易路遙 熊蔚#

（1江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院 南昌 330029；2江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心 南昌 330029）

●中西藥苑●

高效液相色譜法測(cè)定馬來(lái)酸多潘立酮片的含量

易路遙1,2熊蔚1,2#

（1江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院 南昌 330029；2江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心 南昌 330029）

目的：建立了高效液相色譜法測(cè)定馬來(lái)酸多潘立酮片含量的方法。方法：使用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-0.5%乙酸銨（55﹕45），檢測(cè)波長(zhǎng)為285 nm，流速1 ml/min，柱溫30℃。結(jié)果：馬來(lái)酸多潘立酮在0.129 4～5.176 μg呈良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r2為0.999 99；加標(biāo)回收率98.21%～101.73%。結(jié)論：本法準(zhǔn)確、可靠，可用于馬來(lái)酸多潘立酮片的質(zhì)量控制。

馬來(lái)酸多潘立酮片；含量測(cè)定；高效液相色譜法

馬來(lái)酸多潘立酮化學(xué)名為5-氯-1-[1-[3-(2-氧代-1,3-二氫苯并咪唑-1-基)丙基]-4-哌啶基]-1,3-二氫苯并咪唑-2-酮馬來(lái)酸鹽。馬來(lái)酸多潘立酮片是外周多巴胺受體拮抗劑，可促進(jìn)上胃腸道的蠕動(dòng)和張力恢復(fù)正常，促進(jìn)胃排空，增強(qiáng)胃竇和十二指腸運(yùn)動(dòng)，協(xié)調(diào)幽門的收縮，同時(shí)也能增強(qiáng)食道的蠕動(dòng)和食道下端括約肌的張力。筆者承擔(dān)了中國(guó)食品藥品檢定研究院委托的該品種標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)正工作，借標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)正之機(jī)，對(duì)含量測(cè)定的方法進(jìn)一步提高。馬來(lái)酸多潘立酮片有國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）YBH24812005標(biāo)準(zhǔn)。美國(guó)藥典、日本藥局方和歐洲藥典均未收載馬來(lái)酸多潘立酮片等其它劑型，英國(guó)藥典和歐洲藥典收載多潘立酮和馬來(lái)酸多潘立酮原料，其中英國(guó)藥典（2013年版）收載了多潘立酮片（以馬來(lái)酸多潘立酮為原料）的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，YBH24812005標(biāo)準(zhǔn)針對(duì)馬來(lái)酸多潘立酮片的含量測(cè)定是紫外-可見(jiàn)分光光度對(duì)照品法，而英國(guó)藥典采用高效液相色譜法?？紤]到紫外光譜法的專屬性不如HPLC，實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)該藥品的含量測(cè)定受到溶劑以及輔料等若干因素影響，故本文參考《中華人民共和國(guó)藥典》[1]“高效液相色譜法”及英國(guó)藥典2013年版附錄[2]建立了馬來(lái)酸多潘立酮片含量測(cè)定的高效液相色譜法。該方法簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確可靠、專屬性。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑LC2010高效液相色譜儀（日本島津公司），AE163電子天平（瑞士Mettler公司），BP211D電子天平（德國(guó)satorius公司）。馬來(lái)酸多潘立酮對(duì)照品（中檢院，批號(hào)100697-200401），馬來(lái)酸多潘立酮片（南京長(zhǎng)奧制藥有限公司，批號(hào)100706、100607、081202、100404、100307），甲醇為色譜純，鹽酸、乙酸銨試劑均為分析純，水為自制高純水。

1.2 色譜條件色譜柱：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為285 nm；流速1 ml/min；柱溫30℃。理論板數(shù)按多潘立酮峰計(jì)算不低于3 000。

1.3 試驗(yàn)方法供試品溶液：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于多潘立酮10 mg），置100 ml量瓶中，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）超聲15 min使溶解，冷卻，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）至刻度，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；對(duì)照品溶液：取105℃干燥至恒重的馬來(lái)酸多潘立酮對(duì)照品約12.72 mg，置100 ml量瓶中，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）超聲溶解，冷卻，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液。測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性試驗(yàn)精密稱取馬來(lái)酸多潘立酮對(duì)照品12.94 mg，置100 ml瓶中，加0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別量取1、2、5、10、20、40 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：Y=1 667 740X-40 470，相關(guān)系數(shù)r2=0.999 99。同時(shí)，對(duì)照品溶液和供試品溶液的測(cè)定色譜圖分別見(jiàn)圖1和圖2。

圖1 對(duì)照品溶液圖譜

圖2 供試品溶液圖譜

2.2 精密度試驗(yàn)取[線性試驗(yàn)]考察項(xiàng)下的馬來(lái)酸多潘立酮對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果RSD（%）為0.06%，精密度試驗(yàn)結(jié)果良好。

2.3 重現(xiàn)性試驗(yàn)取樣品（批號(hào)100706），按試驗(yàn)方法中供試品溶液配制，平行配制5份，分別進(jìn)樣，測(cè)定，結(jié)果5份供試品測(cè)定結(jié)果平均標(biāo)示含量為100.8%，RSD（%）為0.1%，試樣方法重現(xiàn)性良好。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)取樣品（批號(hào)100706），按試驗(yàn)方法中供試品溶液配制，分別在0、2、4、6、8、10、12 h進(jìn)樣，7個(gè)時(shí)間點(diǎn)的測(cè)定結(jié)果RSD（%）為0.11%，試驗(yàn)方法所得供試品溶液在12 h內(nèi)均較穩(wěn)定。

2.5 回收率試驗(yàn)取已知含量的樣品（批號(hào)100706）9份，分別加入不同量的對(duì)照品溶液，按試驗(yàn)方法中供試品溶液配制，進(jìn)樣，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.6 討論

2.6.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇考察了馬來(lái)酸多潘立酮對(duì)照品在三種溶液項(xiàng)下的紫外最大吸收值：取馬來(lái)酸多潘立酮對(duì)照品適量分別用甲醇、甲醇-0.5%乙酸銨（30∶70）、甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）三種溶液溶解，在200～400 nm處掃描，結(jié)果表現(xiàn)均在285 nm處有最大吸收。

2.6.2 流動(dòng)相的選擇英國(guó)藥典與國(guó)內(nèi)原料標(biāo)準(zhǔn)均采用甲醇-0.5%乙酸銨流動(dòng)相系統(tǒng)，在此基礎(chǔ)上調(diào)整流動(dòng)相比例，以取得合適的保留時(shí)間、對(duì)稱因子、理論板數(shù)，分別考察了馬來(lái)酸多潘立酮樣品在二種流動(dòng)相下的峰形情況：流動(dòng)相一：0→10 min，甲醇∶0.5%乙酸銨=（30∶70）→（100∶0）；10→12 min，保持甲醇100%。流動(dòng)相二：甲醇∶0.5%乙酸銨=（55∶45）。在保證保留時(shí)間一致的情況下，主要以峰面積、對(duì)稱因子、理論塔板數(shù)為考察指標(biāo)，結(jié)果表明甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）峰形較好，保留時(shí)間合適，選用了甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）為流動(dòng)相。

2.6.3 樣品提取溶劑的選擇分別考察了三種提取溶劑在相同的超聲提取情況下的提取效果，取研細(xì)后本品約0.1 g，精密稱定，分別加入純甲醇、甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）、0.002 mol/L和鹽酸∶甲醇（1∶1）三種溶劑，結(jié)果見(jiàn)圖3。根據(jù)圖中結(jié)果可見(jiàn)，三種溶劑效果基本一致，由于標(biāo)準(zhǔn)中含量均勻度擬修訂采用同樣的方法，而該薄膜衣片在純甲醇中難以崩解，故選擇英國(guó)藥典0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）做為提取溶劑。

圖3 不同溶劑的提取效果

2.6.4 兩種方法測(cè)定結(jié)果比較高效液相法：按試驗(yàn)方法中供試品溶液配制。紫外光譜法：供試品溶液的制備：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于多潘立酮50 mg），置100 ml量瓶中，加40 ml甲醇，超聲處理10 min，再振搖10 min使馬來(lái)酸多潘立酮溶解，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，用0.45 μm濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液2 ml置50 ml量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。對(duì)照品溶液的制備：取105℃干燥至恒重的馬來(lái)酸多潘立酮對(duì)照品約12.72 mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸適量，超聲溶解，冷卻，加0.1 mol/L鹽酸稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml，置25 ml量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法：取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液，照分光光度法（中國(guó)藥典二部附錄ⅣA），在284 nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。兩種方法試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。擬建立的高效液相新方法與原紫外光譜方法結(jié)果無(wú)顯著性差異。

表2 兩種含量測(cè)定方法試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

本文建立了高效液相色譜法測(cè)定馬來(lái)酸多潘立酮片含量的方法，該方法采用甲醇-0.5%乙酸銨（55∶45）作為流動(dòng)相，0.002 mol/L鹽酸∶甲醇（1∶1）超聲提取來(lái)酸多潘立酮，經(jīng)十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱分離，在檢測(cè)波長(zhǎng)為285 nm條件下測(cè)定，其線性范圍、相關(guān)系數(shù)、方法精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性及回收率等指標(biāo)均符合分析檢測(cè)的要求，并且操作方便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，與原紫外測(cè)定方法測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯差異，且專屬性及先進(jìn)性均優(yōu)于原方法，適用性更廣，是標(biāo)準(zhǔn)提高改進(jìn)的理想方法。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(四部)[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015.512

[2]British Pharmacopoeia Commission.英國(guó)藥典[S].British:TSO(The Stationery Office),2013.附錄ⅢB,ⅧL

High Performance Liquid Chromatography Method for Determining the Content of Domperidone Maleate Tablets

YI Lu-yao1,2,Xiong Wei1,2#

(1Jiangxi Institute of Drug Control,Nanchang330029;2Jiangxi Drug and Medical Devices Quality Engineering Center,Nanchang330029)

Objective:To establish a method to determinate the content of domperidone maleate tablets by high performance liquid chromatography(HPLC).Methods:Using C18 column,the mobile phase was methanol-0.5%ammonium acetate(55:45),the detection wavelength was 285 nm,the flow rate was 1.0 ml/min,the temperature of column was set at 30℃.Results:Domperidone maleate in 0.129 4～5.176 μg showed a good linear relationship,the correlation coefficient r2was 0.999 99,the rate of recovery was 98.21%～101.73%of standard addition.Conclusion:This method is accurate and reliable,can be used for the quality control of domperidone maleate tablets.

Domperidone maleate tablets;Determination of content;HPLC

R927.2

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2016.10.044

2016-09-16）

#通訊作者：熊蔚，E-mail：1513476937@qq.com