zhuǎn)錄因子的基因家族，參與性別決定、骨組織的發(fā)育、血細胞生成、神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、晶狀體的發(fā)育等多種早期胚胎發(fā)育過程。有相關(guān)研究[1]發(fā)現(xiàn), SOX9基因的突變還可引起結(jié)直腸癌, SOX17基因的低表達對于結(jié)腸癌的生長和擴散具有重要作用[2]。SOX7表達下調(diào)可能與結(jié)腸直腸癌的發(fā)生、發(fā)展有一定關(guān)系[3]。SOX9是軟骨發(fā)育和睪丸發(fā)育的主要調(diào)節(jié)者，也在腎、心、腦發(fā)育過程中起作用，在肺腺癌組織中mRNA高表達[4], 在胰腺癌組織中表達上調(diào)[5]。調(diào)控胰腺腫瘤發(fā)生的ERBB通路[6], 是胰腺癌發(fā)生的關(guān)鍵因素[7], 參與胰腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀黏液性腫瘤惡性進展[8]，可作為胰腺導(dǎo)管腺癌預(yù)后標志物[9]，且與乳腺癌預(yù)后相關(guān)[10], 但其與結(jié)直腸癌發(fā)生的關(guān)系尚不明確。

本實驗結(jié)果顯示, SOX9陽性表達率為37.57%。進一步分析其表達與臨床病理特征關(guān)系，發(fā)現(xiàn)SOX9表達與腫瘤大小、浸潤深度、TNM分期和淋巴節(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性(P<0.05), 與目前相關(guān)研究[11]相似，提示SOX9可能是結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展中的危險因素之一，可作為判斷結(jié)腸癌惡性程度和評價患者預(yù)后或診斷的指標。

目前研究表明SOX家族是通過作為轉(zhuǎn)錄因子在信號通路下游發(fā)揮作用而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展，由此可推測它可能并不是一個直接的致癌或抑癌基因。本研究認為SOX9在一定程度上可反映結(jié)直腸癌的惡性程度和預(yù)后，隨著對SOX基因結(jié)直腸癌關(guān)系研究的不斷深入，將有利于尋找更好的預(yù)測指標和干預(yù)靶點。

表1 SOX9在結(jié)直腸癌中的表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

[1] Blache P, van de Wetering M, Duluc I, et al. SOX9 is an intestine crypt transcription factor, is regulated by the Wnt pathway, and represses the CDX2 and MUC2 genes[J]. J Cell Biol, 2004, 166(1): 37-47.

[2] Sinner D, Kordich J J, Spence J R, et al. Sox17 and Sox4 differentially regulate β-catenin/T-cell factor activity and proliferation of colon carcinoma cell[J]. Mol Cell Biol, 2007, 27 (22): 7802-15.

[3] Takash W, Caizares J, Bonneaud N, et al. SOX7 transcrition factor: sequence, chromosomal localissation, expression, transactivation and interence with Wnt signaling[J]. Nucleic Acids Res, 2001, 29(21): 4274-83.

[4] Capaccione K M, Hong X, Morgan K M, et al. Sox9 mediates Notch1-induced mesenchymal features in lung adenocarcinoma[J]. Oncotarget, 2014, 5(11): 3636-50.

[5] Camaj P, Jckel C, Krebs S, et al. Hypoxia-independent gene expression mediated by SOX9 promotes aggressive pancreatic tumor biology[J]. Mol Cancer Res, 2014, 12(3): 421-32.

[6] Grimont A, Pinho A V, Cowley M J, et al. SOX9 regulates ERBB signalling in pancreatic cancer development[J]. Gut, 2015, 64(11): 1790-9.

[7] Seymour P A. Sox9: a master regulator of the pancreatic program[J]. Rev Diabet Stud, 2014, 11(1): 51-83.

[8] Camaj P, Jackel C, Krebs S, et al. Hypoxia-independent gene expression mediated by SOX9 promotes aggressive pancreatic tumor biology[J]. Mol Cancer Res, 2014, 12(3): 421-32.

[9] Xia S, Feng Z, Qi X, et al. Clinical implication of Sox9 and activated Akt expression in pancreatic ductal adenocarcinoma[J]. Med Oncol, 2015, 32(1): 358-363.

[10] Riemenschnitter C, Teleki I, Tischler V, et al. Stability and prognostic value of Slug, Sox9 and Sox10 expression in breast cancers treated with neoadjuvant chemotherapy[J]. Springer plus, 2013, 2: 695-699.

[11] Bruun J, Kolberg M, Nesland J M, et al. Prognostic Significance of β-Catenin, E-Cadherin, and SOX9 in Colorectal Cancer: Results from a Large Population-Representative Series[J]. Front Oncol, 2014, 4: 118.

2015-12-20

R 735.3

A

1672-2353(2017)01-198-02

10.7619/jcmp.201701075