林存學(xué)，劉濱

(黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院牡丹江分院，黑龍江牡丹江157041)

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14個(gè)李品種花粉質(zhì)量測(cè)定

林存學(xué)，劉濱

(黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院牡丹江分院，黑龍江牡丹江157041)

試驗(yàn)采用培養(yǎng)基萌發(fā)法對(duì)來(lái)自3個(gè)省份的14個(gè)李品種花粉進(jìn)行了生活力、萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度測(cè)定，結(jié)果表明：來(lái)自山東省的李花粉萌發(fā)率普遍高于遼寧省和福建省，具體發(fā)芽率大小順序?yàn)樵缙G>紅美麗>卡思李娜>紅燕1號(hào)>安哥諾>奧德羅達(dá)>早美麗>紫葉李>晚黑>大紅袍>蓋縣大李>大紅李>黑琥珀>芙蓉李，生活力測(cè)定結(jié)果與發(fā)芽率結(jié)果大體一致，早艷6個(gè)小時(shí)花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度最大，為1.4mm，大紅李花粉管長(zhǎng)度最小，為0.3mm。

花粉；生活力；萌發(fā)率

李在黑龍江省地產(chǎn)果面積及產(chǎn)量中居第二位，取得李育種的突破性進(jìn)展具有十分重要的意義。目前李育種上普遍存一些品種缺乏的現(xiàn)狀，例如抗寒性、優(yōu)質(zhì)性、耐貯、離核，不同成熟期等。因此就要有針對(duì)性的培育新品種，雜交育種是一個(gè)便捷、高效的途徑。

在雜交育種工作中，為了解決親本花期不一致和遠(yuǎn)距離雜交等問(wèn)題，通常需要選取優(yōu)良特性樹(shù)種，早期采集和收藏花粉，花粉質(zhì)量的好壞，直接影響到育種結(jié)果。本試驗(yàn)對(duì)3個(gè)省份14個(gè)李品種花粉進(jìn)行了生活力、萌發(fā)率、花粉管長(zhǎng)度測(cè)定，評(píng)價(jià)了各個(gè)李品種的花粉質(zhì)量，對(duì)今后育種工作中花粉的選擇提供了理論指導(dǎo)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

表1 供試?yán)钇贩N及其來(lái)源

試驗(yàn)材料取自遼寧果樹(shù)所、山東果樹(shù)所和福建果樹(shù)所，于當(dāng)?shù)厥⒒ㄆ谡』ǘ洌趯?shí)驗(yàn)室內(nèi)剝離花藥，在陰涼通風(fēng)處晾干，收集帶回，置于4℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆茫髌贩N及來(lái)源詳見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 I-IK染色法測(cè)定花粉生活力。稱取碘化鉀1.3g溶解于10mL蒸餾水中，加入0.3g碘，全部溶解后再用蒸餾水定容至100mL，配制成碘-碘化鉀溶液，貯于棕色瓶中，于4℃冰箱中保存?zhèn)溆肹1],用經(jīng)酒精棉球消毒過(guò)的發(fā)絲蘸取少量花粉放于載玻片凹槽內(nèi)，滴1滴碘-碘化鉀溶液，蓋上蓋玻片后置于顯微鏡下觀察,染色后活力較強(qiáng)的花粉呈藍(lán)色，無(wú)活力的幾乎無(wú)色。

1.2.2 培養(yǎng)基萌發(fā)法測(cè)定花粉萌發(fā)率。采用培養(yǎng)基播種萌發(fā)法測(cè)定花粉萌發(fā)率，培養(yǎng)基由5%蔗糖、0.5mg/L硼酸、1%瓊脂配置而成[2]，用經(jīng)酒精棉球消毒過(guò)的發(fā)絲蘸取少量花粉，均勻撒播于培養(yǎng)基上，然后置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h，顯微鏡觀察花粉萌發(fā)情況，每個(gè)品種觀察3個(gè)視野，統(tǒng)計(jì)萌發(fā)數(shù)，以花粉管伸長(zhǎng)長(zhǎng)度大于花粉粒的直徑為萌發(fā)，計(jì)算花粉萌發(fā)率。

萌發(fā)率=萌發(fā)花粉粒數(shù)/花粉?？倲?shù)×100%

1.2.3 測(cè)微尺測(cè)量花粉管長(zhǎng)度。顯微鏡測(cè)定花粉萌發(fā)率的同時(shí)，用顯微鏡自帶的測(cè)微尺測(cè)量花粉管生長(zhǎng)長(zhǎng)度，計(jì)算花粉管生長(zhǎng)速率，每個(gè)品種觀察3個(gè)視野。

2 結(jié)果與分析

2.1 14個(gè)李品種花粉生活力

由表2花粉生活力測(cè)定結(jié)果可以看出，來(lái)自山東的早艷品種花粉生活力最高，為53.51%，遼寧省的大紅李花粉生活力最低，為33.14%，來(lái)自山東省的早艷、紅美麗、卡思李娜、紅燕1號(hào)等品種的花粉生活力平均高于遼寧省和福建省，差異顯著(P<0.05)，來(lái)自遼寧省的大紅袍、蓋縣大李、大紅李和來(lái)自福建省的芙蓉李這幾個(gè)品種花粉生活力排序都比較靠后。

表2 14個(gè)李品種花粉生活力

注：同一列不同字母表示差異顯著(P<0.05)

2.2 14個(gè)李品種花粉萌發(fā)率

圖1 14個(gè)李品種花粉萌發(fā)率

由圖1可以看出，來(lái)自山東省的早艷花粉平均萌發(fā)率最高為19.44%，福建省芙蓉李的花粉萌發(fā)率最低，僅為10.14%。其他來(lái)自山東省各李品種及萌發(fā)率分別為：紅美麗17.73%、卡思李娜16.48%、紅燕1號(hào)16.96%、安哥諾16.01%、奧德羅達(dá)15.52%、早美麗15.49%、黑琥珀14.48%，來(lái)自遼寧省個(gè)李品種及萌發(fā)率分別為：紫葉李14.36%、晚黑13.65%、大紅袍13.08%、蓋縣大李14.13%、大紅李10.72%。山東省各李品種花粉評(píng)價(jià)萌發(fā)率要高出遼寧省和福建省，差異顯著(P<0.05)。

2.3 各李品種花粉管生長(zhǎng)長(zhǎng)度

表3 14個(gè)李品種花粉管生長(zhǎng)長(zhǎng)度

注：同一列不同字母表示差異顯著(P<0.05)

由表3可以看出，各品種花粉離體培養(yǎng)6h后，來(lái)自山東省的早艷花粉管平均生長(zhǎng)長(zhǎng)度最大為1.29mm，福建省芙蓉李的花粉管生長(zhǎng)長(zhǎng)度最小為0.40mm。山東省各李品種花粉管生長(zhǎng)速度普遍高于遼寧省和福建省，差異顯著(P<0.05)。

3 討論

人工授粉前，對(duì)采集的花粉質(zhì)量進(jìn)行快速而準(zhǔn)確的鑒定有著非常重要的意義[3]，不僅能夠判斷花粉的萌發(fā)率、生活力等指標(biāo)，而且還能夠有效地提高人工雜交育種的成功率。染色法測(cè)定花粉生活力的試驗(yàn)中，會(huì)遇到染色時(shí)間不易掌握、染色結(jié)果不易判斷等問(wèn)題[4]，培養(yǎng)基法測(cè)定花粉萌發(fā)率的試驗(yàn)中，需要找到最適的花粉萌發(fā)溫度、培養(yǎng)基配方等[5]。

采集的花粉質(zhì)量好壞受到很多因素的影響，花粉的選擇、采集、保存等都必須嚴(yán)謹(jǐn)正確的操作，在雜交育種工作過(guò)程中，花粉采集是非常重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，采集花粉的時(shí)期不宜太早或太晚，盛花期是花粉在生物學(xué)和生理學(xué)特性上都比較成熟的時(shí)期，因而最適宜在此時(shí)采集花粉，花粉采集后要進(jìn)行干燥處理，使其在安全含水率以下，含水量過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響花粉質(zhì)量，造成失活[6-7]。溫度是影響花粉貯藏的主要外部因素[8-9]，花粉內(nèi)含有很多酶、蛋白質(zhì)等生命活性物質(zhì)，這些物質(zhì)需要適宜的保存溫度，否則會(huì)造成花粉質(zhì)量的下降。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)花粉萌發(fā)率、花粉管長(zhǎng)度、生活力指標(biāo)的測(cè)定，初步評(píng)價(jià)來(lái)自山東省的各李品種花粉質(zhì)量普遍優(yōu)于其他兩省，這可能說(shuō)明，第一山東省花粉自身遺傳特性比較好，其次在花粉采集時(shí)期、保存處理等過(guò)程中可能做的比較好。

[1]何風(fēng)杰. 槜李不良結(jié)實(shí)性的原因及其對(duì)策研究[D]. 杭州：浙江大學(xué), 2007:27.

[2]趙紀(jì)偉,李莉,彭建營(yíng),等. 梨不同品種花粉生活力測(cè)定及授粉特性研究[J]. 植物遺傳資源學(xué)報(bào), 2012(1):153.

[3]楊紅,余和明,李小艷,等. 獼猴桃花粉生活力測(cè)定方法及花藥處理方法研究[J]. 北方園藝, 2015(8):38.

[4]楊鑫,張秀省,穆紅梅,等. 4種槐樹(shù)花粉生活力測(cè)定方法的比較[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué), 2011(12):54-55.

[5]劉贏男,周丹,劉瑋,等. 不同培養(yǎng)基及貯藏條件對(duì)山梅花屬植物花粉生活力的影響[J]. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2011(12):47-48.

[6]于安民,楊錦芬,詹若挺,等. 貯存條件對(duì)陽(yáng)春砂花粉生活力的影響[J]. 北方園藝, 2013(10):149.

[7]尹佳蕾,趙惠恩. 花粉生活力影響因素及花粉貯藏概述[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào), 2005(4):111-112.

[8]謝孔平,李策宏,李小杰,等. 貯藏溫度對(duì)峨眉山4種百合花粉生活力的影響[J]. 四川林業(yè)科技, 2015(1):34.

[9]喬紅蓮,劉忠華,霍喜穎. 貯藏溫度對(duì)百合花粉生活力的影響[J]. 北方園藝, 2010(5):87-88.

2016-08-30

國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BAD02B00)；研發(fā)平臺(tái)：黑龍江省果樹(shù)工程技術(shù)研究中心(PG13B02)

林存學(xué)，男，碩士，研究實(shí)習(xí)員，研究方向?yàn)楹毓麡?shù)育種、栽培，E-mail: nefu20061880@126.com。

S662.3

A

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2016.06.007