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        黃芪四君子湯聯(lián)合不同營養(yǎng)方式對肝硬化肝癌大鼠肝部分切除術(shù)后營養(yǎng)狀態(tài)與免疫功能的影響

        2016-12-23 09:26:11劉詩泆劉素蘭尹秋林
        中國老年學(xué)雜志 2016年23期
        關(guān)鍵詞:四君子湯黃芪肝硬化

        劉詩泆 劉素蘭 尹秋林

        (江西衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院,江西 南昌 330006)

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        黃芪四君子湯聯(lián)合不同營養(yǎng)方式對肝硬化肝癌大鼠肝部分切除術(shù)后營養(yǎng)狀態(tài)與免疫功能的影響

        劉詩泆 劉素蘭 尹秋林1

        (江西衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院,江西 南昌 330006)

        目的 探討黃芪四君子湯聯(lián)合不同營養(yǎng)方式對肝硬化肝癌大鼠肝部分切除術(shù)后營養(yǎng)狀態(tài)與免疫功能的影響。方法 將成功建立肝硬化肝癌大鼠模型并采用Higgins法成功行肝部分切除術(shù)的150只大鼠,按隨機數(shù)字表分為Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組,每組50例,Ⅰ組給予常規(guī)經(jīng)口飲食處理,Ⅱ組給予黃芪四君子湯聯(lián)合腸外營養(yǎng),Ⅲ組給予黃芪四君子湯聯(lián)合腸內(nèi)營養(yǎng),術(shù)前及術(shù)后7 d進行營養(yǎng)狀態(tài)指標(biāo)〔血紅蛋白(Hb)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)〕、免疫功能指標(biāo)(細胞免疫功能指標(biāo)、體液免疫功能指標(biāo))、免疫細胞因子〔白細胞介素(IL)-2、IL-6、干擾素(INF)-γ〕檢測,對三組檢測結(jié)果進行比較。結(jié)果 Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后Hb、TC、TG、LDL均較術(shù)前明顯降低,但Ⅱ組、Ⅲ組營養(yǎng)狀態(tài)指標(biāo)高于Ⅰ組,Ⅲ組營養(yǎng)狀態(tài)指標(biāo)高于Ⅱ組。Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明顯低術(shù)前,CD8+明顯高于術(shù)前,Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后細胞免疫功能指標(biāo)明顯優(yōu)于Ⅰ組,Ⅲ組術(shù)后細胞免疫功能指標(biāo)明顯優(yōu)于Ⅱ組。Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后IgG、IgM、IgA 水平均明顯低于術(shù)前,Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后體液免疫功能指標(biāo)明顯優(yōu)于Ⅰ組,Ⅲ組術(shù)后體液免疫功能指標(biāo)明顯優(yōu)于Ⅱ組。Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后IL-2、INF-γ均較術(shù)前明顯升高,Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后IL-2、INF-γ明顯高于Ⅰ組,Ⅲ組術(shù)后IL-2、INF-γ明顯高于Ⅱ組,Ⅰ組術(shù)后IL-6高于術(shù)前,Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后IL-6低于術(shù)前,Ⅲ組術(shù)后IL-6低于Ⅱ組。結(jié)論 肝硬化肝癌大鼠肝部分切除術(shù)后應(yīng)用黃芪四君子湯聯(lián)合腸內(nèi)營養(yǎng)既能改善術(shù)后的營養(yǎng)狀況,又可提高機體的免疫功能。

        肝硬化;肝癌切除術(shù);黃芪四君子湯;免疫功能;營養(yǎng)狀況

        肝硬化、肝癌患者因肝代謝功能障礙,致使?fàn)I養(yǎng)不良與免疫力低下發(fā)生率極高,而肝硬化與肝癌合并存在的患者尤為明顯〔1〕。手術(shù)切除是治療肝硬化后肝癌最有效的手段,但術(shù)后出現(xiàn)肝衰竭和腫瘤復(fù)發(fā)的概率較高,與機體存在營養(yǎng)不良及免疫功能低下相關(guān)〔2,3〕。圍術(shù)期營養(yǎng)支持對改善營養(yǎng)不良具有積極意義,但營養(yǎng)支持對免疫功能影響的研究相對較少。四君子湯出自《太平惠民和劑局方》,是益氣健脾的經(jīng)典方劑,具有健脾和胃、益氣養(yǎng)血之功效,能有效增強肝癌患者免疫功能、改善營養(yǎng)狀態(tài)〔4〕。黃芪四君子湯是在四君子湯的基礎(chǔ)上加入黃芪配伍而成,有助益氣健脾之功,使提升正氣的作用進一步加強,改善肝細胞代謝功能受損的作用優(yōu)于四君子湯〔5〕。本研究探討黃芪四君子湯聯(lián)合不同營養(yǎng)方式對肝硬化肝癌大鼠肝部分切除術(shù)后營養(yǎng)狀態(tài)與免疫功能的影響差異。

        1 材料與方法

        1.1 藥品試劑、動物 150只Wistar大鼠(3~4個月齡、體質(zhì)量230~250 g),雌雄不限,南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物中心提供(合格證:合格證號:021-9815);黃芪四君子湯:黃芪30 g、黨參15 g、白術(shù)15 g、茯苓15 g、炙甘草15 g,飲片均購自江西益豐大藥房,均經(jīng)鑒定為合格藥材,按照常規(guī)方法煎煮、過濾、濃縮為200 ml。中長鏈脂肪乳(20%,卡路,廣州僑光制藥有限公司生產(chǎn)),復(fù)方氨基酸注射液(安平,德國貝朗),非蛋白質(zhì)熱量171.5 kCal·kg-1·d-1,氮1.22 g·kg-1·d-1,按熱氮比140∶1配制營養(yǎng)液;四氯化碳(CCl4)(美國Sigma公司);Walker-256 腫瘤細胞混懸液購自上海信裕生物技術(shù)有限公司。甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)試劑盒(上??迫A東菱診斷用品有限公司),血紅蛋白(Hb)試劑盒(上海西唐生物科技有限公司),淋巴細胞分離液(TBD生物技術(shù)發(fā)展中心);日立7080全自動生化分析儀(日本日立公司),流式細胞儀FACScan(BD公司),AXSYM全自動免疫化學(xué)發(fā)光分析儀(美國雅培公司)。

        1.2 方法

        1.2.1 肝硬化肝癌大鼠模型的建立 大鼠皮下注射60% CCl4,0.13 ml/100 g,1次/d,連續(xù)給藥5 d,以5%乙醇作唯一飲用水,連續(xù)服用40 d,停藥7 d,B超引導(dǎo)下向大鼠肝中葉注入Walker-256瘤細胞混懸液,篩選植瘤直徑0.5~0.8 cm的肝硬化肝癌大鼠模型作為研究對象,顆粒飼料喂養(yǎng),自由飲水取食,9 d后進行研究。

        1.2.2 分組 將造模成功的肝硬化肝癌大鼠按隨機數(shù)字表分為Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組,每組50例,按照Higgins 法切除帶瘤的大鼠肝中葉,定期換藥,Ⅰ組給予常規(guī)經(jīng)口飲食處理,普通飼料喂養(yǎng),自由飲水;Ⅱ組給予黃芪四君子湯聯(lián)合腸外營養(yǎng)(PN),術(shù)后黃芪四君子湯灌,5 ml/d,分2次灌胃,連續(xù)灌胃7 d,采用恒流微泵持續(xù)輸注靜脈營養(yǎng)液,連續(xù)給藥7 d。Ⅲ組術(shù)后6 h給予營養(yǎng)乳劑與黃芪四君子湯灌胃,每日均為5 ml,分2次灌胃,連續(xù)灌胃7 d。Ⅱ組與Ⅲ組營養(yǎng)液的熱量及含氮量相同。

        1.3 觀察指標(biāo) 術(shù)前及術(shù)后7 d禁食水10 h后取大鼠尾緣靜脈血5 ml,高速離心取上清液,采用8120全自動生物化學(xué)分析儀檢測TC、TG、LDL,采用氰化高鐵法測定Hb,流式細胞術(shù)細胞計數(shù)儀測定CD3+、CD4+、CD8+,采用免疫散射比濁法測定IgG、IgM、IgA,采用ELISA法檢測白細胞介素(IL)-2、IL-6、干擾素(INF)-γ。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0軟件進行單因素方差分析。

        2 結(jié) 果

        2.1 三組大鼠手術(shù)前后營養(yǎng)指標(biāo)比較 Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后Hb、TC、TG、LDL均較術(shù)前明顯降低,但Ⅱ組、Ⅲ組上述指標(biāo)高于Ⅰ組,Ⅲ組營養(yǎng)狀態(tài)指標(biāo)高于Ⅱ組。見表1。

        2.2 三組大鼠手術(shù)前后免疫功能指標(biāo)比較 Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明顯低術(shù)前,CD8+明顯高于術(shù)前,Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后細胞免疫功能指標(biāo)明顯優(yōu)于Ⅰ組,Ⅲ組術(shù)后細胞免疫功能指標(biāo)明顯優(yōu)于Ⅱ組。Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后IgG、IgM、IgA 水平均明顯低于術(shù)前,Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后體液免疫功能指標(biāo)明顯優(yōu)于Ⅰ組,Ⅲ組術(shù)后體液免疫功能指標(biāo)明顯優(yōu)于Ⅱ組。見表2,表3。

        組別Hb(g/L)術(shù)前術(shù)后TC(mmol/L)術(shù)前術(shù)后TG(mmol/L)術(shù)前術(shù)后LDL(mmol/L)術(shù)前術(shù)后Ⅰ組99.3±5.585.1±6.73.43±0.222.02±0.251.15±0.060.63±0.041.18±0.080.65±0.03Ⅱ組99.2±8.390.3±6.43.40±0.342.36±0.261.13±0.080.78±0.031.16±0.040.80±0.04Ⅲ組99.5±6.495.2±7.23.35±0.402.64±0.241.12±0.100.96±0.051.18±0.050.98±0.05F/P值0.402/>0.056.054/<0.010.315/>0.054.246/<0.010.417/>0.054.115/<0.010.422/>0.054.226/<0.01

        組別CD3+(%)術(shù)前術(shù)后CD4+(%)術(shù)前術(shù)后CD8+(%)術(shù)前術(shù)后CD4+/CD8+術(shù)前術(shù)后Ⅰ組69.65±7.5460.45±5.5842.65±5.5036.30±3.4029.43±3.2136.45±3.301.45±0.201.00±0.06Ⅱ組69.42±6.6462.48±5.3642.54±4.5637.53±3.4629.32±2.4634.48±3.371.45±0.181.09±0.05Ⅲ組69.50±6.5964.54±5.2941.60±4.8239.54±3.5329.40±2.8632.54±3.321.42±0.221.22±0.08F/P值0.255/>0.054.042/<0.050.354/>0.053.961/<0.050.411/>0.053.866/<0.050.312/>0.053.916/<0.05

        組別IgG術(shù)前術(shù)后IgM術(shù)前術(shù)后IgA術(shù)前術(shù)后Ⅰ組13.64±1.3510.32±1.201.78±0.151.30±0.102.67±0.142.03±0.16Ⅱ組13.56±1.2711.34±1.151.74±0.151.43±0.132.59±0.162.14±0.22Ⅲ組13.60±1.3312.36±1.081.75±0.161.55±0.202.62±0.162.25±0.30F/P值0.156/>0.054.421/<0.050.542/>0.053.618/<0.050.313/>0.053.412/<0.05

        2.3 三組大鼠手術(shù)前后免疫細胞因子比較 Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后IL-2、INF-γ均較術(shù)前明顯升高,Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后IL-2、INF-γ明顯高于Ⅰ組,Ⅲ組術(shù)后IL-2、INF-γ明顯高于Ⅱ組,Ⅰ組術(shù)后IL-6高于術(shù)前,Ⅱ組、Ⅲ組術(shù)后IL-6低于術(shù)前,Ⅲ組術(shù)后IL-6低于Ⅱ組。見表4。

        組別IL-2術(shù)前術(shù)后INF-γ術(shù)前術(shù)后IL-6術(shù)前術(shù)后Ⅰ組13.1±1.124.5±1.227.8±2.181.8±4.521.8±1.728.4±1.4Ⅱ組13.2±0.931.4±1.328.2±2.0110.4±5.322.4±2.019.9±1.2Ⅲ組13.1±1.139.4±1.528.1±2.0139.5±6.222.1±1.816.6±1.3F/P值0.164/>0.054.413/<0.050.525/>0.053.682/<0.050.332/>0.053.423/<0.05

        3 討 論

        肝癌、肝硬化患者多合并營養(yǎng)不良與免疫功能低下,早期營養(yǎng)支持治療能夠有效改善患者的營養(yǎng)狀況和免疫功能,其方式包括完全PN、腸內(nèi)營養(yǎng)(EN)。四君子湯是益氣健脾的經(jīng)典方法,聯(lián)合腸內(nèi)營養(yǎng)乳劑可有助于改善肝癌合并肝硬化圍手術(shù)期營養(yǎng)狀態(tài)與免疫功能〔6〕,作用優(yōu)于單純腸內(nèi)營養(yǎng)乳劑,對于四君子湯聯(lián)合PN或EM何種效果更好,有待進一步研究。黃芪四君子湯是在四君子湯的基礎(chǔ)上再配伍黃芪,宋雅芳等〔5〕研究顯示,與四君子湯比較,黃芪四君子湯在促進線粒體氧化磷酸化過程中的能量轉(zhuǎn)化作用更好,促使ATP合成更多,維持細胞代謝與能量代謝,起到更好的扶正補虛的效果。曾益宏等〔7〕研究表明,黃芪四君子湯改善脾主運化的功能優(yōu)于四君子湯,其機制可能與其能升高血清胃泌素含量、促進胃腸道吸收有關(guān)。徐旭東等〔8〕研究顯示,黃芪四君子湯聯(lián)合早期EN能夠改善食管癌術(shù)后的營養(yǎng)、免疫狀態(tài),促進患者康復(fù)。

        T和B淋巴細胞是免疫系統(tǒng)的重要組成部分,二者相互作用功能調(diào)控機體免疫,T淋巴細胞在參與機體細胞免疫調(diào)節(jié)及免疫效應(yīng)的過程中發(fā)揮了重要的作用,T細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+是反映機體細胞免疫功能的常用指標(biāo),CD4+細胞能夠有效地促進機體免疫系統(tǒng)起到抗腫瘤作用,CD8+發(fā)揮免疫抑制作用,CD4+/CD8+可作為術(shù)后免疫抑制程度的重要指標(biāo);B淋巴細胞主要參與體液免疫,IgA、IgM、IgG是反映機體體液免疫功能的常用指標(biāo)。本文研究結(jié)果顯示,肝硬化肝癌大鼠肝部分切除術(shù)后免疫功能明顯下降,但黃芪四君子湯聯(lián)合不同營養(yǎng)方式能夠抑制免疫功能下降,其中黃芪四君子湯聯(lián)合EN對免疫功能的改善效果更好。

        肝硬化肝癌大鼠肝部分切除術(shù)后營養(yǎng)狀態(tài)下降,黃芪四君子湯聯(lián)合不同營養(yǎng)方式能夠促進營養(yǎng)狀況改善,以黃芪四君子湯聯(lián)合EN的效果更好,可能與其能更好促進營養(yǎng)物質(zhì)吸收有關(guān)。

        免疫細胞因子是免疫調(diào)控的主要執(zhí)行者,IL-2、INF-γ發(fā)揮促進免疫功能的作用,抑制腫瘤細胞生長;IL-6啟動急性期炎性反應(yīng),同時部分抑制機體免疫功能。本文研究結(jié)果顯示,肝硬化肝癌大鼠肝部分切除術(shù)后啟動了免疫調(diào)控功能,出現(xiàn)急性期炎性反應(yīng),黃芪四君子湯聯(lián)合不同營養(yǎng)方式能夠促進免疫功能,減輕機體的免疫抑制狀態(tài),以黃芪四君子湯聯(lián)合EN的效果更好。

        1 張一超,夏 駿,李 雄.肝硬化合并肝癌及單純肝癌患者免疫功能檢測結(jié)果分析〔J〕.檢驗醫(yī)學(xué),2014;29(11):1128-31.

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        〔2015-12-11修回〕

        (編輯 袁左鳴)

        1 江西省人民醫(yī)院

        劉詩泆(1965-),男,副教授,主要從事天然藥物化學(xué)研究。

        R285.5

        A

        1005-9202(2016)23-5807-03;

        10.3969/j.issn.1005-9202.2016.23.015

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