■方禮祿 楊 光

（北京市SPF豬育種管理中心，北京100194）

定時輸精的原理就是調(diào)控母畜體內(nèi)生殖激素的分泌情況，通過利用激素（四烯雌酮、pLH、hCG,GnRH或GnRH類似物、eCG等）調(diào)節(jié)母豬體內(nèi)的卵泡發(fā)育，從而達到使母豬在某一固定時間內(nèi)發(fā)情并進行批次化的定時輸精，從而達到降低對母豬的漏配率，提高母畜繁殖性能的一種技術。定時輸精的優(yōu)點有：減少人工勞力、減少精液成本及高效使用優(yōu)秀公豬的精液，維持豬群健康狀態(tài)、利于規(guī)?；i場的批次生產(chǎn)、減少母豬的非生產(chǎn)天數(shù)等[1]。豬場的批次化生產(chǎn)有利于豬場的管理、疾病的防控、維持豬群的健康狀態(tài)、降低人工成本、提高豬場的經(jīng)濟效益。而定時輸精是一種高效的、簡單的、有利于豬場批次化生產(chǎn)的技術。我國母豬的P.S.Y.基本在16～26間，跟國外P.S.Y.32（甚至更高）還有很大的差距。我國在2015年開始從德國引進豬定時輸精技術，在應用上還有很多困難，據(jù)現(xiàn)在的文獻研究結(jié)果與國外有很大差距。在我國豬行業(yè)的定時輸精技術還不夠成熟，掌握不了母豬的輸精-排卵最適時間、還需用人工查情與發(fā)情鑒定、輸精2次，與國外的單次定時輸精技術還有很大的差距。造成這種結(jié)果有很多原因，如營養(yǎng)平衡、管理水平、環(huán)境控制、疾病控制、飼料污染等。本試驗研究了同期發(fā)情+定時輸精對母豬發(fā)情率、受胎率及產(chǎn)仔數(shù)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

200頭北京市SPF豬育種管理中心的純種英式大白后備母豬，日齡在210～280 d間，試驗開始前1周內(nèi)無發(fā)情跡象。200頭純種英式大白斷奶母豬，胎次1～5胎，根據(jù)胎次隨機分配成2組，每組100頭。

1.2 試驗藥品、飼料與儀器

四烯雌酮購于北京市科益豐生物技術發(fā)展有限公司生產(chǎn)，含量≥99%，促性素（PMSG）、生源（GnRH）和縮宮素由寧波市三生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，公豬精液稀釋粉購于深圳市鑫鉆農(nóng)牧科技有限公司，氯前列醇鈉由寧波第二激素廠生產(chǎn)。全價配合飼料由北京三元禾豐牧業(yè)有限公司生產(chǎn)。B超儀（SSC-218）由上海阿洛卡醫(yī)用儀器有限公司制造，顯微鏡（SM2L）由LWS公司生產(chǎn)，恒溫生物保存箱（SC-50C）由廣州萬寶特種制冷設備有限公司制造，美國AMG輸精管購于滄州市永高農(nóng)牧機械科技有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 后備母豬

①200頭后備母豬隨機分配成2組：試驗組和對照組，每組100頭。

②后備母豬都在定位欄飼養(yǎng)，試驗組后備母豬在早上8點連續(xù)飼喂四烯雌酮（15 mg/d）14 d，停藥后第2 d開始對豬群進行試情、查情。試驗組后備母豬在停喂四烯雌酮24 h后肌注1 000 IU的促性腺素，再過72 h肌注100 μg生源，肌注生源24 h后對所有后備母豬進行定時輸精，過24 h再定時輸精一次。對照組的后備母豬停止飼喂四烯雌酮后有發(fā)情馬上進行輸精，過24 h再輸精1次，如2次輸精后還發(fā)情再加1次輸精。輸精精液量為80 ml（2×109精子細胞），每次輸精前加10 IU的縮宮素。

③母豬停藥后第2 d開始試情、查情，試情及發(fā)情鑒定的具體方法同楊光等[2]方法。

④B超孕檢：配種后25 d進行B超孕檢，再過15 d再次進行B超孕檢。

⑤數(shù)據(jù)記錄：母豬的發(fā)情數(shù)、外陰變化數(shù)、靜立反應數(shù)、妊娠數(shù)、分娩數(shù)、產(chǎn)仔數(shù)等。

⑥數(shù)據(jù)處理：試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進行單因素方差分析，采用ANOVA法進行比較，結(jié)果以“平均值±標準誤”表示，用SPSS軟件的卡方來檢驗數(shù)據(jù)中百分數(shù)的差異性。

1.3.2 斷奶母豬

① 200頭斷奶母豬（1～5胎），根據(jù)胎次隨機平均分配成2組：試驗組和對照組，每組100頭。

②斷奶母豬都在定位欄飼養(yǎng)，試驗組母豬斷奶24 h后肌注1 000 IU的血促性腺素，再過72 h肌注100 μg生源，肌注生源24 h后對所有斷奶母豬進行定時輸精，過24 h再定時輸精一次；對照組的斷奶母豬發(fā)情后就開始輸精，過24 h再輸精1次，如2次輸精后還發(fā)情再過24 h加1次輸精。輸精的長白豬精液量為80 ml（2×109個精子細胞），每次輸精前2 min 加 10 IU的縮宮素。

③其他方法同上述后備母豬的試驗方法。

2 結(jié)果

2.1 后備母豬試驗結(jié)果（見表1、表2）

表1 定時輸精對后備豬繁殖性能的影響

表2 試驗組內(nèi)后備母豬的繁殖性能

表1顯示，對照組中后備母豬只有出現(xiàn)靜立反應的母豬才參加配種，而試驗組的后備母豬全部參加配種。妊娠的母豬沒有死亡或流產(chǎn)。試驗組的后備母豬的靜立率（68%vs 65%，P＞0.05）、外陰變化率（81%vs 73%，P＞0.05）、妊娠率（78%vs 58%，P＜0.05）、分娩率（78%vs 58%，P＜0.05）、窩產(chǎn)仔數(shù)（9.26±2.27 vs 8.70±2.00，P＞0.05）均高于對照組，試驗組靜立反應母豬妊娠率為（65/68）×100%=95.59%，對照組靜立反應母豬妊娠率為（58/65）×100%=89.23%，試驗組靜立反應母豬妊娠率高于對照組靜立反應母豬妊娠率。

表2顯示，試驗組內(nèi)：靜立反應母豬妊娠率（95.59%vs 46.15%＆36.84%，P＜0.01）高于無靜立+外陰變化母豬、無靜立+無外陰變化母豬；窩產(chǎn)仔數(shù)高于無靜立+無外陰變化母豬（P＞0.05）而低于無靜立+外陰變化母豬（P＞0.05）。

2.2 斷奶母豬試驗結(jié)果（見表3、表4）

表3 定時輸精對斷奶母豬繁殖性能的影響

表4 試驗組斷奶母豬的繁殖性能

表3顯示，試驗組的母豬全面參加配種，對照組中只有發(fā)情的母豬才進行配種。妊娠的母豬沒有流產(chǎn)及死亡。試驗組母豬的發(fā)情率、妊娠率、窩產(chǎn)仔數(shù)均高于對照組（P＞0.05）；試驗組有11頭不出現(xiàn)發(fā)情癥狀，經(jīng)過2次定時輸精后有5頭妊娠。

表4顯示，試驗組中靜立反應母豬的妊娠率（P＜0.01）、窩產(chǎn)仔數(shù)（P＞0.05）均高于隱性發(fā)情組。

3 分析與討論

母豬受精成功與否與輸精～排卵間期有很大的關聯(lián)。在母豬排卵前的0～24 h內(nèi)輸精，并不影響母豬的受精、妊娠、分娩和窩產(chǎn)仔數(shù)[3]。母豬分娩率與輸精時間，公豬的精子數(shù)量與質(zhì)量，母豬的胎次、發(fā)情癥狀、排卵和卵巢異常有關[4]。提前或推遲輸精就會降低母豬的受精率、妊娠率和窩產(chǎn)仔數(shù)，沒有準確地估算好母豬排卵時間就會增加1～2次的人工輸精，顯然增加了人工勞力和浪費公豬的精液[3]。

在早期研究中我們發(fā)現(xiàn)，連續(xù)14 d飼喂四烯雌酮15 mg/d的后備母豬，大欄飼養(yǎng)的后備母豬發(fā)情率高于單欄，本試驗對照組后備母豬發(fā)情率（70%）也高于以前的56%[5]，但低于郭秀麗[6]研究的飼喂四烯雌酮后的后備母豬出現(xiàn)的95%發(fā)情率。造成這種原因可能是環(huán)境因素、育種管理引起的。輸精與排卵是否處理好是母豬受精成功的關鍵。在發(fā)情后備母豬陰部黏膜下注射pLH，12 h后進行單次的定時人工輸精，對照組母豬發(fā)情后進行至少2次人工輸精（發(fā)情12 h輸精1次，36 h后輸精1次，如再發(fā)情60 h后再輸精1次），試驗組母豬的發(fā)情持續(xù)期、發(fā)情-排卵、妊娠率、分娩率和窩產(chǎn)仔數(shù)均低于對照組（P＜0.05）[7]。用過四烯雌酮+eCG+hCG的后備豬，對發(fā)情母豬進行2次人工輸精，其分娩率可達到70%；不管用過四烯雌酮+eCG+hCG/pLH的后備豬發(fā)情不發(fā)情，都對其進行1次或2次定時輸精，其分娩率與對照組類似[8]。

母豬斷奶時肌注eCG、過96 h后肌注hCG（GnRH、pLH等類似激素），再過24～30 h進行單次定時輸精，其繁殖性能不異于自然發(fā)情斷奶母豬的多次輸精[9]。斷奶后（86±3）h肌注10 μg布舍瑞林、再過30～33 h且不需發(fā)情鑒定的單次定時輸精的斷奶母豬，其分娩率（87%vs 84.5%）、產(chǎn)仔數(shù)（13.6±3.8 vs 13.7±3.2）類似對照組（需發(fā)情鑒定、輸精2次）[10]。斷奶后發(fā)情就立即肌注5 mg pLH、過24 h開始單次定時后宮頸輸精的斷奶母豬與斷奶后發(fā)情就立即肌注5 mg pLH、2次的輸精（發(fā)情立即輸精，過24 h再輸1次）的斷奶母豬和不肌注pLH、發(fā)情就開始輸精、隔24 h再輸精（如果母豬還發(fā)情）的斷奶母豬相比，單次定時輸精斷奶母豬的發(fā)情～排卵間期、分娩率、窩產(chǎn)仔數(shù)無差異，它們不受pLH、輸精次數(shù)的影響[11]。斷奶后發(fā)情就立即肌注pLH、過24 h開始單次定時輸精的斷奶母豬的分娩率（88.0%vs 86.1%vs 94.1%）、窩產(chǎn)仔數(shù)（12.0 vs 12.7 vs 12.8）與斷奶發(fā)情24 h后的單次定時輸精的斷奶母豬、斷奶后就發(fā)情且多次輸精的斷奶母豬無差異[7]。斷奶時肌注600 IU eCG、過86～89 h后再肌注10 μg GnRH的斷奶母豬，斷奶后86～89 h肌注GnRH的斷奶母豬，兩組都在肌注GnRH 30～33 h后進行單次定時后宮頸輸精；對照組經(jīng)過發(fā)情鑒定后，開始對發(fā)情母豬進行多次后宮頸輸精；eCG+GnRH組、GnRH組斷奶母豬的斷奶～排卵間期（133.3 hr vs 135.9 hr vs 141.5 hr）短于對照組；GnRH組母豬的分娩率、窩產(chǎn)仔數(shù)與對照組無差異，但高于eCG+GnRH組（GnRH組排卵提前，輸精～排卵間期縮短引起的，應該在斷奶后116～122 h進行單次輸精）[12]。斷奶后96 h肌注醋酸曲普瑞林的母豬，再過22～26 h開始單次定時后宮頸輸精，有88%的母豬出現(xiàn)發(fā)情癥狀，12%無發(fā)情癥狀的母豬經(jīng)過單次定時輸精后有50%受精后分娩，母豬的分娩率高于肌注醋酸曲普瑞林30 h后單次定時輸精的母豬[4]。斷奶母豬斷奶后24 h、96 h后分別肌注PMSG、GnRH，肌注GnRH 24 h后開始定時輸精，約有50%的隱性發(fā)情母豬能夠受精后分娩[1]。花澤雄等把斷奶母豬分成2組，試驗組：斷奶后120 h、168 h分別輸精1次（不管母豬發(fā)情與否都輸精），對照組：需發(fā)情鑒定后再輸精，發(fā)情立即輸精，隔8～12 h后再輸精1次；兩組受胎率（85%vs 76.47%）無差異，但兩組窩產(chǎn)仔豬數(shù)（9.77±1.87 vs 12.27±1.30）差異顯著[13]。

4 結(jié)論

母豬肌注PMSG和GnRH，可提高母豬的發(fā)情率、分娩率、窩產(chǎn)仔數(shù)，減少隱形發(fā)情母豬的漏配率,提高繁殖母豬的P.S.Y.的數(shù)值。但是現(xiàn)在不確定肌注GnRH后輸精的最適時間，在以后的試驗中繼續(xù)探索定時輸精的最適時間及單次定時輸精（傳統(tǒng)輸精方式/低劑量深部輸精方式）對母豬繁殖性能的影響。