蘇曉玲，華啟云，趙東緒，費中華，鄭火青*

(1.金華市農(nóng)業(yè)科學研究院，浙江金華 321000；2. 浙江大學動物科學學院，杭州 310058)

?

八角茴香精油防治蜂螨的蜂群效果研究

蘇曉玲1，華啟云1，趙東緒1，費中華2，鄭火青2*

(1.金華市農(nóng)業(yè)科學研究院，浙江金華 321000；2. 浙江大學動物科學學院，杭州 310058)

本研究在蜂群中測定了八角茴香精油對西方蜜蜂大蜂螨和小蜂螨的殺螨效果。結果表明：應用八角茴香精油一個療程后，大蜂螨的巢房寄生率由用藥前的7.17%下降到1.93%，蜂體寄生率由用藥前的4.13%下降到了1%，與氟氯苯氰菊酯組差異不顯著；小蜂螨巢房寄生率由用藥前的7.65%下降到3.4%，與升華硫組差異不顯著；且八角茴香精油不會引起蜂群群勢下降?？梢?，八角茴香精油在防治蜜蜂大、小蜂螨的應用上具有很大潛力。

蜜蜂；蜂螨；精油；八角茴香

大蜂螨Varroadestructor和小蜂螨Tropilaelapsspp.是西方蜜蜂的重要寄生病害(De Jongetal., 1982)。大蜂螨以蜜蜂成蟲、幼蟲或蛹的血淋巴為食，造成新出房的蜜蜂體重減少、壽命縮短(De Jongetal., 1983)、采集力下降(Kraljetal., 2007)、雄蜂的交配能力降低(Duayetal., 2002)等。同時，大蜂螨還是很多病原的攜帶者和傳播者，其與病毒的協(xié)同作用比任何一種單一病毒感染更具危害性，能造成蜂群毀滅(Hedtkaetal., 2011；Dainatetal., 2012)。小蜂螨也是對中國養(yǎng)蜂業(yè)危害最大的病蟲害之一，在很多地區(qū)，小蜂螨因其繁殖周期短，成為西方蜜蜂的一種長期的危害性寄生蟲(羅其花等, 2010)。小蜂螨主要寄生在蜜蜂巢房內(nèi)，危害封蓋幼蟲、蛹，并導致后者變形、死亡，勉強出房的成蜂通常表現(xiàn)出機體和生理上的缺陷(Rindereretal., 1994)。

防治大、小蜂螨是我國養(yǎng)蜂管理中必不可少的措施。如果沒有周期性的治螨措施，蜂群的越冬死亡率接近100%(Rosenkranzetal., 2010)。目前，養(yǎng)蜂生產(chǎn)上防治大蜂螨最為常見的藥物是氟胺氰菊酯和氟氯苯氰菊酯，防治小蜂螨基本上使用升華硫藥物。但這些化學殺螨劑頻繁、長期使用，致使蜂螨產(chǎn)生抗藥性(Lipinskietal., 2007)，蜂產(chǎn)品受到污染，是我國蜂產(chǎn)品藥物超標的直接原因之一(Rosenkranzetal., 2010; 張煒等, 2012)。而且升華硫稍有不慎用量過大，就會傷蜂(余玉生等, 2011)。為解決蜂螨的抗藥性和蜂產(chǎn)品藥物殘留問題，人們轉向尋找天然、高效、無污染的植物源殺螨劑。

大量實驗證明植物精油對大蜂螨有很好的抑制作用，目前已經(jīng)測試了超過200種植物精油的抗螨活性。大量實驗室篩選實驗證明百里香、薄荷、薰衣草、迷迭香等眾多植物精油表現(xiàn)出顯著的抗螨活性(Arianaetal., 2002；Damianietal., 2009)；酸橙、檸檬草、香茅、天竺葵等植物精油在蜂群實驗中表現(xiàn)出了較好殺螨效果(Gashoutetal., 2009)。由于目前小蜂螨的危害僅局限于亞洲地區(qū)，它的防治在國際上沒有引起足夠重視，植物精油對小蜂螨的殺螨效果研究較少。本研究對八角茴香IlliciumverumHook.f.精油在蜂群中抗螨活性進行全面評價，測定了八角茴香精油對蜜蜂大蜂螨和小蜂螨的殺螨效果，為植物精油防治蜂螨提供了一條新的途徑，為開發(fā)有市場前景的天然植物源藥物奠定基礎。將大蜂螨和小蜂螨的防治同時進行，還可以減少勞動力，提高養(yǎng)蜂業(yè)規(guī)模化程度。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 八角茴香精油

八角茴香精油按《中國藥典》2010年版第一部附錄XD-揮發(fā)油測定法甲法提?。喝∷幉?00 g，粉碎成粗粉，置圓底燒瓶中，加水5 L，緩緩加熱至沸，并保持微沸5 h，至測定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻，開啟測定器下端的活塞，將水緩緩放出后，得到揮發(fā)油。

1.1.2 殺螨劑

對照組1使用的殺螨劑，商品名為鑫螨撲，主要成分是氟氯苯氰菊酯，生產(chǎn)廠家為山西衛(wèi)鵬制藥有限公司。對照組2使用的殺螨劑，商品名為升華硫，主要成分是升華硫，生產(chǎn)廠家為四川汪氏動物保健有限責任公司。

1.1.3 試驗蜂群

大蜂螨試驗蜂群由浙江省金華市石門村倪志芳蜂場提供，選取群勢一致(6足框)、大蜂螨寄生水平一致的蜂群8群，分為兩組，每組4群，分別為八角茴香油試驗組和對照組1。小蜂螨試驗蜂群由浙江省金華市冠山頂村付文斌蜂場提供，選取群勢一致(6足框)、小蜂螨寄生水平一致的蜂群7群，分為兩組，分別為八角茴香油試驗組4群和對照組2為3群。

1. 2 試驗方法

1.2.1 用藥方法

秋季治螨時，蜂群每隔7 d用藥一次，共用藥3次。試驗組在箱底加入含2 mL茴香油的棉球，對照組1在巢脾間懸掛1/4片螨撲，對照組2使用升華硫撒蜂路，每箱用量約3 g。分別統(tǒng)計蜂螨寄生率、落螨數(shù)和蜜蜂死亡數(shù)。

1.2.2 蜂螨寄生率的計算

(1)落螨數(shù)計算：在蜂箱底部鋪上一張與涂有凡士林的白紙，用藥后每天統(tǒng)計白紙上的落螨數(shù)，并計算每次用藥后的總落螨數(shù)。

(2)蜂體寄生率的計算：在用藥前1 d和前3 d分別統(tǒng)計蜂螨的蜂體寄生率，兩次平均數(shù)為用藥前的蜂體寄生率，每次用藥結束后統(tǒng)計一次蜂螨的蜂體寄生率。從每群蜜蜂隨機取50-100頭成年工蜂，放入酒精，待蜜蜂死后, 將蜜蜂倒在白紙上，借助于放大鏡仔細檢查燒杯內(nèi)壁、底部及白紙上的落螨個數(shù)，并用鑷子挑動蜜蜂，觀察蜂體上的螨，統(tǒng)計螨的數(shù)量為蜂螨總數(shù)。蜂體寄生率計算公式：

蜂體螨的寄生率(%)=蜂螨總數(shù)/檢查蜂數(shù)×100

(3)巢房寄生率的計算：統(tǒng)計時間同蜂體寄生率。從每群中隨機提出一張封蓋子脾，抖掉蜜蜂，用鑷子挑開50-100個封蓋房，夾出幼蟲或蛹，檢查蜂房中有無螨寄生。寄生率計算公式：

封蓋房中螨的寄生率(%)=有螨封蓋房數(shù)/檢查封蓋房總數(shù)×100

1.2.3 數(shù)據(jù)分析與處理

試驗數(shù)據(jù)采用EXECL 2007和SPSS 16.0 for Windows數(shù)據(jù)處理軟件進行統(tǒng)計，計算均值、標準誤及獨立樣本T檢驗。

2 結果與分析

2.1 茴香精油對大蜂螨的殺螨效果

2.1.1 落螨總數(shù)

試驗組3次用藥后的落螨總數(shù)分別為288.33頭、296.00頭和123.00頭，對照組1 3次用藥后的落螨數(shù)分別605.67頭、312.33頭和95.33頭，兩兩差異不顯著(圖1)。

圖1 大蜂螨的落螨總數(shù)Fig.1 The number of Varroa mite

2.1.2 巢房寄生率

經(jīng)過八角茴香精油和氟氯苯氰菊酯處理后蜂螨的寄生率均下降。其中，試驗組的巢房寄生率由用藥前的7.17%下降到1.93%，對照組1的巢房寄生率由6.88%下降到0.5%(圖2)，兩兩差異不顯著。

圖2 大蜂螨的巢房寄生率Fig. 2 The parasitic rate of Varroa mite in the cells

2.1.3 蜂體寄生率

試驗組和對照組1蜂體上的蜂螨寄生率均下降，試驗組和對照組1的蜂群的蜂體寄生率分別由用藥前的4.13%和5.67%下降到了1%和0.55%，兩兩差異不顯著。試驗組和對照組1均能有效殺死蜂體的蜂螨，且在第一次用藥后蜂體的寄生率顯著下降(圖3)。

圖3 大蜂螨的蜂體寄生率Fig.3 The parasitic rate of Varroa mite on bees

2.2 茴香精油對小蜂螨的殺螨效果

2.2.1 落螨總數(shù)

試驗組在第一次用藥后、第二次用藥后和第三次用藥后的落螨總數(shù)分別為176.33頭、123.33頭和45.67頭，對照組2分別為171頭、119頭和32頭，兩兩差異不顯著(圖4)。

圖4 小蜂螨的落螨數(shù)Fig. 4 The number of Tropilaelaps mite

2.2.2 巢房寄生率

試驗組和對照組2的巢房寄生率均下降，其中試驗組的小蜂螨巢房寄生率由用藥前的7.65%下降到3.4%，對照組2的小蜂螨巢房寄生率由用藥前的7.50%下降到2.83%，兩兩差異不顯著(圖5)。

圖5 小蜂螨的巢房寄生率Fig.5 The parasitic rate of Tropilaelaps mite in the cells

3 結論與討論

八角茴香精油作為天然香料和藥用材料，被廣泛應用于日化、食品、飼料和醫(yī)藥等領域。蘇曉玲等(2012)在實驗室條件下測定了10種植物精油的殺螨效果，結果表明丁香、八角茴香、降香和小茴香的精油在對蜜蜂安全的濃度下有較好的殺螨效果，其中八角茴香精油在48 h內(nèi)的殺螨率達到92.5%。本研究在此基礎上測定了八角茴香精油在蜂群中防治大、小蜂螨的效果。結果表明，八角茴香精油能有效控制大蜂螨的危害，大蜂螨的巢房寄生率由用藥前的7.17%下降到1.93%，試驗組在第一次用藥后巢房寄生率有所上升，可能是精油殺螨效果比較緩和，新出房的螨有機會潛入新封蓋的巢房，如果蜂群中的大幼蟲較少，蜂螨就可能集中在這些大幼蟲巢房中。蜂體寄生率由用藥前的4.13%下降到了1.00%，在第一次用藥后，對照組1的落螨數(shù)遠高于試驗組，可能是由于蜂群中螨的基數(shù)較高，且對照組1見效快。與大蜂螨的巢房寄生率相比，蜂體寄生率下降較快，八角茴香精油對蜂體上的蜂螨有較好的殺滅效果；而在有封蓋子的蜂群中，殺螨效果較緩慢。在防治小蜂螨方面，八角茴香精油也有較好的效果，試驗組的巢房寄生率由用藥前的7.65%下降到3.4%。雖然八角茴香精油不能全部殺滅蜂群中的蜂螨，但因為只要蜂螨寄生水平在一定閾值以下，就不會對蜂群造成可見的影響，所以八角茴香精油可以在養(yǎng)蜂生產(chǎn)上用于防治大、小蜂螨。

本研究未發(fā)現(xiàn)由于八角茴香精油的使用而導致蜜蜂死亡的現(xiàn)象。試驗組在用藥后蜂群群勢無明顯下降，且蜂群能成功越冬并順利春繁，表明八角茴香精油對蜜蜂無毒害作用。

植物精油有著化學合成殺螨劑無法比擬的優(yōu)點，如對環(huán)境無害、對人體安全、能同時對蜜蜂的細菌等其他病害有效(蘇曉玲等, 2013)等，但也受其本身一些固有的缺點的限制，影響開發(fā)應用。例如植物精油的成分復雜，易受植物生長環(huán)境條件、提取方法等的影響，其產(chǎn)量和質(zhì)量難以控制，給植物精油的標準化生產(chǎn)和應用帶來困難。另外，一般植物精油具有強烈的氣味，即使少量與蜂蜜混合，也可能會改變蜂蜜的味道。因此，在未來的研究中，有必要對八角茴香精油有效成分、標準化生產(chǎn)和應用以及對蜂產(chǎn)品品質(zhì)的影響等方面進一步開展研究工作。

References)

Ariana A,Ebadi R,Tahmasebi G.Laboratory evaluation of some plant essences to controlVarroadestructor(Acari: Varroidae)[J].ExperimentalandAppliedAcarology,2002,27(4):319-327.

Dainat B,Evans JD,Chen YP,etal.Dead or alive: Deformed Wing Virus andVarroadestructorreduce the life span of winter honeybees[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiology, 2012,78(4):981-987.

Damiani N,Gende LB,Bailac P,etal.Acaricidal and insecticidal activity of essential oils onVarroadestructor(Acari: Varroidae) andApismellifera(Hymenoptera: Apidae)[J].ParasitologyResearch, 2009,106(1):145-152.

De Jong D,Andrea DD,Gonsalves LS.A comparative analysis of shaking solution for the detection ofVarroajacobsonion adult honeybees[J].Apidologie,1982,13(3): 297-306.De Jong D,De Jong PH.Longevity of Africanized honey bees (Hymenoptera:Apidae) infested byVarroajacobsoni(Parasitiformes: Varroidae)[J].JournalofEconomicEntomology,1983, 76(4):766-768.

Duay P,De Jong D,Engels W.Decreased flight performance and sperm production in drones of the honeybee (Apismellifera) slightly infested byVarroadestructormites during pupal development[J].GeneticsandMolecularResearch，2002, 1(3):227-232.

Gashout HA,Guzmán-Novoa E.Acute toxicity of essential oils and other natural compounds to the parasitic mite,Varroadestructor, and to larval and adult worker honey bees (ApismelliferaL.)[J].JournalofApiculturalResearch,2009,48(4):263-269.

Hedtka K,Jensen PM,Jensen AB,etal.Evidence for emerging parasites and pathogens influencing outbreaks of stress-related diseases like chalkbrood[J].JournalofInvertebratePathology, 2011,108(3):167-173.

Kralj J,Brockmann A,Fuchs S,etal.The parasitic miteVarroadestructoraffects non-associative learning in honey bee foragers,ApismelliferaL.[J].JournalofComparativePhysiologyA-NeuroethologySensoryNeuralandBehavioralPhysiology,2007,193(3):363-370.

Lipinski Z,Szubstarski J.Resistance ofVarroadestructorto most commonly used synthetic acaricides[J].PolishJournalofVeterinarySciences,2007,10(4):289-294.

Luo QH,Zhou T,Wang Q,etal.A review of research progresses onTropilaelapsspp.[J].ChineseBulletinofEntomology,2010,47(2):263-269. [羅其花,周婷,王強,等.小蜂螨研究綜述[J].昆蟲知識,2010,47(2):263-269]

Rinderer TE,Oldroyd BP,Lekprayoon C,etal.Extended survival of the parasitic honeybee miteTropilaelapsclareaeon adult workers ofApismelliferaandApisdorsata[J].JournalofApiculturalResearch,1994,33(3):171-174.

Rosenkranz P,Aumeier P,Ziegelmann B.Biology and control ofVarroadestructor[J].JournalofInvertebratePathology,2010,103:96-119.

Su XL,Zhao DX,Hua QY,etal.The research advances on the application of essential oils in apiculture[J].ApicultureofChina,2013,64(1):20-24.[蘇曉玲,趙東緒,華啟云,等.植物精油在養(yǎng)蜂業(yè)中的應用前景[J].中國蜂業(yè),2013, 64(1):20-24]

Su XL,Zheng HQ,Fei ZH,etal.Effectiveness of herbal essential oils as fumigants to controlVarroadestructorin laboratory assays[J].ChineseJournalofAppliedEntomology,2012，49(5):1189-1195.[蘇曉玲,鄭火青,費中華,等.中草藥精油對蜜蜂狄斯瓦螨的熏蒸效果[J].應用昆蟲學報.2012,49(5):189-1195]

Yu YS,Zhang ZY,Lu HX,etal.Control effect of sublimed sulfur paired with acaricide on bee mites[J].JournalofAnhuiAgriculturalScience,2011,39(13):7676-7677,7684.[余玉生,張祖蕓,盧煥仙,等.升華硫配合殺螨劑防治蜂螨效果的比較研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2011, 39(13):7676-7677,7684]

Zhang Y,Han RC.Progress in research of honey bee miteVarroadestructor[J].JournalofEnvironmentalEntomology,2012,34(3):345-353. [張煒, 韓日疇.蜜蜂寄生螨-狄斯瓦螨的研究進展[J].環(huán)境昆蟲學報,2012,34(3):345-353]

The effect of essential oils of Truestar Anisetree against mites in honeybee colonies

SU Xiao-Ling1, HUA Qi-Yun1, ZHAO Dong-Xu1, FEI Zhong-Hua2, ZHENG Huo-Qing2*

(1.Jinhua Academy of Agricultural Sciences, Jinhua 321000,Zhejiang Province,China; 2.College of Animal Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China)

Acaricidal activities of essential oils of Truestar Anisetree againstVarroaandTropilaelapsspp. mites were measured in honey bee colonies.With a course of treatment, the parasitic rate ofVarroadestructorin the cells fell to 1.93% from 7.17% and the parasitic rate ofV.destructoron bees fell to 1% from 4.13%, which were not significantly different from the positive control group treated with flumethrin strip.The parasitic rate ofTropilaelapsspp. in the cells fell to 3.4% from 7.65% after medication, which was not significantly different from the positive group treated with sublimed sulfur.Moreover, the treatment with the essential oils did not cause visible decline of honeybee popuplation. In conclusion, essential oils of Truestar Anisetree is a promising acaricide that could be used for controllingVarroamites andTropilaelapsspp. in beekeeping practice.

Honeybee; mites; essential oil; Truestar Anisetree

浙江省自然科學基金(LY13C170004)；金華市農(nóng)業(yè)研究計劃項目(2014-2-009)；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項資金(CARS-45-SYZ7)

蘇曉玲，女，1987年生，畜牧師，研究方向為蜜蜂病蟲害防控，E-mail:linger.su@163.com

*通訊作者Authorforcorrespondence，E-mail:hqzheng@zju.edu.cn

Received：2015-10-29；接受日期Accepted：2015-11-19

Q965.9;S

A

1674-0858(2016)06-1251-05