摘要：以沒食子酸為對照品，采用Folin-ciocalteu比色法測定青海3種特色植物沙棘（Hippohae rhamnoides）、青海云杉（Picea crassifolia）、祁連圓柏（Sabina przewalskii）的根、莖、葉總多酚，并分析同一植物不同部位及不同植物同一部位的總多酚。結(jié)果表明，祁連圓柏葉總多酚含量最高；同一植物不同部位總多酚含量均差異顯著；不同植物同一部位除沙棘與青海云杉葉總多酚差異不顯著外，其他均差異顯著。

關(guān)鍵詞：沙棘（Hippohae rhamnoides）；青海云杉（Picea crassifolia）；祁連圓柏（Sabina przewalskii）；總多酚；Folin-cicalteu比色法

中圖分類號：Q946.82；O657.32 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）11-2879-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.042

植物多酚因含有多個(gè)酚基團(tuán)而得名，可作為一種天然抗氧化劑，是植物體內(nèi)最重要的次生代謝產(chǎn)物之一。植物體內(nèi)多酚類物質(zhì)是受生物（如病蟲害、雜草等）和非生物脅迫（如紫外線、高光、低溫、干旱等）誘導(dǎo)產(chǎn)生的，用以適應(yīng)外界逆境環(huán)境[1]，存在于植物的根、莖、葉、花、果實(shí)等部位。多酚類物質(zhì)可用于防治心腦血管疾病、抗氧化、抗癌、抗病毒、抑菌、抗紫外線等方面[2-6]。

青海省屬于高原大陸性氣候，紫外線較強(qiáng)，常年低溫少雨，冬季嚴(yán)寒而干燥，就在這樣惡劣的環(huán)境里也能生長沙棘（Hippohae rhamnoides）這種全身是寶的植物。關(guān)于沙棘體內(nèi)次生代謝產(chǎn)物總黃酮的研究比較多[7-10]，也有關(guān)于沙棘葉總多酚的報(bào)道[11，12]，鮮見沙棘根莖葉總多酚含量比較的研究。除了沙棘，青海省還是青海云杉（Picea crassifolia）和祁連圓柏（Sabina przewalskii）這兩種中國特有樹種的主要分布區(qū)[13]。關(guān)于青海云杉的研究主要在青海云杉林的群落結(jié)構(gòu)方面[14，15]，對于祁連圓柏則側(cè)重于其葉中揮發(fā)性成分的分析[16、17]，鮮見涉及這3種植物根莖葉總多酚含量的比較研究。本研究以沙棘、青海云杉、祁連圓柏3種植物為材料，采用Folin-cicalteu法測定總多酚含量，并對同一植物不同部位及不同植物同一部位的總多酚進(jìn)行分析，為合理開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 植物樣品

3種試驗(yàn)材料均于2014年10月中旬采集自青海省大通縣天然林（海拔283 8 m，101°37′28.7″E， 36°56′18.3″N）。成年植株的莖葉采集于主干離地面1.5 m處，根從靠近地表處刨出，洗凈分裝，帶回實(shí)驗(yàn)室分析。

1.2 試劑及儀器

主要試劑：福林試劑，20% Na2CO3溶液，0.1 mg/mL沒食子酸，2 g/L單寧酸溶液，8.0 g/L氨（NH3）溶液，3.5 g/L檸檬酸鐵銨溶液（鐵含量17%～20%），75%二甲基甲酰胺溶液。

主要儀器：BS110S型電子天平，CS101型電熱鼓風(fēng)干燥箱，粉碎機(jī)，KQ-400DB型超聲波清洗器，HYB2型回旋振蕩器，離心機(jī)，往復(fù)式機(jī)械攪拌器，722分光光度計(jì)，721分光光度計(jì)。

1.3 測定分析方法

植物總多酚的測定采用Folin-Ciocalteu比色法，具體步驟和分析參照文獻(xiàn)[18]的方法進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

以沒食子酸濃度c（單位為mg/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)建立校準(zhǔn)曲線（圖1），回歸方程為A=127.57c-0.006 3，相關(guān)系數(shù)R2=0.999，在0～0.005 mg/mL范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

2.2 精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、回收率試驗(yàn)結(jié)果

穩(wěn)定性試驗(yàn)顯示，吸光度分別為0.162、0.160、0.159、0.156、0.157、0.155，RSD為0.01%，表明10 h 內(nèi)溶液穩(wěn)定性好。精密度試驗(yàn)結(jié)果顯示，吸光度分別為0.091、0.090、0.091、0.091、0.090、0.090，RSD為0.02%。重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果顯示，吸光度為0.176、0.165、0.201、0.184、0.161、0.197、0.186、0.174、0.167、0.193，RSD為0.13%，具有良好的重現(xiàn)性。加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（表1）顯示，回收率為99.31%～101.59%，平均加樣回收率為100.54%，表明該方法準(zhǔn)確度高。

2.3 同一植物不同部位總多酚含量比較

沙棘不同部位總多酚含量從高到低依次為根、葉、莖，青海云杉不同部位總多酚含量從高到低依次為葉、根、莖，祁連圓柏不同部位總多酚含量從高到低依次為葉、莖、根（表2）；沙棘、青海云杉、祁連圓柏3種植物的根莖葉總多酚含量差異顯著（P<0.05）。

2.4 不同植物同一部位總多酚含量比較

不同植物同一部位總多酚含量有所不同（表2）。根總多酚含量為沙棘>青海云杉>祁連圓柏，三者之間有顯著差異（P<0.05）；莖總多酚含量為祁連圓柏>沙棘>青海云杉，三者之間差異顯著（P<0.05）；葉總多酚含量依次為祁連圓柏>沙棘>青海云杉，其中沙棘與青海云杉相比差異不顯著（P>0.05），祁連圓柏與沙棘、青海云杉比較均存在顯著差異（P<0.05）。

3 小結(jié)與討論

總多酚含量祁連圓柏葉最高，其次是沙棘根、沙棘葉、青海云杉葉，含量最少的是青海云杉莖?？偠喾雍可臣哂谌~，原因可能是沙棘為落葉植物，沙棘進(jìn)入深秋以后，葉子即將掉落，體內(nèi)多酚從葉中向根和莖轉(zhuǎn)移，以提高其根和莖的抗寒性[1]。祁連圓柏和青海云杉均為葉部總多酚含量最高，這可能與它們是常綠植物有關(guān)，在葉中維持較高的多酚含量，有助于提高葉片的抗寒性而順利越冬。

沙棘、青海云杉、祁連圓柏3種植物不同部位的總多酚含量均存在顯著差異，這與對木衣屬植物[19]、石榴[20]等植物中多酚的研究結(jié)論相似。其中，青海云杉莖的總多酚含量最低，為（8.71±0.63）%，但是也高于黃香楝樹皮（58.59 mg/g）[21]、竹葉（6.059 mg/g）[22]、萵苣（32.03 mg/g）[23]等植物中的多酚。3種植物含有豐富的多酚，而且青海云杉和祁連圓柏這2種植物的葉片一年四季均可采集，具有資源量大的特點(diǎn)，為提取多酚類物質(zhì)拓展了新來源。本研究同時(shí)也為沙棘、青海云杉、祁連圓柏3種植物的進(jìn)一步開發(fā)與利用提供參考。

參考文獻(xiàn)：

[1] 徐國前，張振文，郭安鵲，等.植物多酚抗逆生態(tài)作用研究進(jìn)展[J].西北植物學(xué)報(bào)，2011，31（2）：423-430.

[2] VITA J A. Polyphenols and cardiovascular disease： Effects on endothelial and platelet function[J]. The American journal of clinical nutrition，2005，81（1）：292-297.

[3] YANG C S，WANG X. Green tea and cancer prevention[J]. Nutrition and Cancer，2010，62（7）：931-937.

[4] KOLAYLI S，■AHIN H，ULUSOY E， et al. Phenolic composition and antioxidant capacities of Helichrysum plicatum[J]. Hacettepe Journal of Biology and Chemistry，2010，38（4）：269-276.

[5] 馬 力，陳永忠.植物多酚的生物活性研究進(jìn)展[J].農(nóng)業(yè)機(jī)械，2012（7）：119-121.

[6] 周冬虎，申 欣，馮 晴.綠茶多酚抗紫外線作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2013，40（16）：2991-2995.

[7] 謝久祥，林恭華，都玉蓉，等.青海沙棘不同部位總黃酮含量比較研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2012（24）：45-48.

[8] 趙 偉，陳 鑫，劉紅南，等.沙棘葉黃酮對肉雞生長性能及胴體品質(zhì)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2012，24（1）：117-123.

[9] 秦 莉，程文杰，王軍揚(yáng)，等.四種沙棘枝葉總黃酮含量的比較研究[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào)，2013，34（2）：45-48.

[10] 侯 霄，萬 強(qiáng)，付永峰，等.山西各類沙棘葉總黃酮的含量測定[J].國際沙棘研究與開發(fā)，2014，12（1）：6-9.

[11] 敬思群.沙棘葉多酚在蘋果汁保鮮中的應(yīng)用[J].食品科學(xué)，2010，31（18）：147-152.

[12] 李 峰，劉 浩，鐘 媛，等.沙棘葉中總多酚和總黃酮的提取工藝[J].食品與機(jī)械，2012，28（4）：128-130.

[13] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志 第七卷 裸子植物門[M].北京：科學(xué)出版社，1978.

[14] 趙維俊，劉賢德，金 銘，等.祁連山青海云杉林群落結(jié)構(gòu)特征分析[J].干旱區(qū)研究，2012，29（4）：615-620.

[15] 李效雄，劉賢德，趙維俊.祁連山青海云杉林動態(tài)監(jiān)測樣地群落特征[J].中國沙漠，2013，33（1）：94-100.

[16] 王 瑋，汪 濤，王索安.祁連圓柏葉乙醇提取物揮發(fā)性成分GC-MS分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2013，51（1）：60-61.

[17] 劉喜梅，李海朝.不同海拔高度祁連圓柏葉中揮發(fā)性成分的比較[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，36（1）：126-131.

[18] 謝久祥，林恭華，都玉蓉，等.油松不同部位多酚與單寧的含量比較研究[J].植物研究，2012，32（2）：243-247.

[19] 劉海霞，劉 剛，張曉喻，等.栘[木衣]屬植物多酚的含量測定與比較[J].食品科學(xué)，2014，35（24）：295-300.

[20] 胡淳淳，邵建柱，徐繼忠，等.不同石榴品種及器官多酚含量的比較研究[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，33（2）：17-20.

[21] 江 珊，孫培冬.黃香楝樹皮提取物的多酚含量及抗氧化研究[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2014，26（4）：537-540.

[22] 喻 謹(jǐn)，岳永德，湯 鋒，等.Folin-Ciocalteu法測定竹葉中總多酚含量[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2013，30（6）：2752-2758.

[23] 尚紅梅，陳誠，劉 祥，等.Folin-Ciocalteu比色法測定菊苣中多酚的含量[J].草業(yè)科學(xué)，2013，30（9）：1445-1448.