張晏梓,梁建萍,孫明婕,馮曉軍
(山西農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山西太谷030801)
黃芪綠肥對(duì)玉米品質(zhì)和產(chǎn)量的影響
張晏梓,梁建萍,孫明婕,馮曉軍
(山西農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山西太谷030801)
為了探討黃芪莖葉作為綠肥的應(yīng)用前景,以玉米作為試驗(yàn)材料,在玉米不同生長(zhǎng)期施用黃芪綠肥、有機(jī)肥和復(fù)合肥,并采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)和葉片定點(diǎn)監(jiān)測(cè)的方法測(cè)定玉米葉片中谷氨酰胺合成酶含量、玉米產(chǎn)量構(gòu)成因素和相關(guān)玉米品質(zhì)的成分含量,研究黃芪綠肥對(duì)玉米品質(zhì)和產(chǎn)量的影響。結(jié)果表明,黃芪綠肥、有機(jī)肥和復(fù)合肥單獨(dú)使用均可提高玉米功能葉谷氨酰胺合成酶(GS)活性、玉米籽粒中色氨酸及賴(lài)氨酸含量以及清蛋白、球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白的含量,同時(shí)可以改善玉米產(chǎn)量結(jié)構(gòu),提高玉米產(chǎn)量;施用黃芪綠肥后,各指標(biāo)含量均明顯提高,尤其以黃芪綠肥+復(fù)合肥混合使用效果最佳,且隨著綠肥濃度的升高而增加。
黃芪綠肥;玉米品質(zhì);玉米產(chǎn)量
玉米是我國(guó)的主要糧食作物之一,僅次于小麥和水稻,糧、飼、經(jīng)多用,在糧食、飼料、化工、醫(yī)藥、輕工和經(jīng)貿(mào)等行業(yè)中都是重要的產(chǎn)品和原料,并且消費(fèi)量在持續(xù)增加。因此,在保證玉米產(chǎn)量的同時(shí)也要提高品質(zhì),尤其是提高營(yíng)養(yǎng)品質(zhì),從而增強(qiáng)其市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力[1]。氮肥對(duì)玉米品質(zhì)的影響最大,隨著施肥量的增加,玉米中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量增加,玉米的品質(zhì)提高[2]。同時(shí),氮素對(duì)提高玉米產(chǎn)量的作用明顯。
谷氨酰胺合成酶(GS)是植物氮代謝的關(guān)鍵酶,植物中的所有氮都必須經(jīng)過(guò)GS催化反應(yīng)途徑才能轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)。有研究表明,適量氮素能夠提高玉米發(fā)育中GS的活性,從而增加氨基酸含量和蛋白質(zhì)組分[3]。
綠肥是一種可再生資源,是指可以作為土壤肥料的綠色植物[4]。綠肥是一種含有豐富營(yíng)養(yǎng)成分的優(yōu)質(zhì)肥料,并且生長(zhǎng)周期短、適應(yīng)性廣、可以快速有效分解。其不僅能為玉米生長(zhǎng)提供豐富的氮肥、調(diào)節(jié)谷氨酰胺合成酶活性,而且對(duì)玉米品質(zhì)和產(chǎn)量表現(xiàn)出明顯的效果。綠肥按植物學(xué)特性可分為非豆科和豆科2類(lèi)[5]。黃芪是一種豆科黃芪屬多年生草本藥用植物[6],其根是藥用部位,但在生產(chǎn)上莖葉部分被廢棄,不能夠被充分利用。
本研究將黃芪莖葉作為綠肥,促使黃芪資源得到全方位利用,旨在探明黃芪莖葉作為綠肥在玉米生產(chǎn)上的作用效果及機(jī)制。
1.1 試驗(yàn)地概況
玉米種植試驗(yàn)地位于山西省太谷縣。該地年均氣溫9.9℃,降雨量462.2 mm,無(wú)霜期176 d,屬于溫帶季風(fēng)氣候。前茬作物為玉米。
1.2 試驗(yàn)材料
黃芪品種為3年生蒙古黃芪,取材于山西省渾源縣官兒鄉(xiāng)的麗珠黃芪基地;玉米品種為協(xié)玉早2號(hào)F1,種植時(shí)間為2014年5月初,其田間管理措施與當(dāng)?shù)叵嗤?/p>
1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),7個(gè)處理,3次重復(fù)。首先將玉米試驗(yàn)田分為21個(gè)大小7.5 m2(1.5 m×5.0 m)的小塊田,將黃芪地上莖葉部分制成綠肥,施用到玉米試驗(yàn)田中。試驗(yàn)組共分為7個(gè)組,分別為空白、黃芪綠肥、復(fù)合肥、有機(jī)肥、復(fù)合肥+黃芪綠肥(低)、復(fù)合肥+黃芪綠肥(中)和復(fù)合肥+黃芪綠肥(高),每組肥料隨機(jī)選擇3塊田。其中,黃芪綠肥、復(fù)合肥、有機(jī)肥的肥效相當(dāng)于施用了73.89 g氮素,復(fù)合肥+黃芪綠肥(低)、復(fù)合肥+黃芪綠肥(中)和復(fù)合肥+黃芪綠肥(高)這3個(gè)組合是在原含量73.89 g氮的復(fù)合肥基礎(chǔ)上混合了不同濃度的黃芪綠肥,其氮素含量分別為36.94,73.89,147.78 g。每塊小田玉米種植窩距為23 cm,行距為85 cm,并在生長(zhǎng)過(guò)程中進(jìn)行合理的管理。
1.4 黃芪地上部分、玉米葉和玉米粒采集
于2014年5月初,在山西省渾源縣官兒鄉(xiāng)的麗珠黃芪基地采集黃芪地上部分,并處理為綠肥。在玉米不同的生育期(苗期、拔節(jié)期、孕穗期、抽穗期、灌漿期、成熟期)定點(diǎn)采集玉米葉片。在玉米成熟期采集玉米粒。
1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法
1.5.1 谷氨酰胺合成酶活性的測(cè)定
1.5.1.1 GS粗酶液的提取稱(chēng)取植物材料0.2 g于研缽中,加2 mL提取緩沖液,在冰浴上研磨勻漿;然后轉(zhuǎn)移到2mL離心管中,在4℃下12 000 r/min離心30 min,上清液即為GS粗酶液。
1.5.1.2 GS吸光度值的測(cè)定取0.8 mL反應(yīng)混合液B,加入0.35 mL粗酶液和0.35 mL ATP溶液,混勻,在37℃下保溫0.5 h,加入顯色劑1 mL后混勻,靜置一段時(shí)間,在4 000 r/min下離心10 min,取上清液在分光光度計(jì)540 nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光值,以加入0.8 mL反應(yīng)混合液A作對(duì)照。
1.5.1.3 GS粗酶液中蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定先取粗酶液0.1 mL和0.9 mL蒸餾水于10 mL試管中,再取5mL考馬斯亮藍(lán)試劑加入試管,振蕩混勻,同時(shí)以加入1 mL蒸餾水且不加粗酶液的試管作為對(duì)照。放置2 min后在595 nm波長(zhǎng)處比色測(cè)定可溶性蛋白質(zhì)含量。
1.5.1.4 GS活力的測(cè)定GS活力按公式(1)進(jìn)行計(jì)算。
式中,OD540為540 nm處的吸光值;P為粗酶液中可溶性蛋白含量(mg/mL);V為反應(yīng)體系中加入的粗酶液體積(mL);T為反應(yīng)時(shí)間(h)。
1.5.2 玉米產(chǎn)量和產(chǎn)量構(gòu)成因素的測(cè)定玉米成熟后,對(duì)各小區(qū)進(jìn)行產(chǎn)量測(cè)定。分區(qū)取樣10株對(duì)穗長(zhǎng)、禿頂長(zhǎng)、穗質(zhì)量、穗行數(shù)、行粒數(shù)、粒質(zhì)量(風(fēng)干后測(cè)量)進(jìn)行測(cè)量統(tǒng)計(jì),并計(jì)算產(chǎn)量。
1.5.3 玉米籽粒中氨基酸的測(cè)定
1.5.3.1 樣品液的制備稱(chēng)取過(guò)篩后的玉米粉0.3 g放入試管中,加入20 mL蒸餾水后搖勻。讀取樣品懸浮液的總體積,放在80℃恒溫水浴中提取20 min。取出冷卻后,將提取液進(jìn)行過(guò)濾,濾液為待測(cè)樣品液。
1.5.3.2 賴(lài)氨酸的測(cè)定量取2.0mL樣品液于25mL容量瓶中,再加入1 mL醋酸鹽緩沖液和1 mL茚三酮試劑,混勻后沸水浴15 min;取出后冷卻10 min,加水定容至刻度線,在波長(zhǎng)為570 nm處進(jìn)行比色。取賴(lài)氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成不同濃度的工作液,制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.5.3.3 色氨酸的測(cè)定量取1.0mL樣品液于10mL容量瓶中,加入對(duì)二甲氨基苯甲醛4 mL,在沸水中加熱處理5 min,再加入亞硝酸鈉溶液1 mL,繼續(xù)加熱3 min,靜置20 min,加水定容至刻度線,于波長(zhǎng)為595 nm處進(jìn)行比色。取色氨酸標(biāo)準(zhǔn)液稀釋成不同濃度的工作液,制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.5.4 玉米籽粒中蛋白組分的測(cè)定稱(chēng)取樣品0.5 g于研缽中,用來(lái)提取所需要測(cè)定的各種蛋白質(zhì)。用蒸餾水來(lái)提取清蛋白,氯化鈉提取球蛋白,無(wú)水乙醇提取醇蛋白,氫氧化鈉提取谷蛋白。分別制定好各蛋白組分的待測(cè)液之后,加入考馬斯亮藍(lán)溶液,在分光光度計(jì)上進(jìn)行比色。
2.1 黃芪綠肥對(duì)玉米中谷氨酰胺合成酶活性的影響
從圖1可以看出,玉米功能葉中谷氨酰胺合成酶的活性表現(xiàn)為上升→下降→上升→下降。其中,在玉米灌漿期GS活性達(dá)到最大值。黃芪綠肥的處理中,玉米整個(gè)生長(zhǎng)期功能葉GS活性均比空白對(duì)照和其他肥料的單獨(dú)使用高;黃芪綠肥與復(fù)合肥的混合施用效果更好,并且功能葉GS活性隨黃芪綠肥濃度的增加而提高。
2.2 黃芪綠肥對(duì)玉米品質(zhì)的影響
2.2.1 黃芪綠肥對(duì)玉米中氨基酸含量的影響玉米中賴(lài)氨酸和色氨酸的含量可以用來(lái)評(píng)價(jià)玉米籽粒的品質(zhì)。從表1可以看出,不同處理均能提高成熟玉米籽粒中賴(lài)氨酸和色氨酸的含量;在復(fù)合肥、有機(jī)肥、黃芪綠肥的單獨(dú)施用中,黃芪綠肥對(duì)賴(lài)氨酸含量的影響作用大于其他2種肥料,而在提高色氨酸含量的作用中,有機(jī)肥的影響效果略?xún)?yōu)于黃芪綠肥;黃芪綠肥和復(fù)合肥的混合施用與復(fù)合肥、有機(jī)肥、黃芪綠肥的單獨(dú)施用相比,其對(duì)提高成熟玉米籽粒中賴(lài)氨酸和色氨酸含量的效果明顯,隨著黃芪綠肥濃度的增加效果明顯。
表1 黃芪綠肥對(duì)玉米成熟期籽粒中氨基酸含量的影響
2.2.2 黃芪綠肥對(duì)玉米蛋白組分的影響從表2可以看出,不同種類(lèi)的肥料均能提高成熟期玉米籽粒中蛋白組分的含量;在復(fù)合肥、有機(jī)肥、黃芪綠肥的單獨(dú)使用中,對(duì)提高玉米成熟籽粒中清蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白含量的表現(xiàn)為:黃芪綠肥>有機(jī)肥>復(fù)合肥;對(duì)提高球蛋白含量的影響也表現(xiàn)為黃芪綠肥的影響效果最大。黃芪綠肥和復(fù)合肥的混合施用效果優(yōu)于復(fù)合肥、有機(jī)肥、黃芪綠肥的單獨(dú)施用,隨著黃芪綠肥濃度的增加效果越顯著;并且對(duì)醇溶蛋白和谷蛋白的提高程度明顯大于清蛋白和球蛋白??梢钥闯?,黃芪綠肥對(duì)提高玉米籽粒中蛋白組分有明顯的效果,能夠有效提供并促進(jìn)玉米作物對(duì)氮的吸收積累,進(jìn)而提高蛋白質(zhì)組分含量,改善玉米品質(zhì)。
2.3 黃芪綠肥對(duì)玉米產(chǎn)量和產(chǎn)量構(gòu)成的影響
黃芪綠肥對(duì)玉米果穗性狀的影響如表3所示。
表3 黃芪綠肥對(duì)玉米成熟期產(chǎn)量與產(chǎn)量構(gòu)成的影響
由表3可知,黃芪綠肥、有機(jī)肥、復(fù)合肥3個(gè)處理較空白對(duì)照穗長(zhǎng)、穗粗、穗行數(shù)、行粒數(shù)、百粒質(zhì)量增加,禿頂長(zhǎng)減少,且穗粗、行粒數(shù)、百粒數(shù)的變化最明顯;黃芪綠肥與復(fù)合肥的混合處理效果更明顯,隨著黃芪綠肥濃度的增加效果更顯著;各處理對(duì)玉米產(chǎn)量影響的順序從小到大為復(fù)合肥<有機(jī)肥<黃芪綠肥<復(fù)+綠(低)<復(fù)+綠(中)<復(fù)+綠(高),且差異顯著。表明不管是3種肥料的單施還是黃芪綠肥與復(fù)合肥的配施,都能大幅度提高玉米產(chǎn)量。其中,黃芪綠肥與復(fù)合肥的配施分別較單施復(fù)合肥、單施有機(jī)肥、單施黃芪綠肥增產(chǎn)62.67%~86.70%,53.63%~76.33%和38.25%~58.68%;單施黃芪綠肥的產(chǎn)量次之,較單施復(fù)合肥、單施有機(jī)肥分別增產(chǎn)17.66%,11.13%。說(shuō)明黃芪綠肥的增產(chǎn)效果優(yōu)于復(fù)合肥和有機(jī)肥,黃芪綠肥與復(fù)合肥的配施效果更好。
黃芪綠肥是一種優(yōu)質(zhì)綠肥。綠肥是一種養(yǎng)分齊全的生物來(lái)源,含有氮、磷、鉀等農(nóng)作物所需要的養(yǎng)分和有機(jī)質(zhì)。有研究表明,施用綠肥能提高土壤養(yǎng)分特別是氮、磷、鉀含量,進(jìn)而提高作物的產(chǎn)量和品質(zhì)[7-8]。董繪陽(yáng)等[9]通過(guò)研究葉苕子、箭舌婉豆、紫花苜蓿和黑麥4種綠肥翻壓對(duì)煙草品質(zhì)的影響,結(jié)果表明,綠肥可以提高煙草品質(zhì)。蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)之一,它的含量是農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的重要衡量指標(biāo),常常在育種、飼料和食品等工作中需要測(cè)定蛋白質(zhì)的含量。吳光磊[10]研究表明,有機(jī)肥可以提高玉米籽粒中蛋白質(zhì)含量;梁平[11]通過(guò)研究不同來(lái)源有機(jī)肥對(duì)玉米品質(zhì)的影響,結(jié)果表明,秸稈等植物殘?bào)w可以提高蛋白質(zhì)含量,改善玉米的品質(zhì)。本試驗(yàn)研究結(jié)果與前人研究較為一致,利用黃芪地上部分作為綠肥施用,對(duì)提高玉米的品質(zhì)產(chǎn)生了一定的影響。結(jié)果表明,黃芪綠肥能夠提高玉米籽粒中賴(lài)氨酸和色氨酸以及蛋白質(zhì)組分含量,改善玉米品質(zhì)。黃芪綠肥與復(fù)合肥的混合施用與黃芪綠肥單獨(dú)施用相比,效果更顯著,隨著黃芪綠肥濃度的增加效果明顯。
氮素的同化對(duì)植物的生長(zhǎng)和發(fā)育而言,是一個(gè)十分重要的生理過(guò)程。其中,無(wú)機(jī)氮轉(zhuǎn)化為谷氨酰胺等有機(jī)物才能被植物體所吸收和利用。谷氨酰胺合成酶(GS)是參與這一同化過(guò)程的關(guān)鍵酶。本試驗(yàn)結(jié)果表明,各個(gè)肥料處理都可以提高GS活性,不同生育期變化趨勢(shì)也一致;黃芪綠肥較復(fù)合肥和有機(jī)肥提高GS活性的效果更顯著,且黃芪綠肥與復(fù)合肥的配施效果最好,隨黃芪濃度的增加而增加。陳煜等[12]研究表明,不同氮源均能提高玉米中谷氨酰胺合成酶(GS)活性;楊亮等[13]研究表明,不同氮素用量均能提高玉米功能葉中谷氨酰胺合成酶(GS)活性。同時(shí),有研究表明,玉米籽粒產(chǎn)量與GS酶活性呈正相關(guān),位于玉米1,4,5號(hào)染色體的4個(gè)GS基因和影響灌漿期的酶活性相關(guān),參與灌漿過(guò)程中氮的再活化和運(yùn)輸[14]。本研究結(jié)果與前人研究結(jié)果基本一致。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,黃芪綠肥可以提高玉米產(chǎn)量。梁秀蘭等[15]研究表明,綠肥主要通過(guò)增加穗長(zhǎng)和行粒數(shù)來(lái)提高產(chǎn)量;盛良學(xué)[16]通過(guò)研究稻草還田對(duì)玉米生長(zhǎng)發(fā)育與產(chǎn)量的影響,結(jié)果表明,稻草還田可以提高玉米產(chǎn)量;葛發(fā)琴[17]研究表明,不同綠肥品種均可提高玉米產(chǎn)量;周開(kāi)芳等[18]研究表明,豆科冬綠肥翻壓可以提高玉米產(chǎn)量。陳如強(qiáng)等[19]研究表明,綠肥可以提高玉米產(chǎn)量。本研究結(jié)果與前人研究基本一致,結(jié)果顯示,黃芪綠肥不論是單施還是與復(fù)合肥配施均能大幅度提高玉米產(chǎn)量,單施黃芪綠肥的效果優(yōu)于單施復(fù)合肥和單施有機(jī)肥,以黃芪綠肥與復(fù)合肥配施效果最好,隨著黃芪綠肥濃度的增加玉米產(chǎn)量增加,且產(chǎn)量差異均達(dá)到極顯著水平。究其原因,復(fù)合肥的施用及時(shí)為玉米生長(zhǎng)提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),玉米根系分泌物和根系生物量增加,同時(shí)復(fù)合肥為微生物提供了大量礦質(zhì)元素,促進(jìn)了微生物的生長(zhǎng),微生物的增加保證了黃芪綠肥的迅速分解,釋放出有機(jī)酸、氨基酸及無(wú)機(jī)養(yǎng)分等大量可溶性有機(jī)物,這些有機(jī)物為植株生長(zhǎng)和土壤中微生物的繁殖提供了大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),從而提高了土壤肥力,促進(jìn)了植物的生長(zhǎng)發(fā)育,提高了玉米產(chǎn)量。這個(gè)試驗(yàn)結(jié)果與王秀領(lǐng)等[20]研究結(jié)果一致,也與陳正剛等[21]研究結(jié)果一致。
綜上所述,黃芪綠肥能夠提高功能葉谷氨酰胺合成酶(GS)活性、玉米品質(zhì)及產(chǎn)量。并且黃芪綠肥和復(fù)合肥的配施效果更加明顯,隨著黃芪綠肥用量的增加效果顯著。黃芪綠肥用于生產(chǎn)實(shí)踐,不僅可以使黃芪得到全方位利用,也可以提高玉米經(jīng)濟(jì)效益;既創(chuàng)造了生態(tài)價(jià)值,也增加了經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
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Effects of Astragalus Membranaceus Green Manure on Corn Quality and Yield
ZHANG Yan-zi,LIANG Jian-ping,SUN Ming-jie,F(xiàn)ENG Xiao-jun
(College of Life Sciences,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801,China)
To explore the application prospect of astragalus membranaceus stem and leaf as green manure,this experiment applied fertilizer to corns with astragalus membranaceus green manure,organic fertilizer and compound fertilizer respectively in different growth periods,measuring the concentration of glutamine synthetase in corn leaves,corn yield components and component content of the related corn quality with method of randomized complete block design and fixed-point monitoring.The results showed that astragalus membranaceus green manure,organic fertilizer and compound fertilizer used separately could improve the activity of glutamine synthetase(GS)in the functional leaves,the tryptophan and lysine content and albumin,globulin and glutelin and gliadin protein components content in corn seeds,as well as improving the structure of the corn crop yield.Contents of each index were significantly improved with the astragalus membranaceus green manure,especially mixing it with compound fertilizer works best,with increasing concentration of green manure,the index contents increased obviously.
astragalus membranaceus green manure;corn quality;corn output
S142+.1
A
1002-2481(2016)01-0040-05
10.3969/j.issn.1002-2481.2016.01.12
2015-10-28
國(guó)家“十二五”科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2011BAI07B01);山西省科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(振東項(xiàng)目)(2014ZD0501-1);2014年山西省高等學(xué)校教學(xué)改革項(xiàng)目;山西農(nóng)業(yè)大學(xué)2013年教學(xué)改革項(xiàng)目;山西農(nóng)業(yè)大學(xué)博士基金項(xiàng)目(XB2008022);山西農(nóng)業(yè)大學(xué)第十三批科技創(chuàng)新項(xiàng)目(2015088)
張晏梓(1993-),男,山西汾陽(yáng)人,在校學(xué)生,研究方向:中藥資源與開(kāi)發(fā)。梁建萍為通信作者。