李煉星，李 浩，沈和定，杜文俊

( 上海海洋大學 省部共建水產種質資源發(fā)掘與利用教育部重點實驗室，上海 201306 )

縊蟶流水育苗試驗

李煉星，李 浩，沈和定，杜文俊

( 上海海洋大學 省部共建水產種質資源發(fā)掘與利用教育部重點實驗室，上海 201306 )

為探索流水條件與換水操作對縊蟶育苗初期的影響，2015年9月在三門東航水產育苗場進行試驗，試驗桶X(編號1、2、3*、4*、5*、6*)設置篩絹網與進出水開關控制流水速度，試驗桶Y(編號7、8)未設置篩絹網且進行倒池操作，水溫26～27.5 ℃，pH 8.0～8.2，鹽度13，光照度低于1000 lx。結果表明,對于非流水性育苗，加大換水量與設置篩絹網減少機械損傷能夠顯著提高縊蟶幼蟲期的存活率(P<0.05)，對孵化及生長變態(tài)等指標無顯著影響(P>0.05)；對于流水性育苗，當換水量逐漸加大時，縊蟶卵子的受精率降低，受精卵的孵化率在提高后回落，D形幼蟲規(guī)格無顯著差異(P>0.05)，稚貝規(guī)格與變態(tài)率降低，變態(tài)時間延長，縊蟶幼蟲的殼長在試驗中后期生長速率減緩、存活率降低，但與非流水性試驗組的殼長及存活率數據進行對比得出，當流水量較小時，縊蟶幼蟲殼長無顯著差異(P>0.05)，存活率有明顯提高。本試驗驗證了適量的流水性育苗與不倒池換水操作可以顯著提高縊蟶幼蟲孵化率、變態(tài)率、存活率，對變態(tài)時間與稚貝規(guī)格無顯著影響。

縊蟶；流水；育苗；殼長；存活率

縊蟶(Sinonovaculaconstricta)俗稱蟶子、青子，屬軟體動物門、瓣鰓綱、異齒亞綱、簾蛤目、竹蟶科、縊蟶屬[1]。我國沿海均已開展養(yǎng)殖，2014年的全國產量達786 828 t[2]。

縊蟶人工育苗技術研究已有諸多報道，多是關于親蟶催產及后期培養(yǎng)等，如金彬明[3]通過工廠化育苗生產試驗表明，選取灘涂養(yǎng)殖的成熟縊蟶作為育苗親貝可以取得更好的效果；吳洪喜等[4]的縊蟶人工育苗試驗表明，縊蟶受精卵發(fā)育速度主要受水溫影響，其孵化積溫為370～390 ℃·h，同時溫度也是浮游幼蟲生長速度的主要影響因素；何進金等[5]關于縊蟶浮游幼蟲餌料的研究表明，叉鞭金藻(Dicrateriazhanjiangensis)、鈣質角毛藻(Chaetoceroscalcutrans)和三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)均為縊蟶浮游幼蟲的良好餌料，但對稚貝而言只有叉鞭金藻和鈣質角毛藻才能起到良好效果。

縊蟶人工育苗技術可以顯著提高育苗產量，但在工廠化育苗過程中，浮游期幼蟲死亡率高，變態(tài)期間變態(tài)率低等問題突出，是制約出苗量的主要原因，而關于縊蟶工廠化育苗技術進一步優(yōu)化的相關研究仍少見報道。為進一步提高并保證縊蟶工廠化育苗的苗種產量與質量，根據淡水四大家魚已有的流水育苗經驗[6]對縊蟶早期育苗進行了流水育苗探索，得到了良好效果，旨在為當今縊蟶苗種產業(yè)提供一定的技術支持。

1 材料與方法

1.1 縊蟶親貝來源與催產

殼長5.1～5.3 cm、體質量7.6～8.2 g的縊蟶親貝取自樂清灣南岳鎮(zhèn)，選取體表完好、無機械損傷、無畸形、性腺充分發(fā)育的1 齡縊蟶100粒，陰干流水催產[7]，挑選正在排卵與排精的親貝，沖洗后分別放入小桶中繼續(xù)排卵與排精，直至停止，卵子計數。砂濾海水水溫26～27.5 ℃，pH值8.0～8.2，鹽度13，光照度低于1000 lx[8]。

1.2 試驗裝置設置

試驗桶X在距離底部15 cm處固定一層300目篩絹網，進水口設置在水桶頂部，出水口接近水桶底部，進水口與出水口均設閥門，試驗桶Y除未安裝300目篩絹網外，設置均與試驗桶X相同。試驗桶高70 cm，底直徑36 cm，容積約65 L(圖1)。

圖1 試驗桶結構示意

1.3 操作過程

(1)設置試驗桶X 6個和試驗桶Y 2個，預先放入40 L砂濾海水，曝氣。

(2)卵子平均分配入各桶，密度為12粒/mL[9-10]。

(3)往各桶中倒入適量的精子懸濁液，控制精卵比為1000∶1。

(4)通過閥門控制換水，其中1、2、7、8號桶為非流水性育苗，3*、4*、5*、6*號桶為流水性育苗(以B1、B2、B3*、B4*、B5*、B6*、B7、B8表示各試驗組)，換水操作如下：

a.試驗桶X直接通過出水閥門換水：

① B1：孵化后半量換水一次，之后隔24 h半量換水；

② B2：孵化后全量換水一次，之后隔24 h全量換水；

③ B3*、B4*、B5*、B6*：始終保持桶內水體流動，換水速率分別控制為5 L/h，15 L/h，25 L/h，35 L/h；

b.試驗桶Y在出水口套上300目篩絹網袋進行濾苗換水：

① B7：孵化后半量換水一次，之后隔24 h半量換水；

② B8：孵化后全量換水一次，之后隔24 h全量換水。

(5)試驗階段為精卵結合至試驗組中幼蟲完成變態(tài)的時間，較早完成變態(tài)的試驗組幼苗用200目篩絹網過濾后，轉移至預先鋪有約3 mm厚海泥(烘烤消毒且經200目篩絹網過濾處理)的試驗桶中且容量及編號不變，定時使用虹吸法換水15 L/d。

(6)試驗設置兩組重復。當觀察到試驗桶中幼蟲約有30%以上變態(tài)至D形幼蟲時開始投喂餌料。D形幼蟲和殼頂前期早晚2次投喂密度約2.5×106個/mL的叉鞭金藻1 L；殼頂中后期改為早晚2次投喂密度6×106個/mL的鈣質角毛藻1 L，變態(tài)伏底后增加投喂量至1.5 L。

1.4 測定指標

測定受精率、孵化率、變態(tài)率和變態(tài)時間，各日齡幼蟲的殼長與成活率。

分別對各試驗組的受精卵、面盤幼蟲、變態(tài)階段進行計數。自D形幼蟲期開始，每隔24 h測量殼長，每組隨機測量30粒個體。孵化率為D形幼蟲密度與受精卵密度的百分比，存活率為幼蟲密度與初始D形幼蟲密度的百分比；變態(tài)率為長出斧足、水管的幼蟲與D形幼蟲數量的百分比；變態(tài)時間為自孵化至90%幼蟲完成變態(tài)的時間[11]。

應用SPSS 17.0軟件進行數據處理分析，對各桶間的數據進行單因素方差分析，Turkey HSD進行多重比較，差異顯著性設為P<0.05。

2 結 果

2.1 各試驗組孵化參數

表1 各試驗組的幼蟲孵化參數

注：相同符號的同一列表明無顯著差異(P>0.05)，下同.

各試驗組幼蟲孵化參數見表1。由表1可見，除B5*、B6*外，其余各試驗組受精率無顯著差異(P>0.05)，B6*與B5*受精率差異顯著(P<0.05)且受精水平均顯著低于其余各試驗組(P<0.05)，B6*的受精率(89.69%)最低。通過對各試驗組受精卵孵化率進行比較，B1、B2、B7、B8的孵化率差異不顯著(P>0.05)，且處于較低水平；B5*的孵化率(74.47%)最高，顯著大于其余各試驗組(P<0.05)。各試驗組中D形幼蟲規(guī)格差異不顯著(P>0.05)。

2.2 各試驗組縊蟶幼蟲的變態(tài)情況

各試驗組的變態(tài)參數見表2。由表2可見，比較各試驗組中稚貝規(guī)格,除B5*、B6*外其余各試驗組差異不顯著(P>0.05)，B6*變態(tài)規(guī)格(285.31 μm)最小，與其余各試驗組差異顯著(P<0.05)。比較各試驗組中幼蟲的變態(tài)時間，除B5*、B6*外其余各試驗組差異不顯著(P>0.05)，B5*、B6*的變態(tài)時間顯著大于其余各試驗組(P<0.05)，B6*的變態(tài)時間(178.60 h)最長。比較各試驗組中幼蟲的變態(tài)率，B1、B2、B5*、B7、B8差異不顯著，B4*的變態(tài)率(79.64%)最高，B6*的變態(tài)率(45.83%)最低，B4*與B6*的變態(tài)率相差33.81%。

表2 各試驗組的變態(tài)參數

圖2 幼蟲的殼長

圖3 幼蟲的存活率

2.3 試驗階段中各試驗組的生長情況及幼蟲存活率

B3*、B4*組的幼蟲殼長在生長早期顯著大于其余各試驗組(P<0.05)，之后生長速度減緩，至試驗結束時B3*、B4*稚貝殼長略小于B1、B2、B7、B8，同時B4*的稚貝平均殼長小于B3*；B5*、B6*的幼蟲殼長分別在試驗開始5 d和4 d之后顯著小于其它各試驗組(P<0.05)，且B6*顯著低于B5*(P<0.05)；B1、B2、B7、B8的幼蟲殼長在整個試驗階段并未表現出顯著差異，但從平均殼長可以看出，B7、B8的殼長在一定程度上小于B1、B2(圖2)。

B4*中幼蟲的存活率在整個試驗階段均處于最高水平，且在4 d之后與其余各試驗組之間差異顯著(P<0.05)；B3*的幼蟲存活率僅次于B4*，在試驗階段的第5、7、8 日與其余各試驗組差異顯著(P<0.05)；B8的幼蟲存活率在試驗早期處于中等水平，但隨著試驗的推進其存活率明顯下降，至試驗結束時處于最低水平；B5*與B6*的幼蟲存活率從試驗開始1 d后差異顯著(P<0.05)，且處于各試驗組中較低水平(圖3)。

3 討 論

3.1 非流水性育苗

通過對結果中非流水性試驗組直接半量換水組、直接全量換水組、篩絹半量換水組、篩絹全量換水組的數據進行分析表明，不同換水量與篩絹網的設置僅顯著影響縊蟶幼蟲的存活率。

直接半量換水組中幼蟲存活率在試驗階段均低于直接全量換水組，在第3、5、6、7、8日齡具有顯著差異，說明加大換水量有利于提高幼蟲的存活率；篩絹半量換水組的幼蟲存活率在試驗階段中后期顯著高于篩絹全量換水組，初步推測為換水過程中的沖苗與篩洗等人為操作造成較高的幼蟲死亡率[12]，同時這種人為操作甚至能抵消加大換水量對幼蟲成活率帶來的有利影響，因此篩絹半量換水組的幼蟲存活率要高于篩絹全量換水組。由此可見，在人工育苗生產過程中要格外注意人為操作給幼蟲帶來的影響；通過比較直接半量及全量換水組與篩絹半量及全量換水組的幼蟲存活率表明，加大換水量與設置篩網可顯著提高縊蟶育苗初期的幼蟲存活率。

3.2 流水對縊蟶孵化的影響

結合各試驗組的孵化參數可以看出，隨著換水量加大，卵子受精率有一定降低，受精卵的孵化率提高后回落，D形幼蟲的規(guī)格沒有顯著差異。初步推測造成這種變化的原因是換水量加大,流水速度過快，導致一部分卵子、受精卵或D形幼蟲被吸附在篩絹網的網孔上無法擺脫，從而導致消亡或計數結果失真，通過對篩網檢查驗證了推測。孵化率先升高后回落，表明換水量的加大有利于孵化率的提高，其原因可能是流水有利于快速帶走水體中的一些幼蟲代謝物質及一些死亡個體及藻類的腐敗雜質[13]，保證水體質量。由于縊蟶自受精卵孵化到D形幼蟲的過程中，其能量來源主要是卵黃，換水量的大小對D形幼蟲規(guī)格并未造成直接影響，因此各流水組的D形幼蟲規(guī)格沒有顯著差異。

3.3 流水對縊蟶幼蟲變態(tài)的影響

結合各試驗組的變態(tài)參數可以看出，當流水量加大時，幼蟲的稚貝規(guī)格和變態(tài)率減小，變態(tài)時間增長。初步推測為流水量加大時，桶中的藻類餌料流失速度加快，影響幼蟲攝食，無法攝取充足能量完成變態(tài)發(fā)育[14]，同時對篩網進行檢查表明，變態(tài)率的降低還有部分原因是由于流水速度過快導致活力弱的幼蟲吸附于篩網上而死亡。

3.4 流水對縊蟶幼蟲生長及存活的影響

結合各試驗組幼蟲的生長情況和存活率可以看出，流水量加大時，幼蟲在中后期生長緩慢，存活率不斷降低，與非流水性試驗組的殼長及存活率對比，當流水量較小時，幼蟲殼長無顯著差異，存活率顯著提高，表明適當的流水量對縊蟶幼蟲的殼長影響不大，但對存活率影響顯著，部分原因可能是新鮮海水提高了存活率，而過高的流水量導致餌料流失從而降低幼蟲的生長速率與存活率，同時，過大的換水量使得幼蟲不能快速適應新的生存環(huán)境也會對其存活率造成影響[12,15]。水體流速也是影響貝類的一個因素，有研究表明[16]，當水體流速超出一定限度時(15～20 cm/s)，太平洋牡蠣(Crassostreagigas)的生長受到抑制。包永波等[17]總結得到，在適宜的流速范圍內，流速的提高加快了貝類的濾水率，從而提高了攝食率，流速過高則會干擾貝類的攝食的生理活動，導致不能正常攝食。

4 結語及建議

由于條件限制，試驗只參照縊蟶工廠化育苗設置了4個流水速率，試驗結果表明，流水給縊蟶育苗帶來顯著效果，關于育苗過程中具體的最適流水速率還有待進一步試驗探究。試驗表明，適宜的流水可顯著提高縊蟶幼苗培育過程中幼蟲的孵化率、變態(tài)率、存活率，但對于變態(tài)時間與變態(tài)后稚貝規(guī)格影響不顯著。

建議在縊蟶浮游期采用流水培養(yǎng)，盡量減少機械損傷并提供更好的生存環(huán)境，有效提高產量。建議在苗池底部鋪網，代謝物及其他有害物隨流水排出，若僅在出口處鋪網將會導致網孔堵塞，影響育苗水質。目前水產業(yè)中循環(huán)水技術已大量應用，陳文龍等[18]已對縊蟶的循環(huán)水育苗做了初步探究，考慮到貝類流水育苗用水量大，目前的循環(huán)水技術成本較高，但不失為一個良好的發(fā)展方向。

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BreedingofAgamakiClamSinonovaculaconstrictainFlowingWater

LI Lianxing, LI Hao,SHEN Heding，DU Wenjun

( Key Laboratory of Exploration and Utilization of Aquatic Genetic Resources, Ministry of Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China )

In order to explore influence of water condition and different water-change operations on initial breeding stage of Agamaki clamSinonovaculaconstricta, relevant tests were implemented in Sanmen Donghang aquaculture farms in September 2015. Mesh cloth and water inlet and outlet switch were set in test barrel X(Number:1,2,3*,4*,5*,6*) for flowing velocity control, and the comparative test barrels Y(Number:7,8) were not set with mesh cloth and pool water-change operation, at water temperature of 26—27.5 ℃, pH 8.0—8.2, salinity 13, and illuminance of less than 1000 lx. The results showed that for non-flowing breeding, increasing water-change amount and the setting of mesh cloth to reduce mechanical damage led to significant increase in survival rate of Agamaki clam larvae, and did not lead to significant effect on hatching and growth or metamorphosis. For flowing breeding, when water-change amount was gradually increased, fertility rate of Agamaki clam eggs was to some extent decreased hatching rate of fertilized ovum decreased after certain increase, significant difference in D-type larva size and juveniles. The clam had poor growth and low survival in the middle and late periods of test, compared with shell length and survival rate data in non-flow barrels. When the flowing rate was decreased, there was no significant difference in shell length, with significant increase in survival rate. The findings indicate that the proper amount of flow water breeding and no pool water-change operation can significantly improve the larva hatch, metamorphosis rate, survival rate, without significant effect on the time of metamorphosis and juvenile size.

Sinonovaculaconstricta; flowing water; breeding; shell length; survival rate

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.05.019

S968.318

A

1003-1111(2016)05-0568-05

2015-12-25；

2016-04-18.

國家高技術研究發(fā)展計劃項目(2012AA10A400-3)；水產動物遺傳育種中心上海市協(xié)同創(chuàng)新中心資助項目(ZF1206).

李煉星(1991—)，男，碩士研究生；研究方向：貝類遺傳育種.E-mail:469687126@qq.com.通訊作者：沈和定(1964—)，男，教授；研究方向：貝類增養(yǎng)殖.E-mail:hdshen@shou.edu.cn.