余國富

（貴州省貴陽市清鎮(zhèn)市動物疫病預(yù)防控制中心，貴州 清鎮(zhèn) 551400）

結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陽性奶牛的鑒別診斷與處理

余國富

（貴州省貴陽市清鎮(zhèn)市動物疫病預(yù)防控制中心，貴州 清鎮(zhèn) 551400）

通過對首次監(jiān)測（間隔上次監(jiān)測6個月以上）檢出結(jié)核陽性反應(yīng)奶牛進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，于首次監(jiān)測觀察72h皮厚差之日起1周內(nèi)進(jìn)行二次監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)有約10%左右的奶牛呈結(jié)核陰性反應(yīng)，再次間隔45d時進(jìn)行第三次監(jiān)測，確診該部分奶牛為結(jié)核陰性。該監(jiān)測方法降低了結(jié)核陽性奶牛的誤檢（判）、殺率，將奶牛養(yǎng)殖場（戶）的損失降到了最低，節(jié)省了財(cái)政撲殺補(bǔ)助和工作經(jīng)費(fèi)，具有一定推廣價值。

結(jié)核菌素；皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)；奶牛；結(jié)核；鑒別診斷

怎樣防止漏檢和誤檢，是奶牛結(jié)核監(jiān)測中的兩大技術(shù)問題。在長期、大量的奶牛結(jié)核監(jiān)測工作中，筆者不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，改進(jìn)工作方法。采用人用1mL的一次性注射器（具有注射劑量準(zhǔn)確和防止交叉感染的優(yōu)點(diǎn)）替代傳統(tǒng)的2mL金屬注射器，嚴(yán)格控制牛分枝桿菌PPD（提純蛋白衍生物）用量（每頭0.1mL，含2000IU）、注射部位（頸側(cè)中部上1/3處或肩胛部皮內(nèi)注射，注射后局部應(yīng)出現(xiàn)小皰）、加大檢疫頻率（每年不低于2次）和提高檢疫密度（20日齡以上的奶牛必須全檢），有效防止了結(jié)核病（牛型）奶牛的漏檢。通過對首次監(jiān)測（間隔上次監(jiān)測6個月以上）檢出結(jié)核陽性反應(yīng)奶牛進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，于首次監(jiān)測觀察72h皮厚差之日起1周內(nèi)進(jìn)行2次監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)有約10%左右的奶牛呈結(jié)核陰性反應(yīng)，再次間隔45d時進(jìn)行第3次監(jiān)測，確診該部分奶牛為結(jié)核陰性。該監(jiān)測方法降低了結(jié)核陽性奶牛的誤檢（判）、殺率，將奶牛養(yǎng)殖場（戶）的損失降到了最低，節(jié)省了財(cái)政撲殺補(bǔ)助和工作經(jīng)費(fèi)，具有一定推廣價值?，F(xiàn)報告如下：

1 監(jiān)測情況

1.1 材 料

診斷試劑及其它藥品：中牧實(shí)業(yè)股份有限公司成都藥械廠生產(chǎn)的提純結(jié)核菌素（牛型）或哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn)的結(jié)核菌素（有效期內(nèi)使用）、生理鹽水、酒精等。

工具：人用手動刮須刀或電動理發(fā)推剪、卡尺、人用一次性注射器（5mL）、人用一次性皮試注射器（1mL）。

1.2 操作方法

按照《動物結(jié)核病診斷技術(shù)》（GB/T18645—2002）:“（1）注射部位及術(shù)前處理：將牛只編號后在頸側(cè)中部上1/3處剪毛（或提前1d剃毛），3個月以內(nèi)的犢牛，也可在肩胛部進(jìn)行，直徑約10cm。用卡尺測量術(shù)部中央皮皺厚度，作好記錄。注意，術(shù)部應(yīng)無明顯的病變。（2）注射劑量：不論大小牛只，一律皮內(nèi)注射0.1mL（含2000IU）。即將牛型結(jié)核分枝桿菌PPD稀釋成2萬IU/mL后，皮內(nèi)注射0.1mL。凍干PPD稀釋后當(dāng)天用完。（3）注射方法：先以75%酒精消毒術(shù)部，然后皮內(nèi)注射定量的牛型結(jié)核分枝桿菌PPD，注射后局部應(yīng)出現(xiàn)小皰，如對注射有疑問時，應(yīng)另選15cm以外的部位或?qū)?cè)重作。”（4）注射次數(shù)和觀察反應(yīng)：按照《動物結(jié)核病診斷技術(shù)》（GB/T18645—2002）:“皮內(nèi)注射后經(jīng)72h判定，仔細(xì)觀察局部有無熱痛、腫脹等炎性反應(yīng)，并以卡尺測量皮皺厚度，作好詳細(xì)記錄。對疑似反應(yīng)牛應(yīng)立即在另一側(cè)以同一批PPD同一劑量進(jìn)行第二回皮內(nèi)注射，再經(jīng)72h觀察反應(yīng)結(jié)果。對陰性牛和疑似反應(yīng)牛，于注射后96h和120h再分別觀察一次，以防個別牛出現(xiàn)較晚的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)?！狈椒ú僮?。

1.3 結(jié)果判定

按照《動物結(jié)核病診斷技術(shù)》（GB/T18645—2002）:“（1）陽性反應(yīng)：局部有明顯的炎性反應(yīng)，皮厚差大于或等于4.0mm。（2）疑似反應(yīng)：局部炎性反應(yīng)不明顯，皮厚差大于或等于2.0mm、小于4.0mm。（3）陰性反應(yīng)：無炎性反應(yīng)，皮厚差在2.0mm以下”。

1.4 撲殺及生物安全處理

采用高壓電擊方法撲殺發(fā)病和陽性奶牛，對病死和撲殺的奶牛按照《病害動物和病害動物產(chǎn)品生物安全處理規(guī)程》（GB 16548-2006）掩埋要求：“（1）掩埋地點(diǎn)應(yīng)遠(yuǎn)離學(xué)校、公共場所、居民住宅區(qū)、村莊、動物飼養(yǎng)和屠宰場所、飲用水源地、河流等地區(qū)；（2）掩埋前應(yīng)對需掩埋的病害動物尸體和病害動物產(chǎn)品實(shí)施焚燒處理；（3）掩埋坑底鋪2cm厚生石灰；（4）掩埋后需將掩埋土夯實(shí)。病害動物尸體和病害動物產(chǎn)品上層應(yīng)距地表1.5m以上；（5）焚燒后的病害動物尸體和病害動物產(chǎn)品表面，以及掩埋后的地表環(huán)境應(yīng)使用有效消毒藥噴、灑消毒?！边M(jìn)行處理。

2 案例

2015年8月11日～10月16日，筆者采用1.1材料和工具、1.2操作方法和1.3結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，對某奶牛場1124頭奶牛進(jìn)行了結(jié)核監(jiān)測，情況如下：

2.1 首次監(jiān)測

2.1.1 監(jiān)測時間：2015年 8月11～18日。

2.1.2 監(jiān)測奶牛數(shù)：1124頭。

2.1.3 結(jié) 果 檢出結(jié)核陽性反應(yīng)奶牛43頭，可疑反應(yīng)奶牛11頭。見表1（陰性牛只略）。

2.1.4 處 理 對所有結(jié)核陽性和可疑反應(yīng)奶牛實(shí)施隔離，1周內(nèi)進(jìn)行二次監(jiān)測。

2.2 二次監(jiān)測

2.2.1 監(jiān)測時間：2015年8月19～22日。

2.2.2 監(jiān)測奶牛數(shù)：54頭。

2.2.3 結(jié) 果 經(jīng)綜合判定：檢出結(jié)核陽性反應(yīng)奶牛38頭，具體情況略；檢出可疑反應(yīng)奶牛16頭，見表2。

2.2.4 處 理

2.2.4.1 對首次監(jiān)測和二次監(jiān)測均呈結(jié)核陽性反應(yīng)的奶牛和首次監(jiān)測或二次監(jiān)測中一次為結(jié)核陽性反應(yīng)且另一次為可疑反應(yīng)的奶牛做結(jié)核陽性判斷，對其它奶牛做結(jié)核可疑判斷。

2.2.4.2 對2.2.4.1判定為結(jié)核陽性的奶牛按照1.4進(jìn)行撲殺并做無害化處理，對2.2.4.1判定為結(jié)核可疑的奶牛繼續(xù)隔離飼養(yǎng)，間隔45d進(jìn)行第3次監(jiān)測。

2.3 三次監(jiān)測

2.3.1 監(jiān)測時間：2015年10月13～16日。

2.3.2 監(jiān)測奶牛數(shù)：16頭。

2.3.3 結(jié) 果 通過對二次監(jiān)測綜合判定為結(jié)核可疑16頭奶牛進(jìn)行第三次監(jiān)測，結(jié)果全部為結(jié)核陰性反應(yīng)奶牛。

2.3.4 處 理 通知場方對參與第三次監(jiān)測的16頭奶牛解除隔離。

3 討論

3.1 上述案例中，筆者自始至終參與指導(dǎo)、監(jiān)督并親自負(fù)責(zé)結(jié)核菌素注射工作，對注射局部進(jìn)行嚴(yán)格消毒，在首次監(jiān)測間隔72h觀察結(jié)果時還采用分別測量緊靠炎性反應(yīng)包塊邊沿前、后皮厚，求平均值作為原皮厚，避免了感染、測量原皮厚不準(zhǔn)或記錄錯誤等造成的誤判。

3.2 上述案例中，首次監(jiān)測結(jié)核陽性反應(yīng)奶牛43頭，通過二、三次重復(fù)監(jiān)測，最終確診結(jié)核陰性奶牛5頭（D0821、D1938、D2010、D2409、D1972），占首次監(jiān)測結(jié)核陽性反應(yīng)奶?？倲?shù)的11.63%（5/43）。在筆者親自參與其它不同牛群、不同批次奶牛結(jié)核監(jiān)測中，同樣存在類似情況。

3.3 上述案例中，最終確診為結(jié)核陰性的5頭奶牛在首次監(jiān)測時呈結(jié)核陽性反應(yīng)，在二、三次監(jiān)測時又呈結(jié)核陰性反應(yīng)，其機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

表1 第一次檢測結(jié)果 單位：mm

表2 對疑似病例和陽性病例復(fù)檢結(jié)果 單位：mm

[1]余國富.奶牛結(jié)核病檢疫與凈化[J].中國動物檢疫，2013，30，（10）: 46-49.

[2]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.GB/T18645—2002《動物結(jié)核病診斷技術(shù)》[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2002-08-03.

[3]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.GB 16548-2006《病害動物和病害動物產(chǎn)品生物安全處理規(guī)程》[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2006-09-04.

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2016．07.017