吳 凡 肖勝武 余銀山 李德臣 陳登松*

(1.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所,武漢 430070;2.羅田縣三寶蠶種有限公司,湖北羅田 438600;3.湖北省黃岡蠶種場,湖北黃岡 438000)

湖北省主要家蠶品種資源添食NPV抗性試驗

吳 凡1肖勝武2余銀山3李德臣1陳登松1*

(1.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所,武漢 430070;2.羅田縣三寶蠶種有限公司,湖北羅田 438600;3.湖北省黃岡蠶種場,湖北黃岡 438000)

對湖北省保存的11個中系和10個日系家蠶品種資源進行了NPV添食試驗，調(diào)查統(tǒng)計其發(fā)病率。中系發(fā)病率最高的品種是27，平均發(fā)病率為45.56%，最低的品種為E春，平均發(fā)病率為34.86%；日系發(fā)病率最高的品種是812，平均發(fā)病率為48.84%，最低的是9902，平均發(fā)病率為32.62%。中系品種資源的發(fā)病率差異不顯著，而日系品種資源的發(fā)病率差異顯著，發(fā)現(xiàn)9902品種的抗性較強，812品種的抗性較差。

湖北省 家蠶 品種資源 NPV 抗性鑒定

蠶絲業(yè)是我國在國際市場上處于優(yōu)勢地位的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)，繭絲產(chǎn)量占世界總量的70%以上，出口量占世界貿(mào)易額的80%以上。2015年全國桑園面積82.18萬hm2，蠶繭產(chǎn)量63.79萬t，其工農(nóng)業(yè)產(chǎn)值3000多億元。 但是，每年由于蠶病的發(fā)生，給蠶絲業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失，其中，尤以家蠶核型多角體病毒(BmNPV)對蠶業(yè)生產(chǎn)的危害最為嚴重[1]。蠶桑生產(chǎn)的機械化程度低，加之農(nóng)村剩余勞動力的轉(zhuǎn)移，造成蠶業(yè)生產(chǎn)上對抗性強的家蠶品種的需求迫切，為此我們對湖北省現(xiàn)有的部分家蠶品種資源進行了BmNPV的添食試驗，以期為家蠶NPV抗病育種和研究提供參考。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗材料

供試家蠶品種資源共有21個，其中11個中系品種資源，包括9903、895、E蘇、126、27、Z83、821、801、823、新華、E春；日系品種資源10個，包括Z84、812、9902、L64、892、834、866、932、798、854，由湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟作物研究家蠶育種研究室提供，為春制即浸種。家蠶核型多角體(NPB)病原由湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟作物研究家蠶病理研究室提供。

1.2 試驗方法

在各品種二齡餉食時分別添食5×106/mL病毒液，每區(qū)50頭蠶，每品種設(shè)3個重復(fù)，將桑葉切成2 cm×2 cm方塊，用移液槍取100 μL病毒液，置于桑葉上并涂抹均勻，每區(qū)給桑4片，待所有添食的桑葉吃完后，改喂普通桑葉，每天上午用新鮮的石灰粉進行蠶體蠶座消毒，加網(wǎng)除沙防止交叉感染。

1.3調(diào)查方法

從三齡第二天開始逐日調(diào)查發(fā)病率，逐日調(diào)查發(fā)病蠶頭數(shù)，連續(xù)調(diào)查3天后終止(每天上午8：30—11：00調(diào)查)，以防二次感染而影響試驗結(jié)果。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS19.0數(shù)據(jù)分析軟件進行統(tǒng)計分析。One-Way ANOVA 對品種與發(fā)病率差異性進行方差分析，采用 LSD(least sig-nificant difference)進行顯著性檢驗。進行方差齊性檢驗時，當其概率值大于0.05時，表明為齊性方差，否則為非齊性方差。

2 結(jié)果與分析

2.1 各品種在添食NPV后的發(fā)病率

各品種抗NPV測定結(jié)果見表1。

從表1可以看出，中系中發(fā)病率最高的品種是27，平均發(fā)病率為45.56%，最低的品種為E春，平均發(fā)病率為34.86%，各品種發(fā)病率由高到低分別為27>Z83>821>895>新華>801>9903>126>823>E蘇>E春；日系中發(fā)病率最高的品種是812，平均發(fā)病率為48.84%，最低的是9902，平均發(fā)病率為32.62%，各品種發(fā)病率由高到低分別為812>798>L64>834>854>892>Z84>866>932>9902。

2.2 各品種發(fā)病率的方差分析

各品種發(fā)病率的SPSS方差分析和ANOVA分析結(jié)果見表2-5。試驗表明中系家蠶品種資源間對NPV的抗性不存在顯著性差異，日系家蠶品種資源對NPV的抗性存在顯著性差異，其中9902的抗性較強，812的抗性較差。

表1 各添食品種的發(fā)病率

表2 中系品種發(fā)病率的SPSS分析

續(xù)表2 中系品種發(fā)病率的SPSS分析

表3 日系品種發(fā)病率的SPSS分析

表4 中系品種的ANOVA方差分析結(jié)果

表5 日系品種資源的ANOVA方差分析結(jié)果

3 結(jié)論與討論

本試驗對湖北省保存的部分家蠶品種資源進行了NPV抗性鑒定，中系發(fā)病率最高的品種是27，平均發(fā)病率為45.56%，最低的品種為E春，平均發(fā)病率為34.86%；日系發(fā)病率最高的品種是812，平均發(fā)病率為48.84%，最低的是9902，平均發(fā)病率為32.62%。對發(fā)病率進行方差分析，發(fā)現(xiàn)中系品種資源間不存在顯著差異，而日系品種資源間存在顯著差異，其中以9902的抗性較強，812的抗性較差。

劉昌文等[2]進行了15 個中系和12和日系品種資源對 BmNPV 的抗性試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)供試的家蠶品種對家蠶血液型膿病抗性存在顯著差異。黎歡吉等[3]分析了6對家蠶品種添食NPV的抗性，結(jié)果表明不同家蠶品種發(fā)病率差別較大， 其中菁松×皓月發(fā)病率較高， 桂蠶一號發(fā)病率較低，品種間發(fā)病率差異顯著。本實驗僅對湖北部分家蠶品種資源進行了NPV抗性鑒定，結(jié)果表明中系品種間發(fā)病率差異不顯著，日系品種間差異顯著，獲得了對家蠶NPV抗性較強的品種資源，在今后進一步的試驗中有必要加大品種資源的數(shù)量，比較分析其對NPV的抗性，為家蠶抗NPV品種的選育提供更多參考。

[1] 陳婷婷,董戰(zhàn)旗,胡楠,等. 家蠶核型多角體病毒 lef-11 基因 RNA 干擾策略的優(yōu)化[J]. 微生物學(xué)報.2016,56(10):1561-1570.

[2] 劉昌文,艾均文,薛宏,等. 湖南省主要家蠶品種資源及現(xiàn)行一代雜交種對血液型膿病的抗性[J]. 中國蠶業(yè),2016,37(3):12-16.

[3] 黎歡吉,王代鋼. 不同家蠶品種添食 NPV 的抗性分析[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué),2015, 47(10):99-101.

The NPV Resistance Test on Main Silkworm Varieties of Hubei Province

WU Fan1，XIAO Shengwu2，SHE Yinshan3，LI Dechen1，CHEN Dengsong1*

(1.Institute of Industrial Crops, Hubei Academy of Agricultural Sciences,430064,Wuhan ,Hubei, China；2. Luotian Sanbao Silkworm Co. Ltd.,438600, Luotian,Hubei,China;3.Huanggang Silkworm Egg Farms,438000, Huanggang ,Hubei, China)

The 11 Chinese and 10 Japanese silkworm varieties were fed with NPV, and the disease incidence was investigated. The results showed that the highest disease incidence in Chinese silkworm varieties was 27, the average incidence was 45.56%, and of which the lowest was E-chun, the average incidence was 34.86%. The highest disease incidence in Japanese silkworm varieties was 812, the average incidence was 48.84%, and of which the lowest was 9902, the average incidence being 32.62%. SPSS analysis indicated that there was no significant difference between the Chinese silkworm varieties, but there were significant differences between the Japanese silkworm varieties. 9902 had the strongest resistance to NPV, and 812 had lowest resistance to NPV.

Hubei province; Bombyx mori; varieties; NPV; resistance identification

* 資助項目：湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院青年科學(xué)基金項目(2016NKYJJ06)

吳凡(1980-)，女，博士，助理研究員。

陳登松(1968-)，男，研究員。E-mail：hbcds816@126.com