陳 玲， 曹明杰，謝 強(qiáng)， 徐添天

·論著·

安徽省滁州市兒童醫(yī)院2014年臨床分離菌的耐藥性監(jiān)測

陳 玲， 曹明杰，謝 強(qiáng)， 徐添天

目的 了解滁州市兒童醫(yī)院2014年常見病原菌的臨床分布及耐藥情況。方法 回顧性分析各類臨床標(biāo)本分離菌的分布及耐藥性。結(jié)果 2014年共分離細(xì)菌382株，其中革蘭陽性菌143株，占37.4 %； 革蘭陰性菌239株，占62.6 %。居前5位的細(xì)菌分別是：大腸埃希菌（18.8 %）、肺炎克雷伯菌（16.8 %）、凝固酶陰性葡萄球菌（13.1 %）、肺炎鏈球菌（9.4 %）和金黃色葡萄球菌（9.2 %）。葡萄球菌屬中MRSA和MRCNS的檢出率分別為28.6 %和76.0 %。葡萄球菌屬中未見達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬古霉素的耐藥株。腸球菌屬中糞腸球菌和屎腸球菌對達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬古霉素全部敏感。未檢出青霉素耐藥肺炎鏈球菌。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）菌株的檢出率分別為58.3 %和28.1 %。腸桿菌科細(xì)菌對碳青霉烯類最敏感，188株腸桿菌科細(xì)菌中檢出3株碳青霉烯類耐藥株，檢出率為1.6 %。銅綠假單胞菌除對哌拉西林的耐藥率為13.3 %和對左氧氟沙星的耐藥率為6.7 %外，對其余所測抗菌藥物全部敏感。不動(dòng)桿菌屬對碳青霉烯類的敏感率最高，僅檢出1株耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌，檢出率為4.3 %。結(jié)論 2014年該院臨床分離菌以革蘭陰性菌為主，多重耐藥率較高，尤其是碳青霉烯類耐藥腸桿菌料細(xì)菌的出現(xiàn)，對臨床抗感染治療構(gòu)成嚴(yán)重威脅，應(yīng)引起足夠重視，加強(qiáng)耐藥性監(jiān)測。

耐藥性； 多重耐藥； 抗菌藥物

近年來，隨著廣譜抗菌藥物在臨床上的廣泛使用，導(dǎo)致細(xì)菌對常用抗菌藥物的耐藥率逐年增高，多重耐藥和廣泛耐藥株在臨床上不斷出現(xiàn)，細(xì)菌耐藥問題已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。本院同時(shí)參加全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)和安徽省細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)的監(jiān)測工作，為臨床合理使用抗菌藥物提供參考依據(jù)?，F(xiàn)將滁州市第一人民醫(yī)院附屬兒童醫(yī)院2014年臨床分離菌的分布及其耐藥性監(jiān)測結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 收集本院附屬兒童醫(yī)院2014年1－12月的臨床分離菌382株，剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株。

1.1.2 藥敏紙片和培養(yǎng)基 藥敏紙片和藥敏試驗(yàn)用 MH瓊脂培養(yǎng)基均購自英國OXOID公司，E試驗(yàn)條購自法國生物梅里埃公司。

1.1.3 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853、金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923、糞腸球菌ATCC 29212、流感嗜血桿菌ATCC 49247和肺炎鏈球菌ATCC 49619，均購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2 方法

1.2.1 菌株鑒定和藥敏試驗(yàn) 采用德國西門子公司的MicroScanWalkAway 96 PLUS全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀及配套的NC50和PC33檢測卡對臨床菌株進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)。補(bǔ)充藥敏試驗(yàn)（頭孢唑林、頭孢曲松和厄他培南）采用紙片擴(kuò)散法。藥敏試驗(yàn)結(jié)果根據(jù)CLSI 2014標(biāo)準(zhǔn)判斷[1]。

1.2.2 甲氧西林耐藥葡萄球菌（MRS）和產(chǎn)ESBL株的檢測 MicroScan WalkAway 96 PLUS全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀根據(jù)鑒定和藥敏結(jié)果自動(dòng)判斷MRS和產(chǎn)ESBL株。

1.2.3 肺炎鏈球菌青霉素E試驗(yàn) 用1 μg /片的苯唑西林紙片測定，抑菌圈直徑≥20 mm為青霉素敏感肺炎鏈球菌，當(dāng)抑菌圈直徑≤19 mm時(shí)，用青霉素E試驗(yàn)測其MIC值，按CLSI 2014腦膜炎和非腦膜炎肺炎鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)，分別判定敏感、中介和耐藥株。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

使用WHONET 5.6軟件對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分布

2014年共收集臨床非重復(fù)菌株382株，其中革蘭陽性菌143株，占37.4 %； 革蘭陰性菌239株，占62.6 %；住院患者分離株占99.5 %，門診患者分離株占0.5 %；菌株來源于痰液、血液、尿液、分泌物、糞便和咽拭子，分別為293株（76.7 %）、60株（15.7 %）、17株（4.5 %）、8株（2.1 %）、2株（0.5 %）和2株（0.5 %）。菌株分布見表1。其中，痰液標(biāo)本中分離菌主要為大腸埃希菌64株（21.8 %）、肺炎克雷伯菌60株（20.5 %）、肺炎鏈球菌35株（11.9 %）和金葡菌32株（10.9 %）；血液標(biāo)本中分離菌主要為凝固酶陰性葡萄球菌47株（78.3 %）、糞腸球菌2株（3.3 %）和大腸埃希菌2株（3.3 %）；尿液標(biāo)本中分離菌主要為屎腸球菌7株（41.2 %）、大腸埃希菌4株（23.5 %）和肺炎克雷伯菌2株（11.8 %）。

表1 2014年臨床分離菌株的分布Table 1 Distribution of clinical isolates in 2014

表1 （續(xù)）Table 1 （continued）

2.2 主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥率

2.2.1 葡萄球菌屬 葡萄球菌屬中MRSA和MRCNS的檢出率分別為28.6 %和76.0 %。葡萄球菌屬細(xì)菌對達(dá)托霉素、萬古霉素和利奈唑胺全部敏感， MRSA除對慶大霉素和四環(huán)素的耐藥率低于MSSA，對各類測試藥物的耐藥率高于MSSA。MRCNS對各類測試藥物的耐藥率高于MSCNS，MSCNS對測試抗菌藥物的敏感性較好，MRCNS對莫西沙星和利福平的耐藥率均較低，＜16 %，而對奎奴普丁-達(dá)福普汀的耐藥率僅為2.6 %。見表2。

2.2.2 腸球菌屬 14株腸球菌屬細(xì)菌中屎腸球菌8株，占57.1 %；糞腸球菌4株，占28.6 %；其他腸球菌2株，占14.3 %。腸球菌屬細(xì)菌對萬古霉素、利奈唑胺和達(dá)托霉素全部敏感。8株屎腸球菌對氨芐西林、青霉素、紅霉素、左氧氟沙星和環(huán)丙沙星全耐藥，對高濃度鏈霉素和呋喃妥因均敏感；4株糞腸球菌對氨芐西林、青霉素、呋喃妥因和利福平全敏感，3株（3/4）對左氧氟沙星和環(huán)丙沙星敏感。

表2 葡萄球菌屬細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus isolates to antimicrobial agents

2.2.3 肺炎鏈球菌 共分離36株肺炎鏈球菌，對青霉素100 %敏感。具體藥敏結(jié)果見表3。

2.3 主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率

2.3.1 腸桿菌科細(xì)菌 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBL菌株的檢出率分別為58.3 %和28.1 %。兩者對大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBL株。本次監(jiān)測中檢出3株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌（CRE）（對亞胺培南和美羅培南中任一種藥物耐藥者），檢出率為1.6 %。

表3 肺炎鏈球菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility of S. pneumoniae strains to antimicrobial agents

大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和其他腸桿菌科細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥率見表4。

2.3.2 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌 銅綠假單胞菌除對哌拉西林的耐藥率為13.3 %和對左氧氟沙星的耐藥率為6.7 %外，對其余所測抗菌藥物全敏感。不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌中的鮑曼不動(dòng)桿菌和洛菲不動(dòng)桿菌對所測抗菌藥物的敏感率較高，僅檢出1株耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌，檢出率為4.3 %，見表5。

表4 腸桿菌科細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents

3 討論

本次監(jiān)測結(jié)果顯示，2014年滁州市兒童醫(yī)院共分離出非重復(fù)菌株382株，其中革蘭陽性菌占37.4 %； 革蘭陰性菌占62.6 %。細(xì)菌分布前5位的分別是：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌和金葡菌。肺炎鏈球菌是引起兒童肺炎的主要病原菌，檢出率為9.4 %，明顯高于滁州地區(qū)2013年細(xì)菌耐藥監(jiān)測的結(jié)果，其檢出率僅為0.4 %[2]。

葡萄球菌中MRSA和MRCNS的檢出率分別為28.6 %和76.0 %，均低于2014年CHINET監(jiān)測數(shù)據(jù)的44.6 %和83.0 %[3]。本結(jié)果中，MRCNS主要來自新生兒病區(qū)的血培養(yǎng)標(biāo)本，由于新生兒體重較輕，所以來自新生兒病區(qū)的血培養(yǎng)均為單側(cè)單瓶送檢，結(jié)合臨床和再次送檢的結(jié)果顯示，MRCNS存在外源性污染的可能性。本結(jié)果中的MRSA主要來自痰液標(biāo)本，菌株是否存在克隆播散，有待進(jìn)一步研究。監(jiān)測顯示MRSA對常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于MSSA，未檢出對達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬古霉素耐藥的葡萄球菌，葡萄球菌對喹諾酮類、利福平和甲氧芐啶-磺胺甲唑保持著較高的敏感性，這些藥物可用于葡萄球菌感染的經(jīng)驗(yàn)性治療用藥，但喹諾酮類禁用于兒童患者。腸球菌屬中未檢出耐萬古霉素菌株，屎腸球菌對常用抗菌藥物（除達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬古霉素外）的耐藥率明顯高于糞腸球菌，這與秦惠宏等[4]報(bào)道一致。本次共檢出肺炎鏈球菌36株，未發(fā)現(xiàn)對青霉素耐藥的菌株。

表5 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents（%）

本結(jié)果中，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBL的檢出率分別為58.3 %和28.1 %，低于有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[4-5]。目前碳青霉烯類藥物對腸桿菌科細(xì)菌仍保持著高度活性，但隨著該類藥物在臨床上的廣泛使用，CRE也逐年增加，尤其以耐碳青霉烯類的肺炎克雷伯菌最為常見[6]。本次監(jiān)測中共檢出3株CRE，檢出率為1.6 %，顯著低于2014年CHINET的監(jiān)測數(shù)據(jù)[3]。產(chǎn)ESBL的檢出率和CRE的檢出率均較低，這可能與兒童患者所使用的抗菌藥物較單一，使用較規(guī)范有關(guān)。

不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌，在滁州兒童醫(yī)院以銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌屬檢出率最高。本次結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌除對哌拉西林的耐藥率為13.3 %和對左氧氟沙星的耐藥率為6.7 %外，對其余所測抗菌藥物全部敏感；不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌中的鮑曼不動(dòng)桿菌和洛菲不動(dòng)桿菌對所測抗菌藥物的敏感率較高，僅檢出1株耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌，檢出率為4.3 %。

本次監(jiān)測結(jié)果表明，2014年滁州兒童醫(yī)院分離菌對抗菌藥物產(chǎn)生了不同程度的耐藥，同時(shí)也檢出了碳青霉烯類耐藥的腸桿菌科細(xì)菌和鮑曼不動(dòng)桿菌，尤其CRE的出現(xiàn)，應(yīng)引起高度重視。所以，臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物，加強(qiáng)手衛(wèi)生和多重耐藥菌患者的隔離，延緩多重耐藥菌的產(chǎn)生和傳播。

[1] Clinical and Laboratory Standards Institute （CLSI） . Performance standards for Antimicrobial susceptibility testing [S]. 2014， M100-S24.

[2] 謝強(qiáng)，曹明杰，陶良萍，等. 安徽省滁州地區(qū)2013年細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療雜志，2015，15（2）：167-170.

[3] 胡付品，朱德妹， 汪復(fù)，等. 2014年CHINET中國細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療雜志，2015，15（5）：401-410.

[4] 秦惠宏，孔菁， 王春，等. 2012年上海市兒童醫(yī)院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J]. 中國感染與化療雜志，2015，15（2）：113-119.

[5] 楊青，陳曉，孔海深，等. Mohnarin 2011年度報(bào)告：0～14歲兒童細(xì)菌耐藥監(jiān)測 [J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22（24）：5488-5492.

[6] PENA I， PICAZO JJ， RODRíGUEZ-AVIAL C， et al. Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae in a tertiary hospital in Madrid， Spain： high percentage of colistin resistance among VIM-1-producing Klebsiella pneumoniae ST11 isolates [J]. Int J Antimicrob Agents ，2014，43（5）：460-464.

Surveillance of antimicrobial resistance in the clinical isolates fr om Children's Hospital of Chuzhou during 2014

CHEN Ling, CAO Mingjie, XIE Qiang, XU Tiantian. （Department of Laboratory Medicine, Chuzhou First Hospital, Chuzhou Anhui 239000, China）

Objective To investigate the distribution and antimicrobial resistance of the clinical isolates from Children's Hospital of Chuzhou during 2014. Methods A retrospective analysis was conducted with the bacterial strains isolated from various clinical specimens in 2014. Results A total of 382 clinical isolates were collected during 2014, of which gram positive organisms and gram negative organisms accounted for 37.4 % and 62.6 %, respectively. The top 5 most frequently isolated microorganisms were E. coli (18.8 %), K. pneumoniae (16.8 %), coagulase negative Staphylococcus (13.1 %), S. pneumoniae (9.4 %) and S. aureus (9.2 %). The prevalence of MRSA was 28.6 % in S. aureus and the prevalence of MRCNS was 76 % in CNS. All staphylococcal strains were susceptible to daptomycin, linezolid and vancomycin. All the E. faecalis and E. faecium isolates were sensitive to daptomycin, linezolid and vancomycin. All the S. pneumoniae strains were susceptible to penicillin. The prevalence of extended spectrumlactamases (ESBLs) positive strains was 58.3 % in E. coli and 28.1 % in K. pneumoniae. The Enterobacteriaceae strains were highly sensitive to carbapenems. Only 3 (1.6 %) carbapenem-resistant strains were identified in the Enterobacteriaceae isolates. About 13.3 % and 6.7 % of the P. aeruginosa isolates were resistant to piperacillin and levof oxacin, respectively. All the P. aeruginosa strains were sensitive to the other antimicrobial agents. The percentage of carbapenem-resistant Acinetobacter strains was lower than 10 %. Only one carbapenem-resistant A. baumannii strain was identif ed. Conclusions Gram negative microorganisms account for most part of the clinical bacterialisolates in 2014. The antimicrobial resistance is still very serious in this hospital, especially the emergence of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, which is of great concern.

antimicrobial resistance; multi-drug resistance; antimicrobial agent

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 01-0037-05

10.16718/j.1009-7708.2017.01.007

2015-10-26

2016-07-29

安徽省滁州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽滁州 239000。

陳玲（1967－），女，本科，副主任檢驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)診斷方面的研究。

陳玲，E-mail:342263920@qq.com。