■黃雅莉 周貞兵賀文美 彭 婷 侯小露

（廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧 530007）

精氨酸是一種重要的功能性氨基酸[1]，家禽機(jī)體內(nèi)因缺乏氨甲酰磷酸酶等精氨酸合成途徑中的關(guān)鍵酶而不能內(nèi)源合成精氨酸，只能由日糧提供，故精氨酸是家禽的必需氨基酸。但由于精氨酸價(jià)格頗高，且與賴氨酸和組氨酸等有頡頏作用，因而在生產(chǎn)中不能廣泛應(yīng)用。N-氨甲酰谷氨酸(NCG)在機(jī)體內(nèi)參與尿素循環(huán)，可有效激活內(nèi)源性精氨酸的合成，并保持體內(nèi)精氨酸的平衡穩(wěn)定，價(jià)格較便宜，且目前的研究表明N-氨甲酰谷氨酸是無毒的[2]。因此，通過調(diào)控內(nèi)源性精氨酸的合成，增加機(jī)體內(nèi)精氨酸的供給是一種經(jīng)濟(jì)、有效的策略。有關(guān)應(yīng)用N-氨甲酰谷氨酸提高機(jī)體精氨酸含量及NCG-精氨酸途徑產(chǎn)生的活性物質(zhì)改善動(dòng)物健康狀態(tài)和生產(chǎn)性能的研究，是近年來業(yè)內(nèi)人士研究的熱點(diǎn)。N-氨甲酰谷氨酸在家禽上的研究報(bào)道較少，N-氨甲酰谷氨酸作為一種新型禽類飼料添加劑具有良好的市場開發(fā)前景。

近年來，已有許多研究學(xué)者在N-氨甲酰谷氨酸對動(dòng)物生產(chǎn)性能等方面進(jìn)行了研究報(bào)道。湯智群等[3]用N-氨甲酰谷氨酸和精氨酸飼喂京海黃雞肉仔雞，研究表明，日糧中添加N-氨甲酰谷氨酸可提高肉雞生長性能，改善血液指標(biāo)。與對照組相比較，添加0.05%、0.10%組平均日增重顯著升高，添加 0.10%NCG組料重比顯著降低；添加0.15%NCG組血清中一氧化氮、一氧化氮合成酶和堿性磷酸酶含量顯著高于對照組；添加0.10%、0.15%NCG組血清中精氨酸含量顯著升高。陳楠[4]用N-氨甲酰谷氨酸灌服哺乳仔豬，該研究結(jié)果表明，7～21日齡階段哺乳仔豬每天灌服100、150 mg/kg NCG組的體重比對照組分別提高了10.5%和14.6%，日增重分別提高14.98%和21.09%。與對照組相比，哺乳仔豬每天灌服150 mg/kg NCG，提高了血清中白蛋白33.66%，血清中總蛋白16.09%，血清中NO的含量109.37%；灌服150 mg/kg NCG顯著提高了血清中精氨酸含量43.84%，血清瓜氨酸含量45.23%。王琤驊等[5]用N-氨甲酰谷氨酸飼喂斷奶仔豬，該研究結(jié)果表明，26～47日齡仔豬，飼糧中添加0.04%、0.08%的NCG顯著改善了仔豬平均日增重和料重比(P＜0.05)。NCG的添加量為 0.08%時(shí)，仔豬血清游離精氨酸和蛋氨酸含量顯著高于對照組(P＜0.05)，血清游離谷氨酸含量顯著高于對照組(P＞0.05)。王若丞等[6]用N-氨甲酰谷氨酸灌服1～41日齡哺乳山羊羔羊，該研究結(jié)果表明，灌服NCG顯著提高了1～41日齡羔羊平均日增重，顯著降低了腹瀉率(P＜0.05)；灌服NCG顯著提高了41日齡羔羊血漿中總蛋白和白蛋白含量(P＜0.05)，而顯著降低了21和41日齡羔羊血漿氨和尿素氮含量(P＜0.05)；灌服NCG顯著提高了41日齡羔羊血漿精氨酸、鳥氨酸和瓜氨酸含量(P＜0.05)。Chacher B等[7]在飼糧中添加N-氨甲酰谷氨酸飼喂中國荷斯坦奶牛，該研究結(jié)果表明，添加NCG 20 g/d可以提高奶牛產(chǎn)奶量、產(chǎn)奶率和乳蛋白含量。NCG線性增加了血漿中一氧化氮的含量，降低了血漿中氨態(tài)氮的含量。與對照組相比，NCG 10、20、30 g/d組的血漿中精氨酸含量分別增加了1.1%、10.4%和16.0%。周俊華等[8]用N-氨甲酰谷氨酸口服桂黃兔，結(jié)果表明：40～68日齡階段，試兔每天口服300 mg和600 mg組，每千克體質(zhì)量的日增質(zhì)量較對照組提高2.30 g和4.98 g，料重比降低0.33和1.22。

也有一些研究學(xué)者在N-氨甲酰谷氨酸對羅非魚生長性能等方面做了一些研究報(bào)道。程煒軒等[9]研究包被NCG制劑飼喂羅非魚幼魚試驗(yàn)表明，NCG添加量為 0.4%時(shí)，精氨酸含量顯著提高(P＜0.05)，約為對照組的4倍。

N-氨甲酰谷氨酸對仔豬、羔羊、奶牛、家兔及魚類等動(dòng)物生長性能及血液指標(biāo)的影響等方面已有一些報(bào)道，但N-氨甲酰谷氨酸在家禽方面的研究報(bào)道較少，因而，更深層次的開展這方面的應(yīng)用研究工作十分重要。因此，本試驗(yàn)研究旨在飼糧中添加不同水平的N-氨甲酰谷氨酸飼喂三黃雞，通過對三黃雞生長性能、血清生化指標(biāo)及血清中游離氨基酸含量的影響來確定三黃雞飼糧中N-氨甲酰谷氨酸添加的最佳水平，為今后開展N-氨甲酰谷氨酸在家禽營養(yǎng)研究應(yīng)用中提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取三黃雞（21日齡）180只，按體重相近，公、母比例相同的原則隨機(jī)分為4組（對照組及試驗(yàn)1、2、3組），每組3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)15只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.4%、0.5%、0.6%N-氨甲酰谷氨酸的試驗(yàn)飼糧。試驗(yàn)期間每日早8：00、下午18：00各一次，自由采食和飲水，采用常規(guī)飼養(yǎng)管理和免疫程序，自然采光和通風(fēng)，預(yù)飼期7 d，正試期28 d。試驗(yàn)所用的N-氨甲酰谷氨酸購自亞太興牧（北京）科技有限公司，產(chǎn)品純度≥75%。

1.2 試驗(yàn)日糧

試驗(yàn)日糧為肉仔雞用配合飼料，購買于南寧市福凱來農(nóng)牧有限公司。日糧粗蛋白17.0%、粗纖維5.50%、粗灰分7.50%、鈣0.70%～1.20%、總磷 0.47%、氯化鈉0.30%～0.80%、蛋氨酸0.34%～0.90%、水分13%。主要原料為玉米、麥皮、魚粉、豆粕、蛋氨酸、維生素A、維生素D3、維生素E、維生素B12、磷酸氫鈣、磷酸鈣、硫酸亞鐵、硫酸銅、硫酸鋅、硫酸錳、碘化鉀、亞硒酸鈉、氯化鈉等。

1.3 樣品采集與處理

試驗(yàn)正試期最后1 d于晨飼前空腹稱體重，采用每個(gè)重復(fù)3只三黃雞翼根靜脈采血5 ml，室溫避光靜置 30 min后，3 000 r/min離心10 min，分離所得血清分裝于EP管中，置于-20℃保存待測。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能指標(biāo)

于試驗(yàn)正試期開始當(dāng)天晨飼前空腹稱取每組每只三黃雞的體重作為三黃雞的始重量；試驗(yàn)期間，記錄每組每個(gè)重復(fù)三黃雞的日采食量；正試期第14 d和第28 d晨飼前秤取每只三黃雞空腹體重，根據(jù)體重變化和飼料消耗情況計(jì)算三黃雞平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.2 血清生化指標(biāo)的測定

血清中總蛋白（TP）、球蛋白（ALB）、白蛋白（GLO）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）和總膽固醇（T-Cho）水平的測定采用試劑盒（日本和光純藥工業(yè)株式會(huì)社公司），按照說明書操作。

1.4.3 血清游離氨基酸含量的測定

采用氨基酸自動(dòng)分析儀外標(biāo)法測定氨基酸含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用EXCEL軟件進(jìn)行處理，然后用SPSS16.0軟件進(jìn)行方差分析，Duncan's法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以P＜0.05作為差異顯著性判斷的標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 N-氨甲酰谷氨酸對28～56日齡三黃雞生長性能的影響(見表1)

表1 N-氨甲酰谷氨酸對28～56日齡三黃雞生長性能的影響

由表1可知，添加N-氨甲酰谷氨酸對28～42日齡三黃雞平均日增重的影響差異不顯著(P＞0.05)。42～56日齡三黃雞平均日增重試驗(yàn)1組顯著高于其他組(P＜0.05）。28～56日齡三黃雞平均日增重添加N-氨甲酰谷氨酸組都高于對照組。其中，試驗(yàn)1組顯著高于對照組(P＜0.05），試驗(yàn)1組比對照組提高了3.05%。添加N-氨甲酰谷氨酸對28～42、42～56日齡三黃雞平均日采食量的影響差異不顯著(P＞0.05)。28～56日齡三黃雞平均日采食量試驗(yàn)1、2組顯著低于對照組(P＜0.05）。添加N-氨甲酰谷氨酸對28～42、42～56日齡三黃雞料重比的影響差異不顯著(P＞0.05)。28～56日齡料重比試驗(yàn)1、2組顯著低于對照組(P＜0.05），試驗(yàn)1組比對照組降低了5.72%。

2.2 N-氨甲酰谷氨酸對三黃雞血清生化指標(biāo)的影響(見表2)

表2 N-氨甲酰谷氨酸對三黃雞血清生化指標(biāo)的影響

從表2可以看出，總蛋白、白蛋白含量試驗(yàn)1組顯著高于對照組(P＜0.05），試驗(yàn)2、3組與對照組差異不顯著(P＞0.05)。球蛋白水平及堿性磷酸酶活性試驗(yàn)1、2、3組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)，其中試驗(yàn)1組球蛋白水平及堿性磷酸酶活性最高；尿素氮含量試驗(yàn)1、2、3組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)。甘油三酯、總膽固醇含量試驗(yàn)1、2、3組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)，其中試驗(yàn)1組甘油三酯、總膽固醇含量最低。添加N-氨甲酰谷氨酸可以降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性，其中，谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性試驗(yàn)1組顯著低于對照組(P＜0.05)，試驗(yàn)2、3組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)。谷草轉(zhuǎn)氨酶活性試驗(yàn)3組顯著低于對照組(P＜0.05)，試驗(yàn)1、2組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 N-氨甲酰谷氨酸對三黃雞血清游離氨基酸含量的影響(見表3)

表3 N-氨甲酰谷氨酸對三黃雞血清游離氨基酸含量的影響(mg/100 ml)

從表3可以看出，添加N-氨甲酰谷氨酸可以提高精氨酸、賴氨酸含量，其中，精氨酸含量試驗(yàn)1、2、3組顯著高于對照組(P＜0.05)，賴氨酸含量試驗(yàn)1、2組顯著高于對照組(P＜0.05)。蛋氨酸含量試驗(yàn)1、2、3組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)。蘇氨酸含量試驗(yàn)1、3組顯著高于對照組(P＜0.05)。酪氨酸含量試驗(yàn)2組顯著高于對照組(P＜0.05)。絲氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸含量試驗(yàn)1、2、3組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)，但相對于對照組，試驗(yàn)1、2、3組中大多數(shù)這些氨酸酸含量都有所提高(P＞0.05)。胱氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、門冬氨酸、組氨酸含量試驗(yàn)1、2、3組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)。氨基酸總量試驗(yàn)1、2、3組與對照組相比較差異不顯著(P＞0.05)，其中試驗(yàn)1組氨基酸總量最高。

3 討論

3.1 N-氨甲酰谷氨酸對三黃肉雞生長性能的影響

精氨酸是家禽的必需氨基酸，方勇軍等[10]研究表明，肉鴨日糧中缺乏精氨酸，其增重和采食量都很低，但隨著日糧中L-精氨酸鹽酸鹽添加水平提高，肉鴨增重速度上升。精氨酸不足會(huì)影響動(dòng)物正常生理代謝和生長，家禽機(jī)體內(nèi)因缺乏氨甲酰磷酸酶等精氨酸合成途徑中的關(guān)鍵酶而不能內(nèi)源合成精氨酸。N-氨甲酰谷氨酸(NCG)是N-乙酰谷氨酸的結(jié)構(gòu)類似物，能代替N-乙酰谷氨酸成為CAP-Ⅰ的變構(gòu)催化劑，從而促進(jìn)脯氨酸和谷氨酰胺向瓜氨酸和精氨酸轉(zhuǎn)化，增加精氨酸的內(nèi)源合成，且保持體內(nèi)精氨酸的平衡穩(wěn)定[11]。曹洪戰(zhàn)等[12]研究表明，灌服100 mg/kg和150 mg/kg NCG顯著提高了7～21日齡哺乳仔豬平均日增重(P＜0.05)。Frank等[13]對9～16日齡哺乳仔豬灌服NCG 50 mg/kg，2次/d，仔豬增重提高了25%。周笑犁等[14]研究表明，添加N-氨甲酰谷氨酸可以提高環(huán)江香豬的生長性能。0.1%的NCG添加組環(huán)江香豬平均日增重顯著升高(P＜0.05)，料重比顯著降低(P＜0.05)。本試驗(yàn)中添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸顯著提高了三黃雞平均日增重(P＜0.05），添加0.4%、0.5%N-氨甲酰谷氨酸顯著降低了28～56日齡三黃雞平均日采食量(P＜0.05）和料重比(P＜0.05）。本試驗(yàn)添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸提高了三黃雞的生長性能，這說明N-氨甲酰谷氨酸促進(jìn)了三黃雞精氨酸的內(nèi)源合成，從而促進(jìn)了三黃雞的生長。本試驗(yàn)添加N-氨甲酰谷氨酸對三黃雞生長性能提高的結(jié)果與上述研究學(xué)者利用N-氨甲酰谷氨酸在豬方面促進(jìn)豬生長性能的結(jié)果相一致。

3.2 N-氨甲酰谷氨酸對三黃肉雞血液生化指標(biāo)的影響

白蛋白、球蛋白的水平及谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性是動(dòng)物應(yīng)激的重要指標(biāo)。血清總蛋白和白蛋白的含量與機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收和代謝有關(guān),動(dòng)物營養(yǎng)狀況好，蛋白質(zhì)合成就會(huì)相應(yīng)增加，血漿總蛋白含量就會(huì)增加[5]。周錫紅等[15]研究表明，早期斷奶仔豬補(bǔ)充0.09%和0.12%的NCG，總蛋白、白蛋白水平均顯著高于對照組（P＜0.05），而尿素氮水平則均低于對照組。本試驗(yàn)添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸顯著提高了總蛋白、白蛋白含量(P＜0.05)。這說明添加N-氨甲酰谷氨酸促進(jìn)三黃雞生長性能，從而促進(jìn)三黃雞機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收和合成，增加了血清中總蛋白、白蛋白含量，本試驗(yàn)研究結(jié)果與周錫紅等[15]添加N-氨甲酰谷氨酸提高仔豬總蛋白、白蛋白水平的研究結(jié)果相一致。

尿素氮是哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的終產(chǎn)物，可以準(zhǔn)確地反映動(dòng)物體內(nèi)氨基酸平衡和蛋白質(zhì)代謝情況，氨基酸平衡良好時(shí)，尿素氮濃度降低[16]。本試驗(yàn)添加N-氨甲酰谷氨酸降低了尿素氮含量(P＞0.05)，但試驗(yàn)1、2、3組與對照組相比較差異不顯著。堿性磷酸酶活性提高，可以促進(jìn)動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成，加提高日增重，從而提高動(dòng)物的生長速度，提高飼料的轉(zhuǎn)化率。湯智群等[3]等研究表明，添加 1.05%NCG組京海黃雞肉仔雞血清中堿性磷酸酶含量顯著高于對照組（P＜0.05）。本試驗(yàn)中添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸組堿性磷酸酶含量有所提高，但是與對照組比較差異不顯著，這可能跟肉雞不同品種有關(guān)。

王健等[17]研究表明，血漿中甘油三酯與體重呈顯著負(fù)相關(guān)，家禽脂肪沉積取決于血漿中甘油三酯的水平。本試驗(yàn)添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸可以降低甘油三酯含量(P＞0.05)，本試驗(yàn)在研究三黃雞生長性能方面表明，添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸顯著提高了三黃雞平均日增重(P＜0.05），這說明添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸促進(jìn)三黃雞體重的增加，從而促使了血清中甘油三酯含量的降低。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶都屬于細(xì)胞內(nèi)酶，正常情況下，細(xì)胞膜具有屏障作用，二者不容易逸出，血清中該酶的活性很低，但當(dāng)細(xì)胞因各種因素受到損傷時(shí)，細(xì)胞膜的通透性會(huì)增加，從而使其釋放入血液的速度增高，血清酶活性顯著升高。本試驗(yàn)中與對照組相比較，添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸顯著降低了谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性(P＜0.05)，添加0.6%N-氨甲酰谷氨酸顯著降低了谷草轉(zhuǎn)氨酶活性(P＜0.05)。說明日糧中添加NCG對三黃雞無不良影響。

3.3 N-氨甲酰谷氨酸對三黃肉雞血清游離氨基酸含量的影響

Wu等[18]研究表明，哺乳仔豬日糧中添加NCG可以成為抑制腸道瓜氨酸合成下降的一個(gè)有效方式，進(jìn)而促進(jìn)精氨酸的合成。王若丞等[19]研究表明，灌服NCG顯著提高了41日齡羔羊血漿精氨酸、鳥氨酸和瓜氨酸含量(P＜0.05)。江雪梅等[20]研究表明，0.1%NCG組經(jīng)產(chǎn)母豬妊娠第90 d血漿亮氨酸、苯丙氨酸、瓜氨酸和脯氨酸濃度顯著提高(P＜0.05)。本試驗(yàn)添加N-氨甲酰谷氨酸顯著提高了血清中精氨酸含量(P＜0.05)，這說明添加N-氨甲酰谷氨酸很好地促進(jìn)了三黃雞精氨酸的內(nèi)源合成，本試驗(yàn)血清中精氨酸含量提高的結(jié)果與上述學(xué)者在研究NCG對其他動(dòng)物提高精氨酸含量的結(jié)果相一致。本試驗(yàn)添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸顯著提高賴氨酸和蘇氨酸含量(P＜0.05)，添加0.5%N-氨甲酰谷氨酸顯著提高酪氨酸含量(P＜0.05)。這表明添加N-氨甲酰谷氨酸也促進(jìn)了賴氨酸、蘇氨酸、酪氨酸的合成。

4 結(jié)論

①N-氨甲酰谷氨酸添加的比例在0.4%時(shí)，平均日增重、總蛋白、白蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶、精氨酸、賴氨酸、氨基酸總量等指標(biāo)數(shù)值都最高，尿素氮、甘油三酯、總膽固醇含量有所降低，28～56日齡平均日采食量、料重比達(dá)到最低。

②N-氨甲酰谷氨酸添加的比例在0.4%以上時(shí)，平均日增重、總蛋白、白蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶等指標(biāo)與0.4%水平時(shí)比較有所降低。

③N-氨甲酰谷氨酸添加的比例在0.4%時(shí)能很好地促進(jìn)三黃雞的生長發(fā)育，改善血液指標(biāo)，增加血清部分氨基酸的含量。