齊志強(qiáng)，彭 露，李 鵬，劉麗莎

（長(zhǎng)沙市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 長(zhǎng)沙 410004）

孕婦 B族鏈球菌的檢測(cè)及其臨床價(jià)值

齊志強(qiáng)，彭 露，李 鵬，劉麗莎

（長(zhǎng)沙市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 長(zhǎng)沙 410004）

目的探討免疫層析法在檢測(cè)孕婦 B族鏈球菌（GBS）感染中的臨床價(jià)值。方法選取 2014年 12月至 2015年12月間我院待產(chǎn)孕婦320例，各取2份陰道分泌物標(biāo)本。1份用免疫層析法快速檢測(cè) GBS；另1份用于接種 THB培養(yǎng)基，第2天轉(zhuǎn)至血平板，并對(duì)可疑菌落進(jìn)行生化鑒定。同時(shí)對(duì)320例孕婦的妊娠結(jié)局進(jìn)行隨訪。結(jié)果免疫層析法檢測(cè)出 GBS感染41（12.81%）例，培養(yǎng)法檢測(cè)出GBS感染 36（11.25%）例，以細(xì)菌培養(yǎng)法為參考標(biāo)準(zhǔn)，免疫層析法的符合率為98.4%。通過(guò)臨床跟蹤隨訪，320例孕婦中有16例發(fā)生早產(chǎn)、胎膜早破等異常情況，其中有13例GBS陽(yáng)性。結(jié)論GBS與早產(chǎn)、胎膜早破等異常妊娠關(guān)系密切；免疫層析法較傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法檢出率無(wú)統(tǒng)計(jì)差異，且有步驟簡(jiǎn)單、省時(shí)等優(yōu)點(diǎn)，適合應(yīng)用于臨床篩查 GBS感染。

B族鏈球菌； 免疫層析法； 產(chǎn)前檢查； 孕婦

B族鏈球菌（GBS）又稱無(wú)乳鏈球菌，正常寄居于陰道和直腸，是一種條件致病菌，一般正常健康人群感染 GBS并不致病。在20世紀(jì)70年代該菌被證實(shí)可導(dǎo)致泌尿系統(tǒng)感染、孕產(chǎn)婦敗血癥、羊膜絨毛膜炎，與新生兒敗血癥、早產(chǎn)、胎膜早破等疾病關(guān)系密切，為圍生期嚴(yán)重感染性疾病的重要病原菌［1-2］。在GBS的治療過(guò)程中，由于妊娠婦女帶菌率大約為10%～15%左右，對(duì)所有妊娠婦女均注射抗生素預(yù)防的方法顯然不合適，因此在孕婦產(chǎn)前篩檢 GBS顯得尤其重要。

資料與方法

1 一般資料

選取我院2014年 12月至 2015年 12月產(chǎn)房待產(chǎn)的產(chǎn)婦320例，待產(chǎn)婦平均年齡 26.1±4.5歲，平均孕周36.1±2.8周。入選標(biāo)準(zhǔn)如下：①采集樣本前1～2周內(nèi)沒(méi)有應(yīng)用抗生素類藥物治療；②采樣前沒(méi)有進(jìn)行陰道洗液、藥膏以及消毒液處理，24小時(shí)內(nèi)沒(méi)有性生活；③孕婦沒(méi)有內(nèi)科、外科合并癥以及產(chǎn)科并發(fā)癥。

2 標(biāo)本采集

孕婦采取膀胱截石位，絡(luò)合碘常規(guī)外陰消毒，待絡(luò)合碘干燥后，用窺陰器充分暴露宮頸，采用無(wú)菌的棉拭子取陰道后穹窿、宮頸及陰道中下1／3部位分泌物2份送檢。分別用于微生物培養(yǎng)和免疫層析法快速檢測(cè) GBS。

3 標(biāo)本鑒定

將采集好的棉拭子中的一份立即插入 THB培養(yǎng)管，置于37℃，5% ～7%CO2濃度培養(yǎng)箱內(nèi)，24h后轉(zhuǎn)種至血平板，同樣條件下24h后觀察結(jié)果。在血平板上呈現(xiàn)灰白色、濕潤(rùn)、凸起、光滑、透光的菌落，將其進(jìn)行生化鑒定：挑選革蘭染色為陽(yáng)性球菌，鏈狀或短鏈狀排列、觸酶試驗(yàn)為陰性、環(huán)磷酸腺苷式樣為陽(yáng)性的菌落，根據(jù)Lancefield分群的要求提取菌落的抗原，與 B群抗血清凝集的菌株可直接確認(rèn)為GBS。另外一份標(biāo)本采用珠海華奧生物科技有限公司生產(chǎn)的 B族鏈球菌鑒定卡（層析法）試劑盒檢測(cè)，醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證號(hào)：粵食藥監(jiān)械生產(chǎn)許20112095（補(bǔ)）號(hào)，醫(yī)療器械注冊(cè)證號(hào)：粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2012第2400077號(hào)，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：YZB／粵0921-2011。將試劑盒中1號(hào)和2號(hào)抽提液各5滴加入試管內(nèi)充分混勻備用，將標(biāo)本棉拭子放入已加入抽提液的試管中，搖動(dòng)棉簽數(shù)秒鐘，在管壁上反復(fù)擠壓，旋轉(zhuǎn)，使抽提液充分浸泡棉簽，室溫靜置10分鐘后，擠出棉簽上的液體后丟棄棉拭子，將管內(nèi)抽提物垂直加入 1滴于樣品孔，10～15分鐘觀察結(jié)果?？刂茀^(qū)（“C”）和測(cè)試區(qū)（“T”）均陽(yáng)性為GBS陽(yáng)性。

4 孕婦的追蹤觀察

觀察320例產(chǎn)婦最終分娩情況，將發(fā)生胎兒窘迫、泌尿系統(tǒng)感染、孕產(chǎn)婦敗血癥、羊膜絨毛膜炎，與新生兒敗血癥、早產(chǎn)、胎膜早破等異常情況的列為一組，計(jì)算其中GBS陽(yáng)性產(chǎn)婦的比率。

5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用 SPSS18.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用兩兩比較的 χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩種檢測(cè)方法結(jié)果比較

采用免疫層析法所用檢測(cè)時(shí)間較細(xì)菌培養(yǎng)法明顯縮短。以細(xì)菌培養(yǎng)法為參考標(biāo)準(zhǔn)，免疫層析法符合率為98.4%。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果認(rèn)為免疫層析法和細(xì)菌培養(yǎng)法在檢出率上無(wú)差異。結(jié)果見(jiàn)表1、2。

表1 兩種檢測(cè)方法檢出率

表2 兩種檢驗(yàn)方法比較

2 孕產(chǎn)婦追蹤結(jié)果

320例孕產(chǎn)婦中有 16例發(fā)生胎兒窘迫、泌尿系統(tǒng)感染、孕產(chǎn)婦敗血癥、羊膜絨毛膜炎，新生兒敗血癥、早產(chǎn)、胎膜早破等異常情況，其中有13例經(jīng)培養(yǎng)法和免疫層析法檢測(cè) GBS均為陽(yáng)性。

討 論

B族鏈球菌屬于革蘭染色陽(yáng)性球菌，是造成孕產(chǎn)婦生殖道感染的一個(gè)重要原因。西方國(guó)家對(duì)GBS一直都非常的重視，美國(guó)疾病控制中心已制定了 B族鏈球菌的篩查、處理指南［3］。Katz等［4］發(fā)現(xiàn)，孕婦生殖道感染 GBS能引起早產(chǎn)和絨毛膜炎。國(guó)外已經(jīng)開(kāi)始著手研究GBS疫苗，但仍然有些問(wèn)題沒(méi)有得到很好的解決［5］。國(guó)內(nèi)也有很多學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，GBS可以造成胎兒窘迫、泌尿系統(tǒng)感染、孕產(chǎn)婦敗血癥、羊膜絨毛膜炎、新生兒敗血癥、早產(chǎn)、胎膜早破等異常情況，導(dǎo)致一系列嚴(yán)重后果［6-8］。關(guān)于 GBS的感染率在不同地區(qū)結(jié)果存在差異。在歐美國(guó)家GBS感染率在5%～35%不等［9］。馬延敏等［10］曾報(bào)道北京地區(qū)的GBS帶菌率是10.12%。何國(guó)才等［11］報(bào)道桂林地區(qū)孕婦GBS檢出率為7.5%。本次研究的320例孕婦 GBS感染率為11.25%（細(xì)菌培養(yǎng)法）。

通過(guò)本次研究發(fā)現(xiàn)，免疫層析法與培養(yǎng)法一致性高、操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短，能快速篩查出GBS感染者。免疫層析法檢測(cè)的是 GBS的特異性抗原，與其他球菌不發(fā)生交叉反應(yīng)，能提高 GBS的檢出率。本次研究中，培養(yǎng)法 GBS陽(yáng)性的36例樣本，免疫層析法均為陽(yáng)性，沒(méi)有漏檢的樣本。在經(jīng)培養(yǎng)法和免疫層析法檢出的 GBS陽(yáng)性孕婦當(dāng)中有 13例發(fā)生了胎兒窘迫、泌尿系統(tǒng)感染、孕產(chǎn)婦敗血癥、羊膜絨毛膜炎、新生兒敗血癥、早產(chǎn)、胎膜早破中的一些情況，這也提示 GBS感染與這些疾病有著密切的聯(lián)系。如何預(yù)防GBS感染，開(kāi)發(fā)安全有效的 GBS疫苗已成為當(dāng)前的一個(gè)熱點(diǎn)［12］。

［1］時(shí)春艷，曲首輝，楊磊，等.妊娠晚期孕婦 B族鏈球菌帶菌狀況的檢測(cè)及帶菌對(duì)妊娠結(jié)局的影響.中華婦產(chǎn)科雜志，2010，45（1）：12-16.

［2］魯炳懷，李雪清，時(shí)琰麗.477例孕晚期婦女宮頸分泌物攜帶細(xì)菌的分布和耐藥分析.臨床檢驗(yàn)雜志，2011，29（2）：155-156.

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［12］王欣，韓淵明，魏超君.B族鏈球菌感染、預(yù)防及檢測(cè)研究進(jìn)展.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（4）：521-523.

（李 雁 張?jiān)鑫渚庉嫞?/p>

Detection of Group B Streptococcus in Pregnant Women
and Its Clinical Value

QI Zhi-qiang，PENG Lu，LI Peng，LIU li-sha
（Department of Clinical Laboratory，Changsha Central Hospital，Changsha 410004，China）

ObjectiveTo investigate the clinical significance in detecting group B streptococcu infection in pregnant women.MethodsA total of 320 cases of pregnant women in our hospital between December 2014 to December 2015 were included in this study，two specimens of vaginal secretions were collected from each patient.Immunochromatography method was adopted to detect GBS in one specimen.The other was cultured in THB medium and implanted on blood AGAR 2 days later.Biochemical analysis was carried out to identify the suspected colonies.The follow-up data was collected from the 320 patients as well.ResultsOf all the 320 pregnant women，infection of GSB was detected in 41 cases via Immunochromatography and 36 cases by traditional bacterial culture method.Using bacterial culture method as the standard method，the coincidence rate of Immunochromatography assay was 98.4%.There is no statistical significance between these 2 methods.By the end of the study，16 pregnant women experienced obstetric incidents such as premature delivery，premature rupture of membranes.13 out of the 16 patients were infected with GBS.ConclusionGBS infection was suspected with higher rates of obstetric incidence.Immunochromatography assay is in high coincidence with tradition bacterial culture method in detecting GBS.Immunochromatography assay is simpler and quicker and is suitable for screening GBS infection in large scale.

Group B streptococcus； Immune chromatography； Prenatal care； Pregnant women

10.11748／bjmy.issn.1006-1703.2016.12.009

2016-06-02；

2016-07-19

齊志強(qiáng)，男，碩士，主管檢驗(yàn)師，主要研究微生物檢驗(yàn)