王鼎南，周凡，李詩(shī)言，徐衛(wèi)國(guó)，王揚(yáng)

(1.浙江省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站, 浙江 杭州 310023;2.嘉興市水產(chǎn)技術(shù)推廣站, 浙江 嘉興 314050)

甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中呋喃西林代謝物氨基脲的本底調(diào)查及來(lái)源分析

王鼎南1*，周凡1，李詩(shī)言1，徐衛(wèi)國(guó)2，王揚(yáng)1

(1.浙江省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站, 浙江 杭州 310023;2.嘉興市水產(chǎn)技術(shù)推廣站, 浙江 嘉興 314050)

通過(guò)對(duì)常見(jiàn)甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中呋喃西林代謝物氨基脲本底含量的調(diào)查及來(lái)源分析，為水產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管提供依據(jù)。本研究運(yùn)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，對(duì)常見(jiàn)的4種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中本底氨基脲的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，在4種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中，日本沼蝦和羅氏沼蝦中氨基脲檢出率達(dá)100%，日本沼蝦中氨基脲平均檢出值為6.92 μg/kg，羅氏沼蝦中氨基脲平均檢出值為2.52 μg/kg，均超過(guò)現(xiàn)行殘留限量，而凡納濱對(duì)蝦和中華絨螯蟹中的氨基脲含量較低。本研究的結(jié)果為甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中氨基脲殘留限量的制定提供了數(shù)據(jù)支持。[中國(guó)漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)，2016, 6(6):6-11]

甲殼類(lèi)水產(chǎn)品；氨基脲；本底調(diào)查；來(lái)源分析；呋喃西林；日本沼蝦；羅氏沼蝦

呋喃西林(nitrofurazone, NFZ)是美國(guó)Eaton研究所在20世紀(jì)50年代開(kāi)發(fā)的一種人工合成抗菌藥，它能通過(guò)干擾細(xì)菌的糖代謝過(guò)程和氧化酶系統(tǒng)發(fā)揮抑菌或殺菌作用。因其具有殺菌能力強(qiáng)、抗菌譜廣、價(jià)格低廉等特點(diǎn)而廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)[1]，后又被引入水產(chǎn)養(yǎng)殖中。呋喃西林原藥在動(dòng)物體內(nèi)代謝較快，半衰期僅為幾個(gè)小時(shí)，導(dǎo)致原藥本身在動(dòng)物體內(nèi)難以被檢測(cè)[2]。而呋喃西林在動(dòng)物體內(nèi)的典型代謝物——氨基脲(semicarbazide, SEM)，在食源性產(chǎn)品中的含量與呋喃西林在動(dòng)物源中添加的量成線性正比，且能與蛋白結(jié)合生成穩(wěn)定的殘留物，因此美國(guó)、歐盟等國(guó)家以及中國(guó)均以氨基脲為呋喃西林藥物代謝的標(biāo)識(shí)物而進(jìn)行檢測(cè)和監(jiān)控[3]。由于呋喃西林及其代謝物對(duì)人體具有致畸、致癌作用，而在動(dòng)物源性食品中的殘留可以通過(guò)食物鏈傳遞給人類(lèi)，長(zhǎng)期攝入會(huì)引起人體的各種疾病，因此美國(guó)、歐盟等國(guó)家已明文規(guī)定禁止在食品工業(yè)中使用該類(lèi)藥物，中國(guó)也將呋喃西林列為禁用藥[4]，并規(guī)定呋喃西林及其代謝物在動(dòng)物源性食品中不得檢出[5]。歷年來(lái)，由于不同檢測(cè)方法和儀器對(duì)于氨基脲的檢出限存在差異，故農(nóng)業(yè)部在下達(dá)監(jiān)督抽查任務(wù)時(shí)，在《關(guān)于開(kāi)展2016年國(guó)家產(chǎn)地水產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查工作的通知》(農(nóng)漁發(fā)〔2016〕6號(hào))中，將氨基脲的殘留限量值定為1.0 μg/kg。

近些年來(lái)，在對(duì)浙江省水產(chǎn)品監(jiān)督抽查過(guò)程中，

甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中檢出氨基脲的情況較為普遍，而據(jù)養(yǎng)殖戶反映，在養(yǎng)殖過(guò)程并未使用呋喃西林藥物。目前，國(guó)內(nèi)外均有文獻(xiàn)指出氨基脲作為內(nèi)源性物質(zhì)存在于甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中。王群等[6]對(duì)硝基呋喃類(lèi)在甲殼類(lèi)動(dòng)物中的代謝規(guī)律進(jìn)行研究后，認(rèn)為雖然氨基脲在甲殼類(lèi)動(dòng)物中的陽(yáng)性檢出率較高，但是是動(dòng)物本身產(chǎn)生的，并不是違規(guī)用藥的結(jié)果。Poucke等[7]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，羅氏沼蝦、凡納濱對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦挪威海鰲蝦、鋸緣青蟹和遠(yuǎn)海梭子蟹等甲殼中氨基脲本底含量為1.5～12.6 μg/kg，在肌肉中的含量低于0.5 μg/kg。McCracken等[8]在孟加拉國(guó)蝦的研究中發(fā)現(xiàn)，孟加拉國(guó)蝦的肌肉及外殼中含有氨基脲，且外殼中的氨基脲含量要高于肌肉。于慧娟等[9]對(duì)青蝦、青蟹等多種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中氨基脲的含量進(jìn)行了系統(tǒng)性的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)蝦類(lèi)樣品中氨基脲含量在未檢出～370.4 μg/kg之間，蟹類(lèi)樣品中氨基脲含量在未檢出～87.5 μg/kg之間，且甲殼中含量最高，肌肉中含量最低?；谏鲜鲅芯?，本研究針對(duì)凡納濱對(duì)蝦(Penaeusvannamei)、羅氏沼蝦(Macrobrachiumrosenbergiideman)、日本沼蝦(Macrobrachiumnipponense)和中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)這4類(lèi)甲殼類(lèi)水產(chǎn)品進(jìn)行了氨基脲的本底含量調(diào)查及來(lái)源分析，以期為甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中氨基脲殘留限量的制定提供數(shù)據(jù)支持，并為水產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料及方法

1.1 樣品采集

綜合考慮甲殼類(lèi)水產(chǎn)品產(chǎn)量、居民日常食用習(xí)慣及市場(chǎng)消費(fèi)情況等因素，本研究選擇了4種常見(jiàn)的甲殼類(lèi)水產(chǎn)品，包括凡納濱對(duì)蝦、羅氏沼蝦、日本沼蝦和中華絨螯蟹。為保證樣品結(jié)果的真實(shí)性，從浙江省杭州、臺(tái)州、溫州、舟山等地市的超市、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和養(yǎng)殖場(chǎng)，隨機(jī)抽取樣品，每批次樣品不少于500 g，共抽取凡納濱對(duì)蝦60批次(體長(zhǎng)50～80 mm)，羅氏沼蝦20批次(體長(zhǎng)50～100 mm)，日本沼蝦20批次(體長(zhǎng)40～60 mm)，中華絨螯蟹20批次(體重150～200 g)。樣品采集方法依照SC/T 3016—2004《水產(chǎn)品抽樣方法》規(guī)定執(zhí)行，樣品采集后，去除樣品的甲殼，只保留肌肉部分，裝入潔凈的聚乙烯塑料袋中，在采集當(dāng)天用冰箱運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，存放于-20 ℃冷凍保存待用。

1.2 化學(xué)試劑

乙酸乙酯、二甲亞砜、甲醇、乙腈均為色譜純(美國(guó)天地有限公司)；2-硝基苯甲醛，純度為99%(上海麥克林生化科技有限公司)；磷酸氫二鉀、鹽酸為分析純(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；氫氧化鈉為優(yōu)級(jí)純(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

呋喃西林代謝物標(biāo)準(zhǔn)品，純度99.5%(德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司)；氘代呋喃西林代謝物標(biāo)準(zhǔn)品，純度為99.9%(德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司)。

1.3 儀器設(shè)備

API4000Q-TRAP 三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀(美國(guó)AB公司)，配備電噴霧離子源(ESI)；1200液相色譜系統(tǒng)(美國(guó)Agilent公司)；MILLI-Q A10超純水系統(tǒng)(美國(guó)Millipore公司)；Mettler Toledo PL203電子天平(瑞士Mettler公司)；往返式水浴恒溫?fù)u床(上海智誠(chéng)分析儀器制造有限公司)。

1.4 檢測(cè)方法

1.4.1 樣品預(yù)處理

依據(jù)農(nóng)業(yè)部783號(hào)公告-1-2006《水產(chǎn)品中硝基呋喃類(lèi)代謝物殘留量的測(cè)定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》對(duì)待測(cè)樣品預(yù)處理：稱(chēng)取待測(cè)樣品2.00 g(精確到0.01g)于50 mL離心管中，加入150 μL質(zhì)量濃度為1 000 ng/mL內(nèi)標(biāo)溶液，再加入800 μL質(zhì)量濃度為8 g/L 2-硝基苯甲醛溶液和20 mL濃度為0.2 mol/L 鹽酸溶液，渦旋混合15秒，置于37 ℃往返式水浴恒溫?fù)u床上振蕩16 h。取出樣品后，加入300 μL質(zhì)量濃度為103 g/L磷酸氫二鉀溶液，再用質(zhì)量濃度為40 g/L的氫氧化鈉溶液將pH調(diào)節(jié)至7.0～7.5。再加入6 mL乙酸乙酯，渦旋混合15秒，5 000 r/min離心6 min，取上清液至10 mL離心管中，重復(fù)以上操作，合并上清液，在38 ℃水浴下氮?dú)獯蹈桑尤?.0 mL流動(dòng)相(乙腈-0.2%乙酸水溶液，15 ∶85，V/V)和3 mL正己烷，渦旋混合15 s，3 000 r/min離心3 min，取下清液過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜到樣品瓶中，供液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。后續(xù)實(shí)驗(yàn)中用于測(cè)定的蝦殼樣品，預(yù)處理方法同上述方法。

1.4.2 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用條件

Agilent Eclipse XDB-C18色譜柱(2.1 mm×150 mm, 5 μm)；柱溫為35 ℃；進(jìn)樣量為20 μL；流動(dòng)相：A為0.2%乙酸溶液，B為乙腈；梯度洗脫條件：0～1 min，30% A；1.1～3 min，80% A；3.1～6.5 min，95% A；6.6～12 min，30% A。

采用電噴霧離子源(ESI)，正離子掃描，選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)(SRM)；電噴霧電壓為5 500 V；去簇電壓為55 V；碰撞室出口電壓為25 V；氣化溫度為525 ℃。氨基脲和同位素內(nèi)標(biāo)物的母離子、子離子及碰撞能量見(jiàn)表1。

表1 氨基脲和同位素內(nèi)標(biāo)物的母離子和子離子及碰撞能量

Tab.1 Parent/Daughter ions and collision energy for semicarbazide and internal standard

化合物Compounds母離子Parention(m/z)子離子Daughterion(m/z)碰撞能量/eVCollisionenergySEM209.0166.0*11192.013SEM-13C-15N2212.0168.0*11

注：*示定量離子。

1.4.3 方法檢出限和質(zhì)量控制

為保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在陰性樣品中加標(biāo)的方式進(jìn)行質(zhì)量控制，標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控樣品與待測(cè)樣品進(jìn)行相同預(yù)處理。質(zhì)控樣品加標(biāo)濃度為2.50 μg/kg，實(shí)際測(cè)定值為2.37 μg/kg，回收率為94.8%。經(jīng)陰性樣品加標(biāo)確定實(shí)際方法檢出限為0.25 μg/kg(S/N>3)，定量限為0.50 μg/kg(S/N>10)。

1.5 來(lái)源分析

為證實(shí)氨基脲的來(lái)源，并分析氨基脲的含量是否與甲殼類(lèi)生物的生長(zhǎng)周期有關(guān)，本研究在嘉興某固定養(yǎng)殖塘內(nèi)養(yǎng)殖日本沼蝦，在不使用任何藥物養(yǎng)殖的前提下，從7月到12月，每月定期在該固定養(yǎng)殖塘內(nèi)抽樣：隨機(jī)捕獲10只日本沼蝦，分離其肌肉和外殼，并將肌肉和外殼分別混合勻漿，制得該月的肌肉樣本和外殼樣本，然后再測(cè)定樣本中的氨基脲含量。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析

數(shù)據(jù)整理匯總后，用Excel軟件和SAS軟件對(duì)相關(guān)參數(shù)進(jìn)行計(jì)算。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢出率和平均值

由表2可見(jiàn)，本次調(diào)查的4種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中，

所有日本沼蝦和羅氏沼蝦中都有檢出氨基脲。日本沼蝦中氨基脲含量的平均值為6.92 μg/kg，羅氏沼蝦中氨基脲含量的平均值為2.52 μg/kg，均超過(guò)現(xiàn)行氨基脲殘留限量(1.0 μg/kg)。51.7%凡納濱對(duì)蝦中有檢出氨基脲，氨基脲含量的平均值為0.780 μg/kg，低于殘留限量。80.0%中華絨螯蟹中有檢出氨基脲，氨基脲含量的平均值為0.597 μg/kg，也低于殘留限量。

2.2 檢出值分布規(guī)律

本實(shí)驗(yàn)對(duì)各品種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品在不同檢出值范圍中的樣本個(gè)數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并計(jì)算其占樣本總數(shù)的百分比。4種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中氨基脲檢出值的分布情況見(jiàn)圖1。

表2 不同品種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中的氨基脲含量

Tab. 2 The content of semicarbazide in different kinds of shellfish

樣品名稱(chēng)Samplename樣品批次數(shù)Samplesize氨基脲檢出值/(μg·kg-1)DetectionvalueofSEM均值(x±s)/(μg·kg-1)Averagevalue第5百分位數(shù)/(μg·kg-1)P5第50百分位數(shù)/(μg·kg-1)P50第95百分位數(shù)/(μg·kg-1)P95檢出率/%DetectionRate凡納濱對(duì)蝦60ND～6.360.780±1.1900.5602.8851.7羅氏沼蝦201.63～4.412.52±0.761.642.344.26100日本沼蝦202.97～9.246.92±1.933.157.809.00100中華絨螯蟹20ND～1.190.597±0.3500.6931.1680

注：ND表示檢出值小于0.5 μg/kg。

圖1 氨基脲檢出值分布情況Fig. 1 The distribution of the detection value of semicarbazide

由圖1可見(jiàn)，凡納濱對(duì)蝦中氨基脲的檢出值主要集中于0～1 μg/kg，其中未檢出29批次，檢出值在0.5～1 μg/kg的有11批次，共40批次，占樣本總數(shù)的66.7%。另外檢出值在1～3 μg/kg的有18批次，占樣本總數(shù)的30%。經(jīng)計(jì)算得95%置信區(qū)間為0.470～1.09 μg/kg。大部分凡納濱對(duì)蝦氨基脲檢出值能符合現(xiàn)行殘留限量。

羅氏沼蝦中氨基脲的檢出值主要集中于1～3 μg/kg，其中檢出值在1～2 μg/kg有4批次，檢出值在2～3 μg/kg有12批次，共16批次，占樣本總數(shù)的80%。另有4批次樣品檢出值在3～5 μg/kg之間，占樣本總數(shù)的20%。經(jīng)計(jì)算得95%置信區(qū)間為2.17～2.80 μg/kg。羅氏沼蝦中氨基脲的含量與現(xiàn)行殘留限量不符。

日本沼蝦中氨基脲的檢出值主要集中于7～9 μg/kg，共有12批次樣本，占樣本總數(shù)的60%。經(jīng)計(jì)算得95%置信區(qū)間為6.01～7.82 μg/kg。日本沼蝦中氨基脲的含量也與現(xiàn)行殘留限量不符。

中華絨螯蟹中氨基脲的檢出值主要集中于0～1 μg/kg，其中未檢出4批次，檢出值在0.5～1 μg/kg的有14批次，共18批次，占樣本總數(shù)的90%。經(jīng)計(jì)算得95%置信區(qū)間為0.430～0.760 μg/kg，這與彭婕等[10]對(duì)中華絨螯蟹肌肉中氨基脲的含量分析結(jié)果基本一致，說(shuō)明中華絨螯蟹中氨基脲的含量基本符合現(xiàn)行殘留限量。

2.3 氨基脲來(lái)源分析

在對(duì)不同生長(zhǎng)時(shí)期的日本沼蝦肌肉和甲殼中的氨基脲含量進(jìn)行測(cè)定后，進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，由表3可見(jiàn)，日本沼蝦蝦殼中氨基脲含量始終高于肌肉中的含量，可達(dá)到肌肉中含量的4.11～31.52倍，這與倪永付等[11]對(duì)微山湖小青蝦各部分氨基脲含量的測(cè)定結(jié)果較一致，證實(shí)了肌肉中的氨基脲確實(shí)主要源自蝦殼。但不同成長(zhǎng)期的日本沼蝦，蝦殼與肌肉中的氨基脲含量并無(wú)規(guī)律可循。彭婕等[10]通過(guò)對(duì)中華絨螯蟹不同組織中氨基脲殘留量的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)舊甲殼與新長(zhǎng)甲殼中氨基脲含量存在差異，考慮到甲殼類(lèi)水產(chǎn)品存在周期性換殼的生長(zhǎng)特征，本實(shí)驗(yàn)在取樣時(shí)間上存在欠缺，未結(jié)合日本沼蝦換殼期，故未能有效證明不同成長(zhǎng)期日本沼蝦蝦殼與肌肉中氨基脲含量的關(guān)聯(lián)。

表3 日本沼蝦蝦殼和肌肉中氨基脲的含量

Tab.3 The content of semicarbazide in shrimp shell and muscle ofMacrobrachiumnipponense

序號(hào)No.抽樣時(shí)間Samplingtime平均體長(zhǎng)/cmAveragtebodylength蝦殼中氨基脲含量/(μg·kg-1)ContentofSEMinshrimpshell肌肉中氨基脲含量/(μg·kg-1)ContentofSEMinmuscle比值Ratio17月23日3.63230.0±0.573.56±0.208.4328月23日4.25631.6±1.133.31±0.179.5539月23日7.11477.0±1.277.20±0.3810.7410月23日7.47840.4±0.859.82±0.414.11511月23日6.24650.5±0.852.28±0.2122.2612月23日7.34943.5±0.991.38±0.3031.5

此外，本實(shí)驗(yàn)將上述實(shí)驗(yàn)中取得的6份日本沼蝦肌肉用甲醇清洗后再測(cè)定其中氨基脲的含量，并與清洗前的氨基脲含量進(jìn)行比較。由表4可見(jiàn)，日本沼蝦的肌肉經(jīng)過(guò)甲醇清洗后，其氨基脲含量明顯降低，而一般情況下，氨基脲與蛋白質(zhì)會(huì)形成牢固的結(jié)合物，需衍生化才能將其與蛋白質(zhì)分離，這說(shuō)明除了與蛋白質(zhì)結(jié)合的“結(jié)合態(tài)”氨基脲外，肌肉中還存在部分“游離態(tài)”氨基脲，故推測(cè)“游離態(tài)”的氨基脲可能是在制樣過(guò)程中，肌肉與蝦殼分離不徹底而帶入的。而對(duì)于“結(jié)合態(tài)”的氨基脲，Robert等[12]曾有研究，發(fā)現(xiàn)蝦殼與肌肉之間存在一種分泌甲殼素的單細(xì)胞表皮層，而

表4 日本沼蝦肌肉經(jīng)甲醇清洗前后氨基脲的含量

Tab. 4 The content of semicarbazide in muscle before and after treatment

序號(hào)No.肌肉中氨基脲含量/(μg·kg-1)ContentofSEM清洗后Aftertreatment清洗前Beforetreatment比值/%Ratio12.33±0.273.56±0.1465.421.67±0.213.31±0.3050.434.38±0.317.20±0.3360.846.62±0.419.82±0.5467.451.26±0.132.28±0.1155.360.713±0.031.38±0.1851.7

與蝦殼結(jié)合的表層肌肉中氨基脲的含量比內(nèi)部肌肉高3倍以上，故推斷蝦肉中“結(jié)合態(tài)”的氨基脲可能來(lái)自于這層表皮層。

3 結(jié)論與討論

根據(jù)上述研究，羅氏沼蝦與日本沼蝦中本底氨基脲的含量，與現(xiàn)行的氨基脲殘留限量標(biāo)準(zhǔn)有明顯的沖突，如果漁政部門(mén)繼續(xù)按照現(xiàn)行殘留限量進(jìn)行判定，勢(shì)必會(huì)存在假陽(yáng)性的可能，這會(huì)對(duì)養(yǎng)殖戶的積極性和權(quán)益等產(chǎn)生影響。據(jù)了解，日本已經(jīng)不再對(duì)水產(chǎn)品中氨基脲的含量進(jìn)行評(píng)價(jià)，中國(guó)農(nóng)業(yè)部對(duì)于水產(chǎn)品苗種和無(wú)公害水產(chǎn)品中的氨基脲含量也不再做評(píng)價(jià)，而是僅作為調(diào)查。倘若對(duì)所有甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中的氨基脲含量不作評(píng)判，可能會(huì)導(dǎo)致呋喃西林藥物在甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中出現(xiàn)濫用的狀況。若想繼續(xù)科學(xué)地對(duì)甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中呋喃西林代謝物進(jìn)行監(jiān)控，可以設(shè)想有以下3種途徑：第一，掌握甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中內(nèi)源性氨基脲的產(chǎn)生途徑，區(qū)分內(nèi)源性氨基脲和藥源性氨基脲。周萍等[13]曾在對(duì)雄蜂蛹生長(zhǎng)后期，外殼變硬并有氨基脲檢出而推斷氨基脲可能源自甲殼素。但彭婕等[10]在對(duì)中華絨螯蟹蟹殼和甲殼素中氨基脲含量測(cè)定后認(rèn)為蟹殼中氨基脲的產(chǎn)生和甲殼素并沒(méi)有關(guān)聯(lián)?，F(xiàn)有的研究只能推測(cè)氨基脲和甲殼有關(guān)，至于氨基脲的生成途徑尚沒(méi)有明確的定論，故途徑一不可行。第二，通過(guò)追蹤呋喃西林原藥在動(dòng)物體內(nèi)代謝的其他代謝產(chǎn)物來(lái)判定是否用藥。王建[14]曾對(duì)甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中氨基脲進(jìn)行研究，提出通過(guò)追蹤呋喃西林其他代謝產(chǎn)物，如5-硝基-2-糠醛，來(lái)建立監(jiān)測(cè)呋喃西林的新方法，但未取得較好的成果?？梢?jiàn)途徑二尚不可行。第三，通過(guò)對(duì)甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中本底氨基脲的普查，根據(jù)不同品種修訂現(xiàn)有氨基脲殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。將各個(gè)檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)甲殼類(lèi)水產(chǎn)品本底氨基脲數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和匯總，進(jìn)一步分析后即可獲得不同品種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品本底氨基脲含量情況，這是目前最為可行的方案。

通過(guò)對(duì)4種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品本底氨基脲含量調(diào)查，4種甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中本底氨基脲含量存在較大差異，肌肉中氨基脲含量：日本沼蝦>羅氏沼蝦>凡納濱對(duì)蝦>河蟹(均為均值)，肌肉中氨基脲檢出率：日本沼蝦=羅氏沼蝦>河蟹>凡納濱對(duì)蝦。但由于樣本數(shù)量較少，尚不能提出合理的建議限量值。雖然目前氨基脲在甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中僅作為調(diào)查項(xiàng)目，但對(duì)于肌肉中氨基脲檢出值超過(guò)第95百分位(即P95，凡納濱對(duì)蝦為2.88 μg/kg，羅氏沼蝦4.26 μg/kg，日本沼蝦9.00 μg/kg，中華絨螯蟹1.16 μg/kg)的樣品，仍然存在用藥的可能性，漁政執(zhí)法部門(mén)應(yīng)予以重視。

此外，除了內(nèi)源性氨基脲是導(dǎo)致甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中氨基脲超過(guò)殘留限量的主要原因，一些外源性的氨基脲也同樣可能導(dǎo)致氨基脲假陽(yáng)性。袁濤等[15]發(fā)現(xiàn)次氯酸鈉消毒劑使用后會(huì)殘留在肉雞皮膚中造成樣品氨基脲陽(yáng)性；楊曦等[16]發(fā)現(xiàn)用消毒水(主要成分為次氯酸鈉) 浸泡羅非魚(yú)肉片、蝦仁能導(dǎo)致氨基脲檢出；魏云計(jì)等[17]實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)在皮革加工過(guò)程用于洗皮的雙氧水能導(dǎo)致皮制品中氨基脲檢出，可見(jiàn)具有氧化性的次氯酸鈉、雙氧水在接觸動(dòng)物源性產(chǎn)品時(shí)能產(chǎn)生某種反應(yīng)夠產(chǎn)生氨基脲，具體途徑有待研究。而李金強(qiáng)等[18]研究發(fā)現(xiàn)偶氮二甲酰胺(ADC)在高溫?zé)峤鈺r(shí)能夠產(chǎn)生氨基脲，其主要途徑為ADC與硫醇反應(yīng)生成聯(lián)二脲，聯(lián)二脲則最終裂解為氨基脲[19]。而ADC通常被面粉改良劑，當(dāng)甲殼類(lèi)水產(chǎn)品經(jīng)面粉包裹加熱后，會(huì)導(dǎo)致氨基脲含量提高。因此，甲殼類(lèi)水產(chǎn)品在生產(chǎn)和運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)當(dāng)避免與上述物質(zhì)接觸，以防其遭到外源性氨基脲污染。另外，考慮到甲殼類(lèi)水產(chǎn)品其甲殼中可能存在的“游離態(tài)”氨基脲，故在甲殼類(lèi)水產(chǎn)品的樣品制備時(shí)應(yīng)避免將碎殼混入肌肉中，從而確保檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)和準(zhǔn)確性。

本次本底調(diào)查證實(shí)了甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中內(nèi)源性氨基脲的存在，闡釋了部分甲殼類(lèi)水產(chǎn)品中氨基脲超過(guò)殘留限量的可能原因，但由于樣本數(shù)量的局限性，尚不能提出合理的建議限量值。限量標(biāo)準(zhǔn)的修訂需要大量的數(shù)據(jù)支撐，本研究將進(jìn)一步改進(jìn)氨基脲本底調(diào)查方案，開(kāi)展氨基脲來(lái)源分析研究，并希望更多檢測(cè)機(jī)構(gòu)能加入其中，提供更多有效數(shù)據(jù)，這對(duì)于水產(chǎn)行業(yè)的發(fā)展具有重要意義。政府相關(guān)部門(mén)也應(yīng)當(dāng)推進(jìn)高效、低毒的替代藥物的研發(fā)，從根源上杜絕呋喃西林藥物的濫用。

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Background value survey and source analysis of semicarbazide in shellfish

WANG Dingnan1*, ZHOU Fan1, LI Shiyan1, XU Weiguo2, WANG Yang1

(1. Zhejiang Fisheries Technical Extension Station, Hangzhou 310023, China; 2. Jiaxing Fisheries Technical Extension Station, Jiaxing 314050, China)

The aim of this study is to provide the basis for scientific supervision of quality and safety of aquatic products through the survey and source analysis of semicarbazide background value in shellfish. The content of semicarbazide background value in shellfish were determined by using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). Among 4 kinds of shellfish, the detection rates ofMacrobrachiumnipponenseandMacrobrachiumrosenbergiidemanreached 100%. The average detection value of semicarbazide inMacrobrachiumnipponenseandMacrobrachiumrosenbergiidemanwere 6.92 and 2.52 μg/kg, respectively, both of which exceeded the current residue limits. The contents of semicarbazide inPenaeusvannameiandEriocheirsinensiswere relatively lower. The result of this survey provides data support for formulating the residue limits of semicarbazide in shellfish. [Chinese Fishery Quality and Standards, 2016, 6(6):6-11]

shellfish; semicarbazide; background value survey; source analysis;nitrofurazone;macrobrachiumnipponense;macrobrachiumrosenbergiideman

WANG Dingnan，skylineamd2012@163.com

2016-04-30；接收日期：2016-06-17

浙江省水產(chǎn)品質(zhì)量安全技術(shù)支撐團(tuán)隊(duì)(QS20160132)

王鼎南(1989-)，男，學(xué)士，助理工程師，研究方向?yàn)樗a(chǎn)品中獸藥殘留檢測(cè)，skylineamd2012@163.com

S932.5

A

2095-1833(2016)05-0006-06