李瑞清
(山東省臨朐縣畜牧局城關(guān)畜牧獸醫(yī)管理站262600)
豬常見疫病實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)探析
李瑞清
(山東省臨朐縣畜牧局城關(guān)畜牧獸醫(yī)管理站262600)
養(yǎng)豬業(yè)逐漸向規(guī)?;较虬l(fā)展,豬病也開始漸漸變得多元化與復(fù)雜化。尤其是隨著現(xiàn)在分子生物學(xué)已經(jīng)得到快速發(fā)展,很多種準(zhǔn)確快速檢測豬各種疫病的技術(shù)已經(jīng)被開發(fā),但畜牧業(yè)等部門實(shí)驗(yàn)檢測技術(shù)仍然存在不足。本文筆者對實(shí)驗(yàn)室的檢測技術(shù)進(jìn)行介紹。
;豬;常見疫病;實(shí)驗(yàn)室;檢測技術(shù);探析
在對豬體進(jìn)行交叉免疫實(shí)驗(yàn)或是自身相互交換的免疫學(xué)試驗(yàn)中。病毒學(xué)的檢測方法需要較長的檢測時間。而雞新城疫病的毒性相對來說很強(qiáng),病料中不會存在菌的浸出液,因此需要將其接種在豬睪丸細(xì)胞中進(jìn)行再培養(yǎng)。在培養(yǎng)4d之后,再向里面加入新城疫的強(qiáng)病毒,繼續(xù)培養(yǎng)4~5d。如果培養(yǎng)的細(xì)胞有病變現(xiàn)象表示患有豬瘟疾病。此法也可以用在加入抗體的豬瘟血清中進(jìn)行試驗(yàn)。
目前血清學(xué)的檢測方法主要有熒光抗體試驗(yàn)的檢測、間接標(biāo)記以及免疫吸附試驗(yàn)的檢測。
有動物的接種試驗(yàn)和將2日老鼠致死試驗(yàn)等。
包括補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)試驗(yàn)、熒光抗體試驗(yàn)、放射性免疫學(xué)試驗(yàn)、反向間接凝血試驗(yàn)。在實(shí)際的檢測使用中較為廣泛的檢測方法主要包括血清保護(hù)性試驗(yàn)、瓊脂糖擴(kuò)散試驗(yàn)、熒光抗體試驗(yàn)以及反向間接凝血試驗(yàn)。
在非洲的豬瘟疾病檢測中常用的病原檢測方法主要包括熒光學(xué)試驗(yàn)、紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)以及病毒分離培養(yǎng)試驗(yàn)。
酶聯(lián)吸附試驗(yàn)過氧化物單層細(xì)胞試驗(yàn)以及間接熒光抗體試驗(yàn)。
選取處于高熱期的兔耳進(jìn)行靜脈注射,在兔皮膚疹塊邊緣有血液或是其他病料,進(jìn)行涂片染色而進(jìn)行鏡檢??梢钥匆姼锾m氏陽性的小桿菌。
熒光抗體試驗(yàn):此種檢測方法可以用來作為豬丹毒的快速準(zhǔn)確檢疫。瓊脂糖擴(kuò)散試驗(yàn)對于慢性豬丹毒具有很好的治療意義,但對于急性豬丹毒沒有治療價值。與此同時,接過種的豬丹毒在接種疫苗之后會有陽性反應(yīng)。這個需要在檢疫中值得注意。
使用經(jīng)過滅菌的鼻試子插入到豬鼻子的二分之一處,然后接種在葡萄糖的血清瓊脂培養(yǎng)基上面,培養(yǎng)約48h。選取中等大小的菌落,形狀為圓形,顏色為半透明的灰色,產(chǎn)生腐敗氣味。
對于豬萎縮性鼻炎疾病,凝集試驗(yàn)診斷具有很好的實(shí)用價值。選擇已經(jīng)明確的標(biāo)準(zhǔn)血清以及抗K血清對未知抗原進(jìn)行檢測。除此之外,可以選擇已經(jīng)明確的K抗原和O抗原再對豬的血清進(jìn)行檢測。
細(xì)菌學(xué)檢測:對于敗血癥可以從豬心、肝以及體腔中滲透的液體提取病料,而其他病型則是從病變的位置取材。例如通過圖片鏡檢發(fā)現(xiàn)兩極染色的圓形桿菌,而接種的培養(yǎng)基可以分離到該種菌,最終進(jìn)行確診。如果有必要的話,需要對小鼠做實(shí)驗(yàn)的感染。
在實(shí)際檢驗(yàn)中,將鏡檢和臨床診斷兩者結(jié)合起來進(jìn)行綜合性判定。
豬痢疾疾病可以通過對病原體的分離或進(jìn)行直接鏡檢進(jìn)行分離與鑒定。吸取急性病的豬糞進(jìn)行直接鏡檢,或者是進(jìn)行染色的檢測??梢杂^察到革蘭氏顏色,一般有4~6個的螺彎曲,而兩端呈現(xiàn)尖銳的形狀。如在每個視野中可以看見3~5個菌體,就可以將其作為定性的診斷依據(jù)。而對于病原體進(jìn)行分離培養(yǎng)鑒定方法,是目前確定豬痢疾最佳的診斷方法。
目前對于豬痢疾疾病檢測,血清學(xué)檢測方法是最普遍的,而其中最常用的兩種檢測方法即為酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)以及凝集試驗(yàn)。
使用開口器將豬口腔打開,觀察其舌頭底部,一般會有乳白色,如黃豆粒大小的囊泡,囊壁中有會有一個結(jié)節(jié)。
豬囊蟲病免疫學(xué)檢測方法常用的有間接凝血試驗(yàn)以及酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)。
李瑞清(1970.12-),女,山東省臨朐縣人,大專,獸醫(yī)師,主要從事畜牧獸醫(yī)工作。