趙 翠 （山東省泰安市動物衛(wèi)生監(jiān)督所 271000）

常維山 （山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院 山東 泰安）

一例鴿流感H9亞型病例分析

趙 翠 （山東省泰安市動物衛(wèi)生監(jiān)督所 271000）

常維山 （山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院 山東 泰安）

鴿流感不是H5N1禽流感，是由粘病毒科A型流感病毒引起的傳染病。自1999年發(fā)現(xiàn)病根以來，很多地方發(fā)生過鴿的流感病。有資料表明，所有禽類都是易感動物。前不久，根據(jù)有關藥業(yè)飼資料標明，當前起危害作用最嚴重而常見的流感病毒現(xiàn)分為兩種類型：一是H5型；二是H9型。近幾年來各地鴿棚處寄來的病例資料表明，鴿出現(xiàn)的急性突發(fā)性的“咳嗽、眼腫流淚、甩頭曲頸、頭部腫脹、鼻流漿性液體、突然死亡、雙翅下垂、雙腿軟弱無力”的癥狀，都是流感病毒在鴿身上的表現(xiàn)。2015年12月30日，接到一例鴿發(fā)病案例，經(jīng)流行病學調(diào)查、病理剖檢和實驗室診斷，最后確診為一起鴿流感H9病例。

1 發(fā)病情況

一個始建于2012年，由雞舍改造而成的鴿場的鴿子突然發(fā)病，該場飼養(yǎng)青年鴿和成年鴿大約2000對左右，都免疫過新城疫，鴿痘等疫苗。青年鴿首先出現(xiàn)采食量下降，又出現(xiàn)呼吸道癥狀，繼而咳嗽，畜主用安莫西林大群飲水，病情嚴重的鴿子肌注柴胡注射液，仍未見好轉(zhuǎn)，之后出現(xiàn)死亡，然后畜主帶瀕死鴿2只，病死鴿2只前來就診。

2 臨床癥狀

病鴿呈現(xiàn)出精神萎靡，食欲減退，不愛活動，低頭縮頸，體溫略有升高，體重下降，對周圍環(huán)境刺激反應遲鈍，飲水增加。病鴿兩眼腫脹，并流出膠狀分泌物，流鼻涕、鼻阻塞、打噴嚏。因呼吸急促發(fā)出羅音，有的呼吸困難，嚴重的可窒息死亡，口、鼻流粘液，隨著病程的延長，有些病鴿出現(xiàn)頭頸扭轉(zhuǎn)、轉(zhuǎn)圈、運動失調(diào)、不能站立等神經(jīng)癥狀。常常扭動脖子，羽毛松亂，雙足冰冷，因怕冷而蜷縮于鴿舍一角。有的病鴿頭部、頸部和胸部水腫。發(fā)病后1～5d左右死亡，死亡率可達50%～100%。

3 病理剖檢

頸部皮下彌漫性淤血、出血，喉部、氣管出血，嗉囊內(nèi)充滿粘稠液體，肺輕微出血、淤血，胸腺出血腫大，肝臟腫大，腺胃乳頭出血，肌胃和腺胃交界處有條狀出血斑，肌胃角質(zhì)層下有點狀出血；腸道出血，特別是十二指腸黏膜有出血斑點，盲腸扁桃體腫大出血。

4 實驗室診斷

4.1 細菌分離鑒定 無菌操作采取病鴿肝臟，分別接種于LB營養(yǎng)瓊脂及麥康凱瓊脂上，37℃，過夜培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)并無細菌生長。其次，取部分肝臟組織涂片，進行瑞士和革蘭氏染色鏡檢均未見明顯細菌。

圖1 腺胃乳頭出血

圖2 腸道出血

圖3 胸腺出血

4.2 新城疫、禽流感抗原檢測 （1）無菌采集病死鴿和患病鴿的病變氣管，將組織研磨提取RNA，并反轉(zhuǎn)錄為cDNA,進行分子生物學檢測。（2）根據(jù)GenBank上公布的H9亞型禽流感病毒HA序列和新城疫病毒序列設計兩對引物，H9亞型禽流感病毒HA序列的上游序列：CAAGACGCCCAATACACAAATAA，下游序列：CCCTGACCAACCTCCCTCTA，擴增大小為550bp，PCR反應條件：94℃5min、94℃30S、60℃30S、721min℃、727min℃、4℃保存，33個循環(huán)。（3）新城疫病毒的上游序列：ATGGGAGGCTAGGATTTGATGGA，下游序列：ACTGCCCCTCTTGCCTTTTGTCT，擴增大小為186bp，PCR反應條件：94℃5min、94℃30S、54℃40S、72℃1min、727min℃，4℃保存，33個循環(huán)。（4）PCR產(chǎn)物于0.8%瓊脂糖凝膠上進行電泳檢測，在紫外分析儀下觀察發(fā)現(xiàn)，兩個樣品都在550bp處有條帶，與目的片段大小一樣，而在新城疫檢測為陰性，確定為H9亞型禽流感(見圖4)。

圖4 新城疫、禽流感抗原PCR鑒定

4.3 診斷結果 根據(jù)臨床表現(xiàn)和實驗室診斷，最后確診此病是H9流感病例。天氣變冷，冷空氣入室是此次發(fā)病的誘因。發(fā)病后誤診為新城疫斷，加重了疾病，導致鴿群發(fā)病率及死亡率迅速升高。鴿群感染流感H9后往往引起其免疫應答水平低下，機體的抵抗力弱。

5 治療

（1）將病鴿全部淘汰，立即嚴密封鎖場地，進行全面徹底消毒，避免繼發(fā)感染，采用抗病毒及提高鴿群機體抵抗力的綜合性防治措施。（2）抗病毒藥物：能有效抑制病毒在易感動物細胞中生長繁殖，徹底殺滅病毒。（3）提高鴿群抵抗力：飼料或飲水中添加多維素等藥物，提升鴿群自身抵抗力。

6 討論

（1）本次實驗室診斷確診了一例鴿子感染H9的病例，由于該病在實際中與新城疫的癥狀及剖檢變化有相似之處，容易誤診，應用RT-PCR和PCR技術能夠?qū)煞N病毒進行準確的診斷，因此在平時的檢測中應將常規(guī)方法和分子學實驗相結合，為準確的檢測疾病提供依據(jù)。（2）當氣候突變和飼養(yǎng)密度過大時容易促使本病的發(fā)生。本病可通過消化道或接觸性傳染，有資料顯示一些康復鴿仍帶毒，能在天氣突變等應激條件下傳播此病，因此，應當做好天氣突變時的防護工作。（3）由于針對本病的防治目前尚無特效疫苗和藥物，因此在平時應當加強飼養(yǎng)管理，保持合理的密度，并做到飼養(yǎng)室通風良好，陽光充足，清潔干燥，做好防寒保溫工作，做好三防工作(防風、防濕、防擁擠)很關鍵。冬天可在鴿子的飲水中放點辣椒粉或高粱汁，以使鴿經(jīng)常保持興奮狀態(tài)，這對耐寒是很有效的。（4）堅決不要在有本病疫情的鴿場引進新鴿，同時建設鴿舍也要遠離雞舍，否則會促進疾病的水平傳播。如附近鴿場有本病發(fā)生，應該果斷地采取嚴密封鎖消毒工作，以免疫情累及本場。

S858.39

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1007-1733(2017)01-0038-02

2016–09–29）