嚴(yán)紅光， 程江華， 姚平偉， 郝位清

(1.凱里學(xué)院，貴州凱里 556001;2.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，安徽合肥 230036)

藍(lán)莓葉紅茶活性成分分析

嚴(yán)紅光1， 程江華2， 姚平偉1， 郝位清1

(1.凱里學(xué)院，貴州凱里 556001;2.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，安徽合肥 230036)

[目的]研究藍(lán)莓葉紅茶中花青素等活性物質(zhì)的含量。[方法]以藍(lán)莓秋梢嫩葉為材料加工紅茶，比較分析剪碎、揉捻、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、燙漂工藝對(duì)藍(lán)莓葉紅茶中多酚、黃酮、花青素等活性物質(zhì)含量的影響。[結(jié)果]剪碎程度越小，揉捻的時(shí)間越長，花青素等活性物質(zhì)的含量越多。發(fā)酵溫度相同但發(fā)酵時(shí)間延長，花青素等活性物質(zhì)含量減少。發(fā)酵時(shí)間不變但發(fā)酵溫度升高，花青素等活性物質(zhì)含量減少。[結(jié)論]剪碎程度、揉捻時(shí)間、發(fā)酵時(shí)間和發(fā)酵溫度可使藍(lán)莓葉紅茶的花青素等活性物質(zhì)發(fā)生變化并影響品質(zhì)。

多酚；花青素；黃酮；藍(lán)莓葉；紅茶

藍(lán)莓，又稱越橘，屬杜鵑花科(Ericaceae)越橘屬(Vacciniumspp.)多年生落葉或常綠灌木[1]。藍(lán)莓葉中含有豐富的黃酮類化合物，具有抗氧化、清除自由基等生物活性[2-3]。藍(lán)莓葉含有豐富的抗氧化物質(zhì)[4]，可以提取制作天然抗氧化劑，以減少化學(xué)合成抗氧化劑在食品中的添加。前人進(jìn)行了大量的新品種茶的研究，如杜仲茶、青錢柳茶等，但鮮有將藍(lán)莓秋梢嫩葉加工為紅茶的研究報(bào)道。筆者以藍(lán)莓秋梢嫩葉為原料，采用相對(duì)最優(yōu)的加工工藝制作成紅茶，通過比較分析不同產(chǎn)地、品種、加工工藝對(duì)藍(lán)莓葉紅茶活性物質(zhì)含量及其感官品質(zhì)(如湯色、明亮度、滋味、香氣)的影響，以提高紅茶的品質(zhì)，得到適合人們口味的紅茶，既實(shí)現(xiàn)廢棄物資源利用，也提供一種新的植物茶。

1 材料與方法

1.1 材料 藍(lán)莓葉，2015年在貴州麻江縣中國南方藍(lán)莓繁育基地采摘的5年生夏普藍(lán)莓秋稍新葉。主要儀器：FA2004電子天平，上海良平儀表有限公司；721A型分光光度計(jì)，上海第三分析儀器廠；超聲波清洗機(jī)；容量瓶；SHB-D(Ⅲ)循環(huán)水真空泵；冰箱； 鼓風(fēng)電熱恒溫干燥箱等。

主要試劑：硫酸亞鐵、酒石酸鉀鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇，均為分析純；蘆丁對(duì)照品為色譜純。

1.2 方法

1.2.1 理化指標(biāo)檢測(cè)方法。多酚和花青素的測(cè)定參考文獻(xiàn)[5],黃酮的測(cè)定參考文獻(xiàn)[6],干物質(zhì)量的測(cè)定參考文獻(xiàn)[7]。

1.2.2 加工工藝。將藍(lán)莓新鮮葉進(jìn)行清洗，萎蔫后分別進(jìn)行如下加工：工藝1，攤晾→剪碎→干燥[8]；工藝2，攤晾→揉捻→干燥；工藝3，攤晾→揉捻→發(fā)酵→干燥；工藝4，攤晾→剪碎(4 cm)→發(fā)酵→干燥；工藝5，攤晾→揉捻(15 min)→發(fā)酵→干燥。

剪碎：將藍(lán)莓葉片用剪刀剪成條狀，分為大(6 cm)、中(4 cm)、小(2 cm)3種。揉捻：輕輕揉捻，手握成團(tuán)緩慢散開，根據(jù)揉捻的時(shí)間將揉捻程度分為輕(10 min)、中(15 min)、重(20 min)3種。發(fā)酵：6 cm高的塑料盒子，在預(yù)設(shè)溫度及時(shí)間條件下發(fā)酵，每10 min完全翻拌1次。干燥：先在180 ℃烘2 min，再調(diào)成120 ℃烘干，手用力搓能成粉即可(滅酶，使香氣成分釋放)，烘干后袋裝密封，注明標(biāo)簽。燙漂：95 ℃沸水燙漂3 min，立即冷水清洗。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析處理方法。采用EXCEL 2010進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同加工工藝制成藍(lán)莓葉紅茶中活性物質(zhì)含量的比較分析

2.1.1 剪碎程度對(duì)藍(lán)莓葉紅茶活性物質(zhì)含量的影響。根據(jù)工藝1進(jìn)行加工，分別將藍(lán)莓葉剪成2 cm(小)、4 cm(中)、6 cm(大)的條狀制成藍(lán)莓葉茶，分析比較其活性物質(zhì)含量。

從表1可見，藍(lán)莓葉紅茶葉中花青素等活性物質(zhì)含量隨藍(lán)莓葉片剪碎程度增加而增多，其中花青素含量變化最顯著，黃酮、茶多酚含量變化較小[9]，是因?yàn)榧羲槌潭葘?duì)細(xì)胞破損率不同。藍(lán)莓葉紅茶干物質(zhì)含量隨剪碎程度增加而減少，這與剪碎后葉片面積相關(guān)。剪碎使茶葉體積縮小，外觀美化，但茶多酚含量過高使滋味偏澀，所以選擇剪碎程度為中(4 cm)的工藝。

表1 剪碎程度對(duì)藍(lán)莓葉紅茶活性物質(zhì)含量的影響

2.1.2 揉捻程度對(duì)藍(lán)莓葉紅茶中活性物質(zhì)含量的影響。根據(jù)工藝2進(jìn)行加工，改變?nèi)嗄頃r(shí)間為輕(10 min)、中(15 min)、重(20 min)3種，分析比較其活性物質(zhì)含量。

從表2可見，揉捻程度不同導(dǎo)致藍(lán)莓葉紅茶中花青素等活性物質(zhì)含量發(fā)生變化。揉捻時(shí)間延長，花青素、黃酮、茶多酚的含量都有增多[9]。這是因?yàn)槿嗄頃r(shí)將細(xì)胞破壞釋放內(nèi)含物，較重的揉捻提高了細(xì)胞破壞率，增加藍(lán)莓葉內(nèi)含物浸出率。干物質(zhì)含量隨揉捻程度加重呈增大趨勢(shì)[10]，是因?yàn)樵谌嗄淼倪^程中藍(lán)莓葉細(xì)胞組織破損，茶汁被擠出，所以含水率降低。為了更好地浸出，選擇中度揉捻(15 min)，得到的藍(lán)莓葉紅茶不會(huì)因茶多酚過高使藍(lán)莓葉紅茶滋味過澀，黃酮的含量高，有更好的保健價(jià)值。

2.1.3 發(fā)酵溫度對(duì)藍(lán)莓葉紅茶中活性物質(zhì)含量的影響。根據(jù)工藝3進(jìn)行加工，改變發(fā)酵溫度分別為25、35、50 ℃，分析比較其活性物質(zhì)含量。

表2 不同揉捻程度對(duì)藍(lán)莓葉紅茶葉活性物質(zhì)含量的影響

從表3可見，隨著發(fā)酵溫度的升高，藍(lán)莓葉紅茶中花青素的含量減少，發(fā)酵溫度35～50 ℃的變化不明顯。這與發(fā)酵溫度相關(guān)，隨著發(fā)酵溫度的升高，花青素的降解加快。隨發(fā)酵溫度的升高，藍(lán)莓葉紅茶中黃酮的含量是先升高后降低，在35 ℃時(shí)的含量最高[11]，35 ℃時(shí)的黃酮含量約是25與50 ℃時(shí)黃酮含量的2倍，其原因有待探究。藍(lán)莓葉紅茶的發(fā)酵實(shí)質(zhì)是用酶作為催化劑的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)過程[12]，酶的促進(jìn)作用需要合適的發(fā)酵溫度，溫度過低會(huì)降低酶活性，溫度過高會(huì)使酶失活，同時(shí)也會(huì)破壞藍(lán)莓葉紅茶中的活性物質(zhì)。茶葉干物質(zhì)含量隨溫度的升高而降低。藍(lán)莓葉紅茶中花青素等均具有一定的保健作用，而溫度過高時(shí)會(huì)使酶失活，所以選擇在25～35 ℃溫度進(jìn)行下一步試驗(yàn)。

表3 不同發(fā)酵溫度對(duì)藍(lán)莓葉紅茶葉活性物質(zhì)含量的影響

2.1.4 發(fā)酵時(shí)間對(duì)藍(lán)莓葉紅茶中活性物質(zhì)含量的影響。根據(jù)工藝4進(jìn)行加工，在25 ℃下分別發(fā)酵1.0、1.5、2.0、3.0 h，分析比較其活性物質(zhì)含量。根據(jù)工藝5進(jìn)行加工，在溫度30 ℃下分別發(fā)酵1、3、4、5 h，分析比較其活性物質(zhì)含量。

從表4、表5可見，隨發(fā)酵時(shí)間的延長藍(lán)莓葉紅茶中花青素的含量減少，這與花青素易氧化有關(guān)[13]。隨發(fā)酵時(shí)間的延長藍(lán)莓葉紅茶中黃酮的含量下降[14]，黃酮類化合物在自然狀態(tài)下不穩(wěn)定，在與酶、熱和氧化性物質(zhì)的作用下易降解。隨發(fā)酵時(shí)間的延長藍(lán)莓葉紅茶中茶多酚的含量下降[15]，茶多酚在多酚氧化酶的催化下，很快被氧化形成茶黃素、茶紅素類，多酚類物質(zhì)逐漸轉(zhuǎn)化而減少。藍(lán)莓葉紅茶中干物質(zhì)含量變化不大。

在發(fā)酵時(shí)間相同，藍(lán)莓葉破損不同(剪碎與揉捻)，溫度不同(25與30 ℃)的雙重影響下，剪碎于25 ℃工藝條件下比揉捻于30 ℃工藝條件下花青素等活性物質(zhì)的含量多，這與揉捻比剪碎細(xì)胞破損率大相關(guān)。細(xì)胞破損后藍(lán)莓葉汁浸出，同時(shí)也加大了內(nèi)含物間的轉(zhuǎn)化，藍(lán)莓葉紅茶的發(fā)酵實(shí)質(zhì)是用酶作為催化劑的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)過程[12]，溫度過低會(huì)降低酶活性，溫度過高會(huì)使酶失活，同時(shí)也會(huì)破壞藍(lán)莓葉紅茶中的活性物質(zhì)，從而降低了花青素等活性物質(zhì)含量。

表4 發(fā)酵時(shí)間對(duì)藍(lán)莓葉紅茶中活性物質(zhì)含量的影響(剪碎)

表5 發(fā)酵時(shí)間對(duì)藍(lán)莓葉紅茶中活性物質(zhì)含量的影響(揉捻)

2.1.5 燙漂、發(fā)酵對(duì)藍(lán)莓葉紅茶中活性物質(zhì)含量的影響。根據(jù)如下2種工藝進(jìn)行加工：工藝A，采摘→清洗→攤晾→剪碎→冷浸→ 燙漂→發(fā)酵(30 ℃、4 h)→烘干；工藝B，采摘→清洗→攤晾→剪碎→冷浸→燙漂→冷浸→發(fā)酵(30 ℃、4 h)→烘干；分析比較其活性物質(zhì)含量。

從表6可見，工藝A條件下藍(lán)莓葉紅茶的花青素含量比工藝B條件下藍(lán)莓葉紅茶的花青素含量多，而藍(lán)莓葉紅茶中黃酮和茶多酚的含量則是工藝A比工藝B少，茶葉干物質(zhì)含量變化不明顯。這與燙漂后藍(lán)莓葉紅茶的發(fā)酵溫度相關(guān)，燙漂后進(jìn)行發(fā)酵的溫度會(huì)由燙漂時(shí)的溫度緩慢下降到發(fā)酵時(shí)的溫度。黃酮、茶多酚含量的減少與酶的活性有關(guān)，在發(fā)酵過程中溫度的緩慢下降在酶適宜溫度下黃酮、茶多酚快速分解。

表6 燙漂、發(fā)酵對(duì)藍(lán)莓葉紅茶中活性物質(zhì)含量的影響

3 結(jié)論與討論

藍(lán)莓葉紅茶制作時(shí)，葉片剪碎程度越小，揉捻的時(shí)間越長，花青素等活性物質(zhì)的含量越多。發(fā)酵溫度相同但發(fā)酵時(shí)間延長，花青素等活性物質(zhì)含量會(huì)減少。發(fā)酵時(shí)間不變但發(fā)酵溫度升高導(dǎo)致藍(lán)莓葉紅茶中花青素等活性物質(zhì)含量減少。剪碎程度、揉捻時(shí)間、發(fā)酵時(shí)間和發(fā)酵溫度使藍(lán)莓葉紅茶的花青素等活性物質(zhì)發(fā)生變化并影響品質(zhì)。

剪碎與揉捻相比，揉捻對(duì)細(xì)胞的破損率更大，細(xì)胞破損后藍(lán)莓葉汁浸出，同時(shí)也加大了內(nèi)含物間的轉(zhuǎn)化，從而降低了花青素等活性物質(zhì)含量。茶多酚含量影響藍(lán)莓葉紅茶的滋味，茶多酚含量越多會(huì)使藍(lán)莓葉紅茶的苦澀味越重，影響藍(lán)莓葉紅茶的品質(zhì)。黃酮類化合物在自然狀態(tài)下不穩(wěn)定，在熱、酶和氧化物質(zhì)作用下降解，會(huì)與花青素結(jié)合產(chǎn)生輔色素[16]，黃酮在茶湯中口感柔和、苦澀[17]。加工工藝過程中花青素等活性物質(zhì)會(huì)因剪碎程度、揉捻時(shí)間、發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵溫度而發(fā)生變化，對(duì)藍(lán)莓葉紅茶的品質(zhì)非常重要。所以要利用這些影響因素使藍(lán)莓葉紅茶中的花青素等活性物質(zhì)含量適當(dāng)，不影響藍(lán)莓葉紅茶的品質(zhì)及保健作用。該研究通過考察相對(duì)最優(yōu)的加工工藝將藍(lán)莓葉加工為紅茶，提高紅茶的品質(zhì)，得到適合人們口味的紅茶，既實(shí)現(xiàn)廢棄物資源利用，也提供一種新的植物茶。

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Analysis of Active Ingredient in Blueberry Red Leaf Tea

YAN Hong-guang1, CHENG Jiang-hua2,YAO Ping-wei1et al

(1.Kaili College, Kaili, Guizhou 556001; 2.Anhui Academy of Agricultural Sciences, Hefei, Anhui 230036)

[Objective] The aim was to study content of active substance of blueberry red leaf tea.[Method] With blueberry leaf as material to produce red tea, the effect of fermentation time, fermentation temperature, shear, rolling size method on content of active substance of blueberry red leaf tea such as anthocyanin, polyphenols, flavonoids was studied.[Result] The smaller leaf and the longer time of rolling shear lead to the higher content of anthocyanin and other active substances.The longer fermentation time reduced the content of active substance such as anthocyanins when the temperature and other factors keep unchanged.The higher temperature reduced the content of active substance such as anthocyanins when the fermentation time and other factors keep unchanged.[Conclusion] The shear, rolling, fermentation time and fermentation temperature is important to the quality of blueberry red leaf tea that make anthocyanins and other active substances change.

Polyphenols; Anthocyanins; Flavonoids; Blueberry leaf; Red tea

貴州省科技廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目(黔科合J字[2013]2264號(hào))；凱里學(xué)院自然科學(xué)重點(diǎn)項(xiàng)目(Z1303)；凱里學(xué)院博士科研啟動(dòng)資助項(xiàng)目(BS201312)。

嚴(yán)紅光(1981- )，男，安徽巢湖人，副教授，博士后，從事發(fā)酵工程研究。

2016-11-21

S 571.1;TS 272.5+2

A

0517-6611(2016)34-0073-03