朱 纓，談如藍(lán)，吳芝園，俞迪佳

（蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 蘇州 215009）

山東產(chǎn)蛇床子揮發(fā)油化學(xué)成分研究

朱 纓，談如藍(lán)，吳芝園，俞迪佳

（蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 蘇州 215009）

目的 采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）法分析山東產(chǎn)地蛇床子果實(shí)揮發(fā)油的化學(xué)成分。方法 采用水蒸氣蒸餾法從蛇床子果實(shí)中提取揮發(fā)油，運(yùn)用GC-MS法對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行分析鑒定，歸一法測(cè)定其相對(duì)百分含量。結(jié)果鑒定了39種主要成分，相對(duì)含量高的有檸檬油烯(18．90%)、 -松萜(16．40%)、醋酸冰片酯(11．00%)、莰烯(7．44%)等。結(jié)論 該法分離效果好、準(zhǔn)確、快速，適用于中藥蛇床子的藥材質(zhì)量監(jiān)控。

蛇床子；山東；揮發(fā)油；氣相色譜-質(zhì)譜法

蛇床子為傘形科植物蛇床 Cnidium monnieri（L．）Cuss．的干燥成熟果實(shí)，別名野胡蘿卜子、蛇米、蛇粟，出自《神農(nóng)本草經(jīng)》，夏秋二季果實(shí)成熟時(shí)采收[1]，生于原野、田間、路旁、溪溝邊等潮濕處，主產(chǎn)于河北保定、邯鄲、滄縣，山東，浙江金華、蘭溪，江蘇揚(yáng)州、鎮(zhèn)江、鹽城、徐州，四川溫江、金堂、崇慶等地。蛇床子辛、苦，溫，有小毒，功能燥濕、祛風(fēng)、殺蟲止癢、溫腎壯陽，可用于腎虛陽痿、濕痹腰痛、宮冷不孕、寒濕帶下，外治婦人陰癢、滴蟲性陰道炎、外陰濕疹[2]。其藥理作用有抗癌、抗滴蟲、雌激素樣作用，用于抗菌和濕疹治療等[3-4]。蛇床子揮發(fā)油成分復(fù)雜，受產(chǎn)地、氣候和生態(tài)環(huán)境等的影響，中藥材中主要成分差異較大，僅針對(duì)其中某一個(gè)成分進(jìn)行定性定量分析，并不能有效地控制中藥材或中成藥的質(zhì)量。山東產(chǎn)蛇床子揮發(fā)油成分的分析目前尚未見報(bào)道。為此，筆者采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）法研究蛇床子中揮發(fā)性成分鑒定了其中39種主要成分，可作為其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，為中藥材規(guī)范化種植提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

6890GC-5973MS型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（安捷倫科技公司）。蛇床子產(chǎn)于山東，經(jīng)本院張立光副教授鑒定為傘形科植物蛇床 Cnidium monnieri（L．）Cuss．的干燥成熟果實(shí)；乙醚為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2．1 性狀鑒定

性狀為雙懸果，呈橢圓形，長(zhǎng)2～2．5 mm，寬1．2～1．6 mm，表面灰黃色至黃褐色，光滑無毛，有時(shí)頂端有彎曲而叉開的花柱殘基，基部常有細(xì)長(zhǎng)果柄。分果廣橢圓形，果棱5條，均顯著突起成薄翅狀，合生面平坦，中央略內(nèi)凹，通常可見2分裂直達(dá)基部的絲狀心皮柄。果皮松脆，揉搓后易脫落，露出灰棕色種子。氣特異芳香，味微辣，嚼之有辛涼感，以果粒飽滿、灰黃色、香氣濃郁、無雜質(zhì)灰屑者為佳[5]。

2．2 蛇床子揮發(fā)油的提取

將蛇床子粉碎后，用揮發(fā)油提取器按《中國藥典（一部）》水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，經(jīng)無水硫酸鈉干燥后得揮發(fā)油，具有特殊濃郁香味。揮發(fā)油為淡黃色透明油狀物，收油率為1．21%。

2．3 色譜條件

HP-5MS毛細(xì)管柱（30 m×0．25 mm，0．25 μm），EI離子源70 eV，m／z 50～550，燈絲電壓1 689 V；離子源溫度240℃；四極桿溫度280℃，接口溫度240℃；質(zhì)譜延遲時(shí)間2 min。柱溫：40℃(保持2 min)→150℃(保持2 min)，10℃／min，150℃→250℃(保持5min)，15℃／min。進(jìn)樣口溫度：250℃，進(jìn)樣量：1 μL，分流比：10∶1，流速：1．0 mL／min。

2．4 結(jié)果

無水乙醚溶解揮發(fā)油，按擬訂GC-MS條件對(duì)蛇床子揮發(fā)油進(jìn)行分析，總離子流圖見圖1。共分離出95個(gè)峰，采用氣相色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，經(jīng)過質(zhì)譜計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索，人工譜圖解析[6-8]，從基峰、相對(duì)度等方面進(jìn)行直觀比較。綜合各項(xiàng)分析，確定出蛇床子揮發(fā)油中的39種主要成分，以面積歸一法測(cè)得揮發(fā)油各組分相對(duì)百分含量。結(jié)果見表1[9-11]。

圖1 蛇床子揮發(fā)油總離子流圖

3 討論

3．1 揮發(fā)油提取

采用水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，綠色環(huán)保、無毒、簡(jiǎn)便，是《中國藥典》常用揮發(fā)油提取方法。通過對(duì)色譜圖全貌的考察，選用的測(cè)試條件較為理想。對(duì)主要含量高的特征峰進(jìn)行鑒定，對(duì)于判斷蛇床子的質(zhì)量有參考價(jià)值。

3．2 色譜條件

高靈敏度的毛細(xì)管氣相色譜柱較填充氣相色譜柱有優(yōu)勢(shì)，分辨能力高，分析速度快，因此選擇毛細(xì)管柱。采用等溫梯度洗脫試分析速度慢，且分離不好，所以采用程序升溫，經(jīng)比較升溫速度、終止溫度的維持時(shí)間、階梯程序，最后選定2．3項(xiàng)下條件，分離、重復(fù)性均較好[12]。

3．3 揮發(fā)油成分分析

在蛇床子揮發(fā)油中，相對(duì)含量高的有檸檬油烯（limonene，18．90%）、α-松萜（alpha-pinene，16．40%)、醋酸冰片酯（borneyl acetate，11%)、莰烯（camphene，7．44%)、喔斯腦（osthol，5．24% ）、β-松萜（beta-pinene，3．43%）、L-龍腦（L-borneol，1．58%）、十六醇酸（hexadecanoic acid，1．05%）等。另外，在蛇床子揮發(fā)油中，酯類、醇酸類、倍半萜烯類、萜醇類較多，少量腦、醛、酸類化合物。通過這些成分的鑒定，是否能夠完全揭示蛇床子揮發(fā)性成分的特征還有待進(jìn)一步研究，仍需要考慮產(chǎn)地、栽培條件、采收加工、貯藏等多種因素的影響。

表1 蛇床子揮發(fā)油主要化學(xué)成分含量

3．4 研究?jī)r(jià)值

蛇床子在我國各個(gè)地區(qū)均有生長(zhǎng)分布，自然資源十分豐富，產(chǎn)地多，來源廣泛。本試驗(yàn)中對(duì)山東產(chǎn)地蛇床子揮發(fā)油進(jìn)行研究，采用GC-MS研究蛇床子中揮發(fā)性成分，建立蛇床子中揮發(fā)性成分的GC-MS指紋圖譜，鑒定主要成分，確定其分子式和分子量，并測(cè)定揮發(fā)油各組分相對(duì)百分含量，為該蛇床子今后的活性研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)，為山東產(chǎn)地蛇床子真?zhèn)舞b別和質(zhì)量監(jiān)控提供依據(jù)。

3．5 展望

蛇床子有抗誘變、抗腫瘤、抗心律失常、止癢等作用。止癢的有效組分為醇提物及揮發(fā)油，其作用機(jī)制與拮抗組胺的釋放和抑制肥大細(xì)胞脫顆粒作用有關(guān)[13]。蛇床子本身抗腫瘤效價(jià)明顯，對(duì)腫瘤有確切的療效，在腫瘤的預(yù)防及腫瘤治療中配合放射與化學(xué)治療應(yīng)用，對(duì)于克服腫瘤的多藥耐藥及減毒增效作用都有積極的意義[14-15]。今后應(yīng)加強(qiáng)對(duì)蛇床子成分中有效單體的抗腫瘤效價(jià)研究，以及抗腫瘤機(jī)制的研究。蛇床子將成為一味抗腫瘤的中草藥，有效單體成分的分離和研究將推動(dòng)抗腫瘤研究的深入和發(fā)展，使其更有效地服務(wù)于臨床。

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Studies of Chemical Constituents of the Volatile Oil of Cnidii Fructus in Shandong

Zhu Ying,Tan Rulan,Wu Zhiyuan,Yu Dijia
(Suzhou Health College,Suzhou,Jiangsu,China 215009)

Objective To analyze the chemical constituents of the volatile oil from Cnidii Fructus in Shandong by GC-MS．M ethods The volatile oil was extracted from Cnidii Fructus by steam distillation．The volatile components were identified by GC-MS method and the relative component percentage of each component was determined by GC area normalization method．Results 39 major components were identified．High relative content of chemical components were as follows:limonene(18．90%),alpha-pinene(16．40%),borneyl acetate(11．00%),camphene(7．44%),etc．Conclusion This method has good separation effect,is accurate and fast,and can be used as the quality monitoring for Cnidii Fructus．

Cnidium monnieri;Shandong;volatile oil;GC-MS

R284．1；R282．71

A

1006－4931(2016)11－0031－04

朱纓（1971-），女，江蘇蘇州人，大學(xué)本科，教授，研究方向?yàn)橹兴庤b定和中藥化學(xué)等，（電子信箱）tyr200008＠126．com。

2016－01－14；

2016－02－04)