許有盼

（甘肅省武威市民勤縣收成鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，733399）

奶牛乳房炎源大腸桿菌的分離鑒定

許有盼

（甘肅省武威市民勤縣收成鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，733399）

奶牛乳房炎是嚴重影響我國奶牛業(yè)主要的發(fā)展疾病之一。本文通過對采集患乳房炎的牛奶進行細菌學分離鑒定、形態(tài)學觀察、生化特性試驗等方法，引起奶牛乳房炎的病原菌為大腸桿菌，通過致病性試驗驗證其分離大腸桿菌的致病性，結果顯示，分離的大腸桿菌為致病性大腸桿菌。藥敏試驗結果顯示，分離的奶牛乳房炎源大腸桿菌對氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢他啶、恩諾沙星4種藥物高度敏感；對新霉素、慶大霉素、多西環(huán)素、阿莫西林、阿米卡星、青霉素、卡那霉素7種藥物耐藥。

奶牛；乳房炎；大腸桿菌

相關的文獻報道了我國奶牛存欄量大約在1440萬頭，奶牛隱性乳房炎的陽性率也在46%～80%之間，該病嚴重的影響著奶牛的生產性能。奶牛乳房炎是奶牛養(yǎng)殖過程中常見的疾病之一，具有發(fā)病率高，并且難以治愈、病因復雜等特點。病原微生物金黃色葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌等是引起奶牛乳房炎的主要病原菌。而且，病原微生物金黃色葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌這三種菌也是引起的隱性乳房炎主要的病原菌。致病性大腸桿菌廣泛存在環(huán)境中，導致奶牛乳房炎的發(fā)病率相對較高，并且無明顯的季節(jié)性。當致病性大腸桿菌通過多種途徑侵入奶牛的乳房組織后，引發(fā)奶牛的嚴重的炎癥反應，引起乳房炎。致病性大腸桿菌的引起的奶牛的乳房炎多見于高產奶牛及產后泌乳高峰期奶牛。本實驗對采集患乳房炎的牛奶樣品中分離到了大腸桿菌，該菌具有很強的致病性，因此，對分離的致病性大腸桿菌進行藥敏試驗，分析其耐藥性，為奶牛乳房炎的防治提供研究基礎。

1 病料來源

某地區(qū)奶牛養(yǎng)殖場，采集患乳房炎的奶牛鮮奶樣品，采集樣品時對乳頭進行消毒，無菌采集乳樣，進行細菌分離鑒定。

2 細菌的分離鑒定

對采集的乳樣，按照1:100比例接種到滅菌的營養(yǎng)肉湯中，37℃恒溫培養(yǎng)12～16 h后，并接種于麥康凱培養(yǎng)基上，37℃恒溫培養(yǎng)12～16 h后，挑取典優(yōu)勢菌落接種到伊紅美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)后，革蘭氏染色試劑盒對分離的細菌進行染色鏡檢。結果顯示，分離菌株在營養(yǎng)肉湯中培養(yǎng)后，營養(yǎng)肉湯呈現了混色，不透明的狀態(tài)；分離菌株在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上長出粉紅色、濕潤的扁圓的、邊緣光滑整齊菌落；分離菌株在伊紅美蘭培養(yǎng)基上長出深紫帶金屬光澤的圓形、中間黑色菌落；革蘭氏染色鏡檢可見，分離菌株為陰性菌，呈現兩端鈍圓、桿狀菌。

3 細菌的生化試驗挑取伊紅美藍培養(yǎng)基優(yōu)勢菌落，接種到生化試管中，37℃恒溫培養(yǎng)24h后，對分離菌株進行生化特性鑒定，結果顯示，分離菌株分解甘露醇、葡萄糖、海藻糖、麥芽糖、阿拉伯糖、鼠李糖，產酸不產氣，V-P試驗為陰性、吲哚試驗為陽性。

4 分離菌株的致病性試驗

將培養(yǎng)好的大腸桿菌口服方式攻毒小白鼠5只，每只小白鼠攻毒劑量為0.5mL，另外的5只小白鼠口服等量的生理鹽水，觀察7d，結果顯示，攻毒的5只小鼠死亡率為100%，另外5只小鼠健康存活。證實了分離的大腸桿菌具有很強的致病性。

5 藥敏試驗

藥敏試驗結果顯示，分離的致病性大腸桿菌對氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢他啶、恩諾沙星4種藥物高度敏感；對新霉素、慶大霉素、多西環(huán)素、阿莫西林、阿米卡星、青霉素、卡那霉素7種藥物耐藥。

6 小結

引起奶牛乳房炎的病原菌為致病性大腸桿菌，藥敏試驗結果顯示，對氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢他啶、恩諾沙星4種藥物高度敏感。

[1]謝昆,蔣成硯,劉杰等.奶牛隱性乳房炎大腸桿菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2016,(12下)：107-109.16.

[2]羅志堯,陳天來.奶牛隱性乳房炎大腸桿菌的鑒定與藥敏試驗[J].江西畜牧獸醫(yī)雜志,2013,4:11-13.24.

S857.2+6

B

1003-8655（2017）06-0045-01