劉少武，常秀輝，班蘭鳳，宋玉泉，李 斌

（沈陽中化農(nóng)藥化工研發(fā)有限公司，新農(nóng)藥創(chuàng)制與開發(fā)國家重點實驗室，沈陽 110021）

◆農(nóng)藥應(yīng)用◆

4種魚尼丁受體類殺蟲劑活性研究

劉少武，常秀輝，班蘭鳳，宋玉泉，李 斌

（沈陽中化農(nóng)藥化工研發(fā)有限公司，新農(nóng)藥創(chuàng)制與開發(fā)國家重點實驗室，沈陽 110021）

采用葉片飼喂法，在處理后72 h，測定了4種魚尼丁受體類殺蟲劑對3種鱗翅目害蟲（黏蟲、甜菜夜蛾、小菜蛾）的活性，為其合理使用提供依據(jù)。試驗結(jié)果表明：四氯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺對3種鱗翅目幼蟲的活性較高，均高于氟苯蟲酰胺和溴氰蟲酰胺的活性；4種魚尼丁受體類殺蟲劑對小菜蛾卵基本無活性；在不同亞致死劑量下，4種魚尼丁受體類殺蟲劑處理小菜蛾后，可使小菜蛾幼蟲的體重降低，發(fā)育速度變緩。應(yīng)用該類殺蟲劑防治鱗翅目害蟲的最佳時期應(yīng)為卵孵化盛期至低齡幼蟲活動期。不同亞致死劑量的4種魚尼丁受體類殺蟲劑處理小菜蛾后，均能對小菜蛾幼蟲的正常生長產(chǎn)生影響。

魚尼丁受體；殺蟲劑；活性測定；鱗翅目；四氯蟲酰胺；氯蟲苯甲酰胺

魚尼丁受體（ryanodine receptor，RyR）是一類最主要的Ca2+釋放通道，因能與植物堿魚尼丁（ryanodine）發(fā)生高親和性結(jié)合，故得名魚尼丁受體。魚尼丁作為殺蟲劑已有幾十年的歷史，研究證明，魚尼丁是通過作用于魚尼丁受體而產(chǎn)生殺蟲效果的，但由于魚尼丁對人畜的毒性很高，因而限制了其作為殺蟲劑的使用[1]。近年來，以魚尼丁受體為靶標的殺蟲劑研究取得了突破性進展，日本農(nóng)藥株式會社開發(fā)的殺蟲劑氟苯蟲酰胺（flubendiamide）于2006年成功上市，杜邦公司相繼開發(fā)出氯蟲苯甲酰胺（chlorantraniliprole）和溴氰蟲酰胺（cyantraniliprole）。沈陽化工研究院以氯蟲苯甲酰胺為先導(dǎo)，經(jīng)過結(jié)構(gòu)修飾于2008年發(fā)現(xiàn)高活性化合物四氯蟲酰胺（代號為SYP-9080），并于2014年成功上市。這些產(chǎn)品的相繼問世引起了人們對魚尼丁受體類殺蟲劑的再次關(guān)注。本研究以黏蟲、甜菜夜蛾、小菜蛾等3種鱗翅目昆蟲為生測靶標，對4種魚尼丁受體類殺蟲劑的生物活性進行了測定，旨在為這一類殺蟲劑的合理使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

10%四氯蟲酰胺SC，沈陽科創(chuàng)化學(xué)品有限公司；20%氯蟲苯甲酰胺SC、10%溴氰蟲酰胺OD，美國杜邦公司；20%氟苯蟲酰胺WG，日本農(nóng)藥株式會社。

黏蟲（Mythimna seperata）3齡幼蟲；甜菜夜蛾（Spodoptera exigua Hübner）3齡幼蟲；小菜蛾（Plutella xylostella）卵、2齡幼蟲、3齡幼蟲。

1.2 試驗方法

1.2.1 幼蟲活性測定方法

選取新鮮的玉米葉片，剪成約3 cm長的葉段，采用airbrush噴霧器，將配制好的不同藥劑的藥液，按從低濃度到高濃度的順序均勻噴到玉米葉段表面，每葉段約1.5 mL。再將處理過的玉米葉段置于載有濾紙的培養(yǎng)皿中，自然陰干后將大小一致的3齡黏蟲幼蟲轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)皿中，每皿10頭，每處理3次重復(fù)。放置于恒溫、恒濕的觀察室內(nèi)，72 h后進行調(diào)查。調(diào)查時記錄每個處理的死、活蟲數(shù)，并利用DPS數(shù)據(jù)處理軟件計算出不同藥劑的毒力回歸方程及LC50值、LC90值，并依據(jù)LC50值評價4種魚尼丁受體類殺蟲劑的相對毒力指數(shù)[2]。

甜菜夜蛾受藥載體采用直徑為2 cm的甘藍葉碟，其它處理方法及評價方法同黏蟲方法。

小菜蛾受藥載體采用小蘿卜菜苗，小菜蛾幼蟲分為2齡和3齡幼蟲，其它處理方法和評價方法同黏蟲。

1.2.2 小菜蛾卵活性測定方法

將新鮮的盆栽小蘿卜菜苗放到小菜蛾成蟲產(chǎn)卵籠中，24 h后取出，選取載有小菜蛾卵的小蘿卜菜苗并計數(shù)上面的卵粒數(shù)，然后采用airbrush噴霧器，將配制好的不同藥劑的藥液，按從低濃度到高濃度的順序均勻噴到小蘿卜菜苗上，自然陰干后放到載有濾紙的培養(yǎng)皿中，每處理3次重復(fù)。放置于恒溫、恒濕的觀察室內(nèi)，96 h后調(diào)查卵孵化情況，記錄每個處理未孵化的卵粒數(shù)，并用abbot公式計算校正未孵化率。

1.2.3 小菜蛾生長發(fā)育影響測定方法

首先選取大小一致的新鮮小蘿卜菜苗，采用airbrush噴霧器，根據(jù)活性測定結(jié)果將配制好的不同藥劑的藥液（LC10值、LC40值），均勻噴到小蘿卜菜苗上，自然陰干后放到載有濾紙的培養(yǎng)皿中，然后將大小一致的3齡小菜蛾幼蟲轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)皿中，轉(zhuǎn)接前進行稱重，每皿10頭，每處理5次重復(fù)。處理后每隔24 h觀察1次小菜蛾幼蟲的生長發(fā)育情況，直至化蛹，72 h后觀察記錄小菜蛾幼蟲死亡情況并稱重，用abbot公式計算校正死亡率[3]。采用DPS數(shù)據(jù)處理軟件進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 殺蟲劑對不同靶標幼蟲活性測定結(jié)果

4種魚尼丁受體類殺蟲劑對黏蟲、甜菜夜蛾、小菜蛾的活性見表1。

試驗結(jié)果表明:4種魚尼丁受體類殺蟲劑對3種鱗翅目幼蟲均有較高的活性，其中四氯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺對3種鱗翅目幼蟲的活性較高，均高于氟苯蟲酰胺和溴氰蟲酰胺的活性。四氯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺對黏蟲的LC50值分別為0.164 2 mg/L和0.140 2 mg/L，對甜菜夜蛾的LC50值分別為0.689 6 mg/L和0.512 7 mg/L，對2齡小菜蛾的LC50值分別為0.062 1 mg/L和0.059 3 mg/L，對3齡小菜蛾的LC50值分別為0.165 7 mg/L和0.148 6 mg/L。從對不同齡期幼蟲的活性看，4種魚尼丁受體類殺蟲劑對2齡小菜蛾幼蟲的活性均高于對3齡幼蟲的活性。

表1 4種魚尼丁受體類殺蟲劑對3種鱗翅目幼蟲活性測定結(jié)果

2.2 殺蟲劑對小菜蛾卵活性測定結(jié)果

表2列示了殺蟲劑對小菜蛾卵的活性測定結(jié)果。

表2 4種魚尼丁受體類殺蟲劑對小菜蛾卵活性測定結(jié)果

這類殺蟲劑在供試濃度下對小菜蛾卵基本沒有活性，應(yīng)用魚尼丁受體類殺蟲劑防治害蟲時，最佳使用時期應(yīng)是卵孵化盛期至低齡幼蟲活動期，在此階段使用既能保證藥劑的作用效果，也有利于延緩藥劑抗性的產(chǎn)生，并能達到減量增效的使用目的。

2.3 殺蟲劑對小菜蛾生長發(fā)育影響測定結(jié)果

4種魚尼丁受體類殺蟲劑對小菜蛾生長發(fā)育影響測定結(jié)果見表3。在不同亞致死劑量下，4種魚尼丁受體類殺蟲劑處理3齡小菜蛾后，均對小菜蛾幼蟲的正常生長產(chǎn)生了影響，主要表現(xiàn)在體重降低和發(fā)育歷期延長。

表3 不同亞致死劑量的4種魚尼丁受體類殺蟲劑對小菜蛾生長發(fā)育影響測定結(jié)果

3 結(jié)論與討論

通過試驗發(fā)現(xiàn)，4種魚尼丁受體類殺蟲劑對不同的鱗翅目幼蟲均有較高的活性，其中四氯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺對3種鱗翅目幼蟲的活性較高。另外通過試驗還發(fā)現(xiàn)，4種魚尼丁受體類殺蟲劑對小菜蛾卵基本沒有活性。因此，推斷使用魚尼丁受體類殺蟲劑防治害蟲的最佳時期為卵孵化盛期至低齡幼蟲活動期，在此階段使用既能保證藥劑的作用效果，也有利于延緩藥劑抗性的產(chǎn)生，并能達到減量增效的使用目的。使用不同亞致死劑量的4種魚尼丁受體類藥劑處理小菜蛾，發(fā)現(xiàn)這些藥劑均對小菜蛾幼蟲的正常生長產(chǎn)生了影響，主要表現(xiàn)在蟲體重量降低和發(fā)育歷期延長。這些結(jié)果與陳潔瓊等[4]、宋亮等[5]、尹飛等[6]的研究結(jié)果相似，當(dāng)使用亞致死濃度的不同藥劑處理后，小菜蛾會表現(xiàn)出幼蟲和蛹重量減輕，發(fā)育歷期延長等現(xiàn)象。產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因可能與害蟲體內(nèi)一些酶系受到抑制或解毒酶活性升高有關(guān)[7-9]。此次試驗僅測定了4種魚尼丁受體類殺蟲劑對F0代小菜蛾生長發(fā)育的影響，未對F1代之后的幼蟲進行持續(xù)的觀察，這些有待日后進一步去研究。

[1]董衛(wèi)莉,徐俊英,劉幸海,等.昆蟲魚尼丁受體及以其為靶標的殺蟲劑的研究進展[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報,2008,10(2):178-185.

[2]李軻軻,常秀輝,宋玉泉,等.高活性化合物SYP-9080生物活性初探[J].農(nóng)藥,2011,50(10):761-763.

[3]譚曉偉,任龍,徐希寶,等.氯蟲苯甲酰胺對小菜蛾亞致死效應(yīng)的研究[J].植物保護,2012,38(4):42-46.

[4]陳潔瓊,江瑛,陳瓊,等.唑蟲酰胺對小菜蛾的亞致死效應(yīng)研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2014,36(5):1048-1053.

[5]宋亮,章金明,呂要斌.茚蟲威和高效氯氰菊酯對小菜蛾的亞致死效應(yīng)[J].昆蟲學(xué)報,2013,56(5):521-529.

[6]尹飛,馮夏,胡珍娣,等.氯蟲苯甲酰胺對小菜蛾生長發(fā)育的亞致死效應(yīng)研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2012(17):78-80.

[7]尹飛,馮夏,李振宇,等.亞致死劑量氯蟲苯甲酰胺對小菜蛾體內(nèi)活性酶的影響[J].植物保護,2014,40(2):66-69.

[8]任龍,徐希寶,張靖,等.甲氧蟲酰肼對棉鈴蟲解毒酶活力的亞致死效應(yīng)研究[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報,2013,15(3):273-278.

[9]陳瓊,黃水金,秦文婧.氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾的亞致死效應(yīng)研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2011,33(4):690-695.

（責(zé)任編輯：顧林玲）

Research on Biological Activity of Four Ryanodine Receptor Insecticides

LIU Shao-wu,CHANG Xiu-hui,BAN Lan-feng,SONG Yu-quan,LI Bin
(State Key Laboratory of the Discovery and Development of Novel Pesticide,Shenyang Sinochem Agrochemicals R&D Co.,Ltd.,Shenyang 110021,China)

Biological activities of four ryanodine receptor insecticides were studied against three kinds of lepidoptera pests by leaf feeding method.The results showed that the bioactivities of SYP-9080 and chlorantraniliprole against 3 target pests were higher than flubendiamide and cyantraniliprole,but none of these four ryanodine receptor insecticides had ovicidal activity against Plutella xylostella.The growth and weight of Plutella xylostella were affected,when Plutella xylostella were treated by sublethal doses of four ryanodine receptor insecticides.SYP-9080 and chlorantraniliprole had high bioactivities on Mythimna seperata,Spodoptera exigua Hübner,Plutella xylostella.And sublethal doses of four ryanodine receptor insecticides could influence the growth and weight of Plutella xylostella.

ryanodine receptor;insecticide;biological activity;lepidoptera;SYP-9080;chlorantraniliprole

TQ 450.2＋1；TQ 453.2＋99

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.01.013

2016-08-04

劉少武（1983—），男，遼寧省興城市人，工程師，主要從事新農(nóng)藥生物活性測定及應(yīng)用技術(shù)研究工作。E-mail:liushaowu@sinochem.com