胡耀芬

湖北省棗陽市第一人民醫(yī)院(棗陽441200)

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活血復方對腦缺血再灌注神經細胞凋亡的影響*

胡耀芬

湖北省棗陽市第一人民醫(yī)院(棗陽441200)

目的：探究活血復方對腦缺血再灌注神經細胞凋亡的影響。方法：建立大鼠腦缺血再灌注及神經細胞凋亡模型，觀察大鼠神經行為學改變，將尼莫地平作為對照組，觀察組活血復方對腦缺血再灌注神經細胞凋亡的影響。結果：假手術組術后2 d、5 d大鼠神經行為學評分與缺血再灌注組、活血復方中劑量組、活血復方高劑量組及尼莫地平組對比，具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)；假手術組術后20 d大鼠神經行為學評分與缺血再灌注組、尼莫地平組對比，具有統(tǒng)計學差異，P<0.05；缺血再灌注組梗死面積占給梗死面積百分比為(19.27±2.29)%與活血復方低劑量組、活血復方中劑量組、活血復方高劑量組、尼莫地平組(P<0.05)；經缺血再灌注后6 h，缺血再灌注組海馬神經凋亡細胞數與假手術組比較顯著增多，具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)?；钛獜头礁鲃┝拷M凋亡細胞數與缺血再灌注組、尼莫地平組比較顯著減少，具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。結論：活血復方治療腦梗塞可有效可緩解缺血再灌注后神經細胞凋亡，有效改善大鼠腦缺血再灌注模型的神經行為癥狀。

隨著人們生活水平的提高，飲食結構的變化，腦血管疾病發(fā)病率不斷上升，在急性腦血管病中腦梗塞發(fā)病率約為75%左右，對人們生活質量產生嚴重影響[1-2]。臨床上對于腦梗塞的治療尚未有重大突破。本研究中經建立腦缺血再灌注大鼠神經模型，探究該方對腦缺血再灌注神經細胞凋亡的影響。

材料與方法

1 動物及環(huán)境 選擇由上海實驗動物中心提供的SD雄性大鼠，體重為180～210g，平均體重為(190.3±7.3)g。環(huán)境即為SPF級動物實驗室，溫度維持在22～26℃，濕度維持在40～70%，每日光照明暗各12h，每隔4min通風一次。

2 藥 物 活血復方配置為活血復方水煎劑，劑量為1.3g/kg，3.25g/kg為低劑量組，6.5g/kg為中劑量組，13.0g/kg為高劑量組，藥劑經藥房鑒定后，于4℃條件下存放。 ②尼莫地平片，使用前將其用蒸餾水配置為1 mg/kg，研磨藥物加蒸餾水混合。

3 分 組 ①觀察組：選擇60只SD大鼠均分為6組，即假手術組，缺血再灌注組，活血復方低劑量組，活血復方中劑量組，活血復方高劑量組，尼莫地平組。假手術組、缺血再灌注組：造模術后每日上下午各2 ml蒸餾水灌胃，20 d?；钛獜头浇M：造模術后每日上下午各2 ml尼莫地平灌胃，20 d。尼莫地

平組：造模手術前后每日上下午各2 ml尼莫地平灌胃，20 d。六組經進食后1 d給予造模手術，且術后20 d灌胃后斷頭取腦，給予大叔神經性為評分及大腦梗死體積檢查。②對照組：選擇42只SD大鼠均分為6組，同觀察組。假手術組、缺血再灌注組：造模術前每日上下午各2 ml蒸餾水灌胃，20 d?；钛獜头浇M：造模術前每日上下午各2 ml尼莫地平灌胃，20 d。尼莫地平組：造模手術前后每日上下午各2 ml尼莫地平灌胃，20 d。六組均第20d灌胃后30 min給予造模手術，且手術復灌后斷頭取腦，給予細胞凋亡檢測。

4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件，且經χ2與t檢驗，P<0.05表明差異具有統(tǒng)計學意義。

結 果

1 各組大鼠神經行為評分對比 假手術組術后2 d、5 d大鼠神經行為學評分與缺血再灌注組、活血復方中劑量組、活血復方高劑量組及尼莫地平組對比，具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)；假手術組術后20d大鼠神經行為學評分與活血復方中劑量組、活血復方高劑量組對比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，與缺血再灌注組、尼莫地平組對比，具有統(tǒng)計學差異(P<0.05),見表1。

表1 各組大鼠神經行為評分對比

2 各組大鼠大腦梗死面積對比 經TTC染色正常組織即變現為玫瑰紅色，梗死組織為白色。缺血再灌注組梗死面積占給梗死面積百分比為(19.27±2.29)%與活血復方低劑量組為(13.20±1.33)%，活血復方中劑量組為(12.36±1.11)%，活血復方高劑量組為(12.24±1.13)%，尼莫地平組為(12.10±1.25)%對比，具有統(tǒng)計學差異，P<0.05，見表2。

表2 各組大鼠大腦梗死面積對比

3 缺血再灌注小鼠海馬神經細胞凋亡細胞對比 假手術組大鼠大腦海馬的存在少量TUNEL染色陽性細胞，神經元排列整齊，核仁清晰。缺血再灌注組大鼠大腦海馬TUNEL陽性細胞呈圓形，細胞核固縮，且于核內現棕褐色TUNEL反應產物，細胞核為半月狀。經缺血再灌注后6h，缺血再灌注組海馬神經凋亡細胞數與假手術組比較顯著增多，具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)?；钛獜头降蛣┝拷M、活血復方中劑量組、活血復方高劑量組凋亡細胞數與缺血再灌注組、尼莫地平組比較顯著減少，具有統(tǒng)計學差異(P<0.05),見表3。

表3 缺血再灌注小鼠海馬神經細胞凋亡細胞對比

討 論

活血復方為治療動脈硬化的基礎方，該方可活血化瘀、益氣健脾，藥方組成包括黃芪、丹參、蒼術、白術、炙甘草、降香、生蒲黃[3-5]。其中黃芪可入脾肺經，可益氣固表、活血止渴、利水消腫、托瘡生肌的功效；丹參可涼血消腫、活血化瘀、養(yǎng)血安神等功效，可控制血壓，增加冠脈流量，抑制血小板聚集[6-7]；蒼術可治濕阻脾胃，解郁，祛風除濕、化陰解凝，具有明顯抗凝血酶作用，顯著延長凝血時間[8-9]；白術可燥濕和中、益氣健脾，不但可免疫調節(jié)，還可有效抗氧化，促進機體清除自由基，控制自由基損傷機體。整體看，該方可益氣活血、調氣運脾，延緩腦部血管衰老[10-13]。

本實驗研究中，建立大鼠腦缺血再灌注及神經細胞凋亡模型，觀察大鼠神經行為學改變，將尼莫地平作為對照組，觀察組活血復方對腦缺血再灌注神經細胞凋亡的影響。結果顯示，假手術組術后20d大鼠神經行為學評分與缺血再灌注組、尼莫地平組對比，具有統(tǒng)計學差異，缺血再灌注組梗死面積占給梗死面積百分比為(19.27±2.29)%與活血復方低劑量組、活血復方中劑量組、活血復方高劑量組、尼莫地平組；經缺血再灌注后6h，缺血再灌注組海馬神經凋亡細胞數與假手術組比較顯著增多，具有統(tǒng)計學差異?；钛獜头降蛣┝拷M、活血復方中劑量組、活血復方高劑量組凋亡細胞數與缺血再灌注組、尼莫地平組比較顯著減少，具有統(tǒng)計學差異。

綜上所述，活血復方治療腦梗塞可有效改善患者臨床癥狀，改善神經功能缺損，改善血液流變學指標；且其可緩解缺血再灌注后神經細胞凋亡，有效改善大鼠腦缺血再灌注模型的神經行為癥狀。

[1] 陶 濤，秦新月，徐廣會.養(yǎng)血清腦顆粒對大鼠腦缺血再灌注損傷后軸突再生及 RGMa 表達的影響 [J]. 第三軍醫(yī)大學學報,2013, 35(7):635-638.

[2] 邢美榮，袁 紅，張玉林，等.疏血通聯(lián)合依達拉奉對大鼠腦缺血再灌注神經細胞凋亡及炎癥水平影響研究[J].陜西中醫(yī),2016,37(6):759-760.

[3] 張 煒,張小蘭,邢 坤. 丹紅注射液對冠脈介入治療患者高敏C-反應蛋白的影響[J]. 陜西醫(yī)學雜志， 2009，38(6)：730-731.

[4] 何 倩,李繼紅,余清平,等.丹龍醒腦片對老年大鼠腦缺血再灌注后炎癥反應的影響 [J]. 現代生物醫(yī)學進展,2014, 14(26): 5042-5044.

[5] Xia J, Qu Y, Shen H,etal.Patients with stable coronary artery disease receiving chronic statin treatment who are undergoing noncardiac emergency surgery benefit from acute atorvastatin reload[J].Cardiology，2014，128(3):285-292.

[6] 來炳祺，蘇 偉，葉 榮，等.異氟烷預處理對腦缺血再灌注大腦保護作用的實驗研究[J].陜西醫(yī)學雜志,2012,41(8):939-941.

[7] Xia J, Qu Y, Shen H,etal.Patients with stable coronary artery disease receiving chronic statin treatment who are undergoing noncardiac emergency surgery benefit from acute atorvastatin reload[J].Cardiology，2014，128(3):285-292.

[8] 李子富. 紅花注射液結合高氧液治療急性腦梗塞療效觀察[J]. 陜西中醫(yī)，2014，34(8)：1023.

[9] 李堅翔. 活血化濁湯聯(lián)合依達拉奉治療腦梗塞90例[J]. 陜西中醫(yī)， 2013，34(10)：1297-1298.

[10] 明 升. 丹紅注射液聯(lián)合西藥治療腦梗塞74例[J]. 陜西中醫(yī)， 2013，34(7)：802-803.

[11] 王 婷,歐 敏,黃友章，等.益肺活血復方對人肺動脈內皮細胞微結構及內分泌功能的影響[J].鄭州大學學報(醫(yī)學版),2013,(6):799-802.

[12] 董亞茹，由鳳秋，楊 震，等.大鼠全腦缺血再灌注損傷后硫酸鎂及胞二磷膽堿的腦保護作用[J].陜西醫(yī)學雜志,2012,41(10):1289-1291.

[13] 羅昌國,李 陽,陸運鑫，等.溫陽活血法對原發(fā)性肝癌肺轉移抑制作用的實驗研究[J].廣西中醫(yī)藥,2015,38(2):67-69.

(收稿：2016-08-17)

*湖北省衛(wèi)計委科研資助項目(WJ2015MB116)

腦梗塞 @活血復方 動物 ，實驗 大鼠

R743.31

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10.3969/j.issn.1000-7369.2017.01.063