黃 雪 鄭媛媛 李富榮

(暨南大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院(深圳市人民醫(yī)院)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)協(xié)同創(chuàng)新中心，深圳518000)

免疫細(xì)胞靶向治療結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞①

黃 雪 鄭媛媛 李富榮

(暨南大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院(深圳市人民醫(yī)院)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)協(xié)同創(chuàng)新中心，深圳518000)

結(jié)直腸癌(Colorectal cancer,CRC)發(fā)病率列我國第三位。隨著我國人民生活水平的不斷提高和飲食習(xí)慣的改變,發(fā)病率也呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢，結(jié)直腸癌5年生存率只有50%[1,2]。研究發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞在結(jié)直腸癌的發(fā)生、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用。結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞(Colorectal cancer stem cells，CCSCs)是結(jié)直腸癌腫瘤組織中數(shù)量很少的一部分細(xì)胞，但是這類細(xì)胞具有很強(qiáng)的致瘤性和化療抵抗性，是結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的源頭。研究發(fā)現(xiàn)這類細(xì)胞能進(jìn)行自我更新和分化成新的腫瘤，在放化療后能進(jìn)入休眠狀態(tài)，當(dāng)微環(huán)境發(fā)生改變時(shí)，開始增殖并轉(zhuǎn)移到其他地方形成轉(zhuǎn)移灶[3]。免疫細(xì)胞治療作為新的治療技術(shù)，通過免疫細(xì)胞靶向治療結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞可能是從根本上根治結(jié)直腸癌的手段。本文就近年來結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞分離、純化、表面標(biāo)記，以及各種針對(duì)腫瘤干細(xì)胞免疫細(xì)胞治療的研究進(jìn)展作一綜述。

1 結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞生物學(xué)特性

結(jié)直腸癌的干細(xì)胞具有自我更新能力，具有類似的分化能力和類似的信號(hào)通路，多處于靜息期，具有自分泌能力以及耐藥性等[4]。腫瘤干細(xì)胞具有與正常干細(xì)胞相似的自我更新的特征，不同的是正常干細(xì)胞的自我更新是在基因調(diào)控下進(jìn)行的有序的增殖與分化，而腫瘤干細(xì)胞的增殖是無限和無序的，且不能分化為成熟細(xì)胞[5]。腫瘤干細(xì)胞分化出的細(xì)胞具有異質(zhì)性，不同類型的亞克隆伴隨著不同屬性的產(chǎn)生，只有部分克隆細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移形成轉(zhuǎn)移性腫瘤。這些轉(zhuǎn)移的克隆細(xì)胞可以進(jìn)一步地累積突變基因，形成與原始病灶不同的轉(zhuǎn)移性腫瘤[4，6]。根據(jù)種子土壤學(xué)說，腫瘤起始細(xì)胞作為種子，能生產(chǎn)自己的土壤，增加了起始細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中懸浮單細(xì)胞的生存能力[7]。由于腫瘤干細(xì)胞的強(qiáng)大的致瘤能力，猜想這可能和上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)變(EMT)密切相關(guān)。Radisky等[8]人發(fā)現(xiàn)CCSCs可以通過侵犯血管，經(jīng)過上皮間葉組織轉(zhuǎn)分化作用到達(dá)遠(yuǎn)處的組織，形成新的腫瘤，由于結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞的這些特性，可以選擇以結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞作為治療靶標(biāo)，除了傳統(tǒng)的方法來治療結(jié)直腸癌以外，通過免疫細(xì)胞清除腫瘤干細(xì)胞具有預(yù)防結(jié)直腸癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移作用。

2 結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記物

免疫染色技術(shù)發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞的表面抗原標(biāo)記物，主要有CD44、CD24、CD166、CD133、CD29和ALDH1?？梢酝ㄟ^流式細(xì)胞儀等方法成功分離出結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌中每100 個(gè)細(xì)胞中至少就會(huì)有一個(gè) CD44+CSC具有致瘤性[2,3]，取結(jié)直腸癌組織中一個(gè) CD44 陽性細(xì)胞，在體外可以培養(yǎng)成類似原發(fā)癌的腫瘤組織。曾有研究者用流式細(xì)胞儀觀察到組織外周血中 CD3+細(xì)胞 CD24 熒光強(qiáng)度，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)量與結(jié)直腸癌有關(guān)。在結(jié)直腸癌動(dòng)物模型體內(nèi)注入隱匿 HT29 或 Colo357 細(xì)胞的 siRNA，7～10 d內(nèi)可形成肉眼可見的腫瘤;在標(biāo)準(zhǔn)的化療方案中加入抗 CD24 抗體，則發(fā)現(xiàn)腫瘤生長得到抑制[7]。有人證實(shí)腫瘤細(xì)胞表面 CD166 表達(dá)與病理分級(jí)及侵襲深度有關(guān)，與結(jié)直腸癌患者的性別、年齡、直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及 Dukes 分期無關(guān)[8]。把培養(yǎng)的原發(fā)和肝轉(zhuǎn)移結(jié)直腸細(xì)胞“癌球”植入 NOD/SCID 小鼠可見其導(dǎo)致腫瘤發(fā)生，約每 16 個(gè) CD133+細(xì)胞中有一個(gè)可以成癌球，顯示CD133+可能是CCSCs表面標(biāo)志物[9]。研究者把500 個(gè) ALDH1+ESA+細(xì)胞置入 NOD/SCID小鼠，30 d 內(nèi)就能形成腫瘤，而10 000 個(gè) ALDH1-ESA+細(xì)胞在 50 d 內(nèi)仍無法致瘤[10]，研究統(tǒng)計(jì) ALDH1 表達(dá)與結(jié)腸癌患者年齡、性別、分化程度、侵襲深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及 Duke′s 分期無關(guān)，但與預(yù)后有關(guān)，表達(dá)越低預(yù)后越好。另外,EpCAM、CD44、CD166和 DAB2IP 表面標(biāo)記物也是結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)志特征，如 DAB2IP與腫瘤的分化程度、轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，DAB2IP會(huì)抑制NF-κB介導(dǎo)的上皮間質(zhì)間的轉(zhuǎn)分化作用，在結(jié)腸癌中DAB2IP低表達(dá)的患者往往預(yù)后較差且生存時(shí)間更短。目標(biāo)研究發(fā)現(xiàn)的結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)志物，見表1。

3 免疫細(xì)胞靶向治療結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞

由于腫瘤干細(xì)胞大多處于休眠狀態(tài),具有較強(qiáng)的耐藥性及放療不敏感性，傳統(tǒng)的腫瘤化療藥物和放療不能對(duì)其有效殺滅，最終導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。細(xì)胞免疫干預(yù)作為一種有效的治療手段，它可以靶向腫瘤特異性抗原(TSAs)和/或腫瘤相關(guān)抗原(TAAs)，可特異性清除腫瘤細(xì)胞或腫瘤干細(xì)胞。CSCs由于具有對(duì)常規(guī)治療抵抗性，這些腫瘤起始細(xì)胞除表達(dá)干細(xì)胞抗原外，可能還包含許多編碼腫瘤特異性抗原的突變。因此，制備抗結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞的疫苗，以及針對(duì)結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞表面抗原的特異性靶向免疫細(xì)胞，可清除手術(shù)后或化療后殘存結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞，將解決腫瘤干細(xì)胞藥物抵抗和復(fù)發(fā)問題，以大大提高結(jié)直腸癌治愈率[20,21]。

3.1 DC疫苗 目前為止，DCs被認(rèn)為是功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，能激活T細(xì)胞，產(chǎn)生強(qiáng)大的免疫應(yīng)答[22]， Zarnani等[23]在結(jié)腸癌小鼠模型中，給在結(jié)腸癌腫瘤細(xì)胞上面負(fù)載了一個(gè)腫瘤細(xì)胞特異性的抗原肽gp70-derived peptide(AH1)和一個(gè)輔助蛋白分子卵清蛋白(OVA)，得到DC-Pep-OVA 這樣的DC疫苗，再注射到結(jié)腸癌小鼠體內(nèi)，表現(xiàn)出更長的存活時(shí)間。2010年FDA批準(zhǔn)上市的Provenge(sipuleucel-T)，用于治療轉(zhuǎn)移性激素抵抗性前列腺癌(CRPC)，Provenge誘導(dǎo)作用是通過抗原提呈細(xì)胞(APCs)負(fù)載前列腺癌酸性磷酸酶(PAP)抗原，與GM-CSF的因子進(jìn)行了融合，而GM-CSF的作用就是促進(jìn)樹突狀細(xì)胞的擴(kuò)增與分化成熟，可使腫瘤抗原在樹突狀細(xì)胞表面有效地表達(dá)，繼而激活腫瘤特異的CD8+T細(xì)胞，誘導(dǎo)抗前列腺癌免疫應(yīng)答，目前sipuleucel-T已經(jīng)通過了臨床實(shí)驗(yàn)[24]。研究比較熱的還有全細(xì)胞抗原負(fù)載的 DCs 疫苗，將腫瘤細(xì)胞的裂解物來致敏DCs，Alteber等[25]通過冷凍消融術(shù)后再來負(fù)載DCs，并觀察冷凍消融術(shù)負(fù)載DCs和對(duì)照組的生存時(shí)間，觀察到72 d時(shí)，負(fù)載疫苗的小鼠能夠存活而且通過體內(nèi)的光化學(xué)檢測沒有發(fā)現(xiàn)新的轉(zhuǎn)移。也有通過基因修飾的方法來致敏DCs的，將腫瘤細(xì)胞的特異性抗原直接加載到DCs上，使DCs更能有效地與MHC分子進(jìn)行結(jié)合，產(chǎn)生更加強(qiáng)大且持久的免疫應(yīng)答，Benteyn等[26]人將m-RNA修飾在DCs上，獲得比對(duì)照組更有效的免疫應(yīng)答，抗結(jié)直腸癌干細(xì)胞的DC疫苗激活自體T細(xì)胞后會(huì)引起結(jié)直腸CSC抗原特異性的T細(xì)胞應(yīng)答。有學(xué)者利用自體DC負(fù)載后的腫瘤裂解物對(duì)結(jié)直腸癌患者進(jìn)行皮下注射，發(fā)現(xiàn)其活化T細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞有強(qiáng)大的殺傷作用，而且并未發(fā)生明顯不良反應(yīng)，說明了DC用作疫苗的高效安全性[22]，2015年杜克大學(xué)開發(fā)了一種新的方法，用破傷風(fēng)毒素來刺激免疫系統(tǒng)增強(qiáng)了DCs疫苗對(duì)惡性腦膠質(zhì)瘤的效力，研究表明巨細(xì)胞病毒(CMV)存在于膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，但目前還不清楚這種病毒是否導(dǎo)致腫瘤的持續(xù)發(fā)展，這種DC疫苗主要針對(duì)巨細(xì)胞病毒的，在接受破傷風(fēng)加強(qiáng)劑治療的患者生存值超過了36.6個(gè)月，而僅接受樹突狀細(xì)胞注射治療的患者平均生存時(shí)間僅為18.5個(gè)月[27]。這個(gè)結(jié)果是非常令人振奮的。

表1 結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記物

Tab.1 Specific molecular biomarkers of CCSC

標(biāo)記物別名功能參考文獻(xiàn)ALDH1ALDH1A1，RALDH1在細(xì)胞內(nèi)催化乙醛氧化成乙酸[11]CD133Prominin?1，AC133連接兩個(gè)膽固醇酯，包含了兩個(gè)血漿質(zhì)膜微小結(jié)構(gòu)域的跨膜糖蛋白[12]CD44PGP?1，HUTCH?1，GP90，EPICAN，CDW44，MIC4一種細(xì)胞黏附分子，參與淋巴細(xì)胞的激活和淋巴循環(huán)[13]EpCAM，TACSTD1，CD326，17?A，ESA，EGP40上皮細(xì)胞黏附分子[14]CD24HSA黏蛋白樣的細(xì)胞黏附分子[15]CD29B1Integrin受體細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，參與調(diào)控細(xì)胞遷移、增殖、生存、分化和死亡[16]Lgr5GPR49R?spondin受體蛋白，成體干細(xì)胞的表面標(biāo)記物[17]CD166ALCAM白細(xì)胞活化黏附因子[18]BMI?1干細(xì)胞自我更新的調(diào)節(jié)器，核心蛋白復(fù)合體(PRC1)的組成部分[19]

3.2 CTL細(xì)胞 細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)能識(shí)別腫瘤相關(guān)抗原(Tumor-associated antigen，TAA)，抗原肽由HLA-Ⅰ類分子提呈，提呈給CD8+T 細(xì)胞，CD8+T 細(xì)胞具有很強(qiáng)大的抗腫瘤細(xì)胞效應(yīng)，而激活CTLs的重要的分子就是HLA-Ⅰ，有報(bào)道稱惡性腫瘤就是由于失去了表達(dá)HLA-Ⅰ類分子使得不能有效地將腫瘤的表面抗原提呈給CTLs，無法引起有效的免疫應(yīng)答，使機(jī)體無法及時(shí)的清除腫瘤細(xì)胞[28]，Sokol等[29]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在結(jié)直腸癌中由于MHCⅠ分子表面TPA結(jié)合蛋白(Tapasin)的缺失，以致CD8+CTL不能有效地對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行攻擊，并且與結(jié)腸癌的轉(zhuǎn)移和惡性發(fā)展有極大關(guān)系。Morita等[30]科學(xué)家通過使用siRNA來對(duì)嗅覺受體7C1(OR7C1)過表達(dá)和基因敲除，發(fā)現(xiàn)OR7C1可以作為新的篩選結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)志，而CTL能特異性的識(shí)別結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞。Visus 等[31]，已經(jīng)證明ALDH高表達(dá)的細(xì)胞能誘導(dǎo)CD8+T 細(xì)胞免疫應(yīng)答，通過流式細(xì)胞儀分選出ALDH高表達(dá)的細(xì)胞來致敏CD8+T 細(xì)胞，將致敏后的CD8+T 細(xì)胞和從健康人中分離出的HLA-A2-restricted樹突狀細(xì)胞一起共培養(yǎng)，過繼給腫瘤小鼠進(jìn)行細(xì)胞免疫治療，結(jié)果小鼠體內(nèi)的腫瘤生長受到了抑制，而且表現(xiàn)出更長的存活時(shí)間，這個(gè)實(shí)驗(yàn)說明ALDH高表達(dá)的細(xì)胞可能是CTL潛在的作用靶點(diǎn)。Kryczek教授[32]及其團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)IL-22+CD4+的T細(xì)胞能通過激活轉(zhuǎn)錄因子STAT3和誘導(dǎo)甲基轉(zhuǎn)移酶DOT1L促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的干性，當(dāng)用結(jié)腸腺癌細(xì)胞系DLD-1給NSG小鼠種植腫瘤時(shí)發(fā)現(xiàn)，105個(gè)DLD-1細(xì)胞不能在NSG小鼠體內(nèi)形成腫瘤，而用外源性的IL-22作用，小鼠腫瘤的體積明顯增大。在結(jié)腸癌中，CD8+T細(xì)胞是抗腫瘤免疫的重要細(xì)胞，Th1型趨化因子CXCL9 和CXCL10能對(duì)免疫細(xì)胞Th1和CD8+T細(xì)胞起調(diào)節(jié)作用。Nagarsheth等[33]通過用IFN-γ來刺激結(jié)腸癌的單細(xì)胞懸液，發(fā)現(xiàn)CXCL9和 CXCL10的水平有所升高，觀察到CD8+T細(xì)胞浸潤結(jié)腸癌腫瘤的程度也更深。Wei[34]報(bào)道結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞能表達(dá)共刺激抑制信號(hào) CD274 (B7-H1)和可溶性LGALS3 (galectin-3)，能削弱CTLs和γδT細(xì)胞的作用，抑制腫瘤的免疫應(yīng)答。Morita等[30]報(bào)道OR7C1 作為一個(gè)新的結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞表面抗原篩選標(biāo)志，以O(shè)R7C1 來源的抗原肽致敏的CTLs，對(duì)結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞有很強(qiáng)的殺傷毒性。OR7C1致敏的CTL抗腫瘤效應(yīng)比CTL細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞克隆有更強(qiáng)的抗腫瘤性，有研究者觀察到結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞能表達(dá)一種膜融合蛋白和分泌可溶性的IL-4，而這些信號(hào)會(huì)抑制T細(xì)胞對(duì)腫瘤干細(xì)胞的免疫反應(yīng)，且IL-4的水平在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與腫瘤的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)有很密切的聯(lián)系[35]。結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞致敏的CTL細(xì)胞免疫治療有可能成為治療結(jié)直腸癌的一個(gè)希望。

3.3 NK細(xì)胞 自然殺傷細(xì)胞(NK)是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，能識(shí)別病毒感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，主要是由于NK細(xì)胞能調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞上面的MHCⅠ和MHCⅡ類分子，NK細(xì)胞能識(shí)別非特異性的抗原，不需要特異性的HLA表達(dá)。NK細(xì)胞在腫瘤免疫中發(fā)揮著重要的作用。CD133已經(jīng)證明存在于腫瘤干細(xì)胞表面，也包括結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞。有學(xué)者已經(jīng)證明NK細(xì)胞能高度識(shí)別腫瘤干細(xì)胞，表明NK細(xì)胞能有效靶向殺傷腫瘤干細(xì)胞和非干性的腫瘤細(xì)胞的可能。最近研究發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞對(duì)于CD133陽性的細(xì)胞具有很強(qiáng)的殺傷作用[36]。Kim[37]通過比較原位結(jié)腸癌和轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌的腫瘤干細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，在轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌細(xì)胞系(KM12L4A 和KM12SM)中腫瘤干細(xì)胞表面NKG2D 配體和DR4/5水平是明顯高于原位結(jié)腸癌的，NK92細(xì)胞對(duì)KM12L4A 和KM12SM的殺傷作用也更加敏感。結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞表面低表達(dá)CD1d，有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)加入胸腺肽α1能上調(diào)CD1d的表達(dá)，CD1d能有效刺激NK細(xì)胞的免疫應(yīng)答，抑制Erk/MAPK途徑，致敏NK細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)中24 h內(nèi)，血液中NK細(xì)胞的數(shù)量已經(jīng)達(dá)到一個(gè)高水平，體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)都得到驗(yàn)證[38]。Tallerico等[39]發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸癌干細(xì)胞表面的MHCⅠ類分子相對(duì)于結(jié)腸癌細(xì)胞是低表達(dá)的，而 MHCⅠ類分子，會(huì)減弱NK細(xì)胞的免疫應(yīng)答作用，研究人員用純化同種異體的NK細(xì)胞來識(shí)別和殺傷結(jié)直腸癌腫瘤肝細(xì)胞，這是由于結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞白表面可高表達(dá)NKp30和NKp44配體。Ueda等[40]科學(xué)家在小鼠結(jié)腸癌中對(duì)小鼠進(jìn)行自體干細(xì)胞移植，再對(duì)脾臟中的NK細(xì)胞進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)在1到3周后NK細(xì)胞在結(jié)腸癌小鼠自體干細(xì)胞移植組比未進(jìn)行自體干細(xì)胞移植組的細(xì)胞數(shù)量增加，并且是高度激活的。而且在2周時(shí)，NK細(xì)胞的數(shù)量和活性達(dá)到一個(gè)頂峰狀態(tài)，但這是在小鼠實(shí)驗(yàn)階段的結(jié)果，進(jìn)入臨床還有待研究。

3.4 TCR-T及CAR-T TCR-T是通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)修飾的T細(xì)胞，基因轉(zhuǎn)染TCRs與靶細(xì)胞特異性的MHC分子結(jié)合，既能識(shí)別細(xì)胞表面抗原，又能識(shí)別細(xì)胞內(nèi)抗原[41]。早在2006年Morgan等[42]就報(bào)道采用基因修飾的方法來治療轉(zhuǎn)移性的黑色素瘤，將特異性的TCR-T細(xì)胞與黑色素瘤的MART-1基因特異性的結(jié)合，實(shí)驗(yàn)的17個(gè)患者中有2名患者腫瘤縮小且生存時(shí)間延長。后來用高活性的TCR修飾后的T細(xì)胞能識(shí)別滑膜肉瘤的NY-ESO-1抗原，6個(gè)試驗(yàn)患者中，4個(gè)患者引起了強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答。Rapoport等[43]于2015年對(duì)20例多發(fā)性骨髓瘤的患者進(jìn)行臨床試驗(yàn)，用TCR-T治療后其中14名患者接近完全緩解(near complete response，nCR)，2名患者獲得較大緩解(Very good partial response，VGPR)，一名患者表現(xiàn)為病情穩(wěn)定，另一名表現(xiàn)出有進(jìn)展，但是所有患者均超過100 d表現(xiàn)出接近完全緩解或較大緩解，平均存活時(shí)間達(dá)到了19.1個(gè)月。而CAR載體通常來源于抗原蛋白的一部分，表達(dá)在T細(xì)胞表面時(shí)，能與靶細(xì)胞結(jié)合，激活CAR-T細(xì)胞。最近CAR-T已經(jīng)發(fā)展到第三代，包含了雙刺激分子，如CD28+CD134 (OX40) 和CD28+CD137 (4-1BB)[44]。雖現(xiàn)在對(duì)于結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞的免疫治療上，CAR-T及TCR的文獻(xiàn)報(bào)道還比較少，但是運(yùn)用CAR-T及TCR與結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞特異性抗原結(jié)合，也為結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞的免疫治療提供了一個(gè)新的思路。

3.5 其他 最近有研究者用白喉?xiàng)U菌與胃泌素-17進(jìn)行共軛，而胃泌素-17作為生長因子本身能促進(jìn)胃腸道腫瘤的生長，在這項(xiàng)臨床研究中，有三分之一的患者獲得了部分免疫應(yīng)答，32%的患者病情更加穩(wěn)定，其余的患者產(chǎn)生了抗胃泌素-17的抗體，生存時(shí)間明顯延長[45]。有研究團(tuán)隊(duì)將人5型腺病毒作為疫苗，發(fā)現(xiàn)能在67%的轉(zhuǎn)移性的結(jié)腸癌患者中引起較強(qiáng)的免疫反應(yīng)，但是這項(xiàng)研究并沒有明顯提高患者的生存期[46]。

4 展望

研究已經(jīng)證明腫瘤干細(xì)胞比一般的腫瘤細(xì)胞的免疫原性更低，而且腫瘤干細(xì)胞會(huì)下調(diào)自身的某些抗原的表達(dá)來逃脫免疫細(xì)胞的免疫效應(yīng)作用。因此，識(shí)別和增加腫瘤干細(xì)胞表面的特異性抗原來增加免疫應(yīng)答作用是非常有必要的。隨著對(duì)結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞的認(rèn)識(shí)更加深入，以及對(duì)結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞表面抗原標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)，以及新的免疫細(xì)胞制備的技術(shù)手段發(fā)現(xiàn)和改進(jìn)，將為人類預(yù)防或治愈結(jié)腸癌提供了可能。

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[收稿2016-06-02 修回2016-08-02]

(編輯 倪 鵬)

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.01.034

黃 雪(1992年-)，女，碩士，主要從事腫瘤免疫治療方面研究，E-mail：654954659@qq.com。

及指導(dǎo)教師：李富榮(1963年-)，男，博士，研究員，博士生導(dǎo)師，主要從事細(xì)胞治療方面的研究，E-mail:frli62@163.com。

R392

A

1000-484X(2017)01-0156-05

①本文為深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.201402014)。