謝英娜

補體反應基因-32在結(jié)腸癌組織中的表達及臨床意義

謝英娜

目的 探討補體反應基因-32（RGC-32）在結(jié)腸癌組織中的表達情況，并分析其臨床意義。方法 選取2012年12月至2015年12月沈陽市第九人民醫(yī)院收治的結(jié)腸癌患者80例為研究對象，癌組織標本均采用免疫組化SP法檢測RGC-32表達，觀察不同腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及不同TNM分期RGC-32的陽性表達情況。結(jié)果 高中分化者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率均低于低分化者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率均低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；TNM分期Ⅰ+Ⅱ期者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論 RGC-32可作為結(jié)腸癌患者預后的預測指標及靶向治療新突破。

補體反應基因-32；結(jié)腸癌；分化程度；病理檢查

【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2017.01.050

結(jié)腸癌是目前臨床上最常見的消化道惡性腫瘤之一，本病發(fā)病隱匿，臨床癥狀不明顯，一旦發(fā)病多數(shù)處于中晚期，故本病病死率較高，且發(fā)病后患者的生命質(zhì)量相對較差[1]。既往研究證實[2-4]，結(jié)腸癌的發(fā)病與多種致癌基因存在一定的相關(guān)性，其中補體反應基因-32（RGC-32）作為補體激活相關(guān)基因，表達于多種實體惡性腫瘤中[5]。在結(jié)腸癌發(fā)病過程中，RGC-32主要通過促進惡性腫瘤細胞增殖、遷移與血管生成而發(fā)病。然而，RGC-32在結(jié)腸癌發(fā)病中的具體機制目前尚未完全闡明，尤其是其促進惡性腫瘤發(fā)展的分子機制有待進一步研究[6]。為更好地闡明RGC-32基因與結(jié)腸癌之間的相關(guān)性，本研究采用免疫組化檢測RGC-32在結(jié)腸癌中的表達情況，以分析RGC-32與結(jié)腸癌發(fā)生及發(fā)展的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年12月至2015年12月沈陽市第九人民醫(yī)院收治的結(jié)腸癌患者80例為研究對象，均經(jīng)病理組織活檢確診，且預計生存時間在3個月以上，均接受手術(shù)治療并留取術(shù)中標本送病理檢查，排除合并全身多處轉(zhuǎn)移、嚴重心、肺功能障礙、嚴重肝腎功能障礙、凝血功能障礙、精神疾病者、預計生存時間1個月以內(nèi)者及拒絕參加本研究者；所有患者均簽署了知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核批準。其中男25例，女15例，年齡35～60歲，平均（45.2±2.6）歲；分化程度：高中分化40例，低分化40例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移40例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移40例；TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期40例，Ⅲ+Ⅳ期40例。

1.2 方法 所有患者標本均采用免疫組化SP法進行檢測，且均嚴格按照說明書進行操作，試劑盒購自北京中杉生物技術(shù)公司，其中兔抗人RGC-32多抗（濃度1:100）購自Santa Cruz公司，設(shè)立RGC-32強陽性者為陽性對照組，使用PBS緩沖液者為陰性組。通過雙盲法進行實驗，并選取每張病理切片中的5個高倍視野，由具有5年以上病理診斷經(jīng)驗的病理醫(yī)師觀察。

1.3 判斷標準 無染色為0分，淺黃色染色為1分，棕黃色染色為2分，棕褐色染色為3分。如未見細胞質(zhì)或細胞核中有棕黃色顆粒者為無陽性細胞，標記為0分；細胞質(zhì)或細胞核中棕黃色顆粒＜10％者標記為1分；細胞質(zhì)或細胞核中棕黃色顆粒10％～50％者為2分；細胞質(zhì)或細胞核中棕黃色顆粒＞50％者為3分。以上兩者的乘積＞2分則視為RGC-32陽性，否則評定為陰性。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同腫瘤分化程度RGC-32陽性情況比較 高中分化患者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率均低于低分化患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同腫瘤分化程度RGC-32陽性情況比較

2.2 是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者RGC-32陽性情況比較 存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率均低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的RGC-32陽性情況比較

2.3 不同TNM分期RGC-32陽性情況比較 TNM分期Ⅰ+Ⅱ期患者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同TNM分期RGC-32陽性情況比較

3 討論

城市男性結(jié)腸癌的發(fā)病率更高，在全球范圍內(nèi)每年約新增100萬結(jié)腸癌患者，其中約50％的患者死亡。目前，結(jié)腸癌的基本病因尚未闡明[7]。流行病學研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌發(fā)病可能與攝入高脂肪、高熱量食物有關(guān)[8]。早期結(jié)腸癌主要以手術(shù)治療為主，晚期結(jié)腸癌多以化療、放療、生物療法等綜合保守治療為主。導致結(jié)腸癌患者死亡的最關(guān)鍵原因是腫瘤轉(zhuǎn)移，故如何做到早診斷、早治療是提高其臨床療效的關(guān)鍵[9]。近年，關(guān)于RGC-32與惡性腫瘤的相關(guān)性逐漸成為腫瘤研究的重點及熱點，越來越多的基礎(chǔ)研究提示，RGC-32是一種多腫瘤相關(guān)性原癌基因，其體內(nèi)表達與多種實體腫瘤發(fā)病存在相關(guān)性[10]。RGC-32陽性對腫瘤細胞的生長繁殖起到雙重效應，其在正常表達時具有一定抑制腫瘤細胞生長的作用，一旦發(fā)生異常表達則會顯著促進腫瘤細胞的增殖與生長，進而激活腫瘤細胞無序增殖與分化，其在惡性腫瘤的發(fā)生繁殖中具有十分重要的作用[11]。

既往研究證實，RGC-32在結(jié)腸、前列腺、膀胱及乳腺的惡性腫瘤中均存在顯著陽性表達[12]。Guo等[13]采用RNA逆轉(zhuǎn)錄技術(shù)于體外行肺癌細胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，RGC-32陽性肺癌細胞的分化及增殖速度顯著加快，侵襲性增強，同時發(fā)現(xiàn)此類腫瘤細胞的細胞周期分化停滯，細胞凋亡顯著增加，故證實RGC-32可參與肺癌的發(fā)生及發(fā)展，進而為肺癌的臨床治療提供新的思路。RGC-32在乳頭狀瘤及導管上皮不典型增生等乳腺癌的癌前病變組織中呈明顯陽性表達，且在乳腺乳頭狀瘤及導管上皮不典型增生患者中表達水平顯著高于正常乳腺組織，尤其在晚期乳腺癌惡性腫瘤細胞中，RGC-32的表達水平顯著高于癌前病變組織及早期乳腺癌惡性腫瘤細胞，故認為RGC-32與乳腺癌的發(fā)病存在相關(guān)性。盡管RGC-32在多種惡性腫瘤細胞中呈陽性表達，且在腫瘤的發(fā)生及發(fā)展中發(fā)揮極其重要的作用，但目前對于結(jié)腸癌與RGC-32之間的相關(guān)性研究較少。

本研究發(fā)現(xiàn)，高中分化者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率均低于低分化者，差異有統(tǒng)計學意義；存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率均低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學意義；TNM分期Ⅰ+Ⅱ期患者RGC-32乘積積分及RGC-32陽性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計學意義。上述結(jié)果均提示RGC-32在結(jié)腸癌中的表達水平是影響腫瘤分化程度、TNM分期及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要影響因素，RGC-32表達陽性者，其腫瘤分化程度相對較低、容易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移且腫瘤分期一般較晚，與Guo等[13]的研究結(jié)果相似。因此，RGC-32可以作為結(jié)腸癌患者預后的預測指標及靶向治療新突破。

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