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        血液凈化對(duì)膿毒癥患者凝血功能及免疫功能的影響①

        2016-12-26 01:46:42張鋒利吐?tīng)枬L艾沙
        中國(guó)免疫學(xué)雜志 2016年11期
        關(guān)鍵詞:膿毒癥細(xì)胞因子凈化

        李 軍 張鋒利 吐?tīng)枬L·艾沙 吳 燕 李 超

        (新疆兵團(tuán)第一師醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科,阿克蘇843000)

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        血液凈化對(duì)膿毒癥患者凝血功能及免疫功能的影響①

        李 軍 張鋒利②吐?tīng)枬L·艾沙 吳 燕 李 超③

        (新疆兵團(tuán)第一師醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科,阿克蘇843000)

        目的:探究連續(xù)性血液凈化 (Continuous blood purification,CBP) 對(duì)膿毒癥患者凝血功能及免疫功能的影響。 方法:選取2012年1月至2015年1月入住新疆兵團(tuán)第一師醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)病房54例符合膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者納入本研究。采取CBP治療,分別在治療前、治療后12、24、48、72 h時(shí),對(duì)患者持續(xù)性觀察,測(cè)定其APACHEⅡ評(píng)分。收集患者不同CBP治療時(shí)間段的血液,利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血免疫細(xì)胞CD4+/CD8+,ELISA法檢測(cè)其分泌的細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-10和TNF-α,凝固法檢測(cè)其凝血功能指標(biāo)PT、APTT、TT,免疫比濁法檢測(cè)FIB。 結(jié)果:膿毒癥患者治療前PT、APTT、TT和FIB含量高于健康人群,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (均P<0.05) 。CBP治療12、24、48、72 h的凝血功能指標(biāo)PT、APTT、TT、FIB相比CBP治療前顯著降低 (P<0.05)。膿毒癥患者組的CD3+、CD4+和CD4+/CD8+細(xì)胞頻率較健康組明顯降低 (均P<0.05)。CBP治療12、24、48、72 h,相比治療前,CD3+T、CD4+T細(xì)胞頻率逐漸升高 (均P<0.05)。CBP治療12、24、48、72 h的CD4+/CD8+比例比治療前顯著升高 (均P<0.05)。治療前、CBP治療12、24、48 h的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+細(xì)胞頻率低于健康組 (均P<0.05) 。CBP治療12、24、48、72 h的IL-1、IL-6、IL-10的水平較治療前降低 (均P<0.05)。CBP治療48 h、72 h的TNF-α的水平較治療前顯著降低 (均P<0.05)。治療前、CBP治療12、24、48 h的IL-1的水平高于健康組 (均P<0.05)。治療前、CBP治療12、24、48、72 h的IL-6、IL-10的水平高于健康組 (均P<0.05)。治療前、CBP治療12、24 h的TNF-α水平顯著高于健康組 (均P<0.05)。CBP治療12、24、48、72 h的APACHEⅡ評(píng)分與治療前比較均顯著降低 (均P<0.05)。 結(jié)論:連續(xù)性血液凈化能夠通過(guò)清除血液中炎癥因子,增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,對(duì)改善膿血癥患者的病情有一定幫助。

        連續(xù)性血液凈化;膿毒癥;凝血功能;細(xì)胞因子;CD4+/CD8+;APACHEⅡ評(píng)分;白介素;外周血T淋巴細(xì)胞

        膿毒癥 (Sepsis) 主要是由腦膜炎、肺炎、泌尿系統(tǒng)等感染導(dǎo)致的全身炎癥反應(yīng)綜合征[1]。據(jù)報(bào)道:每年的膿毒癥患者在全球大約有750 000萬(wàn)例,死亡為225 000例。我國(guó)膿毒癥的死亡率45%~70%,其發(fā)病急、病情進(jìn)展迅速、病死率每年還在不斷升高[2,3]。膿毒癥發(fā)病機(jī)制涉及免疫、凝血、炎癥、感染以及機(jī)體各系統(tǒng)、各器官的病理生理變化[4,5]。其中,凝血功能失控和免疫功能紊亂是膿毒癥發(fā)生和發(fā)展的中心環(huán)節(jié),膿毒癥時(shí)免疫反應(yīng)的炎癥因子和凝血因子相互作用,相互促進(jìn)膿毒癥的進(jìn)展和惡化[6]。膿毒癥的早期階段,血液中產(chǎn)生大量的細(xì)菌,同時(shí)釋放出內(nèi)毒素,從而誘導(dǎo)機(jī)體免疫系統(tǒng)分泌大量的炎癥因子和促炎介質(zhì),以及氧自由基和血管活性物質(zhì)[7,8]。炎癥系統(tǒng)中的炎癥因子和促炎介質(zhì)可激活凝血系統(tǒng)的凝血因子,抑制抗凝機(jī)制、造成血液高凝狀態(tài)、形成血栓、導(dǎo)致微血管栓塞,最后導(dǎo)致患者發(fā)生嚴(yán)重膿毒癥或膿毒癥休克[9-11]。

        目前,膿毒癥的治療方法主要有感染源控制、血管加壓類藥物、糖皮質(zhì)激素等,但是治療的藥物昂貴、耗費(fèi)的醫(yī)療資源多,給家庭和社會(huì)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)壓力,所以膿毒癥的治療一直是全球關(guān)注的重點(diǎn),診治方法也不斷更新[12]。其中連續(xù)性血液凈化 (Continuous blood purification,CBP) 就是目前大力推廣的一種膿毒癥支持療法,它是主要利用特殊材質(zhì)的濾膜,連續(xù)、緩慢清除水分和溶質(zhì)的一種治療方式[13]。CBP能過(guò)濾掉血中特定分子量的炎癥因子和趨化因子等其他抗炎介質(zhì)和體內(nèi)代謝毒素,如:IL-1、 IL-6、IL-10、TNF-α,調(diào)整免疫失控,使免疫系統(tǒng)的內(nèi)環(huán)境逐漸恢復(fù)穩(wěn)定,使凝血機(jī)制恢復(fù)正常[2,14]。目前,關(guān)于CBP對(duì)膿毒癥患者免疫功能和凝血功能的兩者造成的影響所見(jiàn)報(bào)道甚少。因此,本研究以膿毒癥患者為研究對(duì)象,對(duì)患者進(jìn)行CBP治療,對(duì)患者持續(xù)性觀察,測(cè)定其細(xì)胞因子和凝血功能指標(biāo)并進(jìn)行APACHEⅡ評(píng)分,以期為臨床治療提供新的方向。

        1 對(duì)象與方法

        1.1 研究對(duì)象 選取2012年1月至2015年1月入住新疆兵團(tuán)第一師醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)病房確診為膿毒癥的患者54例,其中男32例,女22例,年齡20~67歲,平均年齡 (49.57±12.98) 歲。原發(fā)病為:急性重癥胰腺炎30例,心血管疾病16例,腎病8例。膿毒癥的確診符合2008年國(guó)際會(huì)議所制定的關(guān)于膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)[15],且年齡20~75歲。排除入院前接受透析治療者;近期使用過(guò)免疫抑制劑者;患自身免疫性疾病及惡性腫瘤者;HIV陽(yáng)性者;終末期肝病或慢性腎功能衰竭者;升壓治療血壓 <80/40 mmHg者;APACHE II分值 >25的膿毒癥患者。

        選取同期在醫(yī)院體檢的正常健康人54例,其中男30例,女24例,年齡21~66歲,平均年齡(50.30±12.15) 歲。膿毒癥患者與正常人群平均年齡及性別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (均P>0.05) 。本研究經(jīng)新疆兵團(tuán)第一師醫(yī)院倫理委員會(huì)討論通過(guò),所有患者均簽署知情同意書(shū)。

        1.2 方法

        1.2.1 治療方法 膿毒癥患者進(jìn)行CBP (Continu-ous blood purification) 治療,CBP采用連續(xù)性靜脈血液濾過(guò)(Continuous veno-venous hemofiltration,CV-VH)方法,使用德國(guó)產(chǎn)Fresenius Medical Care ADM08/ABM 血濾系統(tǒng),濾器為Fersenius Ultraffux AV600。所有患者均行CVVH治療72 h。在CBP治療的基礎(chǔ)上采用烏司他丁聯(lián)合治療,即20萬(wàn)U加入50 ml 0.9%氯化鈉注射液中靜脈滴注,每次靜滴1 h,每8 h靜滴1次,連用5 d。肝素或低分子肝素抗凝,有活動(dòng)性出血者行無(wú)肝素治療,有出血傾向者選擇低分子肝素抗凝。血流量150~250 ml/min,透析液流量25~45 ml/(h·kg)。同時(shí)使用APACH-EⅡ評(píng)分評(píng)價(jià)患者治療前、CBP治療12、24、48、72 h的整體病情變化。

        1.2.2 標(biāo)本采集時(shí)間及處理 所有膿毒癥患者治療前及治療后12、24、48、72 h共5次采集,正常人群僅采集1次血液。收集5 ml血液放入含EDTA的抗凝管中,300 r/min離心,留取血清,-20℃保存供ELISA法檢測(cè)IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α;同時(shí)留取細(xì)胞用流式細(xì)胞分析法檢測(cè)CD4+/CD8+;檢測(cè)凝血功能相關(guān)指標(biāo)PT/APTT/TT/FIB。

        1.2.3 凝血功能指標(biāo)檢測(cè) 采用南京建成生物公司購(gòu)買(mǎi)的凝血酶原時(shí)間 (Prothrombintime,PT) /部分凝血酶原時(shí)間(Active prothrombintime,APTT) /凝血酶時(shí)間 (Thrombin time,TT) 試劑盒,取離心收集的待測(cè)血漿0.1 ml,加入37℃預(yù)熱的PT/APTT/TT 0.2 ml試劑,混勻,立即使用STAGO公司產(chǎn)STA Compact全自動(dòng)血凝分析儀檢測(cè)其凝血時(shí)間。使用上海明華體外診斷試劑有限公司生產(chǎn)的FIB免疫比濁法測(cè)定試劑盒,將離心收集的血漿,按照1∶10的比例稀釋血液樣品,取20 μl稀釋樣品及標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,分別加入500 μl纖維蛋白原抗體500 μl,37℃水浴30 min,上機(jī)VITALAB MICRO半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)其含量。

        1.2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè) 向50 μl抗凝全血[含細(xì)胞濃度為 (1~10) ×109L-1]中加入相應(yīng)20 μl抗體 (FITC標(biāo)記小鼠抗人CD4單抗,PE標(biāo)記的小鼠抗人CD3單抗,BD TritestTMCD3/CD4/CD8購(gòu)自美國(guó)BD公司) ,室溫下避光孵育20 min;然后加入300 μl溶血?jiǎng)靹虮芄忪o置10 min,1 400 r/min離心5 min,棄上清。PBS洗滌1次,用新的PBS重懸細(xì)胞,避光靜置10 min,使用BD FACS Calibur流式細(xì)胞儀 (美國(guó)BD公司) 檢測(cè),以CD3設(shè)門(mén),分為CD4+淋巴細(xì)胞和CD8+淋巴細(xì)胞,計(jì)算出CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞占外周血淋巴細(xì)胞的比例。

        1.2.5 ELISA檢測(cè)細(xì)胞因子 細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒購(gòu)買(mǎi)自BD公司,BD OptEIATMIL-1/IL-6/IL-10/TNF-α ELISA Kit。用鼠抗人IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α單克隆抗體包被ELISA板,4℃放置過(guò)夜。用PBST (含0.05%Tween-20) 洗滌,加入含10%FCS的PBS室溫封閉1 h;按照說(shuō)明書(shū)配制標(biāo)準(zhǔn)品,并稀釋樣品,加入ELISA板中,室溫孵育2 h;洗板后,加入生物素標(biāo)記的抗體及親和素標(biāo)記的辣根過(guò)氧化物酶,室溫孵育1 h;洗板后,加TMB顯色劑,室溫避光反應(yīng)30 min,加入10%終止Solution,全自動(dòng)多功能酶標(biāo)儀 (Thermo公司SM800) 450nm波長(zhǎng)測(cè)值,計(jì)算細(xì)胞因子濃度。

        2 結(jié)果

        2.1 不同時(shí)間點(diǎn)凝血功能指標(biāo)的變化 如表1所示,膿毒癥患者在治療前表現(xiàn)出凝血功能紊亂,PT、APTT、TT和FIB含量高于健康人群,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (均P<0.05) 。CBP治療后,凝血功能檢測(cè)指標(biāo)明顯得到改善,且隨著CBP治療時(shí)間的延長(zhǎng),凝血功能相關(guān)指標(biāo)均逐漸降低 (均P<0.05) 。CBP治療12、24、48、72 h的凝血功能指標(biāo)PT、APTT、TT、FIB相比CBP治療前顯著降低 (P<0.05) 。CBP治療12、24、48 h的凝血功能指標(biāo)PT、APTT、TT顯著高于健康組 (均P<0.05) 。CBP治療12、24 h的凝血功能指標(biāo)FIB顯著高于健康組 (均P<0.05) 。CBP治療48 h的凝血功能指標(biāo)FIB與健康組相比無(wú)顯著差異 (P>0.05) 。CBP治療72 h的凝血功能指標(biāo)PT、APTT、TT、FIB趨近于健康組,均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (均P>0.05) 。

        表1 不同時(shí)間點(diǎn)凝血功能指標(biāo)的比較

        Tab.1 Comparison of coagulation function indexes at different time points

        GroupsPTAPTTTTFIBHealthygroup127±11341±31143±1828±06BeforeCBPtreatment197±412)489±1122)225±632)43±102)CBPtreatmentfor12h172±401)2)435±911)2)194±461)2)39±071)2)CBPtreatmentfor24h158±271)2)396±711)2)173±291)2)34±061)2)CBPtreatmentfor48h136±211)2)367±591)2)153±181)2)29±061)CBPtreatmentfor72h130±131)346±281)148±131)27±041)

        Note:Compared with before CBP treatment,1)P<0.05;compared with the healthy group,2)P<0.05.

        2.2 不同時(shí)間點(diǎn)外周血免疫細(xì)胞變化 如表2所示,膿毒癥患者組的CD3+、CD4+和CD4+/CD8+細(xì)胞頻率較健康組明顯降低 (均P<0.05) ,表明膿毒癥患者的細(xì)胞免疫功能受到抑制。CBP治療12、24、48、72 h,相比治療前,CD3+T、CD4+T細(xì)胞頻率逐漸升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (均P<0.05) 。CBP治療12、24、48、72 h的CD8+細(xì)胞頻率較治療前無(wú)顯著變化 (均P>0.05 ) 。隨著CBP治療時(shí)間的延長(zhǎng),外周血免疫淋巴細(xì)胞發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,CBP治療12、24、48、72 h的CD4+/CD8+比例比治療前顯著升高 (均P<0.05) ,說(shuō)明,經(jīng)過(guò)CBP治療后膿毒癥患者的免疫抑制功能減弱,使其逐漸發(fā)揮正常的免疫功能。治療前、CBP治療12、24、48 h的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+細(xì)胞頻率低于健康組 (均P<0.05) 。CBP治療72 h的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+細(xì)胞頻率相比健康組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (均P>0.05) 。治療前、CBP治療12、24、48、72 h的CD8+細(xì)胞頻率相比健康組無(wú)顯著變化 (均P>0.05)。見(jiàn)圖1。

        2.3 不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞因子的變化 如表3所示,CBP治療12、24、48、72 h的IL-1、IL-6、IL-10的水平較治療前降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (均P<0.05)。CBP治療48、72 h的TNF-α的水平較治療前顯著降低(均P<0.05) ,CBP治療12、24 h的TNF-α的水平較治療前無(wú)顯著差異 (均P>0.05) 。治療前、CBP治療12、24、48 h的IL-1的水平高于健康組 (均P<0.05) ,CBP治療72 h的IL-1的水平與健康組無(wú)差異 (P>0.05) 。治療前、CBP治療12、24、48、72 h的IL-6、IL-10的水平高于健康組 (均P<0.05) 。治療前、CBP治療12、24 h的TNF-α水平顯著高于健康組 (均P<0.05) 。CBP治療48、72 h的TNF-α水平與健康組相比無(wú)顯著差異 (均P>0.05) 。

        2.4 CBP治療對(duì)膿毒癥患者APACHEⅡ評(píng)分的影響 膿毒癥患者CBP治療后,患者病情明顯改善,APACHEⅡ評(píng)價(jià)分?jǐn)?shù)均下降 (圖2) 。治療前的APACHEⅡ評(píng)分為19.86±4.42,CBP治療12、24、48、72 h的APACHEⅡ評(píng)分分別為18.56±3.75、17.56±2.77、16.51±1.90、15.27±1.64。CBP治療12、24、48、72 h的APACHEⅡ評(píng)分與治療前比較均顯著降低 (均P<0.05) 。

        表2 不同時(shí)間點(diǎn)外周血免疫細(xì)胞變化

        Tab.2 Changes of peripheral blood immune cells at different time points

        GroupsCD3+(%)CD4+(%)CD8+(%)CD4+(%)/CD8+(%)Healthygroup643±101418±89236±44188±057BeforeCBPtreatment461±822)276±912)229±35123±0442)CBPtreatmentfor12h524±551)2)328±691)2)233±26142±0311)2)CBPtreatmentfor24h582±461)2)367±581)2)235±23159±0311)2)CBPtreatmentfor48h611±341)2)391±391)2)232±30171±0241)2)CBPtreatmentfor72h636±571)413±341)236±19176±0211)

        Note:Compared with before CBP treatment,1)P<0.05;compared with the healthy group,2)P<0.05.

        GroupsIL?1IL?6IL?10TNF?αHealthygroup2086±1038642±247210198±213442843±3123BeforeCBPtreatment2976±0852)15123±42042)17019±41982)48947±86022)CBPtreatmentfor12h2538±0361)2)14356±35462)16052±36651)2)47485±77382)CBPtreatmentfor24h2319±0441)2)10504±33041)2)15576±32421)2)46287±90282)CBPtreatmentfor48h2197±0281)2)13457±37201)2)15243±28011)2)43834±56331)CBPtreatmentfor72h2103±0221)13238±29231)2)15123±24921)2)43112±37281)

        Note:Compared with before CBP treatment,1)P<0.05;compared with the healthy group,2)P<0.05.

        圖1 健康對(duì)照組和膿毒癥患者CD3+、CD4+和CD8+細(xì)胞流式細(xì)胞圖Fig.1 Flow cytometry of CD3+,CD4+ and CD8+ cells in healthy group and in patients with sepsisNote: A.Flow cytometry of CD3+,CD4+ and CD8+ cells in the healthy group;B.Flow cytometry of CD3+,CD4+ and CD8+ cells in the patients with sepsis before treatment;C.Flow cytometry of CD3+,CD4+ and CD8+ cells in the patients with sepsis after treatment.

        圖2 CBP治療前后膿毒癥患者的APACHEⅡ評(píng)分Fig.2 APACHEⅡ score of sepsis patients before and after CBP treatment

        3 討論

        目前,膿毒癥的發(fā)病機(jī)制還不完全清楚,不僅與免疫系統(tǒng)失控和凝血系統(tǒng)紊亂相關(guān)、還與代謝紊亂、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)和神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)等密切相關(guān)[16,17]。對(duì)免疫系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)相關(guān)的分子機(jī)制進(jìn)行研究,將有助于發(fā)現(xiàn)膿毒癥治療的新方法和確定新的治療手段,從而提高患者的生存率、降低膿毒癥的死亡率[18]。

        對(duì)于膿毒癥患者,早期炎性介質(zhì)的失衡是導(dǎo)致病情惡化的重要原因,CD3+T、CD4+T、CD4+/CD8+細(xì)胞在不同細(xì)胞因子的作用下分化為不同的效應(yīng)T細(xì)胞,從而產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子(TNF-α和 IFN-γ),分泌抗炎介質(zhì) (IL-1、IL-6、IL-10)[19]。所以早期控制、清除炎癥因子及改善免疫功能是治療膿毒癥的關(guān)鍵。CBP通過(guò)對(duì)流與吸附作用,能有效去除體內(nèi)多種炎性因子和促炎、抗炎介質(zhì) (IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α),維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài),從而改善免疫失調(diào)狀態(tài)[20]。本研究發(fā)現(xiàn):膿毒癥患者經(jīng)CBP治療12、24、48、72 h后,患者的體內(nèi)炎癥因子IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α的水平較治療前顯著降低。

        同時(shí),膿毒癥患者體內(nèi)炎癥因子、抗炎介質(zhì)的增加會(huì)過(guò)度活化凝血系統(tǒng),使纖溶物質(zhì)下降、血液出現(xiàn)高凝狀態(tài)導(dǎo)致促凝和抗凝物質(zhì)大量消耗,最終造成血液低凝狀態(tài)和出血傾向,臨床表現(xiàn)為 PT、APTT、TT不同程度的延長(zhǎng),CD3+T、CD4+T細(xì)胞頻率增加[21]。而CBP可以調(diào)節(jié)患者體內(nèi)的水電解質(zhì)體液平衡和酸堿平衡,使機(jī)體血液凝血狀態(tài)和纖溶物質(zhì)的含量趨于正常,從而防止機(jī)體血流動(dòng)力學(xué)和凝血纖溶系統(tǒng)的紊亂,使凝血系統(tǒng)恢復(fù)正常[22]。本研究中:膿毒癥患者經(jīng)CBP治療12、24、48、72 h后,患者的凝血功能指標(biāo)PT、APTT、TT、FIB相比CBP治療前顯著降低,CD3+T、CD4+T細(xì)胞頻率逐漸升高,CD4+/CD8+比例比治療前顯著升高。

        而傳統(tǒng)的治療膿毒癥方法:如使用抗生素、糖皮質(zhì)激素以及手術(shù)切除病灶、靜脈補(bǔ)液等只是單一的防止凝血系統(tǒng)的激活,抑制血液高凝狀態(tài),并沒(méi)減少和清除體內(nèi)的炎癥因子、促炎和抗炎介質(zhì),無(wú)法調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫系統(tǒng)的失控,并不能達(dá)到滿意的治療效果[23]。CBP治療后能夠通過(guò)清除血液中炎癥因子,增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,患者的免疫功能和凝血狀態(tài)均有所改善、生存率均有明顯提高,這表明CBP是治療膿毒癥的有效方法。本研究顯示,CBP治療能有效降低 APACHEⅡ評(píng)分,改善膿血癥患者的病情,從而緩解病情,降低患者死亡率。因此,CBP自從開(kāi)始應(yīng)用于膿毒癥患者的治療后,得到了廣泛的推廣和一致好評(píng)。

        綜上所述,雖然膿毒癥患者經(jīng)連續(xù)性血液凈化技術(shù)治療后,患者的凝血功能和免疫功能有所改善,對(duì)改善膿血癥患者的病情有一定幫助;但是血液凈化技術(shù)具體改善膿毒癥患者免疫功能和凝血功能的作用機(jī)制還不是很清楚,可能與減少體內(nèi)炎癥因子和其他內(nèi)毒素以及改善血液的血管內(nèi)皮功能和纖溶組織有關(guān)。因此,未來(lái)需擴(kuò)大樣本做進(jìn)一步深入研究,為血液凈化技術(shù)對(duì)膿毒癥患者的治療提供更多的新思路和新手段。

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        [收稿2016-01-28 修回2016-03-04]

        (編輯 倪 鵬)

        Effect of continuous blood purification on coagulation function and immune function in patients with sepsis

        LI Jun,ZHANG Feng-Li,Tuergun Ai-Sha,WU Yan,LI Chao.

        Intensive Care Unit,the First Division Hospital of Xinjiang Crops,Akesu 843000,China

        Objective:To explore the functions of continuous blood purification(CBP) on blood coagulation function and immune function of patients with sepsis.Methods: From January 2012 to January 2015,54 patients who were hospitalized in the intensive care unit(ICU) of the first division hospital of Xinjiang Crops that in accordance with the diagnostic criteria of sepsis were enrolled into this experiment.All the patients were treated with CBP,and their APACHEⅡ scores before treatment and 12 h,24 h,48 h and 72 h after treatment were measured with persistent observation,respectively.Blood were collected from patients in different times after CBP treatment.The peripheral blood immune cells (CD4+/CD8),the levels of secreted cytokines (IL-1,IL-6,IL-10 and TNF-α),the coagulation function index (APTT,TT,PT) and FIB were detected by flow cytometry,ELISA,coagulation method and immunoturbidimetry,respectively.Results: The levels of PT,APTT,TT,and FIB of sepsis patients before CBP treatment were higher than those of healthy people (allP<0.05).Compared with before CBP treatment,the coagulation function indexes (PT,APTT,TT and FIB) were significantly reduced after CBP treatment for 12,24,48 and 72 h(allP<0.05).The frequencies of CD3+,CD4+and CD4+/CD8+cells in the sepsis group were significantly lower than those in the healthy group (allP<0.05).After CBP treatment for 12,24,48 and 72 h,the frequencies of CD3+T and CD4+T cells were gradually increased when compared with those before CBP treatment (allP<0.05),while the CD4+/CD8+ratio was significantly higher than that before CBP treatment (allP<0.05).The frequencies of CD3+,CD4+and CD4+/CD8+cells before CBP treatment and with CBP treatment for 12,24 and 48 h were lower than those in the healthy group (allP<0.05).After CBP treatment for 12,24,48 and 72 h,the levels of IL-1,IL-6 and IL-10 were lower than those before CBP treatment (allP<0.05).After CBP treatment for 48 h and 72 h,the levels of TNF-α were lower than those before CBP treatment (bothP<0.05).The levels of IL-1 before CBP treatment and with CBP treatment for 12,24 and 48 h were higher than those in the healthy group (allP<0.05),while the levels of IL-6 and L-10 before CBP treatment and with CBP treatment for 12,24,48 and 72 h were higher than those in the healthy group (allP<0.05).The levels of TNF-α before CBP treatment and with CBP treatment for 12 h and 24 h were higher than those in the healthy group (bothP<0.05).After CBP treatment for 12,24,48 and 72 h,the APACHEⅡ score were significantly lower than those before CBP treatment (allP<0.05).Conclusion: Our study provide strong evidence that CBP is helpful to improve the condition and enhance immune function of patients with sepsis by removing inflammatory factors in blood.

        Continuous blood purification;Sepsis;Coagulation function;Cytokine;CD4+/CD8+;APACHEⅡ score;Interleukin;Peripheral blood T lymphocytes

        10.3969/j.issn.1000-484X.2016.11.021

        ①本文為新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2015年度院內(nèi)科研基金項(xiàng)目(2015012)。

        李 軍(1978年-),男,碩士,主要從事膿毒癥血液凈化治療方面的研究。

        R45

        A

        1000-484X(2016)11-1661-06

        ②新疆兵團(tuán)第一師醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,阿克蘇843000。

        ③通訊作者,新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院RICU,烏魯木齊830000,E-mail:lichao20160113@163.com。

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