屈元姣

(廣西壯族自治區(qū)南溪山醫(yī)院腫瘤科，廣西 桂林 541002)

腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響患者預(yù)后和臨床治療的重要因素。目前，有學(xué)者認(rèn)為腫瘤細(xì)胞向靶向器官的轉(zhuǎn)移是腫瘤細(xì)胞對(duì)靶向器官中獨(dú)特因子的反應(yīng)，這些因子與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移、黏附和器官侵犯等過(guò)程有關(guān)。在轉(zhuǎn)移過(guò)程中，腫瘤細(xì)胞必須脫離原發(fā)腫瘤，骨架重塑、從微血管壁中滲出然后向靶器官遷移。另有學(xué)者認(rèn)為腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移是腫瘤細(xì)胞表達(dá)功能性趨化因子受體，與器官特異性的化學(xué)性誘導(dǎo)分子趨化因子等反應(yīng)，從而趨化腫瘤細(xì)胞向趨化因子高表達(dá)的靶向器官遷移[1]。趨化因子受體7(CCR7)及其配體在惡性腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。本文就CCR7及其配體的結(jié)構(gòu)和生理功能，以及與惡性腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述如下。

1 趨化因子及其受體

趨化因子是由炎性細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子及病理刺激因素誘導(dǎo)免疫或非免疫細(xì)胞分泌一類相對(duì)分子質(zhì)量介于8 000～10 000之間的小分子蛋白多肽。在哺乳動(dòng)物中，趨化因子家族至今已發(fā)現(xiàn)近50種結(jié)構(gòu)不同的成員。趨化因子在胚胎發(fā)育、傷口愈合、白細(xì)胞的穩(wěn)定、淋巴器官發(fā)育、炎性疾病、促進(jìn)或抗腫瘤等過(guò)程中起重要作用[2]。根據(jù)N末端2個(gè)保守半胱氨酸殘端的排列和空間分布，可將趨化因子家族細(xì)分為C、CC、CX3C和CXC等4種不同的亞型。趨化因子需要通過(guò)與其相應(yīng)受體結(jié)合，從而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。其根據(jù)所結(jié)合的趨化因子類型的不同分為4種，C類受體(CR)、CC類受體(CCR)、CX3C受體(CX3CR)和CXC類受體(CXCR)。目前已發(fā)現(xiàn)趨化因子受體多達(dá)19種，其可表達(dá)于多種類型的細(xì)胞，如神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等[3]。趨化因子通過(guò)結(jié)合并激活細(xì)胞表面的趨化因子受體誘導(dǎo)靶細(xì)胞趨化性遷移及細(xì)胞骨架重排，增強(qiáng)靶細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附能力等，參與細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育、分化、凋亡等多種生理功能[4]。趨化因子及其受體在多種腫瘤細(xì)胞也有表達(dá)，并參與腫瘤細(xì)胞的侵犯和轉(zhuǎn)移[5]。腫瘤細(xì)胞之所以能在特定的組織或器官發(fā)生轉(zhuǎn)移，是因?yàn)槠淠[瘤微環(huán)境分泌的生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子等起到至關(guān)重要的作用[6]。

2 CCR7及其配體

CCR7基因定位于人類染色體17q12～q21.2，其編碼蛋白含有378個(gè)氨基酸殘基。CCR7是CC類趨化因子受體，在所有的幼稚T細(xì)胞、部分中樞記憶型T細(xì)胞、B細(xì)胞及成熟樹(shù)突狀細(xì)胞中有表達(dá)。一種趨化因子可以和多種受體結(jié)合，反之亦然。CCR7與趨化因子配體19(CCL19)和CCL21相互作用被證實(shí)在機(jī)體炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)中淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)和歸巢至淋巴結(jié)等過(guò)程中起重要作用。

CCL19又稱EB病毒誘導(dǎo)分子1配基的趨化因子，其表達(dá)主要位于次級(jí)淋巴器官T細(xì)胞區(qū)的間質(zhì)細(xì)胞。CCL19和CCR7被認(rèn)為是成熟樹(shù)突狀細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)、淋巴組織啟動(dòng)初級(jí)免疫反應(yīng)微環(huán)境建立的重要分子。隨著學(xué)者對(duì)趨化因子研究深入，發(fā)現(xiàn)CCL19可誘導(dǎo)T細(xì)胞、NK細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞遷移至腫瘤組織區(qū)域發(fā)揮免疫應(yīng)答，免疫細(xì)胞通過(guò)識(shí)別并攻擊腫瘤細(xì)胞，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)[7]。

CCL21又稱次級(jí)淋巴組織趨化因子，在淋巴結(jié)內(nèi)高內(nèi)皮靜脈及多種器官的淋巴管內(nèi)皮中有表達(dá)。CCL21激活后可引起幼稚T細(xì)胞和抗原刺激樹(shù)枝狀細(xì)胞的共同定位，抑制腫瘤引起的免疫抑制反應(yīng)，從而誘導(dǎo)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)而消除腫瘤細(xì)胞。另外，CCL21與CXCR3結(jié)合有抗腫瘤的作用[8]。

CCR7通過(guò)與CCL19和CCL21相互作用，對(duì)淋巴組織發(fā)育、成熟期樹(shù)突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞歸巢行為中起到重要作用。近年，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)CCR7在多種腫瘤組織中呈高表達(dá)，如非小細(xì)胞肺癌[9]、乳腺癌[10]、膀胱癌[11]等。多種腫瘤研究中發(fā)現(xiàn)CCL19/CCR7軸、CCL21/CCR7軸與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤生長(zhǎng)、血管新生、侵襲等病理過(guò)程有關(guān)。腫瘤細(xì)胞可利用淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移至淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處臟器。而腫瘤的轉(zhuǎn)移是一個(gè)極其復(fù)雜的過(guò)程，涉及多方面因素，不僅與腫瘤細(xì)胞自身特征有關(guān)，還與宿主微環(huán)境密切相關(guān)。

3 CCR7與惡性腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

3.1 CCR7與食管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 Ishida等[12]應(yīng)用qRT-PCR檢測(cè)到食管鱗癌組織中CCR7 mRNA有表達(dá)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)明顯關(guān)系，該學(xué)者觀察到腫瘤組織中除腫瘤細(xì)胞表達(dá)CCR7外，腫瘤組織中浸潤(rùn)的淋巴細(xì)胞也表達(dá)CCR7，但是激光顯微鏡系統(tǒng)選擇分離后的食管鱗癌細(xì)胞中CCR7 mRNA的表達(dá)水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，認(rèn)為CCR7是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。Irino等[13]應(yīng)用免疫組化技術(shù)分別對(duì)105例食管鱗癌和78例病理T分期為T1的食管鱗癌患者組織標(biāo)本中CCR7表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示CCR7與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，同時(shí)CCR7表達(dá)陽(yáng)性患者5 a存活率顯著低于表達(dá)陰性者。而國(guó)內(nèi)有文獻(xiàn)[14]報(bào)道，食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CCR7表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于未轉(zhuǎn)移組，CCR7陽(yáng)性表達(dá)患者5 a存活率較差，這與CCR7促進(jìn)腫瘤細(xì)胞淋巴管侵襲、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等行為有關(guān)，可作為臨床上預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)移和預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)[15]已發(fā)現(xiàn)，CCL21-CCR7信號(hào)軸可激活ERK1/2通路使黏蛋白MUC1表達(dá)上調(diào)，從而誘導(dǎo)上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的發(fā)生，并上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶 (metalloproteinases，MMPs)表達(dá)等參與腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程。

3.2 CCR7與非小細(xì)胞肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 李洋等[9]觀察到CCR7在非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)組織中存在異常表達(dá)，發(fā)現(xiàn)CCR7組要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜，其表達(dá)與NSCLC的臨床病理分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，并認(rèn)為CCL19/CCR7通過(guò)上調(diào)NSCLC中MMP-9表達(dá)促進(jìn)NSCLC的轉(zhuǎn)移。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(vascular endothelial growth factor-D，VEGF-D)作為調(diào)控淋巴管新生的重要因子，在多種腫瘤中被證實(shí)VEGF-D高表達(dá)可促進(jìn)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移，與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Sun等[16]研究發(fā)現(xiàn)利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)染CCR7基因的肺大細(xì)胞癌細(xì)胞株BE1后，CCR7和VEGF-D因子在蛋白和mRNA層面均呈過(guò)表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)CCR7通過(guò)激活p-ERK1/2和p-Akt從而上調(diào)VEGF-D表達(dá)。此外，該研究小組還對(duì)90例NSCLC組織中CCR7和VEGF-D的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示CCR7表達(dá)與VEGF-D表達(dá)呈正相關(guān)，兩者高表達(dá)均與較高淋巴管密度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、較差預(yù)后有關(guān)[16]。

3.3 CCR7與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 Liu等[10]在乳腺導(dǎo)管癌中觀察到70%的原發(fā)性乳腺癌組織和77%的存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞都有CCR7的表達(dá)。Cunningham等[17]利用CCR7轉(zhuǎn)染的大鼠MMTV-PyVmT乳腺腫瘤細(xì)胞和人CCR7陽(yáng)性表達(dá)的MCF10A和MCF7乳腺細(xì)胞系進(jìn)行相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)CCR7及其配體CCL21通過(guò)β1整合素黏附分子控制細(xì)胞的遷移。CCR7可通過(guò)上調(diào)腫瘤類干細(xì)胞發(fā)揮其功能參與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程[18]。CCR7調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)并趨化乳腺癌細(xì)胞向淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。然而，Weitzenfeld等[19]觀察到CCR7表達(dá)水平與乳腺癌的分子亞型有關(guān)，其中Luminal A亞型的乳腺癌組織CCR7高表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)。CCL21誘導(dǎo)CCR7陽(yáng)性表達(dá)腫瘤細(xì)胞遷移需要PI3K和MAPK信號(hào)通路的激活，而腫瘤微環(huán)境中激素水平、炎癥反應(yīng)、生長(zhǎng)因子等因素可影響上述通路的激活，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞遷移方向性受限。因此，CCR7對(duì)預(yù)測(cè)乳腺癌預(yù)后及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的作用仍然存在爭(zhēng)議。

3.4 CCR7與其他惡性腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 Sperveslage等[20]研究發(fā)現(xiàn)CCR7 mRNA和CCR7蛋白在6種不同胰腺導(dǎo)管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)細(xì)胞系中都有表達(dá)。CCR7表達(dá)的PDAC細(xì)胞向其配體CCL19和CCL21遷移的能力增強(qiáng)。與模擬轉(zhuǎn)染模型相比，CCR7轉(zhuǎn)染的PT45P1細(xì)胞種植裸小鼠模型的腫瘤體積較大，其淋巴管的侵犯陽(yáng)性率更高。應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)PDAC細(xì)胞中CCR7的含量是正常導(dǎo)管細(xì)胞的4倍。缺乏CCR7表達(dá)的PDAC細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力減弱，CCR7表達(dá)陽(yáng)性的PDAC細(xì)胞所造成的淋巴管侵犯可能是通過(guò)上調(diào)腫瘤相關(guān)淋巴管中CCL21的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。國(guó)內(nèi)也有文獻(xiàn)[21]報(bào)道，在122例胃癌患者中有88例(72.13%)CCR7呈高表達(dá)，CCR7表達(dá)與胃癌區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。CCR7可協(xié)同TGF-β1途徑誘導(dǎo)EMT的發(fā)生，認(rèn)為在SLC/CCR7生物軸和TGF-β1/TGF-βR途徑相互交聯(lián)在胃癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用。

3.5 針對(duì)CCR7為靶點(diǎn)治療腫瘤 目前,抑制CCR7生物學(xué)效應(yīng)在腫瘤生物學(xué)治療方面的作用日益受到關(guān)注。近年，關(guān)于以CCR7為靶點(diǎn)治療乳腺癌、白血病等腫瘤體外研究成果已相繼報(bào)道[22-23]。Somovilla-Cresp等[24]采用CCR7單克隆抗體對(duì)移植人類套細(xì)胞淋巴瘤的小鼠模型進(jìn)行處理，可顯著延遲腫瘤的出現(xiàn)和減小腫瘤體積，延長(zhǎng)小鼠生存時(shí)間，同時(shí)可阻礙皮下腫瘤細(xì)胞遷移至骨髓、脾臟等淋巴器官。Chi等[25]通過(guò)小干擾RNA轉(zhuǎn)染前列腺癌細(xì)胞株，敲除CCR7基因表達(dá)，觀察到VEGF、MMP-2、MMP-9表達(dá)下調(diào)，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)、侵襲轉(zhuǎn)移等。另外，國(guó)內(nèi)學(xué)者M(jìn)a等[21]發(fā)現(xiàn)CCR7高表達(dá)胃癌細(xì)胞株MGC80-3侵襲性顯著強(qiáng)于CCR7低表達(dá)胃癌細(xì)胞株SGC-7901，應(yīng)用CCR7中和抗體neu-CCR7干預(yù)上述細(xì)胞株，這2種細(xì)胞株細(xì)胞侵襲力均顯著下降，認(rèn)為CCR7可作為胃癌治療的潛在靶點(diǎn)。

4 展望

綜上所述,CCR7及其配體CCL19、CCL21在腫瘤發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，并可能成為預(yù)測(cè)某些腫瘤發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的先兆因子。在多項(xiàng)體外研究中，以CCR7為治療靶點(diǎn)，可降低腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力。因此，深入研究CCR7及其配體在惡性腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用機(jī)制及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有望成為腫瘤治療的靶點(diǎn),其相關(guān)的基因治療的研制及應(yīng)用有可能成為新的腫瘤治療策略與手段，望為腫瘤疾病的臨床治療提供新思路。

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