趙淑敏，陳文鋒，施曉瑩，周若夏，趙文昌（廣東醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣東東莞523808）

口服結(jié)腸靶向給藥系統(tǒng)（Oral colon-specific drug delivery system，OCDDS）是指通過藥物傳遞技術(shù)使藥物口服后在上消化道不釋放，被輸送至回盲部后在結(jié)腸部位釋放而發(fā)揮局部或全身療效作用的一種新型定位給藥系統(tǒng)[1]。大量研究表明，OCDDS能顯著增強(qiáng)局部療效，降低不良反應(yīng)，彌補(bǔ)了許多傳統(tǒng)口服制劑的不足，在許多胃腸道疾病如潰瘍性結(jié)腸炎、克恩羅病、結(jié)腸腫瘤等的治療上有廣闊的應(yīng)用前景[2]。按照藥物釋放機(jī)制可將OCDDS分為以下幾類：pH敏感型、時(shí)間依賴型、壓力控制型、酶觸型、脈沖釋藥型、生物粘合技術(shù)型、納米技術(shù)型等[3]。近年來，OCDDS的相關(guān)研究已經(jīng)取得很大的進(jìn)展，如何評價(jià)其體內(nèi)外釋藥性顯得尤為重要。為此，筆者查閱相關(guān)研究文獻(xiàn)，對OCDDS的體內(nèi)、體外釋藥性評價(jià)方法進(jìn)行了歸納和總結(jié)。

1 體外釋藥性評價(jià)

藥物制劑的體外釋藥性評價(jià)是處方篩選和優(yōu)化的主要手段，對于研究制劑的體內(nèi)、體外相關(guān)性具有重要的意義。體外釋藥性評價(jià)主要考察制劑在不同溶出介質(zhì)中的釋放過程，溶出度試驗(yàn)是研究大部分給藥體系包括OCDDS的體外釋藥性的方法[4]。溶出度試驗(yàn)主要依照胃腸道內(nèi)pH值變化（胃pH在0.9～1.5，小腸pH在6.0～6.8，結(jié)腸pH在6.5～7.5）以及藥物在各部位轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間而設(shè)計(jì)，用不同pH的緩沖介質(zhì)以及不同的時(shí)間間隔模擬藥物在人體胃腸道中的過程[5]。本文根據(jù)溶出度試驗(yàn)中溶出介質(zhì)的差異，將OCDDS的體外釋藥性評價(jià)方法分為常規(guī)的體外釋放度測定和改良的體外釋放度測定。

1.1 常規(guī)的體外釋放度測定

大多數(shù)OCDDS制劑都參考藥典中腸溶制劑的溶出度測定方法進(jìn)行體外釋放度測定，根據(jù)不同的活性成分或劑型選擇轉(zhuǎn)籃法、槳法或者小杯法等，利用不同pH的緩沖溶液作為溶出介質(zhì)來模擬胃液、小腸液和結(jié)腸液。Liang L等[6]在以白芨多糖（BSP）為骨架的苦豆子總堿（TASA）結(jié)腸靶向微丸的研制過程中，利用TDTF自動溶出度儀（轉(zhuǎn)籃法）對所制備的具有Eudragit S100和Eudragit RS30D三層包衣的微丸進(jìn)行體外釋放度測定。微丸在900 mL的溫度（37±0.5）℃的pH 1.2稀鹽酸溶液模擬胃液中持續(xù)溶出2 h，之后用pH 6.8磷酸鹽緩沖液模擬小腸液溶出3 h，最后用pH 7.4磷酸鹽緩沖液模擬結(jié)腸液持續(xù)溶出至24 h。利用這種方法篩選出在前5 h內(nèi)不釋放或者較少釋放的包衣處方，可認(rèn)為其體外溶出特性符合結(jié)腸靶向釋放要求。另一項(xiàng)研究中，Vemula SK[7]使用USP 1型溶出度測定儀在轉(zhuǎn)速為50 r/min、溫度為（37±0.5）℃的不同溶出介質(zhì)中測定氟比洛芬（FLB）雙層壓縮包衣結(jié)腸靶向片的體外釋放度，在0.1 mol/L HCl溶液、pH 5.5緩沖溶液中各溶出2 h，之后在pH 7.4磷酸鹽緩沖液中進(jìn)行長達(dá)24 h的溶出，得到FLB在胃和小腸累積釋放量為（3.42±0.12）%、在結(jié)腸的累積釋放量達(dá)到（99.78±0.74）%的包衣處方，可認(rèn)為此處方具有結(jié)腸靶向釋藥特性。對于pH敏感型、時(shí)間依賴型、pH-時(shí)間依賴型的結(jié)腸靶向制劑，常規(guī)的溶出度試驗(yàn)方法能夠較準(zhǔn)確及便利地模擬人體胃腸道的pH變化及轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間，再根據(jù)試驗(yàn)所獲得的藥物溶出曲線，進(jìn)行多種釋藥模型的擬合，由此可以推斷出制劑的體外釋放行為。

1.2 改良的體外釋放度測定

生理狀態(tài)下胃腸道環(huán)境的變化除pH值外還包括細(xì)菌數(shù)量和種類、酶的種類及活性、內(nèi)容物的混合強(qiáng)度等，因此藥典所規(guī)定的方法用于緩控釋制劑的評價(jià)具有一定的局限性。隨著OCDDS多種新釋藥機(jī)制的出現(xiàn)，藥物的體外釋放度評價(jià)方法也隨之不斷完善。

1.2.1 釋放介質(zhì)中加入酶 結(jié)腸內(nèi)有大量的酶系，主要有多糖酶、糖苷酶、偶氮還原酶等。Kumar B等[8]在研究瓜耳豆膠封閉的介孔二氧化硅納米粒這一酶觸型結(jié)腸靶向載體（GG-MSN）過程中，利用5-氟尿嘧啶作為模型藥物，比較在普通的緩沖溶液以及有結(jié)腸特異性酶混合物的緩沖溶液中藥物的釋放度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在兩種介質(zhì)中藥物的釋放度存在較大差異。Ursekar BM等[9]在研究大豆多糖在結(jié)腸靶向釋藥系統(tǒng)中的應(yīng)用時(shí)，按照常規(guī)的溶出度試驗(yàn)方法進(jìn)行6 h的試驗(yàn)后，將一定量的果膠酶加入到試驗(yàn)組一半的樣品的溶出介質(zhì)中，發(fā)現(xiàn)果膠酶對于大豆多糖乙基纖維素包衣的抗張強(qiáng)度和表面形態(tài)有很大影響，能顯著增加藥物的釋放。此外，還有研究者在溶出介質(zhì)中分別加入胃蛋白酶、胰酶、葡萄糖苷酶來模擬胃腸道的環(huán)境，發(fā)現(xiàn)對于酶控釋OCDDS可以增加藥物在結(jié)腸的釋放度[10]。提示在溶出介質(zhì)中加入胃腸道相關(guān)酶能更好地模擬胃腸道環(huán)境，對酶觸型OCDDS的體外釋藥性評價(jià)具有重要的意義，而不足之處在于其增加了試驗(yàn)成本及工作量。

1.2.2 釋放介質(zhì)中加入有益菌種、大鼠盲腸內(nèi)容物或人類糞便 結(jié)腸內(nèi)獨(dú)特的菌群能夠產(chǎn)生獨(dú)特的酶系，使得許多高分子材料在作為OCDDS制劑載體時(shí)在結(jié)腸可被降解。在一項(xiàng)利用5-氟尿嘧啶作為模型藥物的納米多糖結(jié)腸靶向制劑研究中，研究者利用脫脂奶粉和蜂蜜培養(yǎng)有益菌種如雙歧桿菌、乳酸菌、擬桿菌等，并按照一定比例加入到釋放介質(zhì)中，與加入大鼠盲腸內(nèi)容物、健康人糞便勻漿稀釋液的釋放介質(zhì)作藥物釋放比較；同時(shí)，試驗(yàn)過程中不斷通入CO2以充分模擬胃腸道的無氧環(huán)境。結(jié)果顯示，在所有的溶出介質(zhì)中5-氟尿嘧啶在上消化道的釋放量都少于10%，并且相較于加入大鼠盲腸內(nèi)容物組，加入有益菌種組的藥物釋放更快[11]。嚙齒類動物（如鼠）的結(jié)腸菌種與人類結(jié)腸菌種相似，為了克服常規(guī)溶出介質(zhì)的局限性，在以多糖類（如殼聚糖、果膠等）作為載體的結(jié)腸靶向制劑的溶出度試驗(yàn)研究過程中，研究者們根據(jù)不同的多糖材料在溶出介質(zhì)中分別加入不同濃度（2%～4%）的大鼠盲腸內(nèi)容物[12-16]，比較制劑在含大鼠盲腸內(nèi)容物的溶出介質(zhì)和常規(guī)溶出介質(zhì)中的釋放度，都得到一致的結(jié)果：制劑均表現(xiàn)出明顯的結(jié)腸靶向釋藥性，且在含大鼠盲腸內(nèi)容物的溶出介質(zhì)中的釋放度明顯高于常規(guī)溶出介質(zhì)。這意味著溶出介質(zhì)中加入大鼠盲腸內(nèi)容物用于結(jié)腸靶向制劑的體外釋放度評價(jià)將比常規(guī)的釋放度評價(jià)方法更加準(zhǔn)確。

2 體內(nèi)釋藥性評價(jià)

當(dāng)篩選出理想的制劑處方，并且獲得理想的體外釋藥性評價(jià)數(shù)據(jù)后，可對制劑進(jìn)一步進(jìn)行體內(nèi)釋藥性評價(jià)。本文將OCDDS的體內(nèi)釋藥性評價(jià)方法分為動物體內(nèi)藥動學(xué)及組織分布評價(jià)、X射線衍射分析、γ-閃爍法分析、同位素標(biāo)記技術(shù)、多層螺旋CT掃描技術(shù)、多光譜小動物活體成像技術(shù)等。

2.1 動物體內(nèi)藥動學(xué)及組織分布評價(jià)

豚鼠[17]、大鼠[18-21]、狗[22]和豬[23]等動物與人的胃腸道解剖條件和胃腸道菌群相似，常作為OCDDS實(shí)驗(yàn)動物模型。體內(nèi)藥動學(xué)是研究靶向給藥系統(tǒng)給藥后體內(nèi)的血藥濃度變化及其與非靶向給藥系統(tǒng)間的差異，這是靶向給藥系統(tǒng)進(jìn)入臨床的重要基礎(chǔ)之一。針對不同的藥物制劑，選擇不同的動物，通過檢測動物血藥濃度或者尿藥濃度繪制藥-時(shí)曲線，根據(jù)此曲線可獲得藥物制劑的有關(guān)參數(shù)（tmax、cmax、AUC等），可以了解藥物在體內(nèi)的吸收及代謝情況，也可以通過計(jì)算釋藥時(shí)滯、生物利用度等參數(shù)來評價(jià)藥物在胃腸道的釋放狀態(tài)。Shah N等[24]制備了基于丙烯酸樹脂-乙基纖維素包衣的甲硝唑結(jié)腸靶向微粒并研究了其在兔體內(nèi)的藥動學(xué)，實(shí)驗(yàn)通過比較包衣與未包衣的甲硝唑微粒的藥動學(xué)參數(shù)來評價(jià)包衣微粒的結(jié)腸靶向性。結(jié)果表明，未包衣微粒的cmax在灌胃1 h之后出現(xiàn)，而包衣微粒在灌胃后4 h之內(nèi)都未檢測出藥物，tmax為7 h，cmax為（190±4.9）ng/mL，這就意味著包衣微粒具有結(jié)腸靶向釋藥特性。You YC等[20]用氫化可的松琥珀酸鈉（HSS）作為模型藥物，利用多糖水凝膠將其制備成pH敏感型結(jié)腸靶向釋放制劑（HSS-GEL），將正常的大鼠分為HSS和HSS-GEL組，比較兩組的藥動學(xué)差異。結(jié)果表明，HSS-GEL組相對于HSS組的AUC下降了58.21%（P＜0.01），cmax下降了70.78%（P＜0.01），說明藥物吸收入血的量顯著降低，與此同時(shí)也就降低了藥物的副作用。但是對于OCDDS，只繪制藥-時(shí)曲線顯然不夠，因?yàn)榘邢蚪o藥系統(tǒng)的靶向作用與緩釋作用特點(diǎn)，使其體內(nèi)藥動學(xué)研究比較特殊和困難，不論是血液還是器官的藥動學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，均不宜采用普通制劑的藥動學(xué)模型處理，并且這些藥動學(xué)參數(shù)均不能明確說明OCDDS制劑在胃腸道各部位轉(zhuǎn)運(yùn)和停留時(shí)間及其在體內(nèi)崩解并且釋藥的準(zhǔn)確部位。

體內(nèi)組織分布評價(jià)是靶向給藥系統(tǒng)的主要質(zhì)量指標(biāo)，也是驗(yàn)證其靶向作用的重要手段。對于治療結(jié)腸局部疾病的藥物，測定其局部藥物濃度具有直接的評價(jià)意義。Naeem M等[25]利用香豆素-6作為模型藥物，研究了其酶-pH雙重敏感型和pH敏感型結(jié)腸靶向納米粒在實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi)組織分布。在體內(nèi)定位釋放實(shí)驗(yàn)中，在給予誘導(dǎo)大腸炎模型大鼠灌胃8 h后取出不同胃腸段（胃、小腸、盲腸和結(jié)腸），用乙醇-二甲基亞砜（DMSO）（1∶1，V/V）萃取并收集各部位內(nèi)容物，并利用生物發(fā)光檢測儀測定了各部位香豆素-6的含量。在布地奈德結(jié)腸靶向制劑的研究中，研究者應(yīng)用組織勻漿法于灌胃后不同時(shí)間點(diǎn)將大鼠的胃、小腸、盲腸和結(jié)腸分別取出進(jìn)行組織勻漿，測定了各部位在不同時(shí)間點(diǎn)布地奈德的含量[22，26]。Jin L等[18]也應(yīng)用此法評價(jià)了酶-pH雙重敏感型氨基水楊酸結(jié)腸靶向制劑在不同時(shí)間點(diǎn)的藥物體內(nèi)組織分布。此方法可直接測定局部藥物濃度，但動物損耗量比較大。

2.2 X射線衍射分析

給制劑包裹不透射線的硫酸鋇，而后口服，經(jīng)X射線衍射分析，可實(shí)時(shí)監(jiān)測藥物制劑在胃腸道內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)、開始和完成降解的時(shí)間與部位、分散情況等。Yassin AEB等[22]研究了5-氟尿嘧啶合并殼聚糖顆粒壓制而成的片劑的結(jié)腸靶向效果，該研究以比格犬作為實(shí)驗(yàn)對象，經(jīng)X射線衍射分析，顯示殼聚糖顆?？捎行ё柚股隙挝改c道液對片劑的溶蝕，具有一定的結(jié)腸靶向效果。此外，Patel MM等[27]也利用X射線衍射分析驗(yàn)證了茶堿結(jié)腸靶向片劑在家兔體內(nèi)的結(jié)腸靶向釋藥特性。

2.3 γ-閃爍法分析

γ-閃爍法是監(jiān)測藥物制劑在胃腸道內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)情況的理想方法，該分析方法是在對實(shí)驗(yàn)動物等無侵入條件下進(jìn)行的，可實(shí)時(shí)監(jiān)測制劑的胃排空時(shí)間、小腸轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間及滯留時(shí)間、崩解時(shí)間及部位，適合多種劑型胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)情況的研究。該法一般將放射性標(biāo)志物與藥物混合制成制劑，或先將穩(wěn)定同位素與藥物混合制成制劑再經(jīng)中子激發(fā)獲得放射性后，利用γ-閃爍照相跟蹤監(jiān)測。Sangalli ME等[28]以γ-閃爍法研究了安替比林片劑在胃腸道內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)情況，結(jié)果顯示，所制備片劑于結(jié)腸部位發(fā)生崩解；McConnell EL等[29]利用γ-閃爍法監(jiān)測了Eudragit S100包衣茶堿微丸與直鏈淀粉-乙基纖維素包衣茶堿微丸在健康志愿者胃腸道內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)情況，結(jié)果顯示，Eudragit S100包衣茶堿微丸主要在小腸內(nèi)開始崩解釋放藥物，而直鏈淀粉-乙基纖維素包衣茶堿微丸則主要在結(jié)腸內(nèi)開始崩解釋放藥物。γ-閃爍法能直接反映制劑的崩解情況和體內(nèi)的運(yùn)行軌跡，但是這種方法不能夠進(jìn)行藥物分布的定量分析。

2.4 同位素標(biāo)記技術(shù)

同位素標(biāo)記技術(shù)將放射性同位素用于藥物定位及定性、定量測定中，該法可以用來觀察胃的排空情況、小腸的轉(zhuǎn)運(yùn)情況、制劑的崩解滯留部位以及其他相關(guān)情況等。一般將放射性同位素混入模型藥物，利用同位素跟蹤儀檢測藥物經(jīng)口服利用后在胃腸道的轉(zhuǎn)運(yùn)情況。Mladenovska K等[30]用131I標(biāo)記5-氨基水楊酸，在特定的時(shí)間點(diǎn)監(jiān)測5-氨基水楊酸結(jié)腸靶向微粒與水混懸液在2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型大鼠體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)情況。結(jié)果表明，5-氨基水楊酸結(jié)腸靶向微粒在結(jié)腸部位具有較高的生物利用度。劉曉華等[31]將紫草、丹皮、黃蓖提取、精制后制成微丸，選取經(jīng)特殊處理的果膠作為包衣材料，用氯化亞鉈注射液作為放射性內(nèi)標(biāo)物，健康志愿者口服微丸后，用同位素跟蹤儀在30 min～23.5 h內(nèi)檢測體內(nèi)標(biāo)記藥物運(yùn)行情況。結(jié)果顯示，所研制的結(jié)腸靶向微丸有能力攜帶藥物穿過胃、小腸，傳送藥物到達(dá)結(jié)腸釋放，并在該部位維持較高濃度。

2.5 多層螺旋CT掃描技術(shù)

多層螺旋CT掃描技術(shù)是利用X線束，在信息采集過程中讓其掃描軌跡呈連續(xù)螺旋狀，這種新的掃描方式大大提高了掃描速度，對于OCDDS制劑的評價(jià)也具有很高的價(jià)值。謝興亮等[32]運(yùn)用多層螺旋CT掃描技術(shù)評價(jià)了pH敏感雙層型苦參結(jié)腸靶向微丸的體內(nèi)釋藥行為。健康志愿者早晨空腹服用體內(nèi)試驗(yàn)用包衣微丸約2 g，同時(shí)服用500～600 mL水，分別于服用后約1、5、10、24 h，運(yùn)用多層螺旋CT機(jī)對其消化道各段進(jìn)行斷層掃描（其中24 h時(shí)點(diǎn)應(yīng)在第2天早晨志愿者排便前進(jìn)行），掃描層厚2 mm，觀察微丸在腸道的分布及崩解情況。結(jié)果表明，該微丸在人體具有良好的結(jié)腸靶向釋藥性能，達(dá)到了試驗(yàn)預(yù)期的目標(biāo)；同時(shí)，該項(xiàng)研究還發(fā)現(xiàn)，以多層螺旋CT掃描技術(shù)進(jìn)行檢測時(shí)，直徑約1 mm的微丸在消化道內(nèi)仍可獲得較為清晰的顯影，這為準(zhǔn)確判斷微丸的釋藥情況提供了較為可靠的依據(jù)。另外，掃描圖上不同組織器官清晰顯影，為通過解剖位置判斷微丸在消化道中的分布提供了可靠的信息。相比于現(xiàn)有檢測技術(shù)，多層螺旋CT掃描技術(shù)具有一定的優(yōu)勢，預(yù)計(jì)在其他口服緩控釋制劑的體內(nèi)釋藥性評價(jià)方面也具有良好的應(yīng)用前景。

2.6 多光譜小動物活體成像技術(shù)

多光譜小動物活體成像是基于可見光成像、X射線成像等技術(shù)的動物影像技術(shù)，具有無創(chuàng)、安全、分辨率高等優(yōu)點(diǎn)，可用于活體動物的動態(tài)觀察和相關(guān)指標(biāo)檢測。Ma Y等[33]利用多光譜小動物活體成像技術(shù)監(jiān)測納米粒（NPs）以及用包衣NPs填裝的結(jié)腸靶向微膠囊（MCs）的體內(nèi)分布情況來研究其結(jié)腸靶向給藥的潛力。研究者將20只雌性小鼠分為兩組，分別給予熒光標(biāo)記的NPs及MCs，在灌胃后0.5、2、5、8、24 h，將小鼠麻醉后進(jìn)行多光譜活體成像。成像數(shù)據(jù)顯示，這種廣泛使用的結(jié)腸靶向制劑雖然可以增加納米粒在消化道的時(shí)滯從而達(dá)到藥物的局部釋放，但是缺乏結(jié)腸靶向的精確性?；谶@項(xiàng)技術(shù)的運(yùn)用，該研究還指出，在評價(jià)口服結(jié)腸靶向制劑的時(shí)候應(yīng)該注意研究其與胃腸道黏膜層的黏附作用，這是在體外研究中不能發(fā)現(xiàn)的。多光譜動物成像技術(shù)用于追蹤熒光標(biāo)記的結(jié)腸靶向制劑為結(jié)腸給藥系統(tǒng)的體內(nèi)評價(jià)提供了一種有效的手段，并且在其他口服給藥系統(tǒng)的體內(nèi)評價(jià)中也具有相當(dāng)廣闊的應(yīng)用前景。

3 結(jié)論

驗(yàn)證結(jié)腸靶向制劑能否達(dá)到預(yù)期的效果，關(guān)鍵是要建立科學(xué)、合理的體內(nèi)外釋藥性評價(jià)方法。遺憾的是，現(xiàn)有的OCDDS體內(nèi)外釋藥性評價(jià)方法還存在一定的局限性并且缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。人體胃腸道的復(fù)雜環(huán)境以及OCDDS開發(fā)研究過程中不斷出現(xiàn)的新型輔料、新載體、新劑型、新釋藥機(jī)制都將會增加體內(nèi)外釋藥性評價(jià)的難度。因此，在相關(guān)研究過程中應(yīng)該充分考慮所涉及制劑的各方面特性，針對不同的制劑及研究目的采用適當(dāng)?shù)姆椒ǎ⑶冶M可能地聯(lián)合應(yīng)用多種評價(jià)方法綜合進(jìn)行考察。探索建立新的、完善的OCDDS體內(nèi)外釋藥性評價(jià)體系是今后進(jìn)一步研究的方向。

[1]王少靜，張學(xué)順.結(jié)腸定位給藥系統(tǒng)的體內(nèi)外評價(jià)方法[J].中國新藥雜志，2014，23（12）：1398-1401.

[2]Amidon S，Brown JE，Dave VS.Colon-targeted oral drug delivery systems：design trends and approaches[J].Aaps Pharmscitech，2015，16（4）：731-741.

[3]何雯，朱華，卜平.中藥口服結(jié)腸定位給藥系統(tǒng)研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2016，27（10）：2484-2485.

[4]Yang L.Biorelevant dissolution testing of colon-specific delivery systems activated by colonic microflora[J].J Control Release，2008，125（2）：77-86.

[5]Koziolek M，Grimm M，Becker D，et al.Investigation of pH and temperature profiles in the GI tract of fasted human subjects using the Intellicap?system[J].J Pharm Sci，2015，104（9）：2855-2863.

[6]Liang L，Chen H，Zhao S，et al.Preparation of colon-specific and synchronous release pellet containing total alkaloids of sophora alopecuroides[J].Chinese Herbal Medicines，2016，8（1）：44-52.

[7]Vemula SK.A novel approach to flurbiprofen pulsatile colonic release：formulation and pharmacokinetics of double-compression-coated mini-tablets[J].Aaps Pharmscitech，2015，16（6）：1465-1473.

[8]Kumar B，Kulanthaivel S，Mondal A，et al.Mesoporous silica nanoparticle based enzyme responsive system for colon specific drug delivery through guar gum capping[J].Colloids and Surfaces B：Biointerfaces，2017（150）：352-361.

[9]Ursekar BM，Soni PS，Date AA，et al.Characterization of soy polysaccharide and its in vitro and in vivo evaluation for application in colon drug delivery[J].Aaps Pharmscitech，2012，13（3）：934-943.

[10]Kavianinia I，Plieger PG，Cave NJ，et al.Design and evaluation of a novel chitosan-based system for colon-specific drug delivery[J].Int J Biol Macromol，2016（85）：539-546.

[11]Webster T，Kotla N，Singh S，et al.A novel dissolution media for testing drug release from a nanostructured polysaccharide-based colon specific drug delivery system：an approach to alternative colon media[J].Int J Nanomedicine，2016（11）：1089-1095.

[12]Kaushik D，Sardana S，Mishra DN.5-fluorouracil loaded guar gum microspheres for colon delivery：preparation，characterization and in vitro release[J].Yao Xue Xue Bao，2009，44（11）：1278-1284.

[13]Vaidya A，Jain A，Khare P，et al.Metronidazole loaded pectin microspheres for colon targeting[J].J Pharm Sci，2009，98（11）：4229-4236.

[14]Umadevi SK，Thiruganesh R，Suresh S，et al.Formulation and evaluation of chitosan microspheres of aceclofenac for colon-targeted drug delivery[J].Biopharm Drug Dispos，2010，31（7）：407-427.

[15]Patel MM，Amin AF.Process，optimization and characterization of mebeverine hydrochloride loaded guar gum microspheres for irritable bowel syndrome[J].Carbohyd Polym，2011，86（2）：536-545.

[16]Dubey R，Dubey R，Omrey P，et al.Development and characterization of colon specific drug delivery system bearing 5-ASA and camylofine dihydrochloride for the treatment of ulcerative colitis[J].J Drug Target，2010，18（8）：589-601.

[17]Wadhwa J，Asthana A，Shilakari G，et al.Development and evaluation of nanoemulsifying preconcentrate of curcumin for colon delivery[J].Scientific World Journal，2015（2015）：541510.

[18]Jin L，Ding YC，Zhang Y，et al.A novel pH-enzyme-dependent mesalamine colon-specific delivery system[J].Drug Des Devel Ther，2016（10）：2021-2028.

[19]Bazan L，Bendas ER，El Gazayerly ON，et al.Comparative pharmaceutical study on colon targeted micro-particles of celecoxib：in-vitro-in-vivo evaluation[J].Drug Deliv，2016，23（9）：3339-3349.

[20]You YC，Dong LY，Dong K，et al.In vitro and in vivo application of pH-sensitive colon-targeting polysaccharide hydrogel used for ulcerative colitis therapy[J].Carbo Hydr Polym，2015（130）：243-253.

[21]Lu J，Kan S，Zhao Y，et al.Novel naproxen/esomeprazole magnesium compound pellets based on acid-independent mechanism：in vitro and in vivo evaluation[J].Drug Dev Ind Pharm，2016，42（9）：1495-1503.

[22]Yassin AEB，Aodah AH，Al-Suwayeh S，et al.Theophylline colon specific tablets for chronotherapeutic treatment of nocturnal asthma[J].Pharm Dev Technol，2011，17（6）：712-718.

[23]Guo F，Zhang M，Gao Y，et al.Modified nanoparticles with cell-penetrating peptide and amphipathic chitosan derivative for enhanced oral colon absorption of insulin：preparation and evaluation[J].Drug Delivery，2015，23（6）：2003-2014.

[24]Shah N，Sharma OP，Mehta T，et al.Design of experiment approach for formulating multi-unit colon-targeted drug delivery system：in vitro andin vivo studies[J].Drug Dev Ind Pharm，2016，42（5）：825-835.

[25]Naeem M，Choi M，Cao J，et al.Colon-targeted delivery of budesonide using dual pH-and time-dependent polymeric nanoparticles for colitis therapy[J].Drug Des Devel Ther，2015（9）：3789-3799.

[26]Xu Q，Zhang N，Qin W，et al.Preparation，in vitro and in vivo evaluation of budesonide loaded core/shell nanofibers as oral colonic drug delivery system[J].J Nanosci Nanotechnol，2013，13（1）：149-156.

[27]Patel MM，Amin AF.Design and optimization of co-lon-targeted system of theophylline for chronotherapy of nocturnal asthma[J].J Pharm Sci，2011，100（5）：1760-1772.

[28]Sangalli ME，Maroni A，Zema L，et al.In vitro and in vivo evaluation of an oral system for time and/or site-specific drug delivery[J].J Control Release，2001，73（1）：103-110.

[29]McConnell EL，Short MD，Basit AW.An in vivo comparison of intestinal pH and bacteria as physiological trigger mechanisms for colonic targeting in man[J].J Control Release，2008，130（2）：154-160.

[30]Mladenovska K，Raicki RS，Janevik EI，et al.Colon-specific delivery of 5-aminosalicylic acid from chitosan-Caalginate microparticles[J].Int J Pharmaceut，2007，342（1/2）：124-136.

[31]劉曉華，張鈞壽，李純球，等.中藥結(jié)腸靶向給藥研究[J].中成藥，2001，23（12）：859-862.

[32]謝興亮，楊明，韓麗，等.pH敏感雙層型苦參結(jié)腸靶向微丸的體內(nèi)外釋藥性能評價(jià)[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（10）：7-10.

[33]Ma Y，F(xiàn)uchs AV，Boase NRB，et al.The in vivo fate of nanoparticles and nanoparticle-loaded microcapsules after oral administration in mice：evaluation of their potential for colon-specific delivery[J].Eur J Pharm Biopharm，2015（94）：393-403.