卞光明，胡則輝，柴學軍，王躍斌，胡成碩

（浙江海洋大學海洋與漁業(yè)研究所，浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江舟山 316021）

·綜述·

SNP標記技術(shù)及其在水產(chǎn)動物遺傳學中的應(yīng)用

卞光明，胡則輝，柴學軍，王躍斌，胡成碩

（浙江海洋大學海洋與漁業(yè)研究所，浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江舟山 316021）

單核苷酸多態(tài)性是最新型分子標記技術(shù)，位點豐富、自動化強，可以有效地應(yīng)用于水產(chǎn)動物遺傳學研究。本文結(jié)合近年研究成果，綜述了SNP特點及其在水產(chǎn)動物研究中的常用分型方法與應(yīng)用，分析了分型方法的優(yōu)劣，并對其應(yīng)用前景予以展望。

SNP；水產(chǎn)動物；分型方法；應(yīng)用

單核苷酸多態(tài)性（Single nucleotide polymorphism，SNP）指的是某種生物不同個體DNA序列中單個核苷酸點突變產(chǎn)生的多態(tài)性，包括置換、顛換、插入或缺失引起的多態(tài)現(xiàn)象[1]。SNP是由美國學者Lander于1996年提出的繼RFLP、SSR的第三代新型分子標記技術(shù)[2]，1998～2002年每年都召開“SNPs與復(fù)雜基因組”國際會議以探討SNPs在復(fù)雜基因組中應(yīng)用，隨著PCR、分型檢測、DNA芯片等技術(shù)的不斷發(fā)展，SNP趨于高通量、自動化。近年來，分子標記技術(shù)逐漸成為研究水產(chǎn)動物遺傳學的重要手段，SNP作為第三代遺傳標記，位點數(shù)量多、密度廣、遺傳多樣性高以及自動化程度強，能夠顯示其他分子標記技術(shù)難以檢測到的遺傳信息多態(tài)性，故而，SNP標記技術(shù)對于水產(chǎn)動物遺傳學研究具有重要意義。

1 SNP特點

SNP具有以下特點：①SNP可以通過對單個核苷酸的差異檢測來區(qū)分個體之間遺傳物質(zhì)的差異，由于CG序列中的胞嘧啶（C）極易自發(fā)脫氨轉(zhuǎn)化成胸腺嘧啶（T），故而SNP等位基因多為（C）轉(zhuǎn)換為（T），只有通過專門的技術(shù)才可區(qū)分其間細微的差異[3]。②第一代的RFLP、第二代STR的遺傳特點是長度差異，而SNP的遺傳特點是單個堿基的置換，在種群中呈二態(tài)性，在雙等位基因共顯性標記提供的遺傳信息量小于SSR[4]，但是SNP在基因組中位點豐富、遺傳標記密度高、遠多于SSR，能夠為任何待研究基因提供合適標記，可彌補多態(tài)信息含量P（PIC）低于多等位基因SSR的缺陷[5-6]。③SNP的點突變率通常10-9，遺傳穩(wěn)定性遠大于SSR等重復(fù)序列標記[7]。④SNP在基因組中分布具有代表性，非同義編碼區(qū)SNP與蛋白質(zhì)的功能有關(guān)，從cDNA序列獲得的多態(tài)SNP標記一定程度上可與控制性狀的基因連鎖。除此之外，基因調(diào)控區(qū)的SNP則會影響著基因表達量，對于疾病發(fā)生機制的研究具有重要意義[8-9]。⑤SNP基因分型不需要檢測片段長度，可直接通過“全或無”分析，制成芯片開展自動化分析，一般可同時實現(xiàn)104～105個分型檢測[10]，SNP與其他分子標記技術(shù)比較見表1。

表1 幾種常見分子標記技術(shù)特點比較Tab.1 Comparison of characters of common molecular markers

2 SNP常用檢測分型方法

SNP基因分型方式多樣，檢測方法研究進展報道較多[1,11-13,16]，但應(yīng)用在水產(chǎn)動物遺傳學研究上的分型方法不多，常見的有直接測序法、PCR-SSCP、HRM以及自動化強度較高的侵入檢測法、焦磷酸測序法和GoldenGate。

2.1 傳統(tǒng)分型方法

2.1.1 直接測序法

直接測序法是依托DNA測序手段來獲得堿基序列，并通過比較篩選出有效SNP位點的分型方法，一般可分為有PCR產(chǎn)物測序和克隆測序。邢賀飛[14]通過直接測序法對半滑舌鰨Cynoglossus semilaeviNarump基因進行抗病SNP篩選，并篩選到15個SNP位點，其中有1個SNP位點在存活與死亡差異呈現(xiàn)顯著性，且等位基因（G）和基因型（GG）與抗鰻弧菌病呈現(xiàn)顯著相關(guān)性，是半滑舌鰨抗病研究的一個良好的遺傳標記位點。直接測序法需要設(shè)置重復(fù)實驗才能將雜合子篩選出，且位點有限，成本較高，但不需要通過多個位點分型來構(gòu)建遺傳圖譜，可以有效分析水產(chǎn)動物遺傳信息的多樣性與性狀關(guān)聯(lián)，是最為常用的分型方法。

2.1.2 聚合酶鏈式反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析法（PCR-SSCP）

聚合酶鏈式反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性指的是小于300 bp的DNA微小序列中單個堿基的變化所產(chǎn)生的構(gòu)象，通過對PCR反應(yīng)生成的雙鏈DNA片段進行低濃度變性解鏈處理，形成單鏈結(jié)構(gòu)，再對單鏈結(jié)構(gòu)進行電泳分析[15]。李玉梅等[16]對PCR-SSCP技術(shù)的原理與研究進展進行詳述；馬瑞芹[17]運用PCR-SSCP技術(shù)對牙鲆Paralichthys olivaceus的CYP17-I編碼區(qū)的SNPs進行了檢測，分析了兩個SNP位點中CT基因型與CC基因型個體血漿中的睪酮（T）水平差異以及CC基因型與TT基因型性腺指數(shù)（GSI）的顯著性，并構(gòu)建四種二倍型。PCR-SSCP成本經(jīng)濟，操作便捷，靈敏度高，ZHANG等[18]將非對稱PCR-SSCP與傳統(tǒng)的PCR-SSCP進行比較，發(fā)現(xiàn)前者清晰穩(wěn)定、更適用于基因突變檢測，是PCR-SSCP技術(shù)發(fā)展重點。

2.1.3 高分辨率熔解曲線法（HRM）

高分辨率熔解曲線法是基于不同核酸物理性質(zhì)的差異，將熒光染料加入PCR反應(yīng)體系，當含熒光染料的DNA解旋后，便可收集熒光信息形成熔解曲線[19]。當DNA序列中某個堿基發(fā)生變化，熔解曲線便會發(fā)生相應(yīng)的改變，便可通過軟件對遺傳信息進行分析。逄錦菲[20]通過HRM技術(shù)對96尾中國對蝦Fenneropenaeus chinensis進行檢測發(fā)現(xiàn)了93個顯示多態(tài)性的SNPs，并對其群體抗性進行基因分型，發(fā)現(xiàn)抗性群體與敏感群體分布差異顯著。HRM技術(shù)通量高、操作簡便、靈敏度和特異性強，可以準確快捷地篩選SNP位點。SEEB等[21]運用HRM技術(shù)在大麻哈魚Oncorhynchus keta 202個樣本中檢測出SNPs，其中有37個SNP位點滿足哈-溫平衡期望。目前大多HRM技術(shù)被商業(yè)化占用，缺少新技術(shù)革新的靈活性，LI等[22]介紹了基于數(shù)字圖像處理公共程序的高分辨率熔解曲線分析軟件，可以有效地獲取濾波一階微分曲線、鑒定熔解區(qū)域、熒光性與正常曲線間差集等。CELINE等[23]運用HRM技術(shù)對21個SNP位點基因分型，實現(xiàn)快速、有效地識別樣品種類，并在新一代測序中追蹤樣品，滿足現(xiàn)代分子遺傳學試驗中完整干態(tài)、濕態(tài)實驗室研究的需求。

2.2 高自動化分型方法

2.2.1 侵入檢測法

侵入檢測法的原理是等位基因特異性初始探針的一個5’端的擺動序列不與目的DNA互補結(jié)合[24]。侵入探針的3’端可以通過SNP位點的堿基特異性形成重疊區(qū)，再用核酸內(nèi)切酶I識別切斷，釋放目標特異性產(chǎn)物，然后通過裂解酶裂解5’端擺動序列形成折疊結(jié)構(gòu)，進而從淬滅熒光基團中釋放報告熒光基團，發(fā)射熒光，以此來追蹤報告SNPs。侵入檢測法可通過微量樣本檢測SNP突變情況，易于自動化操作，侵入檢測原理見圖1。

圖1 侵入檢測原理圖Fig.1 Principle of intrusion detection

2.2.2 焦磷酸測序法

焦磷酸測序技術(shù)[25]是依托PCR擴增模板單鏈與引物雜交，在多種酶作用下實現(xiàn)對模板遺傳信息的分析。模板與dNTP互補配對，并通過DNA聚合酶延伸，釋放焦磷酸基團，焦磷酸基團在三磷腺苷硫酸化酶的酶促作用下與5’-磷酸化硫酸腺苷生成ATP，然后熒光素酶使得ATP與熒光素發(fā)生作用，可根據(jù)dNTP種類和熒光強弱來跟蹤記錄模板序列。王文基[26]使用焦磷酸測序技術(shù)對半滑舌鰨Cynoglossus semilaevis組織測序，得到75萬個序列。曾地剛等[27]運用焦磷酸測序法對凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei的CTLS序列編號為C681G的SNP位點分析，發(fā)現(xiàn)C/C、C/G和G/G基因型以及基因型頻率符合哈-溫平衡，且在群體中該SNP位點與體重不顯著。CRISTIAN等[28]運用454焦磷酸測序法對蛤蜊Mesodesma donacium進行分析，發(fā)現(xiàn)2 594個與613共有序列相關(guān)的SNP位點，平均每260 bp就有一個SNP位點，A/G、A/T以及C/T多態(tài)性較為豐富，通過熱休克蛋白-70及翻譯延長因子1-a注解基因驗證了12個SNP位點軌跡。焦磷酸測序法精確度高、重復(fù)性好、無需熒光標記、電泳等，可配合高通量測序儀器準確、直接測定序列，特別適用于短至中等長度序列。

2.2.3 微珠芯片技術(shù)（GoldenGate）

微珠芯片技術(shù)是通過寡核苷酸對SNP位點進行識別，經(jīng)過延伸、連接作用，形成等位基因特異性模板芯片，再運用微珠陣列閱讀程序?qū)π酒蠠晒庑盘栠M行掃描分析，自動對基因型聚類分析[29]。目前較為先進的iSelect Infinium Custom Genotyping檢測系統(tǒng)可以同時測定千萬個基因型，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學[30-34]、作物基因組學[35-39]，這為水產(chǎn)動物基因組學研究提供參考。LAPEGUE等[40]通過電腦模擬及GoldenGate基因分型對太平洋牡蠣Crassostrea gigas和歐洲平牡蠣Ostrea edulis SNP位點進行研究，利用Illumina公司GoldenGate陣列技術(shù)為兩種牡蠣設(shè)計兩套384個SNP標記，發(fā)現(xiàn)每種牡蠣基因型SNP位點多態(tài)性比率約60%，并通過仿真模擬，發(fā)現(xiàn)至少有150個標記需要完成精確的親本分配，可有效地研究野生群體與人工選擇群體間的連通性及牡蠣的選擇性育種。常見的高通量分型技術(shù)還有基因芯片[41]、TaqMan技術(shù)[42]、MALDI-TOF[43]等，因價格昂貴等因素，尚未發(fā)現(xiàn)在水產(chǎn)動物遺傳學中應(yīng)用。

3 SNP標記在遺傳學中的應(yīng)用

3.1 基因定位與遺傳連鎖圖譜構(gòu)建

構(gòu)建遺傳圖譜可以顯示所知基因或遺傳標記的相對位置，對水產(chǎn)動物QTL進行精準定位，有利于基因克隆研究的開展。張建勇[44]設(shè)計800組SNP引物，篩選出200組構(gòu)建中國對蝦Fenneropenaeus chinensis親本遺傳連鎖圖譜，包含16個連鎖群、180個標記，總長度899.3cM，覆蓋率分別為51.94%和53.77%，依據(jù)圖譜檢驗中國對蝦體重、體長性狀連鎖顯著性，發(fā)現(xiàn)了C2 904-168、C1 2871-235兩個與體重相關(guān)的SNP位點。張振[45]利用SSR、SNP分子標記技術(shù)成功對皺紋盤鮑Haliotis discus hannai2個家系作圖構(gòu)建遺傳連鎖圖譜，覆蓋了18個連鎖群，連鎖群中分子標記均數(shù)約為18.0，平均間隔2.65 cM，圖譜總長度810.32cM，覆蓋率88.8%。HSIN等[46]運用“ssalar01”高密度SNP矩陣對60組核心家系622條大西洋鮭魚Salmo salar進行基因分型并構(gòu)建高密度遺傳連鎖圖譜，圖譜包含超過96 K的SNP位點和29組鮭魚連鎖群體，每組SNP位點與染色體長度（r=0.95）呈顯著正相關(guān)。盡管遺傳與物理圖譜標記規(guī)則大體一致，但仍存在差異區(qū)域，覆蓋率增加了6.5%，雄性重組率低于雌性，在端粒區(qū)有明顯峰值。LI等[47]通過250 K SNP陣列構(gòu)建斑點叉尾鮰Ietalurus Punetaus高密度、高分辨率遺傳圖譜，包含了54 342個SNP位點，總長度2505.4 cM，雌性與雄性重組率為1.7:1，覆蓋率為90%。AO等[48]運用限制酶位點DNA測序（RAD-seq）技術(shù)發(fā)現(xiàn)31 191個SNP位點均勻分布在大黃魚Larimichthys crocea基因組上，其中有10 150個SNP位點分屬于24個共識連鎖群體，遺傳圖譜總長度5451.3 cM，位點間距0.54 cM，并利用大黃魚遺傳圖譜對棘魚Gasterosteus aculeatus和青鳉Oryzias latipes基因組同線性分析，發(fā)現(xiàn)大黃魚同棘魚的親緣關(guān)系近于青鳉。同時，在大黃魚24個染色體上標記出1 274個免疫力相關(guān)基因和195個缺氧相關(guān)基因。目前，有很大一部分水產(chǎn)生物的第一代、第二代遺傳圖譜因標記密度較低而難以進行精細QTL分析，通過SNP技術(shù)可以有效地解決相關(guān)水產(chǎn)動物遺傳連鎖圖譜上標記位點數(shù)量不足等現(xiàn)狀，對水產(chǎn)動物遺傳學研究具有重要的意義。

3.2 基因連鎖不平衡、關(guān)聯(lián)分析

基因連鎖是基于兩等位基因在同一染色體上存在幾率大于隨機分布同時存在的幾率，檢測分析水產(chǎn)生物基因組中的序列與性狀位點關(guān)系，便于新基因定位與克隆[49]。關(guān)聯(lián)分析一般是在連鎖不平衡基礎(chǔ)上，通過SNP標記將目的基因與目的性狀相互關(guān)聯(lián)。邱櫻[50]基于7個EST-SNP位點對馬氏珠母貝Pinctada martensii兩個野生群體以及引進群體進行遺傳分析，發(fā)現(xiàn)每個位點均包含兩個等位基因，并將其中3個位點在子三代中擴增，發(fā)現(xiàn)基因型比符合孟德爾遺傳規(guī)律，可以作為馬氏珠母貝群體遺傳學分析位點。曹婷婷[51]通過線性模型對草魚Ctenopharyngodon idellus的2個SNP位點和質(zhì)量、體長等生長性狀進行關(guān)聯(lián)分析，發(fā)現(xiàn)個別位點不同基因型個體的質(zhì)量均值差異顯著，AA基因型各項指標均值顯著高于CC型，草魚的CPA1基因可作為草魚分子輔助育種的候選基因。ZHANG等[52]利用SNP標記分析團頭魴Megalobrama amblycephala低氧功能基因fih-1，發(fā)現(xiàn)團頭魴氨基酸序列顯示同其他脊椎動物同源性很高，結(jié)構(gòu)和功能區(qū)域高度保守，其不同組織和發(fā)展階段的mRNA水平曲線表明團頭魴fih-1基因在肝臟和肌肉中表達程度很高，其次是腮、腸、脾臟。團頭魴fih-1 mRNA在早期胚胎發(fā)育過程中表達程度較高，然后會下降至較低水平，在孵化后又會保持在相對高水平的狀態(tài)。GUTIERREZ等[53]通過4.5K SNP陣列對480個大西洋鮭魚Salmo salar進行全基因組關(guān)聯(lián)研究，發(fā)現(xiàn)早熟幼鮭Ssa10、Ssa02、Ssa13、Ssa25、Ssa12位點標記和晚熟幼鮭Ssa28、Ssa01、Ssa21位點處標記關(guān)聯(lián)顯著，Ssa13位點處生長關(guān)聯(lián)性水平較低，與基因標記相關(guān)的候選位點可以反映性成熟發(fā)育歷程的直屬關(guān)系，在大西洋鮭魚育種應(yīng)用中的生長相關(guān)標記檢測需要運用高密度SNP克服較低水平的連鎖不平衡。FU等[54]分析了羅非魚Oreochromis sppcDNA肥大細胞蛋白酶8（MCP8）及其基因組結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)MCP-8基因在脾臟中表達高，在肝臟、血液、大腦、鰓、腸、皮膚中次之，在腎臟、肌肉和眼表達水平較低，且在MCP-8基因序列中發(fā)現(xiàn)5個SNPs，其中有三個位點對無乳鏈球菌抗性顯著。水產(chǎn)動物抗性性狀基因定位及關(guān)聯(lián)分析是水產(chǎn)動物分子育種研究的重要內(nèi)容，其主要限制因素是缺少足夠的標記，而SNP分布密度廣、幾乎遍布整個基因組，在全基因組關(guān)聯(lián)分析研究中優(yōu)于其他分子標記技術(shù)，且一個染色體區(qū)域一般僅有幾個常見的SNP單體型，但其代表大部分的多態(tài)性，僅需少數(shù)SNP標簽即可實現(xiàn)基因組選擇、遺傳以及育種過程中對目的基因的跟蹤[55]。

3.3 遺傳多樣性分析

SNP可通過對不同群體比較，獲得不同地理群體遺傳結(jié)構(gòu)，進而有效地分析該物種的遺傳多樣性，為水產(chǎn)動物分子輔助育種提供參考。金玉琳[56]通過HRM分析55個SNP位點在六個長牡蠣Crassostreagigas家系中的遺傳模式，發(fā)現(xiàn)其中的48個位點表現(xiàn)過多態(tài)性，沒有無效等位基因，呈遺傳分離現(xiàn)象，且家系SNP多態(tài)性的鑒定成功率與親本數(shù)量呈負相關(guān)。于凌云等[57]基于草魚Cteaophoyngodon idellus0 EST數(shù)據(jù)庫中21個SNPs分析長江、珠江水系6個地理群體遺傳結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)監(jiān)利群體PIC、Ne、He最高，沅江群體最低，并對遺傳距離聚類分析，確立了長江與珠江部分群體的遺傳結(jié)構(gòu)和親緣關(guān)系。江麗華[58]運用SNP技術(shù)對舟山、漳浦、澄邁以及寧德四個地理種群的大黃魚Pseudosciaena crocea進行遺傳背景分析，獲得57組良好分型位點以及10個基因型，其中AT、GC為稀有突變型，可以在大黃魚遺傳多樣性以及種群結(jié)構(gòu)分析中利用。URTZI等[59]對取自26個地理位置共1 331個長鰭金槍魚Thunnus alalunga進行SNP位點基因分型，發(fā)現(xiàn)過度捕撈影響著長鰭金槍魚種群結(jié)構(gòu)和遺傳多樣性。對地中海、大西洋、印度洋和太平洋的群體進行基因水平上同質(zhì)群體界定，發(fā)現(xiàn)北大西洋長鰭金槍魚有效種群大小沒有出現(xiàn)歷史性下降，其種群遺傳多樣性與進化潛力沒有受到過度捕撈顯著影響。JOBRAN等[60]對加拿大小奴湖的白鮭魚Coregonus clupeaformis群體進行研究，發(fā)現(xiàn)了51個編碼基因區(qū)SNP位點，且當?shù)匕柞q魚系單一遺傳繁殖群體，并通過基因掃描技術(shù)發(fā)現(xiàn)一個與生長差異相關(guān)的二磷酸核苷激酶A編碼區(qū)SNP位點。KHRUSTALEVA等[61]對堪察加-白令區(qū)域的紅大麻哈魚Oncorhynchus nerka群體的45個SNP位點的可變性進行研究，發(fā)現(xiàn)島嶼與大陸的紅大麻哈魚群體存在相當大的差異，當?shù)丨h(huán)境壓力很大程度上決定著紅大麻哈魚單核苷酸堿基替換頻率，部分區(qū)域群體出現(xiàn)較高的遺傳分化。對于水產(chǎn)動物來說，表型性狀數(shù)量有限，難以滿足多樣性研究需求，故而需要從分子水平上分析物種遺傳多樣性。處于非編碼區(qū)的SNP在進化上屬于中性，沒有選擇壓力，其保守程度低于編碼區(qū)的SNP位點，在群體中的豐度是遺傳漂變結(jié)果[62]，有利于對種群遺傳多樣性進行綜合評估。

表2 SNP在水產(chǎn)動物遺傳學中應(yīng)用Tab.2 Applications of SNP in aquatic animal genetics

4 展望

SNP的發(fā)現(xiàn)方法、分型手段多種多樣，水產(chǎn)動物一般無需全基因組測序，主要還是通過EST、目標特異性PCR、簡化RSS以及BAC末端序列數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)獲取，分型方式可由成本、自動化程度、標記數(shù)量、樣品量以及可靠性等而定，具體選擇哪種研究方法取決于研究目標與研究條件，水產(chǎn)動物樣品量一般相對較小，目前多采用HRM、焦磷酸測序等分型手段。

針對目前的研究狀況，SNP研究重點應(yīng)側(cè)重于以下幾個方面：①國內(nèi)SNP技術(shù)研究多集中于應(yīng)用方面，在SNP技術(shù)的檢測、分型方法、成本以及技術(shù)革新等方面的研究力度還有待于加強。②目前，DNA微陣列與芯片技術(shù)的應(yīng)用大大提高了SNP檢測分型的精確度，但仍沒有研發(fā)出同時符合高通量、高精度、低成本的理想檢測方法，開發(fā)高效的分析系統(tǒng)、構(gòu)建基因分型技術(shù)平臺將是SNP技術(shù)的研究重點。③與第一、二代分子技術(shù)在水產(chǎn)動物基因組學研究以及SNP在醫(yī)療、作物等方面的應(yīng)用相比較，SNP在水產(chǎn)動物上的研究與應(yīng)用水平并不高，但隨著獲得越來越多的水產(chǎn)動物序列信息，繪制包含大量SNP標記的遺傳圖譜，通過QTL基因組掃描等技術(shù)對水產(chǎn)動物進行功能相關(guān)分析，將能夠更好地集中于水產(chǎn)動物經(jīng)濟性狀以及生物學發(fā)面的研究，高效地推動水產(chǎn)動物遺傳育種發(fā)展。

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Single Nucleotide Polymorphism and Its Application in Aquatic Animal Genetics

BIAN Guang-ming,HU Ze-hui,CHAI Xue-jun,et al
(Institute of Marine and Fisheries of Zhejiang Ocean University,Marine Fishery Institute of Zhejiang Province,Zhoushan 316021,China)

Single nucleotide polymorphism(SNP),as the latest generation molecular marker,has many characters with widely spread and automated detection.It could be used in the aquatic animal genetics.This paper summarized the characteristics,application of main detection methods of SNP,the advantage and disadvantage of genotyping inrecent researchesfor aquatic animals.latestly,the prospect of SNP molecular marker was also predicted.

SNP;aquatic animals;genotyping;application

S 917

A

1008-830X(2016)04-0346-08

2016-05-10

浙江省科技廳合作與轉(zhuǎn)化項目（2013F50003）；浙江省科技廳公益技術(shù)研究農(nóng)業(yè)項目（2014C32069）；舟山市公益類科技項目（2014C31062）；舟山市公益項目（2015C31013）

卞光明（1992-），男，江蘇連云港人，碩士研究生，研究方向：種質(zhì)與種苗工程.E-mail:mingbg@163.com

柴學軍（1972-），男，浙江舟山人，教授級高級工程師，研究方向：魚類繁育與海洋生物技術(shù).E-mail:chaixj6530@sohu.com