秦 娟 晏 偉 王三喜 王海燕 唐曉梅 司婷婷

Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中的表達水平及臨床意義

秦 娟 晏 偉 王三喜 王海燕 唐曉梅 司婷婷

目的 探討Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中的表達水平及其臨床意義。方法 收取行病理學(xué)檢查的胃癌患者170例作為研究對象，對其胃癌組織及癌旁組織的石蠟切片進行ki67、p53及EGFR免疫組化染色。結(jié)果 胃癌組織中Ki67、p53及EGFR陽性表達率分別為71.18%、55.88%及45.29%；癌旁組織中Ki67、p53及EGFR陽性表達率分別為31.76%、12.94%及10.59%。胃癌組織陽性表達率均明顯高于癌旁組織，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。3種指標(biāo)均與腫瘤浸潤深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及TNM分期密切相關(guān)，即隨著腫瘤進展而其陽性率增高(P<0.05)。Ki67與p53、EGFR均呈正相關(guān)(P<0.05)；p53與EGFR相關(guān)性不顯著(P>0.05)。結(jié)論 Ki67、p53及EGFR與胃癌的發(fā)展關(guān)系密切，均可作為判斷胃癌惡性程度及進展情況的可靠指標(biāo)。

Ki67；p53；EGFR；胃癌；免疫組化

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:037～039)

胃癌是我國最為常見的消化道惡性腫瘤之一，是由內(nèi)在因素、外在因素、胃部疾病以及吸煙等多因素共同致病，同時也與多種癌基因的激活和抑癌基因的失活有著密切的聯(lián)系[1]。有研究表明，Ki67、p53基因以及EGFR均與腫瘤的發(fā)生及進展有著重要的關(guān)系，然而其三者間在胃癌中的特征性表達相關(guān)研究尚不多見[2]。因此，本研究對我院近年來收治的胃癌患者Ki67、p53及EGFR表達情況以及與臨床特征的關(guān)系進行了考察分析，以期對3種指標(biāo)檢測胃癌的臨床意義進行判斷，為臨床輔助診斷提供可靠依據(jù)，現(xiàn)進行如下報告。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收取2014年5月至2015年5月間于我科進行病理學(xué)檢查的胃癌患者170例作為研究對象，納入標(biāo)準(zhǔn)如下：①患者均經(jīng)過病理組織學(xué)檢查確診為胃癌，且有胃癌組織及癌旁組織病理切片；②患者無其他腫瘤病史，亦不合并其他系統(tǒng)嚴重疾病；③標(biāo)本采集前均未經(jīng)其他治療(如放療、化療等)。符合標(biāo)準(zhǔn)的170例患者中包括男性95例，女性75例；年齡28～75歲，平均年齡(48.3±10.2)歲；腫瘤直徑≤50 mm 78例，>50 mm 92例；按照病理組織學(xué)分型，可分為腺癌93例，印戒細胞癌77例；腫瘤位于胃體及胃底部66例，胃竇部104例；腫瘤浸潤累及粘膜及粘膜下層者51例，肌層及漿膜層者119例；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者105例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者65例；低度分化者112例，中度及高度分化者58例；TNM分期按照AJCC發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期+Ⅱ期患者共86例，Ⅲ期+Ⅳ期患者共84例。

1.2 試劑與方法

鼠抗人Ki67單克隆抗體、鼠抗人p53單克隆抗體以及鼠抗人EGFR單克隆抗體均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。所有組織經(jīng)甲醛脫水固定后進行石蠟包埋，之后使用石蠟切片機將組織連續(xù)切片，片厚4 μm。采用免疫組化常規(guī)方法鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶法(SP法)進行染色。

1.3 判斷指標(biāo)

Ki67及p53均定位于細胞核，陽性表達為棕色或黃色顆粒；EGFR定位于細胞質(zhì)和細胞膜，陽性表達為棕黃色至深棕色。在高倍鏡(400)下進行觀察，取5個視野共計數(shù)細胞100個，按照染色強度及陽性細胞所占比例進行評分，具體標(biāo)準(zhǔn)如下：染色后細胞無著色為0分，呈淺黃色為1分，呈棕黃色為2分，呈棕褐色為3分；陽性細胞所占比例<10%為1分，11%～50%為2分，51%～80%為3分，>80%為4分。將染色強度及陽性細胞所占比例得分相乘即為最后陽性判斷結(jié)果：總分≥6分為免疫組化陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析處理，組間表達情況均為計數(shù)資料，以率的形式表示，檢驗方式選擇卡方檢驗。3種標(biāo)記物表達相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析進行。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃癌組織及癌旁組織中Ki67、p53及EGFR表達情況比較

胃癌組織中Ki67、p53及EGFR陽性表達率分別為71.18%、55.88%及45.29%。癌旁組織中Ki67、p53及EGFR陽性表達率分別為31.76%、12.94%及10.59%。胃癌組織中其陽性表達率均明顯高于癌旁組織，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 胃癌組織及癌旁組織中Ki67、p53及EGFR表達情況比較(例，%)

2.2 Ki67、p53及EGFR表達與胃癌臨床病理特征的關(guān)系

對胃癌患者Ki67、p53及EGFR表達情況進行檢測，結(jié)果顯示，3種指標(biāo)表達水平均與腫瘤浸潤深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及TNM分期密切相關(guān)，即隨著腫瘤進展其表達陽性率增高(P<0.05)，在其他如性別、年齡等臨床特征中，3種指標(biāo)表達差異不顯著(P>0.05)，見表2。

2.3 Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中表達的相關(guān)性分析

對3種指標(biāo)進行Spearman相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，Ki67與p53、EGFR表達均呈正相關(guān)(P<0.05)；p53與EGFR表達無顯著相關(guān)性(P>0.05)，見表3。

3 討論

作為具有高發(fā)病率及高死亡率的惡性腫瘤，胃癌發(fā)病往往是1個多基因改變、多因素參與及多階段發(fā)生的過程[3]。胃癌的發(fā)病可能經(jīng)歷從胃炎到腸上皮化生及不典型增生等多階段，最終發(fā)展至胃癌[4]。這一過程可能伴隨多種分子事件的發(fā)生，例如蛋白質(zhì)、酶等基因水平發(fā)生的多種改變[5]。

Ki67是1種核增殖抗原，廣泛存在于細胞有絲分裂的S期、G1期、G2期及M期，是全面反應(yīng)細胞增殖活性的1項可靠指標(biāo)[6]。有研究證實，Ki67與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展又密切關(guān)系，并且可為腫瘤轉(zhuǎn)歸及預(yù)后提供指導(dǎo)[7]。人類P53基因定位于17號染色體短臂，長度20 kb左右，由11個外顯子和10個內(nèi)含子組成，是一種被人們廣泛研究的抑癌基因[8]。按照基因型的不同又可將p53基因分為野生型(wtp53)以及突變型(mtp53)。其中野生型P53基因可通過對細胞生長和凋亡進行調(diào)控而發(fā)揮抑癌作用，而當(dāng)其轉(zhuǎn)變成突變型p53后，由于空間構(gòu)想發(fā)生變化，使得原先抑癌作用被改變，而發(fā)揮刺激血管內(nèi)皮生長因子并且調(diào)控腫瘤血管生長等促癌作用，導(dǎo)致細胞增殖以及惡性轉(zhuǎn)化[9]。由于突變型p53蛋白具有不易水解的特性，因此目前采用SP法免疫組化檢測到的均為突變型p53。表皮生長因子受體(EGFR)屬于酪氨酸激酶Ⅰ型受體家族成員之一，在胃癌中具有高表達。通過與EGFR配體相結(jié)合后發(fā)生二聚化，激活酪氨酸激酶使酪氨酸殘基發(fā)生磷酸化，從而暴露酪氨酸激酶靶蛋白結(jié)合位點，激活多條信號通路改變，最終影響細胞增殖與分化[10]。

表2 Ki67、p53及EGFR表達與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系(例，%)

表3 Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中表達的相關(guān)性分析

本研究對上述3種蛋白在胃癌腫瘤組織及癌旁組織中的表達情況及相關(guān)性進行了分析探討，結(jié)果顯示，3種蛋白在胃癌組織中均有高表達，且均與腫瘤浸潤深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及TNM分期密切相關(guān)，證實3種蛋白均與胃癌的進展及惡化密不可分，與文獻報道相符[11]。而對3種蛋白表達情況的相關(guān)性進行考察的結(jié)果顯示，Ki67與p53、EGFR均呈正相關(guān)，提示Ki67與其他2種蛋白可能均有協(xié)同促進胃癌發(fā)展的作用。而本研究中p53與EGFR相關(guān)性不顯著，與文獻報道的不符[12]，這可能與腫瘤的個體差異、收取樣本的例數(shù)較少等因素有關(guān)，仍需要進行更大規(guī)模的分析研究。

綜上所述，Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中呈現(xiàn)高表達，且與腫瘤的發(fā)展關(guān)系密切，均可作為判斷胃癌惡性程度及進展情況的可靠指標(biāo)。

[1] 史振貴.消化性潰瘍與胃癌的關(guān)系分析〔J〕.吉林醫(yī)學(xué),2011,32(3):542.

[2] 賈振軍,郭雪潔,苗新東,等.p16、p53、CerbB2和ki-67在胃癌及癌前病變中的表達及意義〔J〕.中國現(xiàn)代普通外科進展,2014,17(8):611-615.

[3] Smyth EC,Tarazona N,Chau I.Ramucirumab:targeting angiogenesis in the treatment of gastric cancer〔J〕.Immunotherapy,2014,6(11):1177-1186.

[4] Ma GF,Miao Q,Zeng XQ,et al.Transforming growth factor-β1 and-β2 in gastric precancerand cancer and roles in tumor-cell interactions with peripheral blood mononuclear cells in vitro〔J〕.PLoS One,2013,8(1):e54249.

[5] 邱 磊,付海嘯,宋 軍,等.胃癌相關(guān)細胞因子的研究進展〔J〕.中國現(xiàn)代醫(yī)生,2012,50(32):25-26,29.

[6] Rangel-Gamboa L,Reyes-Castro M,Dominguez-Cherit J,et al.Proliferating trichilemmal cyst:the value of ki67 immunostaining〔J〕.Int J Trichology,2013,5(3):115-117.

[7] 梅 迪,劉 洋,胡 枋,等.C-erb-B2和Ki67抗原在胃癌組織中的表達及意義〔J〕.中國微生態(tài)學(xué)雜志,2015,27(7):828-830.

[8] Takatori H,Kawashima H,Suzuki K,et al.Role of p53 in systemic autoimmune diseases〔J〕.Crit Rev Immunol,2014,34(6):509-516.

[9] Flemming A.Cancer:Mutant p53 rescued by aggregation inhibitor〔J〕.Nat Rev Drug Discov,2016,15(2):85.

[10] 董 晨,李 紅.胃癌組織中Lrig1與EGFR基因表達〔J〕.中國公共衛(wèi)生,2015,31(6):819-822.

[11] 張朝林,李 宏,李金平.p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌組織中的表達及臨床意義〔J〕.海南醫(yī)學(xué),2014,25(1):15-17.

[12] 文思全.關(guān)于胃癌標(biāo)志物檢測〔J〕.中國保健營養(yǎng),2013,23(1):31-32.

(編輯：吳小紅)

Expression of Ki67,p53 and EGFR in Gastric Cancer and Clinical Significance

QINJuan,YANWei,WANGSanxi,etal.

PathologyDepartment,BaojiPeople’sHospital,Baoji，721000

Objective To explore the expression of Ki67,p53 and EGFR in gastric cancer and clinical significance.Methods 170 patients with gastric cancer underwent pathological test in our department from May 2014 to May 2015 were selected to this study.The expression of Ki67,p53 and EGFR of tumor tissues and para-carcinoma tissues was detected by immunohistochemical method.Results Expression rate of Ki67,p53 and EGFR in gastric cancer tissues was respectively 71.18%,55.88% and 45.29%;in para-carcinoma tissues was respectively 31.76%,12.94% and 10.59%.Expression rate in gastric cancer tissues was obviously higher than para-carcinoma tissues with statistically significance(P<0.05).Positive expression was related to the depth of invasion,degree of differentiation,lymphatic metastasis and TNM stages(P<0.05).Ki67 expression was positively correlated with p53 and EGFR(P<0.05),but correlation between p53 and EGFR had no statistically significance(P>0.05).Conclusion Expression of Ki67,p53 and EGFR has close relation with gastric tumor,which can be used as reliable indexes in judgement of tumor malignancy and development.

Ki67;p53;EGFR;Gastric cancer;Immunohistochemeical

721000 寶雞市人民醫(yī)院(秦 娟，王三喜，王海燕，唐曉梅，司婷婷)；710032 解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院(晏 偉)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.01.012

R735.2

A

1001-5930(2017)01-0037-03

2016-03-08

2016-10-12)