胡 敏
山西師范大學(xué)教育科學(xué)研究院,山西 呂梁 032100
杏鮑菇黃酮類化合物不同極性部位還原過氧化氫能力的測定
胡 敏**
山西師范大學(xué)教育科學(xué)研究院,山西 呂梁 032100
為了更具體的探討杏鮑菇黃酮類化合物不一樣的極性位置對(duì)過氧化氫的還原能力,本實(shí)驗(yàn)的研究材料選擇了杏鮑菇,對(duì)杏鮑菇用超聲輔助方法從其里面提出了黃酮類化合物。從結(jié)果得知:杏鮑菇黃酮類化合物的不同極性部位對(duì)過氧化氫都有還原能力,表明它們均有抗氧化性,且具有明顯的效果。
杏鮑菇;黃酮類化合物;極性部位;還原;過氧化氫
杏鮑菇,既是一種食用菌也是一種藥用菌。從人們的研究中發(fā)現(xiàn),杏鮑菇具有很多用處,比如說可以當(dāng)做食物,也可以制成中藥和西藥,用于治療疾病。當(dāng)下在杏鮑菇的探討方面主要是它的抗氧化功能。黃酮以及其他幾大類的化合物也稱為黃酮體、黃堿素和類黃酮,從一系列研究中我們發(fā)現(xiàn),黃酮能夠降低血液中的葡萄糖的含量,有效防止血栓病的發(fā)生,抑制菌類的侵襲,制止炎癥的發(fā)生,使肝功能進(jìn)一步強(qiáng)化等等,而黃酮功能作用的理論依據(jù)是它的抗氧化能力,由此看來將黃酮類化合物看成一種比較自然的抗氧化劑,對(duì)我們的平常生活有較大的作用。
(一)材料與試劑
1.材料
杏鮑菇(由山西省的侯臨農(nóng)業(yè)有限公司提供,并用真空包裝緊密嚴(yán)實(shí),帶回實(shí)驗(yàn)室)
2.主要化學(xué)試劑
無水乙醇 石油醚 三氯甲烷 醋酸乙酯 丙原醇 亞鈉 二氯化鍶 氫氧化鈉 雙氧水 磷酸二氫鉀 三水合磷酸氫二鉀。
(二)主要儀器設(shè)備
PH酸度計(jì);分液漏斗500ml。
(三)方法
1.對(duì)材料的采集與處理
采集:供試菌株由山西侯臨農(nóng)業(yè)有限公司提供,真空包裝,將其帶回實(shí)驗(yàn)室。
處理:將帶回來的試驗(yàn)材料用清水洗凈,再切成小片,將烘箱調(diào)溫至65℃干燥,一段時(shí)間后取出,將其粉成沫狀物,從一百木篩子中過濾,放到棕色瓶里備留作備用。
2.對(duì)極性不同的各個(gè)部位的萃取分離
根據(jù)下面列出來的圖操作,制作不同的相。
上述具體過程見圖1:
圖1 極性不同的各個(gè)部位萃取與分離的結(jié)果圖
3.制備不同極性樣品溶液
4.測定不同極性樣品濃度
5.極性不同的各個(gè)部位還原過氧化氫的能力測定
先把PH為7.4的緩沖液準(zhǔn)備好放到一旁,用已經(jīng)配好的溶液液再配成濃度為10mmol/L的過氧化氫溶液,用移液槍從試管里取上五毫升的上述溶液,再用另一支移液槍取上五毫升不同濃度的樣品液,把兩者加到一起,用手將杯子拿起來搖一搖,待到均勻混合后為止。用實(shí)驗(yàn)室的分光光度計(jì)在波長為248nm處測量出它的吸光值,A1表示實(shí)驗(yàn)過程中兩種溶液的混合溶液的吸光值,做實(shí)驗(yàn)的過程中以試管里沒有樣品液的過氧化氫吸光度為A0,A2表示試管里沒有過氧化氫的樣品液體吸光值。根據(jù)以下公式計(jì)算出對(duì)過氧化氫的清除率,清除率的值越高,表明對(duì)過氧化氫的還原能力越強(qiáng),也就是說它的抗氧化性越厲害。
式中:A0:試管里過氧化氫溶液體積只有五毫升的吸光值;
A1:五毫升過氧化氫溶液+五毫升(不同濃度)樣品液的吸光值;
A2:五毫升只有(不同濃度)樣品液的吸光值。
(一)極性不同的各個(gè)樣品濃度測定的結(jié)果分析
由實(shí)驗(yàn)可知,黃酮濃度含量最高的是氯仿相,為51.73mg/ml,但是提取出來的黃酮類混合物中石油醚相的濃度是20.34mg/ml,這個(gè)的黃酮含量濃度就最低。因此,濃度從高到低的順序?yàn)椋郝确孪?乙酸乙酯>正丁醇相>石油醚相。
(二)極性不同的各個(gè)部位還原過氧化氫的能力測定
下圖即為此實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
表2 不同極性部位對(duì)過氧化氫的還原能力表
由表2可以看出,杏鮑菇黃酮類化合物極性不同的各個(gè)部位對(duì)過氧化氫均有消除能力。在濃度是一個(gè)值的情況下,去除過氧化氫能力最大的是氯仿相,而正丁醇相去除過氧化氫的能力最弱,表明對(duì)過氧化氫還原能力最大的是氯仿相,而正丁醇相對(duì)過氧化氫的還原能力最小。
針對(duì)從杏鮑菇中提取到的黃酮類化合物,本實(shí)驗(yàn)過程對(duì)其進(jìn)行不同極性溶劑萃取分離,對(duì)不同極性部位還原過氧化氫的能力進(jìn)行了比較。實(shí)驗(yàn)表明,從杏鮑菇中提取到的黃酮類混合物里,4個(gè)不同極性的部位對(duì)過氧化氫都有不一樣的還原能力。其中,對(duì)過氧化氫的清除率最大的是氯仿相,表明對(duì)過氧化氫的還原能力最強(qiáng)的就是氯仿相。通過測定黃酮含量的濃度和其對(duì)過氧化氫的還原能力測定表明:氯仿相中黃酮含量濃度最高,去除過氧化氫的概率也最大,表明氯仿相對(duì)過氧化氫的還原能力也最強(qiáng)。而乙酸乙酯較弱,其還原能力也相對(duì)較弱。黃酮類化合物在我們?nèi)粘I钪杏泻芏嘀匾饔?,因此,建議大家平時(shí)多吃杏鮑菇來保持我們的身體平衡,對(duì)我們的身體的正常發(fā)展起到益處。
[1]張京芳,王冬梅,周麗等.香椿葉提取物不同極性部位體外抗氧化活性研究[J].中國食品學(xué)報(bào),2007,7(5):12-17.
[2]章英,宋江峰,李大婧等.甘薯葉提取物不同極性部位抗氧化活性研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(3):321-324.
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
** 作者簡介:胡敏(1992-),女,漢族,山西人,山西師范大學(xué)教育科學(xué)研究院,2017級(jí)學(xué)科教學(xué)專業(yè)碩士。