林存學(xué)，劉濱

(黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院牡丹江分院，黑龍江牡丹江157041)

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14個李品種花粉質(zhì)量測定

林存學(xué)，劉濱

(黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院牡丹江分院，黑龍江牡丹江157041)

試驗采用培養(yǎng)基萌發(fā)法對來自3個省份的14個李品種花粉進行了生活力、萌發(fā)率及花粉管長度測定，結(jié)果表明：來自山東省的李花粉萌發(fā)率普遍高于遼寧省和福建省，具體發(fā)芽率大小順序為早艷>紅美麗>卡思李娜>紅燕1號>安哥諾>奧德羅達>早美麗>紫葉李>晚黑>大紅袍>蓋縣大李>大紅李>黑琥珀>芙蓉李，生活力測定結(jié)果與發(fā)芽率結(jié)果大體一致，早艷6個小時花粉管萌發(fā)長度最大，為1.4mm，大紅李花粉管長度最小，為0.3mm。

花粉；生活力；萌發(fā)率

李在黑龍江省地產(chǎn)果面積及產(chǎn)量中居第二位，取得李育種的突破性進展具有十分重要的意義。目前李育種上普遍存一些品種缺乏的現(xiàn)狀，例如抗寒性、優(yōu)質(zhì)性、耐貯、離核，不同成熟期等。因此就要有針對性的培育新品種，雜交育種是一個便捷、高效的途徑。

在雜交育種工作中，為了解決親本花期不一致和遠距離雜交等問題，通常需要選取優(yōu)良特性樹種，早期采集和收藏花粉，花粉質(zhì)量的好壞，直接影響到育種結(jié)果。本試驗對3個省份14個李品種花粉進行了生活力、萌發(fā)率、花粉管長度測定，評價了各個李品種的花粉質(zhì)量，對今后育種工作中花粉的選擇提供了理論指導(dǎo)。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

表1 供試李品種及其來源

試驗材料取自遼寧果樹所、山東果樹所和福建果樹所，于當?shù)厥⒒ㄆ谡』ǘ?，在實驗室?nèi)剝離花藥，在陰涼通風處晾干，收集帶回，置于4℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?，各品種及來源詳見表1。

1.2 試驗方法

1.2.1 I-IK染色法測定花粉生活力。稱取碘化鉀1.3g溶解于10mL蒸餾水中，加入0.3g碘，全部溶解后再用蒸餾水定容至100mL，配制成碘-碘化鉀溶液，貯于棕色瓶中，于4℃冰箱中保存?zhèn)溆肹1],用經(jīng)酒精棉球消毒過的發(fā)絲蘸取少量花粉放于載玻片凹槽內(nèi)，滴1滴碘-碘化鉀溶液，蓋上蓋玻片后置于顯微鏡下觀察,染色后活力較強的花粉呈藍色，無活力的幾乎無色。

1.2.2 培養(yǎng)基萌發(fā)法測定花粉萌發(fā)率。采用培養(yǎng)基播種萌發(fā)法測定花粉萌發(fā)率，培養(yǎng)基由5%蔗糖、0.5mg/L硼酸、1%瓊脂配置而成[2]，用經(jīng)酒精棉球消毒過的發(fā)絲蘸取少量花粉，均勻撒播于培養(yǎng)基上，然后置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h，顯微鏡觀察花粉萌發(fā)情況，每個品種觀察3個視野，統(tǒng)計萌發(fā)數(shù)，以花粉管伸長長度大于花粉粒的直徑為萌發(fā)，計算花粉萌發(fā)率。

萌發(fā)率=萌發(fā)花粉粒數(shù)/花粉粒總數(shù)×100%

1.2.3 測微尺測量花粉管長度。顯微鏡測定花粉萌發(fā)率的同時，用顯微鏡自帶的測微尺測量花粉管生長長度，計算花粉管生長速率，每個品種觀察3個視野。

2 結(jié)果與分析

2.1 14個李品種花粉生活力

由表2花粉生活力測定結(jié)果可以看出，來自山東的早艷品種花粉生活力最高，為53.51%，遼寧省的大紅李花粉生活力最低，為33.14%，來自山東省的早艷、紅美麗、卡思李娜、紅燕1號等品種的花粉生活力平均高于遼寧省和福建省，差異顯著(P<0.05)，來自遼寧省的大紅袍、蓋縣大李、大紅李和來自福建省的芙蓉李這幾個品種花粉生活力排序都比較靠后。

表2 14個李品種花粉生活力

注：同一列不同字母表示差異顯著(P<0.05)

2.2 14個李品種花粉萌發(fā)率

圖1 14個李品種花粉萌發(fā)率

由圖1可以看出，來自山東省的早艷花粉平均萌發(fā)率最高為19.44%，福建省芙蓉李的花粉萌發(fā)率最低，僅為10.14%。其他來自山東省各李品種及萌發(fā)率分別為：紅美麗17.73%、卡思李娜16.48%、紅燕1號16.96%、安哥諾16.01%、奧德羅達15.52%、早美麗15.49%、黑琥珀14.48%，來自遼寧省個李品種及萌發(fā)率分別為：紫葉李14.36%、晚黑13.65%、大紅袍13.08%、蓋縣大李14.13%、大紅李10.72%。山東省各李品種花粉評價萌發(fā)率要高出遼寧省和福建省，差異顯著(P<0.05)。

2.3 各李品種花粉管生長長度

表3 14個李品種花粉管生長長度

注：同一列不同字母表示差異顯著(P<0.05)

由表3可以看出，各品種花粉離體培養(yǎng)6h后，來自山東省的早艷花粉管平均生長長度最大為1.29mm，福建省芙蓉李的花粉管生長長度最小為0.40mm。山東省各李品種花粉管生長速度普遍高于遼寧省和福建省，差異顯著(P<0.05)。

3 討論

人工授粉前，對采集的花粉質(zhì)量進行快速而準確的鑒定有著非常重要的意義[3]，不僅能夠判斷花粉的萌發(fā)率、生活力等指標，而且還能夠有效地提高人工雜交育種的成功率。染色法測定花粉生活力的試驗中，會遇到染色時間不易掌握、染色結(jié)果不易判斷等問題[4]，培養(yǎng)基法測定花粉萌發(fā)率的試驗中，需要找到最適的花粉萌發(fā)溫度、培養(yǎng)基配方等[5]。

采集的花粉質(zhì)量好壞受到很多因素的影響，花粉的選擇、采集、保存等都必須嚴謹正確的操作，在雜交育種工作過程中，花粉采集是非常重要的一個環(huán)節(jié)，采集花粉的時期不宜太早或太晚，盛花期是花粉在生物學(xué)和生理學(xué)特性上都比較成熟的時期，因而最適宜在此時采集花粉，花粉采集后要進行干燥處理，使其在安全含水率以下，含水量過高或過低都會影響花粉質(zhì)量，造成失活[6-7]。溫度是影響花粉貯藏的主要外部因素[8-9]，花粉內(nèi)含有很多酶、蛋白質(zhì)等生命活性物質(zhì)，這些物質(zhì)需要適宜的保存溫度，否則會造成花粉質(zhì)量的下降。本試驗通過對花粉萌發(fā)率、花粉管長度、生活力指標的測定，初步評價來自山東省的各李品種花粉質(zhì)量普遍優(yōu)于其他兩省，這可能說明，第一山東省花粉自身遺傳特性比較好，其次在花粉采集時期、保存處理等過程中可能做的比較好。

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2016-08-30

國家科技支撐計劃項目(2013BAD02B00)；研發(fā)平臺：黑龍江省果樹工程技術(shù)研究中心(PG13B02)

林存學(xué)，男，碩士，研究實習(xí)員，研究方向為寒地果樹育種、栽培，E-mail: nefu20061880@126.com。

S662.3

A

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2016.06.007