■陳 鵬 楊在賓 張 慶 姜淑貞

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東泰安 271018）

近年來(lái)，在對(duì)肉產(chǎn)品安全高度關(guān)注、實(shí)現(xiàn)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展以及抗生素負(fù)面作用的影響下，開發(fā)“安全、高效、穩(wěn)定、可控”的新型飼料添加劑成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。植物提取物以其安全高效、無(wú)殘留、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，在畜牧生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用，成為一種新型綠色抗生素替代品[1-2]。我國(guó)八角和杜仲資源豐富，且具有多種生物學(xué)功能。體外試驗(yàn)表明，八角和杜仲葉提取物在抗菌[3-4]、抗氧化[5-6]和提高免疫力[7-8]方面具有顯著效果。目前，由于八角和杜仲葉提取物的研究主要集中在體外的研究，作為飼料添加劑對(duì)斷奶仔豬的研究尚少。本試驗(yàn)旨在探討八角和杜仲葉提取物對(duì)里岔黑斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率、血清代謝產(chǎn)物和盲腸微生物的影響，為八角和杜仲葉提取物在畜牧生產(chǎn)中替代抗生素的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

八角提取物：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究實(shí)驗(yàn)室提取。提取方法：乙醇提取法，主要成分：反式茴香腦≥55.50%，草稿腦≥6.17%，茴香醛≥4.56%。

杜仲葉提取物：山東龍昌動(dòng)物保健品有限公司提供。主要成分：杜仲多糖≥20.00%，黃酮≥8.00%，綠原酸≥5.00%。

抗生素：金霉素(山東雨澤銀豐動(dòng)物藥業(yè)有限公司)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取28日齡里岔黑斷奶仔豬48頭，隨機(jī)分為4個(gè)組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4頭斷奶仔豬，組間體重差異不顯著（P＞0.05）。基礎(chǔ)飼糧參考中國(guó)肉脂型生長(zhǎng)豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)[9]配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加八角提取物（500 mg/kg）、杜仲葉提取物（250 mg/kg）和金霉素（50 mg/kg）。試驗(yàn)預(yù)試期7 d，正式期42 d，仔豬自由采食和飲水。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1 生產(chǎn)性能

每天記錄各組仔豬采食量，每周稱量各組仔豬體重，計(jì)算其平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。

1.3.2 血液的采集、處理與血清酶的測(cè)定

于試驗(yàn)期結(jié)束后的次日晨飼前，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取里岔黑仔豬1頭，使用真空促凝管采集血液15 ml。37℃水浴靜置10 min，3 000 r/min下離心10 min，分離血清，-20℃保存待測(cè)，采用全自動(dòng)生化分析儀（COBAS MIRA Plus，瑞士羅士公司）測(cè)定血清中總蛋白(TP)、膽固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)和尿素氮(SUN)的含量。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3.3 盲腸微生物的測(cè)定

取盲腸食糜，通過(guò)細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)，測(cè)定盲腸食糜中沙門氏菌（SS瓊脂培養(yǎng)基）、大腸桿菌（營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）、乳酸菌（MRS培養(yǎng)基）的數(shù)量，計(jì)算出每克樣品所含菌數(shù)（用每克盲腸內(nèi)容物中細(xì)菌個(gè)數(shù)的對(duì)數(shù)Lgcfu/g表示）。所取盲腸內(nèi)容物經(jīng)勻質(zhì)后在超凈工作臺(tái)無(wú)菌取樣0.5 g，加入到裝有4.5 ml稀釋液的試管中，在微型振蕩器上振蕩20 min，然后從試管中取0.5 g加入另一個(gè)試管振蕩5 min，依次稀釋到10-6。用移液槍取10 μl放到不同培養(yǎng)基平皿內(nèi)，然后置于37℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，細(xì)菌數(shù)量采用平板菌落記數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算出每克樣品所含菌數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SAS 9.3軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。處理和仔豬品種間差異采用雙因素方差分析（Double factor variance analysis）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各平均數(shù)之間用Duncan's法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“x±SEM”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)生長(zhǎng)性能的影響（見表2）

表2 八角和杜仲葉提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，各組間仔豬平均日采食量（ADFI）差異不顯著（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，八角、杜仲葉組和抗生素三組斷奶仔豬平均日增重（ADG）顯著提高（P＜0.05）。各組間料重比（F/G）差異不顯著，但杜仲組有下降的趨勢(shì)（P＞0.05）。

2.2 對(duì)血清代謝產(chǎn)物的影響（見表3）

表3 八角和杜仲葉提取物對(duì)斷奶仔豬血清代謝產(chǎn)物的影響

由表3可見，飼糧添加八角組的總蛋白（TP）顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。八角組和杜仲葉組血清尿素氮（SUN）含量顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），與抗生素組差異不顯著（P＞0.05）。各組間甘油三酯（TG）和膽固醇（TCHO）含量差異不顯著（P＜0.05）。

2.3 對(duì)盲腸微生物的影響（見表4）

表4 八角和杜仲葉提取物對(duì)斷奶仔豬盲腸微生物菌群的影響(lgcfu/g)

由表4可見，各組間的沙門氏菌數(shù)差異不顯著（P＞0.05），但杜仲、八角組和抗生素組有降低的趨勢(shì)（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，八角組和抗生素組盲腸大腸桿菌數(shù)顯著降低（P＜0.05）。各組間乳酸菌數(shù)差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

宋振帥[10]研究表明，八角粉（10 g/kg）對(duì)育肥豬日增重和采食量沒顯著影響，但可提高其飼料轉(zhuǎn)化率。李曉梅等[11]研究報(bào)道，在日糧中添加一定量的杜仲（250 mg/kg）有利于提高日增重和飼料轉(zhuǎn)化率。本試驗(yàn)中，飼糧中添加八角（500 mg/kg）和杜仲葉提取物（25 mg/kg）提高了仔豬生長(zhǎng)性能（仔豬ADG提高）。八角和杜仲葉提取物具有抗菌消炎[12-14]的作用，通過(guò)抑制有害病菌與機(jī)體競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，提高機(jī)體中飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收實(shí)現(xiàn)[15]，這可能是八角和杜仲葉提取物提高生長(zhǎng)性能的原因之一。八角和杜仲葉提取物中含有增強(qiáng)抗膽堿酯酶（AchE）的成分，通過(guò)其抗AchE的作用，興奮了胃腸道平滑肌，進(jìn)一步促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)及胃液分泌[16-17]，這可能是八角和杜仲葉提取物提高生長(zhǎng)性能的另一個(gè)原因。但是，八角和杜仲提取物提高生長(zhǎng)性能的分子機(jī)制尚需進(jìn)一步證實(shí)。

3.2 對(duì)血清代謝產(chǎn)物的影響

動(dòng)物機(jī)體的代謝過(guò)程是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的變化過(guò)程，血清生化指標(biāo)是反映動(dòng)物體內(nèi)物質(zhì)代謝和某些組織器官機(jī)能變化的重要特征，也可反映動(dòng)物體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的沉積情況[18]。

血清總蛋白（TP）是由白蛋白和球蛋白組成，是血清固體成分中含量最多的一類物質(zhì)，含量越高，組織蛋白合成作用越強(qiáng)，越能促進(jìn)組織器官的生長(zhǎng)[19]；而且具有維持血管內(nèi)膠體正常滲透壓和酸堿度、運(yùn)輸多種代謝物的功能[20]；此外血清中總蛋白含量也反映了機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收狀況以及與體液免疫的關(guān)系，是衡量機(jī)體免疫水平的一項(xiàng)指標(biāo)[21]。本試驗(yàn)中八角組血清總蛋白顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明八角具有促進(jìn)組織器官生長(zhǎng)和提高免疫力的作用，可能原因是八角提取物中的成分茴香腦具有促進(jìn)骨髓組織的生長(zhǎng)和白細(xì)胞的分泌[22]的功效，從而提高機(jī)體的免疫力。

尿素氮(SUN)是豬蛋白質(zhì)分解代謝的終產(chǎn)物，其含量與動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡及肌肉組織的增長(zhǎng)狀況呈負(fù)相關(guān)性，氨基酸平衡良好血清尿素氮含量下降[23-24]。此外，SUN還與機(jī)體疲勞程度有關(guān)，體內(nèi)能源儲(chǔ)備糖原物質(zhì)消耗，就會(huì)開始消耗體內(nèi)蛋白質(zhì)，從而產(chǎn)生大量的SUN。機(jī)體對(duì)運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的適應(yīng)性越低，形成的尿素就越多。本試驗(yàn)表明添加杜仲和八角提取物的飼糧組血清尿素氮水平顯著低于對(duì)照組，說(shuō)明在飼糧中添加八角和杜仲葉提取物在一定程度上增加仔豬體內(nèi)氮的沉積，有利于斷奶仔豬體內(nèi)蛋白質(zhì)合成和氨基酸的平衡，從而促進(jìn)斷奶仔豬的生長(zhǎng)和飼料蛋白的利用，與前面生產(chǎn)性能結(jié)果一致；并且飼糧中添加八角和杜仲葉提取物也具有抗疲勞的功效。有資料表明[25-26]，茶多酚和竹葉黃酮具有抗疲勞功效，這兩種成分分別屬于多酚類物質(zhì)和黃酮類物質(zhì)，其抗疲勞的功效可能與八角和杜仲葉提取物成分中的山奈酚、榭皮素等黃酮類物質(zhì)有關(guān)。

3.3 對(duì)斷奶仔豬盲腸微生物菌群的影響

仔豬早期斷奶后受到各種應(yīng)激影響，腸道微生物菌群嚴(yán)重失調(diào)，斷奶后2 d內(nèi)回腸中乳酸桿菌的數(shù)量幾近消失，而大腸桿菌的數(shù)量顯著增加，且pH值越高，大腸桿菌的數(shù)量越多，而大腸桿菌是引起仔豬斷奶后腹瀉的主要病原菌[27]。植物精油能抑制多種細(xì)菌，如單核細(xì)胞李斯特屬菌、沙門氏菌、埃希式大腸桿菌屬、志賀氏大腸桿菌、芽孢桿菌、葡萄球菌。其作用機(jī)理主要通過(guò)其疏水性裂解細(xì)胞膜和線粒體的脂質(zhì)層，使其具有滲透性，最終導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物釋放出來(lái)從而達(dá)到抑菌目的[28]。鑒于以上機(jī)理，本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，八角提取物可通過(guò)抑制腸道有害微生物生長(zhǎng)，進(jìn)而提高消化道揮發(fā)性脂肪酸含量和消化吸收能力，有利于促進(jìn)仔豬的健康生長(zhǎng)。

4 結(jié)論

① 本研究條件下，八角（500 mg/kg）和杜仲葉（250 mg/kg）提取物能提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能。

② 八角和杜仲葉提取物降低了血清尿素氮（SUN）含量及提高總蛋白（TP）含量，說(shuō)明其具有提高蛋白利用率和免疫力的作用。

③八角提取物降低了盲腸有害菌的數(shù)量，說(shuō)明其具有提高仔豬抗病和腸道消化吸收的能力。

④通過(guò)總體試驗(yàn)結(jié)果可見，八角和杜仲葉提取物對(duì)抗生素具有一定的替代作用。