葉江華+王海斌+賈小麗+李遠華+康曉燕+孔祥海+何海斌

摘要：以不同樹齡黃金桂茶樹葉片為研究對象，分析不同樹齡對茶樹葉片氨基酸含量的影響。結果表明，茶樹葉片中必需的水解氨基酸及游離氨基酸含量隨著茶樹樹齡增加呈先上升后下降的趨勢，且不同樹齡間達到顯著差異。水解氨基酸中有5個非必需氨基酸隨著茶樹樹齡增加呈先上升后下降的趨勢，其余5個差異不顯著，而游離氨基酸中有8個氨基酸在茶樹樹齡為1年時最低，隨后呈上升趨勢，而6、9、15年茶樹葉片中的8個氨基酸含量變化差異不顯著。相關性分析結果表明，不同樹齡茶樹葉片的水解氨基酸與游離氨基酸含量呈極顯著正相關。氨基酸總量分析結果表明，當茶樹樹齡達到9年時茶樹葉片的必需、非必需水解氨基酸總量及水解氨基酸總量最高。當茶樹樹齡達到6年時茶樹葉片的必需、非必需游離氨基酸總量及游離氨基酸總量最高。

關鍵詞：茶樹；黃金桂；水解氨基酸；游離氨基酸

中圖分類號：S571.1；Q946.2 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）20-5355-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.20.047

Abstract： In this paper， the different age of Huangjingui（C. sinensis cv.） tea leaves were chosen to study the effects of different ages of tea leaves in the change of amino acid content. The results showed that the tea leaves essential hydrolytic amino acids and free amino acid content showed a trend of first increased and then decreased with tea tree ages increase， and among different age reached significant difference. And non-essential amino acid analysis found that hydrolysis amino acids have five non-essential amino acids with tea tree ages increase showed a trend of increased first and then decreased. The remaining five had no significant difference，and free amino acids in eight amino acids in tea tree ages for 1 year lowest， and then present a rising trend，but 6，9 and 15 years of tea leaves in the eight amino acid content difference was not significant. Correlation analysis showed that the different ages of tea leaves in hydrolytic amino acid and free amino acid content was extremely significant positive correlation. Total amino acid analysis results showed that when the tea tree age reached 9 years tea leaves essential and non-essential hydrolytic amino acids and hydrolyzed amino acids were the highest. When the tea tree age to 6 years， tea leaves of essential and non-essential free amino acids and free amino acids were the highest.

Key words： tea tree； Huangjingui； hydrolyzed amino acids； free amino acids

氨基酸與茶葉的品質密切相關，氨基酸組成及含量上的差異對后續(xù)茶葉的加工及品質的形成具有重要的作用[1，2]。茶樹作為一種經(jīng)濟灌木，在中國及世界各地廣泛種植，茶樹種植后由于茶樹自身物質的分泌及積累，茶樹土壤的理化性質產(chǎn)生變化并形成特有的生態(tài)環(huán)境[3]。隨著茶樹種植年限的增加，茶園土壤的酸化加重，茶葉品質呈現(xiàn)下降趨勢[4-6]。然而，近年來眾多學者在茶葉品質研究上主要集中在茶葉中茶多酚、咖啡堿含量的分析上，而對于茶葉中氨基酸含量的分析研究較少[7-9]。本研究以不同樹齡茶樹葉片為材料，分析不同樹齡茶樹葉片的水解氨基酸及游離氨基酸含量的變化，以期為茶樹連作對茶葉品質形成的影響機制研究奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 供試材料

以黃金桂茶樹原產(chǎn)地福建省泉州市安溪縣虎邱鎮(zhèn)為研究地點，收集已種植1、6、9、15年的黃金桂茶樹葉片的一芽二葉（取樣地位于東經(jīng)117°99′，北緯24°96′），用于葉片水解氨基酸及游離氨基酸的測定，每個樣品3個重復。

1.2 茶葉氨基酸含量測定

茶葉中水解氨基酸含量測定，參照中華人民共和國國家標準“食品中氨基酸的測定”（GB/T 5009.124-2003）制備好待測液，采用日立L-8900氨基酸自動分析儀測定分析[10]。茶葉中游離氨基酸含量的測定，參照中華人民共和國國家標準“茶葉中茶氨酸的測定高效液相色譜法”（GB/T 23193-2008）制備待測液，采用日立L-8900型氨基酸自動分析儀對待測液進行測定分析[11]。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用EXCEL對數(shù)據(jù)進行歸類、方差分析及回歸曲線制作，采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對數(shù)據(jù)進行顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 茶樹葉片氨基酸含量分析

不同樹齡茶樹葉片水解氨基酸及游離氨基酸中的7種必需氨基酸（蘇氨酸、纈氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸）均表現(xiàn)為隨著茶樹樹齡的增加呈先上升后下降趨勢，當茶樹樹齡為9年時最高（表1）。顯著性分析結果表明，不同樹齡間茶樹葉片的必需氨基酸含量差異達到顯著水平。

茶樹葉片非必需氨基酸含量分析結果表明，隨著茶樹樹齡的增加，不同樹齡茶樹葉片的水解氨基酸中的絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、精氨酸等含量呈先上升后下降的趨勢，且表現(xiàn)為當茶樹樹齡為9年時最高（表2）。顯著性分析結果表明，不同樹齡間，茶樹葉片5種非必需的水解氨基酸含量差異達到顯著水平。而天冬酰胺、甘氨酸、酪氨酸、組氨酸、脯氨酸等非必需水解氨基酸含量在不同樹齡茶樹葉片中變化差異不顯著。

非必需游離氨基酸分析結果表明（表2），當茶樹樹齡為1年時，茶樹葉片中天冬酰胺、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、精氨酸等8種氨基酸的含量最低，隨著茶樹樹齡增加，呈上升趨勢。然而，6、9、15年茶樹葉片中的8種氨基酸含量變化差異不顯著。此外，不同樹齡間茶樹葉片的組氨酸、脯氨酸含量差異不顯著。

隨著樹齡的變化，茶樹葉片中的必需氨基酸含量發(fā)生顯著的變化，而在非必需氨基酸上，5種水解氨基酸變化不顯著，5種變化達顯著水平；非必需游離氨基酸在茶樹樹齡（6、9、15年）較大時含量較為穩(wěn)定。

2.2 不同樹齡茶樹葉片水解及游離氨基酸含量關系分析

不同樹齡茶樹葉片水解氨基酸與游離氨基酸含量的相關性分析結果表明（圖1），不同樹齡茶樹葉片的水解氨基酸與游離氨基酸含量呈極顯著正相關，表現(xiàn)為當茶樹樹齡為1、6、9、15年時，二者的線性回歸方程決定系數(shù)R2分別為0.505 1（P<0.001）、0.529 1（P<0.001）、0.503 7（P<0.001）、0.448 1（P<0.001）?？梢?，隨著茶樹葉片中水解氨基酸含量的增加，游離氨基酸含量呈極顯著上升趨勢。

2.3 不同樹齡茶樹葉片氨基酸總量分析

不同樹齡茶樹葉片氨基酸總量分析結果表明（圖2），隨著茶樹樹齡的增加，茶樹葉片的必需、非必需水解氨基酸總量及水解氨基酸總量均呈先上升后下降的趨勢，當茶樹樹齡達到9年時最大。游離氨基酸分析結果表明，必需、非必需游離氨基酸總量及游離氨基酸總量依然表現(xiàn)為隨著茶樹樹齡增加呈先上升后下降的趨勢。然而不同樹齡間必需游離氨基酸總量差異達到顯著水平，非必需游離氨基酸總量在6、9、15年茶樹葉片間不存在顯著差異，6、9年茶樹葉片的游離氨基酸總量不存在顯著差異?？梢姡S著茶樹樹齡的增加，茶葉中的水解氨基酸含量變化明顯，而游離氨基酸的變化較為微弱。

3 結論與討論

氨基酸具有重要的營養(yǎng)價值及生理功能，是茶葉品質的主要評價指標之一，長期以來受到廣大學者的關注[2]。本研究分析了不同樹齡茶樹葉片中17種水解氨基酸及游離氨基酸的含量，結果表明，茶樹葉片中的水解氨基酸的變化與樹齡間的關系較密切，表現(xiàn)為不同樹齡間的變化差異達到顯著水平，而游離氨基酸中的必需氨基酸隨著茶樹樹齡的變化呈先上升后下降的趨勢且變化差異顯著，非必需氨基酸在較高樹齡茶樹（6、9、15年）中的變化差異不顯著。李煜等[12]研究認為茶葉中氨基酸的價值主要體現(xiàn)在必需氨基酸的含量的高低?？梢姡煌瑯潺g間茶樹葉片氨基酸的營養(yǎng)價值表現(xiàn)為隨著茶樹樹齡增加先上升后下降，以水解氨基酸計，當茶樹樹齡為9年時氨基酸營養(yǎng)價值最高，以游離氨基酸計，當茶樹樹齡為6年時氨基酸營養(yǎng)價值最高。趙和濤[13]分析了紅茶、綠茶不同等級間的氨基酸含量差異認為，茶葉等級與茶葉中氨基酸的含量顯著相關，茶葉等級越高其氨基酸含量越多。

本研究中隨著茶樹樹齡的增加茶葉中的必需氨基酸及氨基酸總量呈先上升后下降的趨勢，當茶樹樹齡為9年時，水解氨基酸總量最高，當茶樹樹齡為6年時，游離氨基酸總量最高?？梢?，茶葉品質與茶樹樹齡間存在一定的相關性。隨著茶樹樹齡的增加，長期連作極易導致茶樹品質下降[14]。然而在茶樹品質的決定因子中還包含了茶多酚、咖啡堿，在茶葉品質評判上還需綜合評價不同品質指標之間的比值差異[15]。因此，在后續(xù)研究中應當深入分析不同品質指標的綜合比例差異，進一步分析茶葉品質區(qū)別。

參考文獻：

[1] 楊 衛(wèi)，鮮 殊，李大祥，等.鄰苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色譜法測定茶葉中17種游離氨基酸[J].茶葉科學，2011，31（3）：211-217.

[2] 宛曉春.茶葉生物化學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2003.

[3] 俞 慎，何振立，陳國潮，等.不同樹齡茶樹根層土壤化學特性及其對微生物區(qū)系和數(shù)量的影響[J].土壤學報，2003，40（3）：433-439.

[4] 張 倩，宗良綱，曹 丹，等.江蘇省典型茶園土壤酸化趨勢及其制約因素研究[J].土壤，2011，43（5）：751-757.

[5] MEHRA A，BAKER C L.Leaching and bioavailability of aluminium，copper and manganese from tea（Camellia sinensis.）[J].Food Chemistry，2007，100：1456-1463.

[6] LI W，ZHENG Z C，LI T X，et al. Effect of tea plantation age on the distribution of soil organic carbon fraction within water-stable aggregates in the hilly region of western Sichuang，China[J].Catena，2015，133：198-205.

[7] SHIROMANI J，LOVEDEEP K，ABDUL-LATEEF M，et al. Effects of season and plantation on phenolic content of unfermented and fermented Sir Lankan tea[J].Food Chemistry，2014，152：546-551.

[8] 王海斌，洪斌毅.不同種植年限鐵觀音茶葉的品質分析[J].農(nóng)產(chǎn)品加工（學刊），2014（7）：49-51.

[9] GRAMZA-MICHALOWSKA A.Caffeine in tea camellia sinensis-content，absorption benefits and risks of consumption[J]. The Journal of Nutrition Health & Aging，2014，18（2）：143-149.

[10] GB/T 5009.124-2003，食品中氨基酸的測定[S].

[11] GBT23193-2008，茶葉中茶氨酸的測定高效液相色譜法[S].

[12] 李 煜，鄭德勇，吳亮亮，等.茶渣中蛋白質和氨基酸分析及其營養(yǎng)價值評價[J].福建茶葉，2015，37（1）：15-19.

[13] 趙和濤.紅茶綠茶加工中氨基酸變化及與品質關系[J].氨基酸雜志，1990（3）：47-49.

[14] 彭 萍，侯 渝，嘉徐澤.茶樹忌地殘毒控制綜合措施[J].西南園藝，2005，33（1）：36-37.

[15] 鄭月梅，鄭德勇，葉乃興.烘焙工藝對鐵觀音茶葉內含物變化規(guī)律的影響[J].福建農(nóng)林大學學報（自然科學版），2013，42（6）：584-588.