牛江婷，伊淑帥，劉宏凱，李登亮，董國英，胡桂學*

( 1.吉林農業(yè)大學 動物科學技術學院，長春 130118；2.北京師范大學 全球變化與地球系統(tǒng)科學研究院，北京 100875)

貓病毒性鼻氣管炎治療性藥物研究進展

牛江婷，伊淑帥1，劉宏凱1，李登亮1，董國英2，胡桂學1*

( 1.吉林農業(yè)大學 動物科學技術學院，長春 130118；2.北京師范大學 全球變化與地球系統(tǒng)科學研究院，北京 100875)

貓病毒性鼻氣管炎(FVRs)是由1型貓皰疹病毒引起的一種對貓科動物健康構成嚴重威脅的病毒性傳染病，其傳播迅速、潛伏感染的特點一直以來都是寵物臨床中診斷與治療的難點。目前存在多種貓皰疹病毒的治療性藥物，但是對藥物治療效果的評價存在很大的爭議。因此，充分認識抗皰疹病毒藥物的研究現(xiàn)狀及治療效果對于FVRs治療方案的制定十分重要。對近年來抗貓皰疹病毒藥物及治療效果的研究進展進行了綜述，以期為FVRs的臨床治療提供理論參考。

貓病毒性鼻氣管炎；貓皰疹病毒；治療性藥物；賴氨酸

貓病毒性鼻氣管炎(Feline viral rhinotracheitis, FVRs)，又稱為貓傳染性鼻氣管炎或貓傳支，是由1型貓皰疹病毒(Feline herpesvirus type 1, FHV-1)感染引起的一種以貓科動物上呼吸道炎癥與角膜結膜炎為主要臨床癥狀的上呼吸道病毒病[1]。FHV-1屬于皰疹病毒科，α-皰疹病毒亞科成員，為線狀雙股DNA病毒，具有復制周期短、傳播迅速、誘導細胞溶解以及引起潛伏感染的特點[2-3]。FHV-1感染幼貓后主要誘發(fā)流涎、咳嗽、鼻眼膿性分泌物等上呼吸道癥狀以及結膜炎、角膜樹枝狀潰瘍、眼周皮膚潰瘍等眼部臨床癥狀，發(fā)病率為100%，病死率可達50%，患病貓康復后可持續(xù)帶毒，造成持續(xù)性感染或潛伏感染[1,4]。目前，貓傳染性鼻氣管炎的治療性藥物主要包括賴氨酸，干擾素以及阿昔洛韋、泛昔洛韋、噴昔洛韋等核苷類抗皰疹病毒藥物[1,5]。但是，國內外學者對各種抗FHV-1藥物治療效果的評價仍然存在爭議，并進行了大量臨床研究予以證明。本文對近年來抗FHV-1藥物及其治療效果的研究進展進行了綜述，以期為FVRs的臨床治療提供理論參考。

1 賴氨酸

20世紀60年代，Tankersley等通過體外試驗證明高濃度賴氨酸可以有效地抑制單純皰疹病毒(Herpes simplex virus , HSV)的復制[6]，此后，食源性賴氨酸被廣泛應用于皰疹病毒感染性疾病的治療。目前，國內外90%的寵物診療機構建議使用食源性賴氨酸治療FHV-1感染引起的FVRs，并提倡通過在貓糧中添加賴氨酸進而預防FHV-1的感染。普遍認為，使用過量的賴氨酸可以有效的抑制FHV-1的復制，從而減輕感染后引發(fā)的臨床癥狀，并降低健康貓感染FHV-1的風險。但是，近年來相關研究證明賴氨酸并沒有拮抗皰疹病毒的作用，補充賴氨酸對于FVRs的治療是無效的，甚至可能會增加FHV-1隱性感染貓復發(fā)的風險[7]。因此，充分認識賴氨酸對FVRs的治療效果及研究現(xiàn)狀，對賴氨酸在寵物臨床中的正確使用以及FVRs治療方案的制定具有重要意義。

1.1 體外研究 鑒于賴氨酸在寵物臨床中使用的普遍性以及治療效果上的爭議性，國內外學者在細胞水平上進行了大量的試驗，希望證明賴氨酸對FHV-1復制的影響。Maggs等通過體外試驗發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)FHV-1時，在CRFK細胞培養(yǎng)液中添加不同濃度賴氨酸與精氨酸對病毒滴度存在顯著的影響，并證明雖然賴氨酸本身不具有拮抗皰疹病毒的作用，但是可以通過降低精氨酸的濃度，進而抑制FHV-1的復制[8]。然而，Cave等通過改變Maggs試驗中賴氨酸與精氨酸的濃度，發(fā)現(xiàn)賴氨酸并不能降低培養(yǎng)液中精氨酸的濃度，也不會抑制FHV-1的復制[9]。分析其原因，可能與試驗中設置的精氨酸濃度有關。皰疹病毒復制過程中需要大量的精氨酸用于病毒衣殼的裝配，降低細胞內精氨酸的濃度會影響病毒粒子的形成，從而抑制皰疹病毒的復制[10-11]。健康貓血漿與細胞內賴氨酸含量為12～15 μg/mL，精氨酸含量為17～23 μg/mL，Maggs等實驗過程中并未考慮精氨酸對FHV-1復制的影響，設置的精氨酸含量均低于正常含量，影響了病毒復制過程中衣殼蛋白的形成，從而抑制了病毒的復制，并不能用于賴氨酸治療效果的準確評價。此外，F(xiàn)ascetti等通過檢測過量飼喂賴氨酸后成年貓血漿中精氨酸的濃度，證明飼喂過量的賴氨酸并不能降低血漿中精氨酸的水平[12]，進一步否定了Maggs等的研究結果?；谏鲜鲅芯拷Y果，推測體外培養(yǎng)FHV-1的過程中，添加賴氨酸并不能抑制FHV-1的復制。

1.2 臨床試驗 2002年，Stiles等首次使用賴氨酸進行了FVRs的臨床治療試驗，結果發(fā)現(xiàn)添加賴氨酸可以有效的減輕FHV-1感染誘發(fā)的打噴嚏、結膜炎等臨床癥狀，降低FVRs臨床評分，但是賴氨酸治療組與對照組結膜拭子FHV-1病毒檢出量并無顯著差異[13]。Maggs等選擇了14只FHV-1感染貓也進行了相同的臨床治療試驗，但是結果與Stiles等的研究結果并不完全一致。Maggs等發(fā)現(xiàn)添加賴氨酸后并不能改變結膜炎等臨床癥狀的發(fā)展進程，反而在一定程度上增加了結膜炎的嚴重程度，但是賴氨酸可以降低FHV-1的傳播風險[14]。考慮到樣本量對臨床試驗準確性的影響，Maggs(樣本量為50只)、Rees(樣本量為291只)、Drazenovich(樣本量為261個動物收容所內所有的貓)等[15-17]分別進行了大規(guī)模的臨床研究，希望證明賴氨酸對FHV-1感染的治療及預防效果，結果發(fā)現(xiàn)補充賴氨酸并不能減輕FHV-1感染引發(fā)的臨床癥狀，反而在一定程度上會誘發(fā)感染貓出現(xiàn)更嚴重的眼部癥狀以及更高的病毒檢出率，同時增加了FHV-1隱性感染貓復發(fā)的風險。

綜合體外研究與臨床試驗的相關研究結果，充分說明賴氨酸對于治療FHV-1感染引起的上呼吸道炎癥與眼部疾病是無效的，甚至可能對FHV-1在貓體內的復制具有增強作用。鑒于缺乏賴氨酸良好治療效果的科學依據，建議貓病毒性鼻氣管炎治療過程中應減少或停止使用賴氨酸，避免使用賴氨酸造成FVRs癥狀加重。

2 核苷類抗皰疹病毒藥物

核苷類抗病毒藥是一類核苷酸類似物，是目前應用最為廣泛的抗皰疹病毒藥物。20世紀60年代初，5-碘尿嘧啶核苷(indoxuridine, IDU)作為第一個批準上市的抗皰疹病毒藥物，打破了世界上無皰疹病毒治療性藥物的歷史。20世紀80年代，新一代核苷類抗皰疹病毒藥物-阿昔洛韋的問世，開辟了皰疹病毒治療性藥物新的里程[18]。目前，最有效的核苷類抗皰疹病毒藥物為無環(huán)鳥苷及其衍生物(包括噴昔洛韋、泛昔洛韋、西多福韋等)，它們與阿昔洛韋的抗病毒機制相同，被皰疹病毒感染的細胞吸收后，經皰疹病毒胸腺激酶磷酸化形成單磷酸鹽，進一步被細胞產生的激酶磷酸化形成三磷酸化合物，模擬核苷酸，競爭性抑制DNA聚合酶，阻斷病毒DNA復制，進而發(fā)揮抗病毒作用[18-19]。

2.1 阿昔洛韋 阿昔洛韋(Acyclovir, ACV)，又稱為無環(huán)鳥苷，是美國FDA批準的第一個用于治療皰疹病毒感染的藥物，也是目前寵物臨床中使用較多的一種FVRs治療性藥物[20]。雖然ACV并不能抑制皰疹病毒在細胞內的復制，但是局部使用高倍劑量的ACV可以有效的減輕皰疹病毒感染引起的鼻部以及眼部癥狀[21]。Williams等通過臨床試驗證明局部使用5倍劑量的ACV對FHV-1感染誘發(fā)的皰疹性結膜炎具有良好的治療效果[22]。因此，寵物臨床中建議FHV-1感染貓眼、鼻局部使用3%阿昔洛韋，連續(xù)使用10～14 d，用于治療FHV-1感染引起的角膜結膜炎。

2.2 三氟胸腺嘧啶核苷 三氟胸腺嘧啶核苷(Trifluorothymidine, TFT)，又稱為三氟胸苷或曲氟胸苷，理論上是針對FVRs感染最有效的局部外用抗病毒藥物，治療效果優(yōu)于碘苷，但是目前尚無相關的臨床試驗予以證明。TFT可滲入未感染皰疹病毒的細胞中，影響健康細胞的生理活動，故不可以用于全身性病毒感染的治療，僅可作為局部外用藥物[23]。感染FHV-1引發(fā)鼻、眼以及眼周皮膚潰瘍的貓，可使用1% TFT軟膏或液體制劑，每天4～6次，連續(xù)使用21 d，可達到一定的治療效果。由于TFT價格昂貴，并且對幼貓皮膚有刺激損傷作用，故寵物臨床中不常使用。

2.3 噴昔洛韋 噴昔洛韋(penciclovir, PCV)為無環(huán)鳥苷類似物，其抗病毒機制以及療效與阿昔洛韋相同，但是PCV的血漿半衰期比ACV長，一般臨床用量為口服90 mg/kg，每天3次，連續(xù)口服21 d。

2.4 泛昔洛韋 泛昔洛韋(famciclovir, FCV)是噴昔洛韋的前體藥物，口服后通過胃腸道轉化為噴昔洛韋發(fā)揮抗病毒作用。Groth等通過細胞試驗證明泛昔洛韋自身并無抗病毒活性，需要通過代謝后轉化為PCV才可以發(fā)揮強大的抗病毒活性，但是抗病毒的作用時間相對較短[24]。FCV轉化為PCV后，隨血液循環(huán)進入組織器官、淚液，進而拮抗皰疹病毒的復制，Sebbag等對口服FCV后血漿與淚液藥代動力學進行了測定，推薦FCV的口服治療劑量為90 mg/kg(間隔時間為12 h)[25]。Thomasy等通過臨床治療試驗進一步證明，F(xiàn)HV-1感染貓口服高劑量的泛昔洛韋(90 mg/kg，每天3次，連續(xù)口服21 d)可以降低感染貓病毒載量，緩解結膜炎等臨床癥狀，有效控制FVRs臨床癥狀的進一步發(fā)展[26-28]。

2.5 昔多福韋 昔多福韋(cidofovir)主要用于治療人類的巨細胞病毒性視網膜炎，也可以作為廣譜的抗病毒藥物用于病毒性感染的治療。細胞與動物治療試驗均證明昔多福韋可以有效地抑制FHV-1的增殖，并表現(xiàn)出良好的治療效果[29-31]。此外，昔多福韋血漿半衰期較長，為65 h，每天內服0.5%昔多福韋兩次便可以有效地抑制FHV-1感染引起的鼻眼潰瘍與其他嚴重的臨床癥狀。雖然昔多福韋療效顯著，但是由于缺乏臨床試驗證明，目前仍處于實驗研究階段。

3 干擾素

干擾素是由宿主細胞釋放的一類具有廣譜抗病毒活性的細胞因子，主要分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。其中，Ⅰ型干擾素是由宿主細胞激活抗病毒免疫應答后釋放的一類細胞因子，大多數細胞均可以釋放，主要包括IFN-α, IFN-β, IFN-ω等。用于治療FVRs的Ⅰ型干擾素主要包括重組人α-干擾素與貓ω-干擾素，但是目前仍處于試驗研究階段，并未投入臨床試驗。

Sandmeyer等使用人源IFN-α治療FHV-1感染貓，結果證明每天口服IFN-α可以在感染初期有效抑制病程的發(fā)展，減輕臨床癥狀[32]。仇婧等利用基因與蛋白質工程技術制備了貓IFN-α與IFN-ω重組蛋白，并對抗病毒活性進行了研究，證明制備的重組貓干擾素可以在細胞水平上有效抑制水皰性口炎病毒的復制，并且IFN-ω抗病毒活性優(yōu)于IFN-α[33]。國內外學者使用重組貓IFN-ω進行了大量關于FHV-1治療的臨床試驗，并對治療劑量、治療方案進行了研究[34-35]。Ballin等比較了皮下注射重組貓IFN-ω與安慰劑(抗生素+祛痰劑)對FHV-1感染貓的治療效果，結果二者對感染貓臨床癥狀的治療效果并無顯著差異，但是注射IFN-ω顯著減少了感染貓的病毒載量[36]。Fenimore、Slack等也通過臨床治療試驗相繼證明，皮下注射人IFN-α與貓IFN-ω均可以減輕FHV-1以及杯狀病毒感染引發(fā)的上呼吸道癥狀，降低感染貓呼吸道病毒載量[37-38]。綜合臨床研究結果，建議貓IFN-ω使用方法為，靜脈注射20 mL濃度為10 MU的IFN-ω 生理鹽水稀釋液，每天5次，連續(xù)10 d。

雖然，已有相關臨床研究證明了干擾素的治療效果，但目前并未批準干擾素在寵物臨床中的使用，仍需進行更多的臨床治療試驗進一步評估干擾素對于FHV-1感染的治療效果，為干擾素的臨床使用提供依據。

4 結 語

目前，隨著人們生活水平的提高，寵物逐漸成為人們生活中必不可少的組成部分，寵物健康也逐漸成為世界寵物行業(yè)關注的熱點問題。貓病毒性鼻氣管炎作為寵物貓常發(fā)病毒病之一，其混合感染、潛伏感染與終身帶毒的特點一直以來都是寵物臨床中治療的難點。因此，了解國內外貓病毒性鼻氣管炎治療性藥物的研究進展，并尋找新型抗皰疹病毒藥物對于FVRs的治療至關重要。應在人類抗皰疹病毒藥物的研究基礎上，加快中藥制劑、免疫球蛋白、單克隆抗體的研發(fā)工作，逐步實現(xiàn)對貓病毒性鼻氣管炎的有效治療。

[1] Maggs D J. Update on pathogenesis, diagnosis, and treatment of feline herpesvirus type 1[J]. Clin Tech Small Anim Pract, 2005, 20(2): 94-101.

[2] Gaskell R, Dawson S, Radford A,etal. Feline herpesvirus [J]. Vet Res, 2007, 38(2): 337-354.

[3] Davison A J, Eberle R, Ehlers B,etal. The order herpesvirales [J]. Arch Virol, 2008, 154(1): 171-177.

[4] Gaskell R M, Radford A D, Dawson S. Feline infectious respiratory disease[M]//Feline Medicine and Therapeutics, Third Edition. 2008.

[5] Gould D. Feline herpesvirus-1: ocular manifestations, diagnosis and treatment options[J]. J Feline Med Surg, 2011, 13(5): 333-346.

[6] Tankersley R W. Amino acid requirements of herpes simplex virus in human cells[J]. J Bacteriolog, 1964, 87(3): 609-613.

[7] Bol S, Bunnik E M. Lysine supplementation is not effective for the prevention or treatment of feline herpesvirus 1 infection in cats: a systematic review[J]. BMC Vet Res, 2015, 11(1): 284.

[8] Maggs D J, Collins B K, Thorne J G,etal. Effects of L-lysine and L-arginine oninvitroreplication of feline herpesvirus type-1[J]. Am J Vet Res, 2000, 61(12): 1474-1478.

[9] Cave N J, Dennis K, Gopakumar G,etal. Effects of physiologic concentrations of l-lysine oninvitroreplication of feline herpesvirus 1[J]. Am J Vet Res, 2014, 75(6): 572.

[10] Griffith R S, Delong D C, Nelson J D. Relation of arginine-lysine antagonism to herpes simplex growth in tissue culture [J]. Chemo￣therapy, 1981, 27(3): 209-213.

[11] Becker Y, Olshevsky U, Levitt J. The role of arginine in the replication of herpes simplex virus [J]. J Gen Virol,1967,1(4):471.

[12] Fascetti A J, Maggs D J, Kanchuk M L,etal. Excess dietary lysine does not cause lysine-arginine antagonism in adult cats [J]. J Nutr, 2004, 134(8): 2042S-2045S.

[13] Stiles J, Townsend W M, Rogers Q R,etal. Effect of oral administration of L-lysine on conjunctivitis caused by feline herpesvirus in cats[J]. Am J Vet Res, 2002, 63(1): 99-103.

[14] Maggs D J, Nasisse M P, Kass P H. Efficacy of oral supplementation with L-lysine in cats latently infected with feline herpesvirus[J]. Am J Vet Res, 2003, 64(1): 37-42.

[15] Maggs D J, Sykes J E, Clarke H E,etal. Effects of dietary lysine supplementation in cats with enzootic upper respiratory disease [J]. J Feline Med Surg, 2007, 9(2): 97-108.

[16] Rees T M, Lubinski J L. Oral supplementation with L-lysine did not prevent upper respiratory infection in a shelter population of cats[J]. J Feline Med Surg, 2008, 10(5): 510-513.

[17] Drazenovich T L, Fascetti A J, Westermeyer H D,etal. Effects of dietary lysine supplementation on upper respiratory and ocular disease and detection of infectious organisms in cats within an animal shelter[J]. Am J Vet Res, 2009, 70(11): 1391-1400.

[18] Maggs D J. Antiviral therapy for feline herpesvirus infections[J]. Vet Clin North Am Small Anim Prac, 2010, 40(6): 1055-1062.

[19] Thomasy S M, Maggs D J. A review of antiviral drugs and other compounds with activity against feline herpesvirus type 1[J]. Vet Ophthalmology, 2016, 19(S1): 119-130.

[20] Hartley C. Treatment of corneal ulcers: what are the medical options? [J]. J Feline Med Surg, 2010, 12(5): 384-397.

[21] Weiss R C. Synergistic antiviral activities of acyclovir and recombinant human leukocyte (alpha) interferon on feline herpesvirus replication [J]. Am J Vet Res, 1989, 50(10): 1672-1677.

[22] Williams D L, Robinson J C, Lay E,etal. Efficacy of topical aciclovir for the treatment of feline herpetic keratitis: results of a prospective clinical trial and data frominvitroinvestigations[J]. Vet Rec, 2005, 157(9): 254-257.

[23] Pavan L D, Foster C S. Trifluorothymidine and idoxuridine therapy of ocular herpes[J]. Am J Ophthalmolog, 1977, 84(6): 818-825.

[24] Groth A D, Contreras M T, Fong H K,etal.Invitrocytotoxicity and antiviral efficacy against feline herpesvirus type 1 of famciclovir and its metabolites [J]. Vet Ophthalmology, 2013, 17(4): 268-274.

[25] Sebbag L, Thomasy S M, Woodward A P,etal. Pharmacokinetic modeling of penciclovir and BRL42359 in the plasma and tears of healthy cats to optimize dosage recommendations for oral administration of famciclovir [J]. Am J Vet Res, 2016, 77(8): 833.

[26] Thomasy S M, Maggs D J, Moulin N K,etal. Pharmacokinetics and safety of penciclovir following oral administration of famciclovir to cats[J]. Am J Vet Res, 2007, 68(11): 1252-1258.

[27] Thomasy S M, Lim C C, Reilly C M,etal. Evaluation of orally administered famciclovir in cats experimentally infected with feline herpesvirus type-1 [J]. Am J Vet Res, 2011, 72(1): 85-95.

[28] Malik R, Lessels N S, Webb S,etal. Treatment of feline herpesvirus-1 associated disease in cats with famciclovir and related drugs[J]. J Feline Med Surg, 2009, 11(1): 40-48.

[29] Maggs D J, Clarke H E.Invitroefficacy of ganciclovir, cidofovir, penciclovir, foscarnet, idoxuridine, and acyclovir against feline herpesvirus type-1[J]. Am J Vet Res, 2005, 65(4): 399-403.

[30] Sandmeyer L S, Keller C B, Bienzle D. Effects of cidofovir on cell death and replication of feline herpesvirus-1 in cultured feline corneal epithelial cells [J]. Am J Vet Res, 2005, 66(2): 217-222.

[31] Fontenelle J P, Powell C C, Veir J K,etal. Effect of topical ophthalmic application of cidofovir on experimentally induced primary ocular feline herpesvirus-1 infection in cats [J]. Am J Vet Res, 2008, 69(2): 289-293.

[32] Sandmeyer L S, Keller C B, Bienzle D. Effects of interferon-alpha on cytopathic changes and titers for feline herpesvirus-1 in primary cultures of feline corneal epithelial cells[J]. Am J Vet Res, 2005, 66(2): 210.

[33] 仇 婧. 貓α和ω干擾素的原核表達及抗病毒活性測定[D]. 南京農業(yè)大學, 2013.

Chou J. The prokapyotic expression and antiviral activity assay of feline interferon alpha and omega [D]. Nangjing Agriculture University, 2015.

[34] Haid C, Kaps S, Gonczi E,etal. Pretreatment with feline interferon omega and the course of subsequent infection with feline herpesvirus in cats[J]. Vet Ophthalmolog, 2007, 10(5): 278-284.

[35] Thiry E, Addie D, Boucrautbaralon C,etal. Feline herpesvirus infection. ABCD guidelines on prevention and management[J]. J Feline Med Surg, 2009, 11(7): 547-555.

[36] Ballin A C, Schulz B, Helps C,etal. Limited efficacy of topical recombinant feline interferon-omega for treatment of cats with acute upper respiratory viral disease[J]. Vet J, 2014, 202(3): 466-470.

[37] Fenimore A, Carter K, Fankhauser J,etal. Evaluation of intranasal vaccine administration and high-dose interferon-2b therapy for treatment of chronic upper respiratory tract infections in shelter cats[J]. J Feline Med Surg, 2015, 18(8): 577-586.

[38] Slack J M, Stiles J, Leutenegger C M,etal. Effects of topical ocular administration of high doses of human recombinant interferon alpha-2b and feline recombinant interferon omega on naturally occurring viral keratoconjunctivitis in cats[J]. Am J Vet Res, 2013, 74(2): 281-289.

(編輯：李文平)

AdvancesinResearchontheTherapeuticDrugsofFelineViralRhinotracheitis

NIU Jiang-ting1, YI Shu-shuai1, LIU Hong-kai1, LI Deng-liang1, DONG Guo-ying2, HU Gui-xue1*

(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,JilinAgriculturalUniversity,Changchun130118,China;2.CollegeofGlobalChangeandEarthSystemScience,BeijingNormalUniversity,Beijing100875,China)

HUGui-xue,E-mail:guixue1964@126.com

Feline viral rhinotracheitis (FVRs) is a viral infection caused by feline herpesvirus type 1 which constitutes a great threat on feline health, and its characteristics of spread quickly and latent infection have always been a difficulty in clinical diagnosis and treatment of pet. At present, there are many anti-feline herpesvirus agents, but the evaluations of treatment effects are disputed. So it is necessary to understand fully the research status and treatment effects of anti-feline herpesvirus agents to make treatment plan of FVRs. In this paper, the progress in research of anti-feline herpesvirus agents and treatment effects were expound, it will be helpful to the clinic treatment of FVRs.

feline viral rhinotracheitis; feline herpesvirus; therapeutic drugs; lysine

10.11751/ISSN.1002-1280.2017.11.10

2017-03-10

A

1002-1280 (2017) 11-0065-06

S852.65

國家重點研發(fā)計劃項目課題(2016YFD0501002)

牛江婷，碩士研究生，從事動物病毒學研究。

胡桂學。E-mail: guixue1964@126.com