易路遙 熊蔚#

（1江西省藥品檢驗(yàn)檢測研究院 南昌 330029；2江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心 南昌 330029）

●中西藥苑●

高效液相色譜法測定馬來酸多潘立酮片的含量

易路遙1,2熊蔚1,2#

（1江西省藥品檢驗(yàn)檢測研究院 南昌 330029；2江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心 南昌 330029）

目的：建立了高效液相色譜法測定馬來酸多潘立酮片含量的方法。方法：使用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，流動相為甲醇-0.5%乙酸銨（55﹕45），檢測波長為285 nm，流速1 ml/min，柱溫30℃。結(jié)果：馬來酸多潘立酮在0.129 4～5.176 μg呈良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r2為0.999 99；加標(biāo)回收率98.21%～101.73%。結(jié)論：本法準(zhǔn)確、可靠，可用于馬來酸多潘立酮片的質(zhì)量控制。

馬來酸多潘立酮片；含量測定；高效液相色譜法

馬來酸多潘立酮化學(xué)名為5-氯-1-[1-[3-(2-氧代-1,3-二氫苯并咪唑-1-基)丙基]-4-哌啶基]-1,3-二氫苯并咪唑-2-酮馬來酸鹽。馬來酸多潘立酮片是外周多巴胺受體拮抗劑，可促進(jìn)上胃腸道的蠕動和張力恢復(fù)正常，促進(jìn)胃排空，增強(qiáng)胃竇和十二指腸運(yùn)動，協(xié)調(diào)幽門的收縮，同時也能增強(qiáng)食道的蠕動和食道下端括約肌的張力。筆者承擔(dān)了中國食品藥品檢定研究院委托的該品種標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)正工作，借標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)正之機(jī)，對含量測定的方法進(jìn)一步提高。馬來酸多潘立酮片有國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）YBH24812005標(biāo)準(zhǔn)。美國藥典、日本藥局方和歐洲藥典均未收載馬來酸多潘立酮片等其它劑型，英國藥典和歐洲藥典收載多潘立酮和馬來酸多潘立酮原料，其中英國藥典（2013年版）收載了多潘立酮片（以馬來酸多潘立酮為原料）的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，YBH24812005標(biāo)準(zhǔn)針對馬來酸多潘立酮片的含量測定是紫外-可見分光光度對照品法，而英國藥典采用高效液相色譜法。考慮到紫外光譜法的專屬性不如HPLC，實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)該藥品的含量測定受到溶劑以及輔料等若干因素影響，故本文參考《中華人民共和國藥典》[1]“高效液相色譜法”及英國藥典2013年版附錄[2]建立了馬來酸多潘立酮片含量測定的高效液相色譜法。該方法簡單快速、準(zhǔn)確可靠、專屬性。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑LC2010高效液相色譜儀（日本島津公司），AE163電子天平（瑞士Mettler公司），BP211D電子天平（德國satorius公司）。馬來酸多潘立酮對照品（中檢院，批號100697-200401），馬來酸多潘立酮片（南京長奧制藥有限公司，批號100706、100607、081202、100404、100307），甲醇為色譜純，鹽酸、乙酸銨試劑均為分析純，水為自制高純水。

1.2 色譜條件色譜柱：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）為流動相；檢測波長為285 nm；流速1 ml/min；柱溫30℃。理論板數(shù)按多潘立酮峰計(jì)算不低于3 000。

1.3 試驗(yàn)方法供試品溶液：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于多潘立酮10 mg），置100 ml量瓶中，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）超聲15 min使溶解，冷卻，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）至刻度，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；對照品溶液：取105℃干燥至恒重的馬來酸多潘立酮對照品約12.72 mg，置100 ml量瓶中，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）超聲溶解，冷卻，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）稀釋至刻度，作為對照品溶液。測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性試驗(yàn)精密稱取馬來酸多潘立酮對照品12.94 mg，置100 ml瓶中，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別量取1、2、5、10、20、40 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：Y=1 667 740X-40 470，相關(guān)系數(shù)r2=0.999 99。同時，對照品溶液和供試品溶液的測定色譜圖分別見圖1和圖2。

圖1 對照品溶液圖譜

圖2 供試品溶液圖譜

2.2 精密度試驗(yàn)取[線性試驗(yàn)]考察項(xiàng)下的馬來酸多潘立酮對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果RSD（%）為0.06%，精密度試驗(yàn)結(jié)果良好。

2.3 重現(xiàn)性試驗(yàn)取樣品（批號100706），按試驗(yàn)方法中供試品溶液配制，平行配制5份，分別進(jìn)樣，測定，結(jié)果5份供試品測定結(jié)果平均標(biāo)示含量為100.8%，RSD（%）為0.1%，試樣方法重現(xiàn)性良好。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)取樣品（批號100706），按試驗(yàn)方法中供試品溶液配制，分別在0、2、4、6、8、10、12 h進(jìn)樣，7個時間點(diǎn)的測定結(jié)果RSD（%）為0.11%，試驗(yàn)方法所得供試品溶液在12 h內(nèi)均較穩(wěn)定。

2.5 回收率試驗(yàn)取已知含量的樣品（批號100706）9份，分別加入不同量的對照品溶液，按試驗(yàn)方法中供試品溶液配制，進(jìn)樣，測定結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.6 討論

2.6.1 檢測波長的選擇考察了馬來酸多潘立酮對照品在三種溶液項(xiàng)下的紫外最大吸收值：取馬來酸多潘立酮對照品適量分別用甲醇、甲醇-0.5%乙酸銨（30∶70）、甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）三種溶液溶解，在200～400 nm處掃描，結(jié)果表現(xiàn)均在285 nm處有最大吸收。

2.6.2 流動相的選擇英國藥典與國內(nèi)原料標(biāo)準(zhǔn)均采用甲醇-0.5%乙酸銨流動相系統(tǒng)，在此基礎(chǔ)上調(diào)整流動相比例，以取得合適的保留時間、對稱因子、理論板數(shù)，分別考察了馬來酸多潘立酮樣品在二種流動相下的峰形情況：流動相一：0→10 min，甲醇∶0.5%乙酸銨=（30∶70）→（100∶0）；10→12 min，保持甲醇100%。流動相二：甲醇∶0.5%乙酸銨=（55∶45）。在保證保留時間一致的情況下，主要以峰面積、對稱因子、理論塔板數(shù)為考察指標(biāo)，結(jié)果表明甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）峰形較好，保留時間合適，選用了甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）為流動相。

2.6.3 樣品提取溶劑的選擇分別考察了三種提取溶劑在相同的超聲提取情況下的提取效果，取研細(xì)后本品約0.1 g，精密稱定，分別加入純甲醇、甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）、0.002 mol/L和鹽酸∶甲醇（1∶1）三種溶劑，結(jié)果見圖3。根據(jù)圖中結(jié)果可見，三種溶劑效果基本一致，由于標(biāo)準(zhǔn)中含量均勻度擬修訂采用同樣的方法，而該薄膜衣片在純甲醇中難以崩解，故選擇英國藥典0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）做為提取溶劑。

圖3 不同溶劑的提取效果

2.6.4 兩種方法測定結(jié)果比較高效液相法：按試驗(yàn)方法中供試品溶液配制。紫外光譜法：供試品溶液的制備：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于多潘立酮50 mg），置100 ml量瓶中，加40 ml甲醇，超聲處理10 min，再振搖10 min使馬來酸多潘立酮溶解，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，用0.45 μm濾膜濾過，取續(xù)濾液2 ml置50 ml量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。對照品溶液的制備：取105℃干燥至恒重的馬來酸多潘立酮對照品約12.72 mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸適量，超聲溶解，冷卻，加0.1 mol/L鹽酸稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml，置25 ml量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸稀釋至刻度，搖勻，即得。測定法：取上述對照品溶液與供試品溶液，照分光光度法（中國藥典二部附錄ⅣA），在284 nm波長處分別測定吸收度，計(jì)算，即得。兩種方法試驗(yàn)測定結(jié)果見表2。擬建立的高效液相新方法與原紫外光譜方法結(jié)果無顯著性差異。

表2 兩種含量測定方法試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

本文建立了高效液相色譜法測定馬來酸多潘立酮片含量的方法，該方法采用甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）作為流動相，0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）超聲提取來酸多潘立酮，經(jīng)十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱分離，在檢測波長為285 nm條件下測定，其線性范圍、相關(guān)系數(shù)、方法精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性及回收率等指標(biāo)均符合分析檢測的要求，并且操作方便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，與原紫外測定方法測定結(jié)果無明顯差異，且專屬性及先進(jìn)性均優(yōu)于原方法，適用性更廣，是標(biāo)準(zhǔn)提高改進(jìn)的理想方法。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(四部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015.512

[2]British Pharmacopoeia Commission.英國藥典[S].British:TSO(The Stationery Office),2013.附錄ⅢB,ⅧL

High Performance Liquid Chromatography Method for Determining the Content of Domperidone Maleate Tablets

YI Lu-yao1,2,Xiong Wei1,2#

(1Jiangxi Institute of Drug Control,Nanchang330029;2Jiangxi Drug and Medical Devices Quality Engineering Center,Nanchang330029)

Objective:To establish a method to determinate the content of domperidone maleate tablets by high performance liquid chromatography(HPLC).Methods:Using C18 column,the mobile phase was methanol-0.5%ammonium acetate(55:45),the detection wavelength was 285 nm,the flow rate was 1.0 ml/min,the temperature of column was set at 30℃.Results:Domperidone maleate in 0.129 4～5.176 μg showed a good linear relationship,the correlation coefficient r2was 0.999 99,the rate of recovery was 98.21%～101.73%of standard addition.Conclusion:This method is accurate and reliable,can be used for the quality control of domperidone maleate tablets.

Domperidone maleate tablets;Determination of content;HPLC

R927.2

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2016.10.044

2016-09-16）

#通訊作者：熊蔚，E-mail：1513476937@qq.com