張海寧 張晴 張輝 林蘇杰 楊俊玲

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·呼吸病研究·

支氣管擴張癥合并哮喘患者中IL-4和IFN-γ的表達水平及臨床意義

張海寧1，2張晴1張輝1林蘇杰1楊俊玲1

目的 檢測支氣管擴張癥合并哮喘患者外周血清白介素-4(IL-4)、γ干擾素(IFN-γ)的表達水平，并分析其臨床意義。方法 按照支氣管擴張及哮喘的診斷標準將41例支氣管擴張和哮喘患者分為A、B、C組，其中14例支氣管擴張患者為A組，12例哮喘患者為B組，15例支氣管擴張合并哮喘患者為C組，7例健康體檢者為D組。應用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法測定上述各組研究對象血清中IL-4、IFN-γ的表達水平。結果 (1) 外周血清IL-4的表達水平：支擴合并哮喘組IL-4的表達水平317.02±53.53ng/L高于支擴組279.02±44.24ng/L，低于哮喘組367.60±45.10ng/L，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2) 外周血清IFN-γ的表達水平：支擴合并哮喘組患者血清中IFN-γ的表達水平241.68±50.33 ng/L低于支擴組295.65±77.10ng/L，高于哮喘組153.76±26.69 ng/L，差異有統(tǒng)計學意義(*P<0.05，△P<0.01)。結論 IL-4，IFN-γ在支氣管擴張癥合并哮喘的發(fā)病中可能起一定作用，檢測IL-4，IFN-γ對支氣管擴張癥合并哮喘的輔助診斷有重要參考價值。

IL-4 主要是通過TH2細胞介導釋放，可以引起IgE水平增高，嗜酸性粒細胞及炎性介質(zhì)釋放增多，導致氣道平滑肌增生。IFN-γ則是由Th1細胞介導分泌，在增強 Th1細胞應答同時抑制 IL-4 產(chǎn)生，可以減輕氣道過敏性炎癥，并且能夠通過減少細菌的供鐵量及誘導內(nèi)源性NO的產(chǎn)生直接抑制細胞內(nèi)的細菌，還能增加單核巨噬細胞溶解細菌作用，通過以上途徑共同達到消滅細菌的作用。在呼吸系統(tǒng)疾病中，支氣管擴張和支氣管哮喘屬于呼吸內(nèi)科的常見病及多發(fā)病，其發(fā)病機制及診治較為明確，但對于支氣管擴張癥合并哮喘的發(fā)病機制研究較少，且由于其診斷需結合高分辨胸部CT及支氣管舒張試驗，臨床上存在較高漏診率，因而本研究是通過對比支氣管擴張合并哮喘與單純支氣管擴張、單純哮喘患者血清中IL-4、IFN-γ的表達水平上的差異，從而提高對支氣管擴張合并哮喘的認識。

資料與方法

一、研究資料

選取2014年10月至2015年10月于吉林大學第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科明確診斷為支氣管擴張合并支氣管哮喘15例患者設為A組，單純支氣管擴張14例患者設為B組，單純支氣管哮喘12例患者設為C組，選取體檢科7例健康體檢者為D組。所有受試者均簽署知情同意書。

納入標準：支氣管擴張診斷標準參照2012年成人支氣管擴張癥[1]診治專家共識，支氣管哮喘診斷標準符合2008年中國哮喘防治指南[2]。

排除標準：所選病例需排除變應性支氣管肺曲霉菌病 (ABPA)，且行支氣管舒張試驗，檢查前3天內(nèi)未使用支氣管舒張劑及抗炎藥，無高血壓、冠心病、心力衰竭等心血管病變。健康體檢者需排除呼吸、心血管、消化、神經(jīng)、內(nèi)分泌、泌尿及免疫系統(tǒng)疾病，從未應用過免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素。

二、試劑與器材

人白細胞介素-4(IL-4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒，人γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒，低速臺式離心機，多功能酶標儀，熱恒溫水溫箱。

三、研究方法

1 標本收集及處理：支氣管擴張合并哮喘組、支氣管擴張組、哮喘組及正常對照組患者于晨起時采取空腹外周靜脈血5mL，將靜脈血置于我院呼吸內(nèi)科實驗室的低速臺式離心機上，以3000r/min的速度離心10min，分離出血清后置于-80℃冰箱中保存。

2 血清IFN-γ及IL-4檢測水平

采用上海豐壽公司的人IL-4、IFN-γ酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測試劑盒，檢測血清IL-4、IFN-γ水平，操作步驟按照說明書進行，每個樣本做2個復孔檢測。采用多功能酶標儀檢測吸光度值。

3 統(tǒng)計分析

結 果

一、血清IL-4的表達水平

A組、B組、C組患者血清中IL-4的表達水平均高于D組，差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)；C組患者血清中IL-4的表達水平高于A組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；C組患者血清中IL-4的表達水平低于B組，差異有統(tǒng)計學意義，P<0.05，(見表1)。

二、血清IFN-γ的表達水平

A組、C組患者血清中IFN-γ的表達水平均高于D組，差異有統(tǒng)計學意義(△P<0.05,*P<0.01)；B組血清中IFN-γ的表達水平低于D組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；C組患者血清中IFN-γ的表達水平低于A組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；C組患者血清中IFN-γ的表達水平高于B組，差異有統(tǒng)計學意義，P<0.01，(見表1)。

表1 各組研究對象血清IL-4、IFN-γ表達水平比較(±s)

表1 各組研究對象血清IL-4、IFN-γ表達水平比較(±s)

分組nIL?4(ng/L)IFN?γ(ng/L)A組14279．02±44．24△?295．65±77．10??B組12367．60±45．10△?153．76±26．69△△C組15317．02±53．53△241．68±50．33#D組7215．33±46．33192．14±25．99

注：1.IL-4：與D組比較，△P<0.01 與C組比較，*P<0.05; 2. IFN-γ: 與D組比較，*P<0.05,△P<0.01;與C組比較，*P<0.05，△P<0.01

討 論

Van der Pouw 等[6]的研究表明哮喘患者中IL-4的表達水平明顯升高，IFN-γ的表達水平明顯降低，目前國內(nèi)外研究認為IFN-γ /IL-4 失衡是哮喘發(fā)病的關鍵因素之一，且與哮喘的病情加重有關。早在20世紀之前國外學者已證實在支氣管擴張患者中IFN-γ的表達水平明顯升高[7-8]。但對于支氣管擴張合并哮喘，此類疾病中IL-4及IFN-γ的表達水平如何目前并沒有相關文獻考證，因而本研究通過ELISA方法測定IL-4及IFN-γ在支氣管擴張合并哮喘患者血清中的表達水平，為支氣管擴張合并哮喘疾病的診斷提供新的輔助方法。

本研究中哮喘組患者血清中IL-4表達水平高于正常對照組，IFN-γ低于對照組，支氣管擴張組IL-4表達水平低于對照組，IFN-γ高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)，此結論同Van der Pouw 等人的研究結論一致。支氣管擴張合并哮喘組IL-4及IFN-γ的表達水平均高于對照組。本研究同時將支氣管擴張合并哮喘組與支氣管擴張組、哮喘組患者血清中IL-4及IFN-γ的表達水平進行對比，發(fā)現(xiàn)支氣管擴張合并哮喘組患者血清中IL-4的表達水平高于支氣管擴張組，低于哮喘組，IFN-γ表達水平低于支氣管擴張組而高于哮喘組。

支氣管擴張合并哮喘是一種特殊類型的疾病，往往被臨床醫(yī)生所忽略，目前其發(fā)病機制仍然不明，是有特殊外界壞境刺激還是發(fā)病過程中必然會出現(xiàn)的并發(fā)癥，這個問題還需要更多的臨床研究去探討。本研究總結了支氣管擴張合并哮喘患者在血清IL-4、 IFN-γ表達水平上的特點，目的在于進一步提高臨床醫(yī)師對支氣管擴張合并哮喘這種疾病的認識和重視，同時由于其檢測方法簡便安全快捷，能夠起到輔助診斷的作用，可以考慮在臨床上推廣應用。

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[2] 中華醫(yī)學會呼吸病學分會哮喘學組,中華醫(yī)學會全科醫(yī)學分會.中國支氣管哮喘防治指南( 基層版)[J].中國實用內(nèi)科雜志,2013, 33(8):615-622.

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10.3969/j.issn.1009-6663.2017.03.053

1. 130000 吉林 長春，吉林大學第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科 2. 257000 山東 東營，東營市人民醫(yī)院

楊俊玲，E-mail：junling@jlu.edu.cn

2016-08-05]